PAF受体及其信号传导研究进展

血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)是一种具有多种生物学活性的内源性磷脂介质,其化学名称为1-0 -烷基-2 -乙酰基-Sn -甘油-3 -磷酸胆碱。PAF在体内主要来源于中性粒细胞,血小板,肥大细胞,吞噬细胞,血管内皮细胞,参与多种生理和病理过程。其生物学效应包括强烈的血小板激活作用、中性粒细胞聚集、趋化产生自由基及“呼吸爆发”、低血压、血液浓缩、血管通透性增加、肺动脉高压、过敏反应等,其在生理方面对生殖系统、心血管系统、中枢神经系统也有一定作用。PAF的这些生物学效应是通过与其受体结合产生的。因此国内外许多学者就PAF受体的分布、亚型、结构与构效关系、理化特征、表达调控及细胞内信号传导机制进行了研究,现概述如下。1PAF受体的组织细胞分布近年来,用[3H] -PAF和PAF受体拮抗剂[3H] -WEB2086进行了配体结合试验,证实了PAF受体存在于人与动物的许多细胞上,如血小板、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、枯否细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞。1991年Honda等建立了豚鼠肺PAF受体的cDNA克隆,并成功的进行了表达。以后相继有人从白细胞、心肌细胞、Eol-1...     

血小板活化因子的生物学效应和受体拮抗剂研究

血小板活化因子(PAF)是一种重要的炎症因子,具有广泛的生物学效应。本文对PAF在哮喘、急性胰腺炎、脑缺血性损伤等疾病中的作用进行了综述,并介绍了近年来PAF受体拮抗剂的研究进展。     

血小板活化因子的生物学效应和受体拮抗剂研究

血小板活化因子(PAF)是一种重要的炎症因子,具有广泛的生物学效应.本文对PAF在哮喘、急性胰腺炎、脑缺血性损伤等疾病中的作用进行了综述,并介绍了近年来PAF受体拮抗剂的研究进展.     

瓜蒌薤白半夏汤制剂对缺氧性肺动脉高压血NO、PAF的影响

探讨一氧化氮 (NO)、血小板激活因子 (PAF)与缺氧性肺动脉高压的关系及瓜蒌薤白半夏汤的作用机理 ,观察了常压缺氧性肺动脉高压时NO、PAF和肺血管形态变化及瓜蒌薤白半夏汤对其的影响。结果表明 :在大鼠常压缺氧性肺动脉高压时 ,血浆中NO水平降低、PAF的含量升高 (P <0 0 1 ) ,瓜蒌薤白半夏汤能明显升高NO和降低PAF的含量 (P <0 0 1 ) ,且大鼠肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄程度显著减轻。     

鞘内注射PAF受体拮抗剂对SNL大鼠痛敏和脊髓c-fos表达的影响

目的 观察鞘内注射血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)受体拮抗剂BN52021和BN50730对脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)大鼠痛敏和脊髓原癌基因c-fos表达的影响,探讨脊髓PAF在神经病理性疼痛机制中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,鞘内置管,随机分为6组.假手术组(sham组),12只;SNL组,12只,制作SNL模型;DMSO(0.1%二甲基亚砜生理盐水,5μl)对照组、BN52021(100 μg/5μl)治疗组、BN50730(100 μg/5 μl)治疗组和BN52021(100 μg/2.5 μl)+BN50730(100 μg/2.5μl)治疗组,每组6只,制作SNL模型,DMSO对照组和3个治疗组鞘内注射给药,每天1次,连续给药7 d;第7天测各组大鼠机械缩爪阈值和辐射热缩爪潜伏期,放射免疫分析检测脊髓PAF含量,免疫组织化学染色检测脊髓c-fos的表达.结果 SNL神经损伤诱发大鼠触觉异常痛敏和热痛敏,机械缩爪阈值和辐射热缩爪潜伏期下降(P<0.05),脊髓PAF含量升高(P<0.05),脊髓c-fos表达增强(P<0.05);BN52021和BN50730明显减轻大鼠触觉异常痛敏和热痛敏并抑制脊髓c-fos的表达增强(P<0.05).结论 内源性PAF可能参与SNL神经损伤疼痛机制,PAF的两类结合位点均介导痛觉信号传导,PAF受体拮抗剂可应用于治疗SNL神经损伤诱发的慢性疼痛.     

血PAF、PAF-AH在COPD相关肺动脉高压炎性机制中的作用研究

目的观察慢性阻塞性肺病(COPD)合并肺动脉高压(PH)和COPD非PH患者血液中血小板活化因子(PAF)及血小板活化因子乙水解酶(PAF-AH)的水平变化,探讨两者在COPD相关PH发病机制中的作用。方法将60例COPD急性加重期患者,根据肺动脉收缩压(PASP)≥40 mm Hg,分为COPD合并PH组和COPD非PH组各30例,同期健康体检者25例,比较3组间血浆PAF、血清PAF-AH水平的差异,并将两者与PASP进行相关性分析。结果 COPD合并PH组和COPD非PH组治疗前血PAF水平均较健康对照组显著升高(P<0.05),且PH组较非PH组升高更明显(P<0.05);血PAF-AH水平较健康对照组降低(P<0.05),且PH组较非PH组降低更明显(P<0.05);治疗后COPD合并PH组及非PH组血PAF水平明显降低(t分别为3.966、5.589,P均<0.05),而血PAF-AH水平显著升高(t分别为-5.506、-3.481,P均<0.05);血浆PAF与PASP呈正相关(r=0.666,P<0.01),而血清PAF-AH与PASP呈负相关(r=-0.346,P<0.05)。结论血液PAF、PAF-AH可能分别作为致炎因子、抗炎因子在COPD相关PH中起重要作用,COPD急性加重时,两者比例的失衡可能参与了PH的形成或加重过程。     

分泌性中耳炎患者血浆及中耳积液中PAF的测定

目的　探讨血小板活化因子 (plateletactivatingfactor,PAF)在分泌性中耳炎 (SOM)发生和转归中的作用。方法　采用了高效液相色谱法测定 5 6例 (6 8耳 )分泌性中耳炎患者血浆和中耳积液 (MEE)中PAF的含量 ,并以 4 0例正常人血浆作为对照。结果　SOM患者MEE中PAF浓度明显高于血浆中PAF浓度 (P <0 0 1) ,SOM患者血浆中PAF浓度明显高于对照组血浆中PAF浓度 (P <0 0 5 ) ;黏液性中耳积液中PAF浓度明显高于浆液性中耳积液 (P <0 0 1)。结论　PAF是SOM中耳积液中的重要炎性介质 ,它与疾病的持续状态相关 ,可能在SOM的病因和发病机制中起着很重要的作用。     

不育患者精液中PAF的变化及外周血PBMC上PAF-R的表达

目的:探讨男性不育患者精液血小板活化因子(PAF)、血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性的变化,以及外周血中单个核细胞(PBMC)PAF受体(PAF-R)的表达。方法:对10例男性不育患者(其中5例为精液异常组,5例为不明原因不育组)采用生物法检测精液中PAF含量,酶水解底物显色法测定PAF-AH活性,流式细胞仪检测PBMC上PAF-R的表达。并与5例有正常生育功能的男性健康体检者对照。结果:精液异常组PAF含量(1.87±0.76)μg/L,PAF-AH活性(23.56±6.86)μmol/(min.L)、PBMC上PAF-R的表达与健康体检者比较差异有非常显著性意义(P<0.01);不明原因不育组PAF含量(2.12±0.81)μg/L,PAF-AH活性(21.65±5.13)μmol/(min.L)、PBMC上PAF-R的表达与健康体检者比较差异也有非常显著性意义(P<0.01);精液异常组与不明原因不育组相比差异无显著性。结论:男性不育患者精浆PAF降低、PAF-AH升高,PAF、PAF-AH、PAF-R三者在男性不育的发生中可能起重要作用。     

IgA肾病患者外周血PAF及PAF-AH的变化及其意义

目的 观察IgA肾病患者外周血血小板活化因子(PAF)及血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF-AH)的变化,探讨PAF及PAF-AH与IgA肾病疾病进展的相关性.方法 选取IgA肾病患者60例设为实验组,正常对照组30例,采用双抗体夹心Elisa法分别检测实验组和正常对照组外周血PAF及PAF-AH水平的变化,同时检测两组红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、血脂(胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白),C反应蛋白、D-二聚体、24 h尿蛋白、血肌酐水平的变化,并采用Pearson相关分析法分析血PAF及PAF-AH与各相关指标的相关性.结果 实验组外周血PAF水平明显高于正常对照组,PAF-AH水平不同程度下降,PAF与PAF-AH水平成负(r=-0.568)相关,与红细胞计数、血小板计数、胆固醇、低密度脂蛋白、C反应蛋白、D-二聚体、血肌酐、24 h尿蛋白呈正相关.结论 IgA肾病患者外周血PAF水平明显升高,PAF-AH下降,提示PAF、PAF-AH与IgA肾病的进展有着密切联系.     

光化学诱导树鼠句脑缺血中心区及半暗区神经元 PAF受体结合特性的研究(摘要)

观察血栓性局部脑缺血过程中缺血中心区及半暗区血小板活化因子(platelet activating factor, PAF)受体的消长变化,探讨PAF在脑缺血中心区及半暗区神经元继发性脑损伤中的分子机制.建立光化学诱导树鼠句血栓性局部脑缺血模型并提取树鼠句脑细胞膜蛋白,并用3H-PAF放射配体结合试验检测中枢神经细胞膜不同特性的PAF结合位点(受体),结果:树鼠句脑细胞膜上存在两种亲和性不同的PAF受体,即高亲和性和低亲和性受体,其亲和力(Kd)分别为(3.61±0.72)nM和(17.04±2.41)*#nM,相应的最大结合容量(max)分别为(1457.94±168.01)fmol/mg蛋白和(5017.40±742.16)fmol/mg蛋白.脑缺血4,24及72h中心区、半暗区及对侧区高、低亲和性受体的Kd值、Bmax值均较假手术组明显下降(P＜0.01),中心区及半暗区下降尤为明显,其中以缺血后24h的变化最为显著.结果表明:PAF受体在介导缺血性脑损伤的病理生理过程中起着重要作用,缺血中心区及半暗区机能代谢的不同与PAF受体亲和特性及最大结合容量改变不同有关,亦是PAF介导继发性脑损伤的重要分子基础.     

Platelet-activating factor mediates hydrogen peroxide induced endothelial-leukocyte adhesion

The effects of hydrogen peroxide(H_2O_2)on endothelial-polymorphonuclear leuko-cyte(EC-PMN)adhesion and their mechanisms were studied in cultured bovine pulmonaryartery endothelial monolayers in vitro.H_2O_2 at various concentrations(10~(-3),10~(-2),10~(-1)mol/Lrespectively)stimulated EC-dependent PMN adhesion,of which 10~(-2)mol/L H_2O_2 was the mostpotent one,increasing adhesion to 2.3 times that of the control.Pretreatment of PMNs with SRI63-441,a platelet-activating factor(PAF)receptor antagonist,had no inhibition effect on H_2O_2induced EC-PMN adhesion.Pretreatment of ECs with SRI 63-441 before H_2O_2 exposure signifi-cantly decreased PMN adherence to ECs.Pretreatment of ECs with phospholipase A_2 inhibitorp-bromophenacyl-bromide or calmodulin antagonist chlorpromazine and calcium ion chelate EG-TA obviously decreased H_2O_2 induced increment of EC-PMN adhesion.These results suggestthat H_2O_2 may activate ECs,causing the inflow of extracellular calcium or the release of calciumfrom intracellular deposits.Increased intracellar Ca~(2+)may bind with calmodulin to activate phos-pholipase A_2,thus initiating PAF synthesis and promoting EC-PMN adhesion.     

Effect of platelet activating factor on blood spinal cord barrier following cervical cord injury

Bloodspinalcordbarrierdamagefollowingcervicalcordinjuryplaysanimportantroleinthepathophysiologicalprocessofsecondarybleeding,edemaandnecrosisofcervicalcordtissue-Plateletactivatingfactor(PAF)isaverystrongbiologicalactivatinglipidmediator-Inrecentyears,interesthasbeenfocusedontheroleofPAFinbloodbrainbarrierdisruption'IthasbeenprovedthatPAFplaysanimportantroleininducingthepathologicalprocessofstrokeLlj.ThestudyoftherelationshipbetweenPAFandbloodspinalcordbarrierisrarelyreported.Inthepresen…     

INTRACAMERAL INJECTION OF PLATELET ACTIVATING FACTOR AS A MEDIATOR OF INTRAOCULAR INFLAMMATION IN RABBIT EYES

R6sumeObjectifEvaluerl'oeddmecornden,lacontractionpuPillaire,laturbulencedel*umeuraqueuseetlesvariationsbiPhasiquesdelatensionintraoculaireinduitsparlefacteur8timulateurplaquettaire(PAF)chezdeslaPins.MdthodesL'injectiondePAFdanslachambreantdrieureetl,administrationparvoiesystdmiquedesonantagoniste.RdsuItatsLesrdactionsinduitesparPAFsontencorrdlationddoseutilisdeetbloqudesparBN52O21,antagonistedesrdcePteursPAF,avcelade20mg/kgeninjectionintraPdritondale.L'indomdthacine,inhibiteurdelacy…     

血小板活化因子对颈髓损伤后血脊髓屏障的影响

探讨血小板活化因子对颈髓损伤后血脊髓屏障的影响。采用蛛钢膜下腔注射ＰＡＦ及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，观察其对颈髓损伤后伤区信邻近脊髓组织ＰＡＦ含量，血脊髓屏障，颈髓水肿的影响。颈髓损伤后颈髓伤区及邻近脊髓组织ＰＡＦ含量，伊文思蓝含量，水含量均明显增加，蛛网膜下腔注射ＰＡＦ可使伤后ＰＡＦ含量，伊文思蓝含量，水含量增加更为显著。     

银杏苦内酯B对大鼠任意皮瓣血供的影响

目的：通过对皮瓣局部放射性核素显像,观察血小板活化因子拮抗剂BN52021（银杏苦内酯B）对大鼠任意皮瓣各区段血容量的影响。方法：使用BN52021对皮瓣局部进行处理,分别于术后3、6、9h,采用^99mTc体内标记红细胞的方法对皮瓣局部进行显像、绘制感兴趣区（ROI）并计算各段皮瓣的摄取比（UR),分别与对照组进行比较。结果：使用BN52021处理皮瓣局部,可使皮瓣中、末段的UR明显增加（P＜0．01）。结论：BN52021可以减轻皮瓣局部的炎症反应,减轻血流阻力,改善皮瓣血供。     

血小板激活因子对大鼠任意皮瓣成活力的影响

目的 检测随意皮瓣移植时,皮瓣局部组织中的血小板激活因子（ＰＡＦ）水平,探讨其在皮瓣移植过程中的作用机制。方法 皮瓣移植术后０,２,４,６和８ｈ将皮瓣取下,分蒂段、中段,末段匀浆提取组织液,检测血小板激活因子前体（ｌｙｓｏ－ＰＡＦ）的水平变化;皮瓣移植术前０．５ｈ皮瓣局部ｓｃ银杏苦内酯Ｂ（ＢＮ５２０２１）,分别于术后３,６和９ｈ采用＾９９Ｔｃ＾ｍ体内标记红细胞的方法进行ＥＣＴ检测和免疫组织化学检查     

内皮源性舒张因子对肺血管张力的调节及其与血小板激活因子引起肺动脉压升高的关系

本实验采用一氧化氮（ＮＯ）合成酶抑制剂Ｎｗ－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）、ＮＯ前体Ｌ－精氨酸和ＮＯ直接供体硝普钠研究内皮源性舒张因子（ＥＤＲＦ）对离体灌注豚鼠肺基础血管张力的调节作用及其与血小板激活因子（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）所致肺动脉压增高的关系。结果表明：Ｌ－ＮＡＭＥ可以明显增高肺动脉压、肺微血管压和肺动脉阻力，精氨酸对基础血管张力没有明显影响，但可阻断Ｌ－ＮＡＭＥ引起的变化。ＰＡＦ可明显增高肺动脉压、肺微血管压和肺动脉阻力，与Ｌ－ＮＡＭＥ合用有叠加效应，不被Ｌ－精氨酸和硝普钠阻断，说明基础状态下肺血管内皮释放一定量的ＥＤＲＦ维持肺循环的低压、低阻状态。ＰＡＦ增高肺血管压力和阻力的机制不是通过抑制ＥＤＲＦ合成的途径，ＥＤＲＦ不能阻断ＰＡＦ引起的肺血管张力升高。     

血小板活性因子及其拮抗剂对大鼠肝硬化门脉高压的影响

目的探讨肝硬化时肝脏和血循环中血小板活性因子(PAF)的变化以及其对门脉高压的影响。方法CCl4腹腔注射8周(0·15ml/kg,2次/周)诱导大鼠肝硬化,快速3H-PAF液闪检测肝及循环中PAF水平;受体饱和结合实验分析肝组织PAF结合能力;监测外源性PAF及其拮抗剂BN52021对门脉压和系统动脉压的影响。结果与对照组相比,肝硬化时肝内PAF、肝脏输出PAF及肝内生PAF水平明显升高,分别4·0ng/g±0·4ng/gvs2·7ng/g±0·5ng/g(P<0·01)、6·3ng/ml±0·6ng/mlvs3·4ng/ml±0·6ng/ml(P<0·01)、1·0ng/ml±0·6ng/mlvs-0·3ng/ml±0·5ng/ml(P<0·01);肝组织PAF结合能力Bmax明显升高(2·8±0·21)fmol/μg膜蛋白vs(0·9±0·06)fmol/μg膜蛋白,P<0·01,而受体亲和力Kd差异无统计学意义(8·0nmol/L±1·3nmol/Lvs5·8nmol/L±1·0nmol/L,P>0·05)。肝硬化组基础门脉压升高(12·2mmHg±0·7mmHgvs5·3mmHg±0·6mmHg,P<0·01),系统动脉压降低(82mmHg±10mmHgvs114mmHg±9mmHg,P<0·01)。门脉注入PAF(1μg/kg)后,肝硬化组门脉压提高了32%(12·1mmHg±0·6mmHgvs16·0mmHg±0·7mmHg,P<0·01),升高幅度约为对照组的227%(4·1mmHg±1·0mmHgvs1·8mmHg±0·3mmHg,P<0·01),而系统动脉压在两组均下降(肝硬化组由82mmHg±10mmHg降至48mmHg±4mmHg,P<0·01;对照组由114mmHg±9mmHg降至52mmHg±4mmHg,P<0·01)。门脉注入BN52021(5mg/kg),肝硬化组门脉压降低了16%(14·6mmHg±1·6mmHgvs12·3mmHg±0·8mmHg,P<0·05),而系统动脉压在肝硬化组和对照组均无明显变化(P>0·05)。结论肝硬化时肝脏合成PAF明显增加是循环血PAF升高的重要来源,并上调节肝的血流动力学影响门脉高压形成,其作用可被其拮抗剂BN52021部分逆转。