CDKN2/p16基因5′-CpG岛SmaI位点甲基化与肺癌的关系

目的　研究CDKN2 /p16基因 5′端调控序列CpG岛甲基化的状态与肺癌发生发展的关系。方法　采用对甲基化敏感的核酸内切酶SmaⅠ ,酶切基因组DNA的方法 ,对 89例肺癌标本和 10例正常肺组织的CDKN2 /p16基因进行Southern杂交分析。结果　 89例肺癌中 ,CDKN2 /p16基因甲基化者 15例 ,甲基化频率为 16 .9%。 42例p16蛋白阴性的肺癌患者中 ,有 12例发生甲基化 ,甲基化频率为 2 8.6 % ;另有 47例p16蛋白阳性患者中仅有 3例发生甲基化。 10例正常肺组织中均未发现CDKN2 /p16基因有甲基化现象。结论　CDKN2 /p16基因 5′端CpG岛甲基化是该基因失活的重要机制 ,是肺癌细胞区别于正常细胞的分子事件之一 ,可能参与肺癌的发生发展过程     

CDKN2／p16基因5‘—CpG岛SmaⅠ位点甲基化与肺癌的关系

目的 研究ＣＤＫＮ２／ｐ１６基因５’端调控序列ＣｐＧ岛甲基化的状态与肺癌发生发展的关系。方法 采用对甲基化敏感的核酸内切酶ＳｍａⅠ,酶切基因组ＤＮＡ的方法,对８９例肺癌标本和１０例正常肺组织的ＣＤＫＮ２／ｐ１６,基因进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析。结果 ８９例肺癌中,ＣＤＮＫ２／ｐ１６基因甲基化１５例,甲基化频率为１６．９％。４２例ｐ１６蛋白阴性的肺癌患中,有１２例发生甲基化,甲基化频率为２８．６％;另有４７例ｐ１６蛋白阳性患中仅有３例发生甲基化。１０例正常肺组织中均未发现ＣＤＮＫ２／ｐ１６基因有甲基化现象。结论 ＣＤＮＫ２／ｐ１６基因５’端ＣｐＧ岛甲基化是该基因失活的重要机制,是肺癌细胞区别于正常细胞的分子事件之一,可能参与肺癌的发生发展过程。     

p16基因5′-CpG岛甲基化对肺癌的早期诊断价值

目的　检测 p16基因在肺癌患者癌组织及相应痰液脱落细胞中甲基化状态 ,以探讨其在肺癌早期诊断中的价值。方法　采用甲基化敏感的核酸内切酶 Sma 、Sac 酶切基因组 DNA,对 5 6份肺癌组织及相应痰液、6 0份非恶性病变肺组织及 2 8份痰液进行 PCR分析。结果　 p16基因在肺癌组织中甲基化率为 30 .4% (17/5 6 ) ,相应的痰液中为 2 8.6 % (16 /5 6 ) ,两组差异无显著性 (χ2 =0 .0 430 ,P=0 .836 )。 6 0份非恶性病变肺组织甲基化率为 3.3% (2 /6 0 ) ,2 8份痰液无 1份发现 p16基因甲基化。结论　肺癌组织及相应的痰液脱落细胞 p16基因 5′- Cp G岛甲基化率相似 ,即痰液脱落细胞 p16基因甲基化状态可以反映肺癌组织 p16基因甲基化状态。因此 ,检测痰液脱落细胞 p16基因甲基化状态有助于肺癌的早期诊断     

CDKN2/p16甲基化的研究与结直肠癌

抑癌基因CDKN2／p16在结直肠癌等多种肿瘤中缺失、点突变及甲基化，导致肿瘤的发生发展。甲基化是其失活的主要机制。应用甲基化特异PCR。检测恶性肿瘤患者外周血中的甲基化改变，在早期诊断、监测术后复发和判定预后方面，具有重要的临床意义。     

结肠癌组织中p16/MTS1基因5′CpG岛甲基化研究

:〔目的〕研究结肠癌组织中p16基因5′端CpG岛异常甲基化现象。〔方法〕采用甲基化特异PCR方法(MSP)检测了28例结肠癌和20例癌旁正常组织标本。〔结果〕28例结肠癌组织中有9例5′端CpG岛异常甲基化(32%),而20例正常组织中均阴性。〔结论〕p16基因5′端CpG岛异常甲基化在人类结肠癌的发生中可能起一定作用。     

CDKN2基因CpG岛异常甲基化与原发性胃癌的关系研究

探讨原发性胃癌中抑癌基因ＣＤＫＮ２的灭活机制。方法ＰＣＲ┐甲基化检测法检测３６例胃癌和２２例正常胃粘膜组织中ＣＤＫＮ２基因外显子１的ＣｐＧ岛异常甲基化情况。结果有１３例（３６．１％）胃癌标本和１例（４．５％）正常胃组织中ＣＤＫＮ２基因５′端ＣｐＧ岛异常甲基化,两者之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＣＤＫＮ２基因的５′端ＣｐＧ岛异常甲基化与胃癌的发生发展相关,是该基因在原发性胃癌中的主要灭活机制。     

结肠癌组织中p16／MTS1基因5′CpG岛甲基化研究

〔目的〕研究结肠癌组织中p１６基因５′端ＣpＧ岛异常甲基化现象。〔方法〕采用甲基化特异ＰＣＲ方法（ＭＳＰ）检测了２８例结肠癌和２０例癌旁正常组织标本。〔结果〕２８例结肠癌组织中有９例５′端ＣpＧ岛异常甲基化（３２％），而２０例正常组织中均阴性。〔结论〕p１６基因５′端ＣpＧ岛异常甲基化在人类结肠癌的发生中可能起一定作用。     

非小细胞肺癌p16/CDKN2基因失活的研究

目的：分析中国人非小细胞肺癌中p16／CDKN2基因失活的情况,探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法：选取与p16基因紧密连锁的D9S1748位点,对17例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析,用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)检测p16基因启动子区CpG岛甲基化状况,用免疫组织化学法检测P16蛋白表达情况。结果：微卫星不稳定性分析结果表明,在13例D9S1748位点存在多态性的肿瘤DNA中有9例（69．2％）发生了杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH)。MSP的结果显示,有70．6％（12／17）的肿瘤组织存在p16启动子区的异常高基甲基。在本研究中,82．4％（14／17）的肿瘤组织可以检测出一种或两种p16基因的异常改变。对此17例肿瘤标本进行的免疫组织化学分析显示,有13例P16蛋白表达阴性,其中92．3％（12／13）存在一种或两种p16基因的异常改变。免疫组化结果与p16基因分子遗传学改变情况基本吻合。结论：作为一种抑癌基因,p16在多种肿瘤组织中都有异常改变。我们的研究表明,p16基因失表达是非小细胞肺癌中较常见的事件;在这里,杂合性缺失和异常甲基化引起的基因表达沉默为其主要失活机制。     

p16基因甲基化与肺癌早期诊断

肺癌已经成为人类癌症死亡的主要原因之一。在我国肺癌是发病率最高的癌症，且发病率和死亡率迅速增长。由于绝大多数肺癌的临床诊断已属晚期，其中50％以上的患者已不能手术，因此。肺癌的早期诊断显得尤为重要。近年来，随着分子生物学的蓬勃发展，已阐明肺癌的发生发展与多种基因有关，但都局限于原癌基因和抑癌基因的点突变、小片段缺失、插入等方式造成的功能丧失。     

甲状腺乳头状癌中NIS基因启动子区5′-CpG岛异常甲基化状况及其意义

[目的]探讨甲状腺乳头状癌（PTC）钠/碘协同转运体（Na＋/I-symporter,NIS）基因启动子区5′-CpG岛异常甲基化状态及其与临床病理参数之间的关系。[方法]应用实时荧光甲基化特异性聚合酶链反应（real-timemethylation-specificPCR,qMSP）分别检测152例PTC患者癌组织及其癌旁正常组织中NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化情况,并分析其与临床病理等参数之间的关系。[结果]在152例PTC组织中,NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化率为30.9%（47/152）,而癌旁正常组织中甲基化率为6.58%（10/152）,两组比较存在显著性差异（P〈0.01）。NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化与肿瘤病灶数目、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0.05）,与肿瘤大小、局部侵犯、性别和年龄等无关（P〉0.05）。[结论]NIS基因启动子区域5′-CpG岛的异常甲基化是PTC频发的分子事件,可能是导致甲状腺细胞摄碘率下降的重要原因之一,在PTC的发生发展过程中发挥着重要作用。     

p16基因CpG岛甲基化与胃癌及癌前病变

表观遗传学研究发现,p16基因CpG岛甲基化可以抑制其表达,进而与胃癌的发生发展密切相关.进一步的研究显示不同类型胃癌中p16基因CpG岛甲基化阳性率不尽相同.在肠型胃癌中,p16基因甲基化阳性率随着癌前病变程度逐渐加重而升高.但是尚需开展大规模的人群前瞻性研究,以验证p16基因CpG岛甲基化能否成为胃癌筛查、诊断及治疗的分子标志物.     

脑胶质瘤p15基因缺失及5′CPG岛甲基化研究

目的　探讨p15基因变异及其与脑胶质瘤的发生、恶性进展的关系。方法　利用PCR和PCR -based甲基化检测技术检测了5 6例脑胶质瘤中p15基因外显子 1缺失及 5′CPG岛甲基化情况。结果　 43例高级别的脑胶质瘤中 ,14例发生了p15基因缺失( 3 2 6% ) ,而 13例低级别的脑胶质瘤中无一例发生p15基因缺失 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。 1例低级别的脑胶质瘤、3例高级别的脑胶质瘤发生了p15基因 5′CPG岛甲基化。结论　p15基因异常可能参与脑胶质瘤的发生、恶性进展。基因纯合缺失是脑胶质瘤中p15基因失活的主要机制。     

脑胶质瘤p 15 基因缺失及5′CPG 岛甲基化研究

 目的　探讨 p1 5基因变异及其与脑胶质瘤的发生、恶性进展的关系。方法　利用 PCR和 PCR- based甲基化检测技术检测了 56例脑胶质瘤中 p1 5基因外显子 1缺失及 5′CPG岛甲基化情况。结果　 43例高级别的脑胶质瘤中 ,1 4例发生了 p1 5基因缺失 ( 32 .6% ) ,而 1 3例低级别的脑胶质瘤中无一例发生 p1 5基因缺失 ,差异具有显著性 ( P<0 .0 5)。 1例低级别的脑胶质瘤、3例高级别的脑胶质瘤发生了 p1 5基因 5′CPG岛甲基化。结论　 p1 5基因异常可能参与脑胶质瘤的发生、恶性进展。基因纯合缺失是脑胶质瘤中 p1 5基因失活的主要机制.     

FHIT和p16基因甲基化与肺癌的发生

背景与目的:探讨FHIT和p16基因甲基化与肺癌发生之间的关系. 材料与方法:采用甲基化特异性PCR检测59例原发性肺癌组织,相对应的32例正常组织及11例支气管鳞状化生组织中FHIT基因、p16基因启动子区CpG岛甲基化状况.结果:肺癌组织和正常肺组织中的FHIT基因甲基化率分别为37.3%(22/59)、0.0%(0/32),两组间的差异有统计学意义(P<0.01);支气管鳞状化生组织FHIT基因甲基化阳性率为18.1%(2/11).肺癌组织和正常肺组织中的p16基因甲基化率分别为50.8%(30/59)、0.0%(0/32),两组间的差异具有统计学意义(P<0.01);支气管鳞状化生组织p16基因甲基化阳性率为18.1%(2/11).肺癌患者吸烟组中FHIT、p16基因甲基化联合检测的阳性率为90.6%(29/32),与非吸烟组(33.3%.9/27)相比较,其差异具有统计学意义(P<0.05).结论: FHIT基因和p16基因启动子区甲基化可能与肺癌的发生有关.     

p16基因与肺癌关系研究进展

肿瘤抑癌基因p16对于肺癌的早期诊断非常重要,启动子的异常甲基化、第二号外显子的纯合子缺失、基因点突变、蛋白及mRNA的缺失表达都与肺癌的发生关系密切,且与肺癌的基因治疗、药物靶向治疗有关.     

FHIT基因5′CpG岛甲基化及其与结直肠癌的关系

[目的]探讨结直肠癌FHIT基因甲基化及去甲基化试剂5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对HCT1116细胞生长的影响。[方法]用甲基化特异性PCR(MSP)检测4个结肠癌细胞株、30例结直肠癌患者的原发肿瘤组织及其对应的正常组织的FHIT基因甲基化状态,用流式细胞术、HE染色及免疫细胞化学检测5-Aza-CdR对HCT1116细胞生长的影响。[结果]4个结肠癌细胞株中有3个细胞株(75%)存在FHIT基因5′CpG岛的甲基化,30例原发肿瘤组织有14例(46.7%)检出FHIT基因5′CpG岛的甲基化;用5-Aza-CdR处理HCT1116细胞后,其凋亡率由用药前的1.49%增加到32.6%。[结论]FHIT基因的5′CpG岛甲基化与结直肠癌的发生发展可能密切相关,5-Aza-CdR可能通过诱导细胞凋亡而抑制HCT1116细胞生长。     

肺癌血清p16基因启动子畸变甲基化检测

[目的]检测肺癌患者血清DNA中p16基因启动子畸变甲基化,并探讨其在肺癌早期诊断和预后评价中的作用。[方法]收集新鲜的肺癌组织及其对应的血清标本69例,肺良性疾病患者标本25例,健康人血清标本10例。采用PCR技术分别检测肿瘤组织DNA和血清游离DNA中p16基因启动子畸变甲基化的状况。[结果]28.99%(20/69)肺癌组织出现p16高甲基化;出现高甲基化的组织标本相对应的20例血清中有15例(75%)出现p16基因高甲基化。肺良性疾病患者及正常人的血清、DNA中均未见p16基因高甲基化。血清p16基因高甲基化与肺癌TNM分期及分化程度密切相关(P<0.01或P<0.05)。[结论]非小细胞肺癌血清中p16基因甲基化状况的检测,可能有助于非小细胞肺癌的早期诊断或预后评估。