芍药苷治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的观察芍药苷对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的治疗效果及对核因子kappaB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法 SD大鼠40只随机分为5组:正常对照组(A组)、急性胰腺炎(AP)模型组24h点(B组)、AP模型组72h点(C组)、芍药苷治疗组24h(D组)和芍药苷治疗组72h(E组),每组8只。采用L-精氨酸腹腔内注射的方法诱发SAP模型,造模后立即灌胃生理盐水(B、C组)、芍药苷溶液(D、E组),分别于造模后24、72h时间点处死各组大鼠。采血检测血清淀粉酶、TNF-α、IL-6;取胰腺组织分2份,HE染色行光镜检查、WesternBlot法检测NF-κBp65蛋白表达。结果造模24h后与A组比较,B、D组大鼠血清淀粉酶均升高(P均<0.05),但D组淀粉酶水平明显低于B组(P<0.05);造模后72h,C、E组血清淀粉酶水平均下降至接近A组水平(P均>0.05)。D、E组较同时间点B、C组的病理改变和病理学评分均明显减轻(P均<0.05)。血清TNF-α和IL-6的水平分别为D组:(10.45±1.90)pg/ml和(610.38±106.19)pg/ml,E组:(9.93±1.63)pg/ml和(598.13±83.77)pg/ml;均明显低于同时间点的B组[(20.53±4.16)pg/ml,(1255.75±118.82)pg/ml,P均<0.05]与C组[(23.85±5.59)pg/ml,(1366.33±163.16)pg/ml,P均<0.05]。D、E组较同时间点B、C组NF-κBp65/β-actin的比值明显减少[D组与B组相比,(0.23±0.044)vs(0.71±0.029),P<0.05;E组与C组相比,(0.04±0.006)vs(0.65±0.026),P<0.05]。结论芍药苷对SAP大鼠治疗作用的机制可能与其抑制NF-κB活化,在整体水平上抑制细胞因子基因表达,使机体免受过量细胞因子的损伤等因素有关。     

痰热清注射液对内毒素所致全身炎症反应综合征大鼠核转录因子-κB的调控作用

目的 观察痰热清注射液对内毒素致全身炎症反应综合征(SIRS)大鼠核转录因子-κB(NF-κB)的调控作用.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、SIRS组和痰热清组,每组20只.腹腔注射内毒素复制SIRS大鼠模型.制模成功后2 h,痰热清组腹腔注射痰热清注射液4.5 ml/kg.各组于实验后6 h开胸取心脏血,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NF-κB活性以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.结果 与正常对照组[(31.06±16.34)、(76.26±16.88)、(45.37±9.64)ng/L]比较,SIRS组大鼠NF-κB活性[(87.52±36.72)ng/L]以及TNF-α[(321.52±56.74)ng/L]和IL-1β[(136.76±19.68)ng/L]表达明显升高(P均<0.01);与SIRS组比较,痰热清组大鼠NF-κB活性[(49.51±20.51)ng/L]以及TNF-α[(183.46±30.64)ng/L]和IL-1β[(90.62±16.29)ng/L]表达明显降低(P均<0.01).SIRS组大鼠NF-κB活性与TNF-α和IL-1β表达均呈明显正相关(r1＝0.67,r2=0.43,P均<0.01).结论 痰热清注射液可明显抑制SIRS大鼠的炎症反应,其作用机制可能是抑制NF-κB的活化.     

腹腔镜下腹腔灌洗引流对重症急性胰腺炎全身炎症反应的影响

目的:探讨腹腔镜下置管腹腔灌洗引流(LPLD)对重症急性胰腺炎(SAP)全身炎症反应的影响.方法:37例SAP患者按入院先后顺序随机分为内科组和LPLD组.检测并比较两组治疗前后0、1、3、7、10 d外周血内毒素、TNF-α、IL-lβ、IL-6的浓度及单核细胞NF-κB的活性.结果:第0天 LPLD组内毒素、TNF-α、IL-lβ、IL-6浓度及单核细胞NF-κB活性与内科组比较无显著差异;术后第10天,LPLD组内毒素、TNF-α、IL-lβ、IL-6浓度及单核细胞NF-κB活性分别为(1.64±0.13)pg/mL、(114.13±15.12)pg/mL、(80.17±18.06)pg/mL、(56.43±12.24)pg/mL、(68.2±1.7)%.上述指标与内科组比较均有显著下降(P<0.01 or P<0.05).结论:LPLD能明显减轻内毒素血症,减低NF-κB活性及细胞因子浓度,有效地减轻SAP患者的炎症反应.     

参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征的作用

目的:探讨参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征(SIRS)的治疗作用及其机制.方法:静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠SIRS模型.健康雄性Wistar大鼠45只,按随机数字表法分为假手术对照组(C组)、LPS致伤组(L组)和参附注射液治疗组(T组).L、T组动物制模后分为1、2、4和6 h 4个亚组.在4个时间点分别取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测单个核细胞中核转录因子-κB(NF-κB)活性、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,观察肺脏和肝脏的病理学变化,并与C组比较.结果:L组单个核细胞中NF-κB活性明显增高,2 h最明显(0.604±0.020),显著高于对照组(0.112±0.017);血清TNF-α浓度明显升高,2 h最明显[(1 644.8±25.9)ng/L],显著高于对照组[(55.9±19.2)ng/L];血清IL-6浓度随时间推移不断升高,显著高于对照组.病理结果显示,L组肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润;肝脏毛细血管扩张、充血、水肿和炎症细胞浸润.参附注射液可以显著降低NF-κB活性、TNF-α及IL-6水平,减轻肺脏和肝脏病理损伤.结论:参附注射液可通过抑制NF-κB活性对大鼠SIRS起保护作用.     

血单核细胞核因子-κB p65活化水平与黄藤素治疗的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者炎症反应的相关性研究

目的探讨血单核细胞核因子-κB(NF-κB)p65活化水平对于评价黄藤素治疗前后慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者的临床症状和气道炎症水平的价值和意义。 方法选取重庆市奉节县人民医院呼吸内科2017年10月至2019年1月收治的100例中度AECOPD患者,按随机数字表法将患者分为对照组(常规治疗)和观察组(黄藤素＋常规治疗),每组各50例。在治疗前和治疗第7天后记录患者动脉血氧分压(PaO₂)、动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)、酸碱值(pH);使用肺功能仪记录患者第1秒用力呼气容积(FEV₁)占预计值百分比(FEV₁% pred);ELISA分析血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)水平;使用western blot法分析血单核细胞磷酸化核因子-κB (NF-κB)p65和总NF-κB p65水平。采用独立样本t检验进行两组间计量资料比较,采用Pearson相关分析血单核细胞磷酸化NF-κB p65/总NF-κB p65比值与血中TNF-α水平和血IL-8水平的关系。 结果治疗第7天后,观察组pH、PaO₂、FEV₁% pred水平[(7.42±1.87),(67.50±9.31)mmHg,(53.62±16.54)%]高于治疗前[(7.16±2.31),(40.40±13.62)mmHg,(36.17±18.27)%],观察组PaCO₂、TNF-α、IL-8水平和磷酸化NF-κB p65/总NF-κB p65比值[(43.12±8.67)mmHg,(81.76±23.41)ng/L,(225.87±89.12)ng/L,(0.47±0.09)]低于治疗前[(69.17±12.11)mmHg,(267.34±33.23)ng/L,(617.34±127.63)ng/L,(0.96±0.07)],均差异有统计学意义(t＝－0.24,－0.31,－0.05,0.04,15.61,25.12,2.53;均P<0.05)。同时,观察组pH、PaO₂、FEV₁% pred水平较对照组[(7.31±1.51),(62.71±14.12)mmHg,(44.64±10.47)%]更高,PaCO₂、TNF-α、IL-8水平和磷酸化NF-κB p65/总NF-κB p65比值较对照组[(53.64±10.25)mmHg,(114.82±25.96)ng/L,(362.65±106.97)ng/L,(0.68±0.11)]更低,组间比较均差异有统计学意义(t＝－2.99,－3.07,－3.26,4.62,5.26,7.27,4.55;均P<0.05)。观察组黄藤素治疗后磷酸化NF-κB p65/总NF-κB p65比值与血中TNF-α水平呈显著正相关(r＝0.622,P<0.001),与血中IL-8水平呈显著正相关(r＝0.571,P<0.001)。且在治疗期间未见明显与黄藤素胶囊相关的严重不良反应。 结论单核细胞NF-κB p65活化水平与AECOPD患者炎症水平密切相关,黄藤素可能是通过抑制NF-κB p65活化减轻AECOPD患者的气道炎症反应,改善肺功能。     

白介素-10对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 探讨白介素-10对内毒素(LPS)诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的调节,为临床运用白介素-10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS组、IL-10＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELISA法分别检测核提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量。结果 LPS组NF-κB活性和TNF-α含量在刺激后0.5～4h明显高于正常对照组;IL-10＋LPS组NF-κB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论 LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNF-α基因表达增强;白介素-10可抑制NF-κB活化而减少TNF-α的释放。     

雷公藤氯内酯醇对急性肺损伤核因子-κB的调节功能观察

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)在急性肺损伤(ALI)中的作用及雷公藤氯内酯醇(T4)的调节功能.方法:实验分ALI组、雷公藤T4组、健康对照组.用迁移电泳法(EMSA)检测外周血单核细胞(PBMC)中NF-κB活性;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMC培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL10)含量.结果:与健康对照组比较,ALI组PBMC中NF-κB活性明显增强(P<0.01),PBMC 培养上清中TNF-α、IL-10含量均明显升高(P均<0.01);TNF-α含量随NF-κB活化而增高,两者呈显著正相关(r=0.79,P<0.01).与ALI组比较,雷公藤T4组PBMC中NF-κB活性显著下降(P<0.01);TNF-α、IL10含量亦明显下降(P<0.05和P<0.01).结论:ALI时PBMC中NF-κB明显活化,介导促炎、抗炎介质大量释放,参与ALI发生.雷公藤T4能明显抑制NF-κB活化及促炎介质TNF-α、抗炎介质IL10释放,调节促炎/抗炎反应失衡.     

利拉鲁肽通过下调NF-κB及相关炎性因子减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤的研究

目的探讨利拉鲁肽减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤的作用及机制。方法实验动物为SPF级SD雄性大鼠54只,分为假手术组(S组)、糖尿病合并脑缺血组(Di组)、利拉鲁肽干预糖尿病合并脑缺血组(Li组),每组18只。采用神经功能缺损评分对各组大鼠的神经功能进行评估;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;采用过氧化氢还原法检测脑组织中的髓过氧化物酶(MPO)活性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织中的IL-1β水平;采用Western blot检测脑组织核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达水平。结果神经功能缺损评分显示:S组、Li组和Di组分别为0、(2.57±0.64)、(3.50±0.55)分,Di组和Li组的评分均高于S组(P0.05),Li组的评分低于Di组(P0.05)。TTC染色显示:S组、Li组和Di组的梗死面积百分比分别为0、(29.44±2.52)%、(36.58±4.85)%,Di组和Li组的梗死面积百分比均高于S组(P0.05),Di组高于Li组(P0.05);MPO活性的测定:S组、Di组和Li组分别为(0.067±0.003)、(0.973±0.049)、(0.549±0.420)U/mL,Di组和Li组均高于S组(P0.05),Li组比Di组显著降低(P0.05)。IL-1β水平的测定:S组、Di组和Li组分别为(35.43±2.35)、(72.42±6.13)、(56.94±2.15)pg/mL,Di组和Li组均高于S组(P0.05),Li组比Di组显著降低(P0.05)。NF-κB、TNF-α蛋白表达的相对水平:Di组和Li组均高于S组(P0.05),Li组比Di组显著降低(P0.05)。结论利拉鲁肽具有减轻糖尿病大鼠局灶性脑缺血损伤的作用,其机制与降低MPO活性、降低NF-κB及相关炎性因子TNF-α、IL-1β的表达有关。     

核因子-κB抑制剂对小鼠肺炎衣原体肺炎致炎及抗炎细胞因子表达变化的影响

目的观察核因子(NF)-κB抑制剂对小鼠感染肺炎衣原体后致炎及抗炎细胞因子表达的调节效应,并对其作用机制进行初步探讨。方法采用TLR4基因缺失(C3H/HeJ)雄性小鼠90只,随机分为正常组、肺炎衣原体感染组和肺炎衣原体感染加NF-κB抑制剂干预组,正常组鼻内接种二磷酸蔗糖(2sp)缓冲液,感染组鼻内接种肺炎衣原体约4.0×10~6IFU/mL,干预组即在感染肺炎衣原体后腹腔注射NF-κB抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)50mg/kg,并分别在接种后第1、4、7、14和21天处死小鼠,取肺脏组织分别采用Western blot法检测NF-κB蛋白的表达,用ELISA法检测肺组织中TNF-α、IL-10的表达,同时观察各组中小鼠肺组织病理变化。结果小鼠感染肺炎衣原体后NF-κB蛋白的表达与正常组比较迅速升高,第4天达高峰(12.44±1.42)pg/mg,第14天时表达下降(5.61±0.81)pg/mg。同时肺组织中TNF-α、IL-10的表达水平在各时间点均高于正常组。在NF-κB抑制剂干预组,肺组织N F-κB蛋白表达与感染组比较明显减弱,同时TNF-α、IL-10的表达水平在各时间点均低于感染组。结论 NF-κB能活化小鼠感染肺炎衣原体的炎症反应,其特异性NF-κB抑制剂能有效拮抗NF-κB活性,抑制炎性介质的释放,减轻炎症反应。     

MCF-7荷瘤小鼠血清及树突状细胞上清液中炎性细胞因子水平变化及意义

目的探讨MCF-7荷瘤小鼠模型血清和树突状细胞(dendritic cells,DCs)上清液中细胞因子水平的变化,为免疫治疗提供依据。方法裸鼠(对照组)及MCF-7裸鼠模型(荷瘤组)各10只,应用ELISA法检测血清及DCs上清液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-12水平。结果荷瘤组血清TNF-α水平((314.81±103.36)pg/mL)低于对照组((371.87±115.30)pg/mL),但2组比较差异无统计学意义(P>0.05),DCs上清液TNF-α水平((1.88±0.10)ng/mL)高于对照组((1.72±0.07)ng/mL)(P<0.05);荷瘤组血清IL-6水平((170.72±54.51)pg/mL)高于对照组((122.35±20.65)pg/mL)(P<0.05),DCs上清液IL-6水平((57.18±5.06)pg/mL)高于对照组((44.53±4.86)pg/mL)(P<0.05);荷瘤组血清及DCs上清液IL-12水平((119.80±33.53)pg/mL和(89.76±8.89)pg/mL)均低于对照组((186.22±51.91)pg/mL和(157.98±48.31)pg/mL)(P<0.05)。结论 MCF-7荷瘤小鼠血清IL-6可能参与该类乳腺癌肿瘤细胞的生长;DCs可能参与产生TNF-α,促进IL-6分泌,抑制IL-12分泌,对肿瘤细胞的杀伤作用减弱。     

轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB及相关炎性因子表达

目的探讨轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、外周血白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-1β表达情况及其临床意义。方法 104例轮状病毒感染合并惊厥患儿为观察组,32例轮状病毒感染无惊厥患儿为对照组,2组采用Western blot法检测外周血白细胞NF-κB P65蛋白表达水平,采用反转录-PCR法检测IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α和IL-1β水平。结果观察组患儿外周血白细胞IL-6mRNA(8.06±1.25)、TNF-αmRNA(12.13±3.73)、IL-1βmRNA(3.97±1.35)及白细胞细胞核NF-κB P65表达水平(1.21±0.42)明显高于对照组(1.15±0.65、2.64±1.06、0.93±0.34、0.41±0.13)(P0.05),白细胞细胞质NF-κB P65蛋白表达水平(0.25±0.10)明显低于对照组(1.87±0.32)(P0.05);观察组患儿血清IL-6[(228.31±54.40)μg/L]、TNF-α[(236.14±36.78)μg/L]和IL-1β[(618.17±30.42)μg/L]水平明显高于对照组[(69.12±12.15)、(57.87±15.43)、(148.14±29.04)μg/L](P0.05)。结论轮状病毒感染合并惊厥可诱发患儿外周血白细胞胞质内NF-κB P65核转位及IL-6、TNF-α和IL-1β等炎性因子表达,对判断病情进展、指导临床治疗有一定意义。     

TSNⅡA对大鼠IRI肾脏TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TSNⅡA)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)肾脏Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响及对炎症因子水平的下调作用,并分析其对肾脏IRI保护作用机制。方法选取雄性Wistar大鼠建立大鼠肾IRI模型,采用随机数字表表法随机分为五组,每组12只,其中A组大鼠为假手术组;B组为IRI模型组;C组为ST2825干预组,注射ST2825(100 mg/kg);D组为Bay-7082干预组,注射Bay-7082(50μg/kg);E组为TSNⅡA干预组:实验前3 d开始TSNⅡA干预组股静脉注射丹参酮ⅡA注射液(5 mg/kg),每天1次。18 h后,取大鼠下腔静脉血液2 ml,检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)浓度,并处死大鼠,应用免疫组化法检测肾脏TLR4和NF-κB阳性表达率。结果 B、C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均高于A组,C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均低于B组,E组TLR4和NF-κB阳性率分别为(38.27±2.87)%和(40.76±4.20)%,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。B、C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均高于A组,C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均低于B组,E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平分别为(76.02±4.28)pg/L、(86.41±6.32)ng/L和(80.28±5.60)ng/L,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论TSNⅡA能够下调大鼠肾脏TLR4和NF-κB水平,抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低炎症因子水平,实现对肾脏IRI的改善与保护作用。     

益赛普对脑外伤后核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的表达及脑水肿的影响

目的 观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFB:Fc,益赛普)对创伤性脑损伤后脑组织核转录因子-κB(NF-KB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及对脑水肿的影响.方法 采用Feeney自由落体撞击法建立脑损伤模型,益赛普组大鼠于脑损伤模型建立后30 min腹腔注射益赛普3.0 mg/kg,对照组及创伤组大鼠注射生理盐水.采用放射免疫法检测大鼠脑组织匀浆TNF-α的蛋白表达,免疫组织化学法检测脑组织NF-κB的阳性细胞表达,用干湿重法测定大鼠脑组织含水量;并应用电镜技术进行脑组织病理形态学观察.结果 与对照组比较,大鼠脑损伤后脑组织NF-κB和TNF-α的表达及脑组织含水量均明显升高(P<0.05或P<0.01);与创伤组比较,益赛普治疗组大鼠NF-κB、TNF-α表达及脑组织含水量均显著降低(P<0.05,P<0.01).在电镜下观察,益赛普组大鼠脑组织损伤明显较创伤组大鼠轻.结论 大鼠急性脑损伤后脑组织NF-κB及TNF-α表达增加,并与脑水肿程度相平行;急性脑损伤后应用益赛普治疗可以抑制脑组织NF-κB和TNF-α的表达,减轻脑水肿.     

甘草酸二铵对急性肺损伤大鼠肺组织糖皮质激素受体及核因子κB表达的影响

目的 观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核因子κB(NF-κB)、糖皮质激素受体(GR)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响.方法 将24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为生理盐水对照组、ALI模型组和GL干预组,每组8只.ALI模型组、GL干预组分别给予内毒素(LPS)5 mg/kg尾静脉注射;IPS注射前1 h,GL干预组给予GL 20 mg/kg静脉注射.观察4 h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干比(W/D)、PaO_2,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织NF-κB mRNA,GR mRNA的表达,western blot法测定肺组织Nf-κB及GR蛋白的表达,ELISA法测定血清TNF-α,IL-10质量浓度.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,各组间均数比较采用单因素方差分析,均数两两比较采用q检验.结果 (1)ALI模型组TNF-α为(153.68±20.42)ng/L,明显高于生理盐水组(43.96±7.57)ng/L(P<0.01)和GL干预组(87.23±7.52)ng/L(P<0.01).ALI模型组IL-10为(42.48±6.81)ug/L,明显高于生理盐水组(24.72±8.03)ng/L(P<0.01),但低于GL干预组水平(58.33±9.62)ug/L(P<0.05).(2)ALI模型组NF-κBmRNA和蛋白的表达水平[分别为(3.414±0.521),(254.7±16.4)]明显高于生理盐水组[分别为(0.432±0.085),(45.6±7.3)](P<0.01),而GRmRNA和蛋白的表达[分别为(0.152±0.025),(11.5±2.3)]则明显低于生理盐水组[分别为(0.434±0.013),(54.6±6.5)](P<0.01);GL干预组NF-κB mRNA和蛋白的表达水平[分别为(1.894±0.272),(133.5±11.7)]明显低于ALI模型组(P<0.01),GR mRNA和蛋白的表达[分别为(0.308±0.033),(28.2±5.6)]则明显高于ALI模型组(P<0.05,P<0.01).(3)ALI模型组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI模型组减轻.结论 甘草酸二铵可能通过下调NF-κB的表达,同时提高GR的表达,进而调节炎症因子TNF-α及抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用.     

银杏叶提取物对糖尿病肾病的防治作用与机制研究

目的:观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病肾病大鼠核转录因子-κB(NF-κB)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平的影响,探讨其对糖尿病肾病的防治作用及其机制.方法:22只Wistar大鼠分为正常对照组(A组),糖尿病无干预组(B组),GBE干预组(C组).以一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg制备糖尿病大鼠模型.12周后取肾组织进行病理学观察,以电泳迁移率变动分析法检测肾组织NF-κB活性,放射免疫法测定血清TNF-α和IL-6水平.结果:B、C组大鼠饲养过程中各死亡2只,存活大鼠空腹血糖>13.9 mmol/L,模型制作成功.B组肾小球基底膜厚度、肾小球内细胞数和单个核细胞数显著多于A组,C组显著少于B组而多于A组(P均<0.05).与A组比较,B组肾组织NF-κB活性、TNF-α和IL-6水平均显著升高,C组也有升高但明显低于B组(P均<0.05).TNF-α、IL-6水平与NF-κB活性呈正相关(r1=0.83,r2=0.78;P均<0.05).结论:银杏叶提取物可以通过抑制肾组织中NF-κB的活化、减轻过度的炎症反应而延缓糖尿病肾病的发生、发展.     

急性缺血性脑卒中患者血浆TAFI和炎性因子水平的变化及意义

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)和炎性因子水平变化,并阐述二者之间的联系,为AIS早期诊断或风险因素评估奠定实验基础。方法选取临床确诊的AIS患者86例为AIS组,以86例健康体检者为对照组。TAFI测定采用免疫比浊法,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)测定采用酶联免疫吸附试验,C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)测定采用胶体金免疫层析法。结果 AIS患者血浆TAFI水平较对照组显著下降[(17.48±2.79)μg/mL vs.(27.23±3.27)μg/mL],炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著升高[(10.14±2.05)pg/mL vs.(4.54±0.78)pg/mL;(110.10±11.12)pg/mL vs.(81.18±7.58)pg/mL;(13.02±1.61)pg/mL vs.(6.90±1.55)pg/mL],急性期蛋白CRP和PCT也显著升高[(0.80±0.11)ng/mL vs.(0.43±0.10)ng/mL;(16.41±2.41)μg/mL vs.(5.60±1.11)μg/mL],差异均有统计学意义(P0.05)。两组血浆TAFI水平与相应炎性因子及急性期蛋白水平呈显著负相关(P0.05)。结论 TAFI对慢性血管内炎性反应有抑制作用;TAFI有可能成为辅助诊断早期AIS或评估其风险性的生物标志物。     

核因子-κB、IκB在创伤失血性休克大鼠肝损伤中的作用

目的 从组织受体水平探讨核因子-κB(NF-κB)、IκB在创伤失血性休克后肝组织中的变化及其在肝损伤中的作用机制.方法 雄性健康Wistar大鼠36只,采用双侧股骨骨折伴失血性休克模型,随机分成正常对照组6只,双侧股骨骨折伴失血性休克组30只.动态观察伤后0.5、2、4、6、8 h大鼠肝组织核因子-κB、IκB、肝脏病理、肝功能、TNF-α、IL-6等变化.肝组织NF-κB采用EMSA法测定结合活性、IκB采用免疫印迹法测定其蛋白含量,并进行计算机图像分析.数据采用SPSS 12.0软件分析,两组间比较采用配对资料的t检验.结果 NF-κB的活性伤后迅速升高,伤后2 h与正常对照相比,差异具有统计学意义,[(8.4±0.7) vs (2.3±0.4),P＜0.01];伤后6 h达到高峰,和正常组相比,P＜0.01[(43.4±4.6) vs (2.3±0.4),P＜0.01].IκB伤后迅速降低,伤后2 h和正常对照相比,差异具有统计学意义[(17.0±2.0) vs (26.4±2.2),P＜0.01].伤后6 h继续下降至比较低的水平,和正常组相比,P＜0.01[(6.5±1.1) vs (26.4±2.2),P＜0.01].TNF-α、IL-6伤后逐渐升高,并于伤后6 h达到高峰:和正常组相比,P＜0.01[TNF-α,(173.7±12.1) vs (30.8±1.8)pg/ml,P＜0.01;IL-6,(175.5±12.5) vs (10.4±0.7)pg/ml,P＜0.01].光镜下伤后4～8 h肝窦内有少许淤血,有散在炎性细胞浸润;血清ALT、TB伤后4 h开始增高,和正常组相比,P＜0.01[ALT,(640.6±80.2) vs (536.8±60.0)nmol·L-1,P＜0.01;TB,(4.7±1.1) vs (1.6±0.2)mol/L,P＜0.01];白蛋白伤后4 h明显下降,和正常组相比,P＜0.01[(13.3±1.6) vs (20.6±3.4)g/L,P＜0.01].结论 NF-κB及其抑制蛋白IκB参与了严重创伤失血性休克后肝损伤的发生;且NF-κB增高越多、IκB减少越明显,肝损害越重.提示NF-κB及其IκB在严重创伤休克后肝组织细胞损伤与抗损伤机制方面起着重要作用.     

一氧化氮和白介素-10抑制核因子-κB活化的实验研究

目的探讨一氧化氮(NO)和白介素-10(IL-10)对内毒素(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化的调节,为临床运用提供理论依据.方法用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS组、NO+LPS组和IL-10+LPS组.用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELISA法分别检测提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量.结果 LPS组NF-κB活性和TNF-α含量在刺激后0.5～4 h显著高于正常对照组(P＜0.01);NO+LPS组和IL-10+LPS组的NF-κB活性和TNF-α含量与LPS组相比均明显下降,尤在刺激后1 h最显著(P＜0.01).结论 LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNF-α基因表达增强;NO和IL-10可抑制NF-κB活化,减少TNF-α的释放,缓解LPS诱导的ALI.     

泰山磐石散对流产模型大鼠母胎界面NF-κB、IL-1β、TNF-α表达情况的影响

目的:观察泰山磐石散对流产模型大鼠母胎界面中核因子κB(NF-κB)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平的影响,探讨泰山磐石散防治自然流产的机制.方法:将30只雌性SD大鼠按1∶1比例和雄性SD大鼠合笼过夜配种,随机平均分为正常组、模型组和治疗组,于妊娠的第12天取各组孕鼠子宫组织,采用免疫组织化学法检测3组大鼠母胎界面子宫侧蜕膜组织NF-κ B、IL-1 β、TNF-α的蛋白表达水平.结果:与正常组相比,模型组大鼠母胎界面子宫侧蜕膜组织NF-κB、IL-1 β、TNF-α的表达水平均显著升高(P＜0.01);治疗组大鼠母胎界面子宫侧蜕膜组织NF-κB、IL-1 β、TNF-α的表达水平显著低于模型组(P＜0.01),差异均有统计学意义.结论:与模型组相比,经泰山磐石散治疗后母胎界面子宫侧蜕膜组织NF-κB、IL-1β和TNF-α的表达水平显著降低.提示泰山磐石散能够有效防治自然流产(spontaneous abortion,SA),可能是通过抑制NF-K B的活化、降低促炎细胞因子的合成和释放实现的.     

胸腺素β4对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用

目的 探讨胸腺素β4腹腔注射给药对重症性胰腺炎大鼠的保护作用及机制.方法 雄性SD大鼠54只,随机(随机数字法)分为3组:假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、胸腺素β4预处理组(Tβ4组),每组18只.采用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备大鼠SAP模型,Tβ4组在造模前30 min经腹腔注射胸腺素β4(6 mg/kg),术后3、6、12h分批剖杀大鼠,各时间点6只.检测血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β及IL-6水平,光镜观察胰头部组织病理变化,Western blot检测胰腺组织NF-κB p65和IκB α蛋白表达水平.多个样本均数比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 SAP组(3、6、12 h)血清淀粉酶分别为(3221 ±394) U/L、(4509±474) U/L和(6280±728) U/L,高于相应时间点Tβ4组的(2598±416) U/L、(3639±373) U/L和(4782±466) U/L,差异具有统计学意义(t=-2.666,-3.530,-4.245,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)TNF-α分别为(247.7±18.5) pg/mL、(313.5±17.7) pg/mL和(359.3±22.6)pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(182.3 ±13.6) pg/mL、(258.9±14.9)pg/mL和(278.1±16.3)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-6.964,-5.769,-7.152,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)IL-1β分别为(258.2±10.5) pg/mL、(345.1±22.0) pg/mL和(430.9±25.4) pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(170.3±12.4) pg/mL、(263.5±13.3) pg/mL和(303.7±16.1)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-13.258,-7.762,-10.355,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)IL-6分别为(266.3±11.5) pg/mL、(355.0±24.4) pg/mL和(429.2±33.7) pg/mL,均高于Tβ4组相应时间点的(171.1±13.0) pg/mL、(234.9±19.2) pg/mL和(277.2±19.2)pg/mL,差异具有统计学意义(t=-13.401,-9.474,-9.582,P＜0.05);SAP组(3、6、12 h)胰腺病理评分分别为(6.25±0.94)分、(8.83 ±0.82)分和(12.08±1.16)分,显著高于Tβ4组相应时间点的(4.17±0.93)分、(6.33 ±0.82)分和(7.33±1.25)分,差异具有统计学意义(t=-3.867,-5.303,-6.823,P＜0.05).SO (12 h)组胰腺组织NF-κBp65蛋白相对表达量为0.95 ±0.11,显著低于SAP(12 h)组的(2.40±0.17),差异具有统计学意义(t=-17.368,P＜0.05),Tβ4组胰腺组织NF-κB p65蛋白相对表达量为(1.50 ±0.10),较SAP (12 h)组显著降低,差异具有统计学意义(t=10.917,P＜0.05).SO (12h)组胰腺组织IκB α蛋白相对表达量为(1.93±0.11),显著高于SAP (12 h)组的(0.78±0.18),差异具有统计学意义(t=13.260,P＜0.05),而Tβ4 (12 h)组胰腺组织IκB α蛋白相对表达量为(1.12±0.10),较SAP (12 h)组显著升高,差异具有统计学意义(t=4.112,P＜0.05).结论 胸腺素β4对重症急性胰腺炎大鼠具有保护作用.其作用机制可能与抑制胰腺NF-κB信号通路的活化及降低炎症细胞因子的水平有关.