核因子-κB及其与动脉粥样硬化的关系

核因子 κB(NF κB)是一种调控多种细胞基因表达的转录因子 ,NF κB存在于血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及单核 巨噬细胞中 ,主要参与介导炎症反应、细胞增殖及细胞凋亡等生物反应。人类动脉粥样硬化组织细胞可见许多由NF κB调控的基因表达增加 ,且存在明显的NF κB激活 ,NF κB的异常激活与动脉粥样硬化疾病的发生有密切关系。抑制NF κB的活化 ,可望为动脉粥样硬化的防治开辟一条新的途径。     

血清或血浆中的miR-375在肿瘤诊治和预后中的研究进展

microRNAs（miRNAs）是一类在转录后水平调控基因表达的内源性非编码小RNA分子,通过与下游靶基因3′-非编码区（3′-untranslated regions 3′-UTRs）结合,抑制mRNA的翻译或使其降解,进而发挥原癌基因或抑癌基因的作用。近年来研究表明,血清或血浆中的miR-375是肿瘤早期诊断、治疗、预后等密切相关的生物标志。     

miRNA介导的病毒-人相互作用研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类内源性,长度约为22核苷酸的单链RNA分子,可通过5′端的种子区与靶标转录本mRNA的3′UTR配对,导致靶mRNA的降解或翻译抑制。越来越多的研究发现,miRNA在介导病毒-人相互作用过程中发挥着重要的作用,作用模式包括病毒miRNA靶向人及自身的转录本、人miRNA靶向病毒及自身的转录本、病毒的miRNA介导人miRNA调控的网络、RNA干扰（RNAi）相关和干扰素相关的宿主对病毒的抑制及反抑制。miRNA介导的病毒-人相互作用的研究对于全面理解病毒-宿主相互作用的机制、开发抗病毒的药物具有重要意义。     

NR2B启动子区域SNP位点生物信息学探究

目的 NR2B基因的表达与调控与空间定向障碍、前庭疾病易感性等密切相关,通过生物信息学技术对NR2B基因启动子区域多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNP)进行探究.方法 应用生物信息学检索的方法 分析了目前已发表位于NR2B基因启动子区域的11个SNP.结果 检索分析表明,S2、S9-11等位基因频率存在人种差异性;核心启动子的SNP可能参与靶基因的调控与表达,在线分析提示,不同转录因子结合元件位于含S1-5、S8-11等九个基因多态性位点序列中,一个转录因子结合元件位于含S6基因多态性位点序列,这些差异可能是SNP影响NR2B表达的重要原因之一.结论 上述基因多态性位点的变化为研究其与前庭系统疾病的关联性提供重要思路.     

miRNA在癌症中的临床应用

miRNAs是一类进化上保守的多效性非编码小RNA,通过序列特异性与同源信使核糖核酸（mRNA）的3＇非翻译区（非编码区）靶向相互作用,抑制转录后的基因表达。miRNAs的表达和处理模式在人类多种疾病（包括恶性肿瘤）上表现出多方面的改变,通过靶向作用于几十到数百个基因,可以改变肿瘤发生和发展所必须的基本生物学功能和路径[1]。     

基因回路调控元件的研究进展

启动子、终止子、核糖开关及核糖体作用相关序列等分别在转录、翻译以及翻译后修饰等不同水平参与基因表达调控,实现目的 基因的精确表达.它们作为基因调控元件广泛用于基因回路的构建,在基因组工程和代谢工程中发挥了重要作用.该文简要概括了基因回路中这些常见调控元件的结构特征、作用机制及其改构方式,阐述了天然及人造基因调控元件在代谢途径优化中的作用,并对未来基因回路的构建及应用进行了展望.     

长链非编码RNA在动脉粥样硬化“损伤-应答”中的作用机制研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类序列长度大于200 bp的非蛋白编码RNA，通过调节前转录、转录、翻译及翻译后修饰而调控生物的表观遗传性状。动脉粥样硬化是因大、中动脉发生粥样病变而逐渐狭窄、闭塞，从而使靶器官出现缺血缺氧的血管病变。动脉粥样硬化的始动、进展机制可概括为“损伤-应答”学说，涉及脂质沉积、血管内膜炎症、细胞增殖与凋亡过程。有研究报道，lncRNA可通过调控不同的基因及分子表达来调控“损伤-应答”的发生发展。本文针对lncRNA调控“损伤-应答”的机制进行综述，旨在为相关的基础研究及临床诊疗提供参考。     

miRNA和肿瘤干细胞研究进展

microRNA（miRNA）是一类长度为21-23个核苷酸（nt）的非编码单链小RNA分子,由约70nt的pre-miRNA经Dicer酶剪切加工而来,通过RISC（RNA-induced silencing complex）在转录后对靶基因的表达实施调控。如miRNA与其靶基因mRNA的3’-UTR（非翻译区）片段完全互补,     

人卵巢癌组织端粒酶活性与p16基因二者相关性探讨

端粒酶是一种核糖核蛋白,主要由RNA和蛋白组成,以自身内源性RNA为模板,依逆转录机制合成端粒序列并添加到染色体末端,使端粒DNA不会随细胞分裂出现净丢失,从而维持了端粒缩短和延伸的动态平衡.p16基因及酶蛋白产物作为细胞周期调节因子发挥对细胞周期负向调控作用,其异常可在多种肿瘤中出现,因此p16基因可能与肿瘤的发生发展密切相关[1].     

微RNA:一类新的基因调控因子

微RNA是新发现的一类非编码RNA分子，在动植物细胞中广泛表达，它的基因是短的反向重复序列。一般认为微RNA参与调控mRNA的翻译，并与其稳定性有关。微RNA可能在细胞中起着非常重要的作用。     

eIF4E生物学功能及其在肿瘤中作用研究进展

 随着分子生物学及肿瘤基因组学的研究进展,近年,针对肿瘤的分子靶向治疗进展迅速。肿瘤分子靶向治疗药众多,根据其作用机制可以分为两大类,一类是针对癌基因依赖靶点的靶向治疗^[1],这类药物以引起肿瘤的驱动基因为靶点。另一类针对非癌基因依赖靶点的靶向治疗^[2],这类药物的靶点蛋白在正常细胞中也存在,只是肿瘤细胞为了快速生长增殖对这类蛋白质需求量远大于正常细胞,例如针对分子伴侣热休克蛋白的靶向治疗。肿瘤细胞的生长增值需要大量的蛋白质,研究表明真核生物蛋白质调控相关蛋白异常与肿瘤发生发展有关,因此针对蛋白质翻译调控靶点成为非癌基因依赖靶向治疗的研究热点。而真核细胞蛋白质翻译调控的限速步骤主要在翻译起始阶段,而真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic traslation initiation factor 4E, eIF4E)作为翻译起始阶段的重要调控因子在多种肿瘤中表达异常。本文就eIF4E在肿瘤中的作用及以其作为靶点的分子靶向治疗研究现状给予综述。     

核因子—kB及其在创伤后炎症反应中的作用

核因子-kB(NF-kB)是调控炎症细胞因子基因表达的主要转录调控因子之一,在创伤后的炎症反应中发挥着重要的作用。机体受到创伤后,NF－kB被激活,从胞浆中进入到细胞核内,结合到被诱导基因自动子序列上的kB位点,诱导基因转录,癸中炎症细胞因子,引起局部乃于全身的炎症反应,并且通过反馈环路导致炎症过程的放大和持续。NF－kB抑制剂可阻断NF－kB的激活而具有显著的治疗应用价值。     

黄体酮对大鼠脑损伤后炎症反应的调控作用

目的 研究黄体酮对大鼠脑损伤后皮质炎症相关因子环氧合酶-2(COX -2)、前列腺素E2( PGE2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和NF - κB表达的影响,以探讨黄体酮脑保护作用的可能机制. 方法 雄性SD大鼠45只,随机数字表法分为假手术组、脑损伤组和黄体酮治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作脑损伤模型.黄体酮治疗组伤后1,6h腹腔注射黄体酮16mg/kg.各组于伤后24h取材.用免疫组织化学法及免疫蛋白印迹法观察皮质COX -2、PGE2、iNOS和NF - κB的免疫阳性细胞数和蛋白表达水平变化. 结果 (1)与假手术组比较,脑损伤组大鼠皮质COX -2、PGE2、iNOS和NF - κB阳性细胞数和蛋白表达水平显著增加(P＜0.05);(2)黄体酮治疗组与脑损伤组比较,皮质COX -2、PGE2、iNOS和NF - κB阳性细胞数和蛋白表达水平明显减少(P＜0.05). 结论 黄体酮可能是通过抑制NF - κB的活化,阻断NF - κB和iNOS自身强化的炎症反应过程,进而降低COX -2、PGE2的表达,抑制脑损伤后的炎症反应,发挥脑保护作用.     

人ID4基因启动子及上游顺式表达调控元件的克隆及特征分析

目的克隆人ID4基因启动子及上游顺式调控元件,并对其结构及调控元件的特征进行生物信息学分析。方法从NCBI人类基因组数据库中截取ID4基因转录起始位点上游5′侧翼区约2242bp及下游5′非翻译区212bp的基因组序列。利用TESS和Genomax等在线分析软件进行启动子及上游调控元件的特征分析。设计PCR引物,采用分段扩增法,获得长度分别为1811bp和650bp的两条产物片段,分别插入pGEM-T载体,转化至Top10感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆。先后应用KpnⅠ/NheⅠ、KpnⅠ/EcoRⅠ对获得的两个pGEM-T重组载体及pGL3Basic荧光素酶报告载体进行双酶切,T4DNA连接酶连接,转化至Top10感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,最后测序鉴定。结果获得长度为2461bp的ID4基因启动子DNA序列,经测序证实与人类基因组序列一致。ID4基因具有Ⅱ型启动子特征,有2个非常显著的上游元件(TATA盒和GC盒),GC含量占总碱基含量的65.9%。在转录起始位点上游-1000bp与下游212bp之间分别存在多个可能具有正向和负向调控作用的顺式元件。结论成功克隆了人ID4基因启动子及其顺式调控元件,并...     

circRNA在肿瘤转化医学研究中的前景

环状RNA（circular RNA,circRNA）是近年发现、生物体内广泛存在、逐渐引起重视的非编码RNA。circRNA大多由外显子序列组成,呈闭合环状结构,性质稳定,高度保守性,通过微小RNA“海绵”作用调控靶基因表达,与肿瘤的发生、发展相关。这些特性使circRNA有潜力成为肿瘤新型分子诊断标志物。通过竞争性与肿瘤相关微小RNA的结合,可以开发针对circRNA分子靶点的靶向治疗药。因此,circRNA在肿瘤转化医学研究中意义巨大。     

可选择性多聚腺苷酸化的生物学功能

可选择性多聚腺苷酸化（ alternative polyadenylation , APA）是一种普遍存在于真核生物中的基因调控机制。 APA事件的发生能使一个基因产生多种mRNA转录本,从而增加转录本的复杂度。选择不同的多聚腺苷酸化位点可以使不同的转录本具有不同的编码序列,或具有不同长度的3′端非翻译区（3′untranslated region,3′UTR）。不同长度的3′UTR可引起RNA结合蛋白或微小RNA（ miRNA）的结合位点发生变化,进而影响mRNA的稳定性、定位和翻译效率。近年来,APA的研究涉及APA的形成过程、调控APA的机制以及APA对生物学过程和疾病的影响。该文对APA的上述研究进展进行了综述。     

登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用

目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3.2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点：SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2,在次环引入突变破坏其环状结构（M77G/C）;SLB3,突变仅涉及核苷酸,不破坏该次环二级结构（M77-78AG/GA）。然后在含有海肾荧光素酶（Renilla Luciferase,R·luc）报告基因的复制子（DEN-R·luc2A-RP）基础上,利用重叠PCR构建上述突变体。将突变体（包括相关的阳性和阴性对照复制子）分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光（IFA）、RT-PCR、R.luc报告基因技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译水平进行检测。结果SLB1突变体的翻译水平并未受到显著影响,但其复制水平出现显著下调。SLB2突变体的翻译水平亦未受到显著影响,但其复制水平受到完全抑制;SLB3突变体的复制和翻译水平均受到了完全抑制。结论登革4型病毒5′非编码区SLB元件对基因组RNA复制和翻译具有重要的调控作用。     

登革4型病毒5''非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用

目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3·2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点:SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2,在次环引入突变破坏其环状结构(M77G/C);SLB3,突变仅涉及核苷酸,不破坏该次环二级结构(M77-78AG/GA)。然后在含有海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,R·luc)报告基因的复制子(DEN-R·luc2A-RP)基础上,利用重叠PCR构建上述突变体。将突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R·luc报告基因技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译水平进行检测。结果SLB1突变体的翻译水平并未受到显著影响,但其复制水平出现显著下调。SLB2突变体的翻译水平亦未受到显著影响,但其复制水平受到完全抑制;SLB3突变体的复制和翻译水平均受到了完全抑制。结论登革4型病毒5′非编码区SLB元件对基因组RNA复制和翻译具有重要的调控作用。     

RNA干涉治疗脑胶质瘤的研究进展

RNA干涉(RNAi)是由双链RNA引发序列特异性的转录后基因沉默.RNA干涉(RNAi)技术的出现为胶质瘤基因治疗的研究提供了新的策略.在研究过程中,不断有新的可能用于RNAi治疗脑胶质瘤的靶标基因被发现,其治疗脑胶质瘤作用主要通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、导致肿瘤细胞周期阻滞或增加肿瘤细胞化疗敏感性的机制来实现.     

核因子-κB及其在创伤后炎症反应中的作用

核因子-κB(NF-κB)是调控炎症细胞因子基因表达的主要转录调控因子之一,在创伤后的炎症反应中发挥着重要的作用。机体受到创伤后,NF-κB被激活,从胞浆中进入到细胞核内,结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点,诱导基因转录,合成各种炎症细胞因子,引起局部乃至全身的炎症反应,并且通过反馈环路导致炎症过程的放大和持续。NF-κB抑制剂可阻断NF-κB的激活而具显著的治疗应用价值。