用PCR研究干扰素对宫颈糜烂患者人乳头瘤病毒感染的疗效

对３７例宫颈糜烂患者用干扰素治疗后发现，治疗前ＰＣＲ检测ＨＰＶ阴性的８人治疗显效率和有效率分别为１２．５％和８７．５％，治疗前ＨＰＶ阳性的２９人治疗显效率和有效率则达６９．０％和９３．１％，ＨＰＶ阴转率达８９．７％。该结果表明ＨＰＶ对ＩＦＮ十分敏感，局部ＩＦＮ治疗ＨＰＶ引起的宫颈糜烂，方法简便有效。     

用套式PCR检测孕妇宫颈粘液巨细胞病毒

本文用套式ＰＣＲ检测孕妇宫颈粘液中巨细胞病毒，阳性率为７８．５％（８０／１０２）此套式ＰＣＲ灵敏快速，可应用于临床检测孕妇期巨细胞病毒感染。     

子宫颈刮片中人乳头瘤病毒的基因分型

目的 确定不同型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染的自然历程以及其持续感染在子宫颈癌发展过程中的作用。方法 应用聚合酶链反应检测荷兰１５５名妇女子宫刮颈片中的ＨＰＶ ＤＮＡ，应用线样探针分析法（ＬｉＰＡ）进行，包括ＨＰＶ６，１１，１６，１８，３１，３３，３５，４０，４２，４３，４４，４５，５１，５２，５６和５８的基因分型。结果 １５５例妇女子宫颈片中ＨＰＶ ＤＮＡ检出率为６０％，其中在宫颈细胞学检查正常或     

宫颈癌患者外周血中的人乳头瘤病毒16例E6及E7蛋白…

本研究证明进展期宫颈癌患者１０／３７例和１０／４６例外周血中分别存在有ＨＰＶ１６Ｅ６和Ｅ７蛋白致敏的淋巴细胞，而４０例献血员中分别为１２．５％（５／４０）和１７．５％（７／４０）。４６例中有１７例和２５例分别进行了宫颈癌组织中的ＨＰＶ１６Ｅ６和Ｅ７基因序列检测，Ｅ６蛋白致敏淋巴细胞阳性的６例中检出与未检出Ｅ６序列的各占３例，Ｅ７蛋白致敏淋巴细胞阳性的５例中有３例未检出，有２例检出Ｅ７序列。     

双重引物聚合酶链反应同时检测人乳头瘤病毒及沙…

本研究于国内首次建立了人乳头病毒／沙眼衣原体两对引物ＰＣＲ技术，即ＨＰＶ／ＣＴ双重经物ＰＣＲ。将设计在人乳头瘤病毒（Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６型早期基因Ｅ１保守区的一对共有引物和设计在沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ，ＣＴ）隐蔽质粒区的一对引物同时加入同一反应体系，一次反应可同时检出泌尿生殖道标本中存在的ＨＰＶ和ＣＴ的单独或混合感染，对设计的两对引物做     

孕妇巨细胞病毒感染对胎儿影响的前瞻性研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对沈阳市４５０名孕妇进行巨细胞病毒（ＣＭＶ）筛查，并前瞻性追查到其婴儿１００名ＣＭＶ感染状况。结果孕妇９７．１１％为既往感染，０．８９％为原发感染，１１．１１％为复发感染，仅２％为易感者。４５０例中感染组孕妇有畸形儿３例，流产３例，其胎儿感染率与致畸率明显高于对照组。１００例母婴检查结果：感染组孕妇所生先天性感染儿比对照组多１．４３倍（ＲＲ＝１．４３），感染组有２名低智儿，对照组无。本组早孕原发感染对胎儿危害最大，其宫内传播率为３３．３％。感染组孕妇９例感染儿中２例巨细胞包涵体病，７例无症状。为了早期诊断达到优生目的，对孕妇进行ＣＭＶ筛查是必要的，但筛查过程中发现有活动感染时处理要慎重，最好追查到羊水阳性时考虑终止妊娠。     

聚合酶链反应改良法检测石蜡包埋组织中的巨细胞病毒

聚合酶链反应改良法检测石蜡包埋组织中的巨细胞病毒钱丽清，张忠德，程新建，梁书锋，吴圣楣，顾友梅我们用二甲苯脱蜡粗提ＤＮＡ，简化了ＤＮＡ抽提步骤，用二次扩增代替一次扩增，提高了检测的敏感性，探求到一种既简便又敏感的用于石蜡包埋组织检测的改良聚合酶链反应...     

应用PCR技术对孕妇HCMV感染的前瞻性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１５６ 例孕妇尿中ＨＣＭＶ 进行检测,并追踪观察１１４ 例新生儿脐血中ＨＣＭＶ 垂直传播情况。结果表明：１１ 例孕妇尿ＨＣＭＶＤＮＡ 检测阳性,孕期感染率为７－０５％ ,有异常妊娠史孕妇感染率（１４－７１ ％ ）较正常孕妇（４－９２ ％） 明显升高。９ 例ＨＣＭＶ 阳性孕妇有４ 例观察新生儿脐血ＨＣＭＶＤＮＡ 阳性,占４４％ ,而ＨＣＭＶＤＮＡ阴性孕妇无１ 例新生儿脐血出现阳性结果。我们认为ＰＣＲ方法是检测ＨＣＭＶ宫内感染的可靠而灵敏的指标,对ＨＣＭＶＤＮＡ阳性的孕妇应进一步检查羊水,如羊水ＨＣＭＶＤＮＡ也阳性,应终止妊娠。     

用PCR组建巨细胞病毒抗原决定簇基因的表达克隆

巨细胞病毒感染的血清学诊断方法是目前临床诊断中应用最广泛的方法之一。但由于缺少高效价、高纯度和高特异性的抗原，使各种血清学方法在其敏感性和特异性方面均不能令人满意。文献报道，通过分子生物学得到的或化学合成的单一病毒蛋白或部分成份可作为血清学诊断的良好抗原。本文报道用聚合酶链反应扩增了巨细胞病毒主要磷蛋白ｐＰＵＬ３２的一个强抗原决定簇基因，并同时在扩增产物的两端引入了相应的限制性内切酶识别位点序列，经与表达载体连接后转入相应的细菌中，得到了能够表达此抗原决定簇的克隆，其表达的融合蛋白在免疫转印检测中与人巨细胞病毒阳性血清有强特异性反应。     

应用原位PCR技术检测阴茎癌组织中人乳头瘤病毒DNA

目的：研究人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与阴茎癌的关系。方法：应用原位ＰＣＲ技术对４６例阴茎癌组织中的ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：３３例阴茎癌中检测到了ＨＰＶＤＮＡ（７１．７％），其中２９例ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性（６３．０％），６例ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性（１３．０％），２例ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性，４例ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１６阴性；２例淋巴结转移癌，３例癌旁不典型增生组织和１例癌旁增生组织ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性。结论：阴茎癌与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８感染有密切关系，原位ＰＣＲ技术是一项敏感性高、特异性强的技术。     

不同引物介导的聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒DNA

应用３对人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）引物对１０７例各种宫颈标本进行了聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。结果显示，共同引物（ＧＰ）扩增，有５８．８％（３０／５１）宫颈鳞癌，１００％（１４／１４）尖锐湿疣、１３．６％（３／２２）宫颈炎和１０％（２／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ阳性。型特异性引物ＳＰ１６／ＳＰ１８扩增，有３７．２％（１９／５１）宫颈鳞癌２５．７％（５／１４）尖锐湿疣和５％（１／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ１６型阳性，５．８％（３／５１）宫颈鳞癌为ＨＰＶ１８型阳性。进一步用ＳＰ１６ｂ引物扩增，没有１例ＨＰＶ１６ｂ亚型被发现。说明宜颈磷癌和尖锐湿疣与ＨＰＶ感染有关，结合应用共同引物和型特异性引物可作为ＨＰＶ检测与分型方法。     

尖锐湿疣组织中人乳头状瘤病毒的检测

用免疫组织化学、ＤＮＡ原位杂交和聚合酶链反应技术，检测人生殖器尖锐湿疣和女阴假性湿疣组织中人乳头状瘤病毒衣壳抗原（ＨＰＶ－Ａｇ）和病毒核酸序列（ＨＰＶ－ＤＮＡ），并观察了ＨＰＶ在尖锐湿疣组织中的分布特点与病变组织学改变的关系。结果显示尖锐湿疣中ＨＰＶ－Ａｇ阳性率为７１．４％（３５／４９）；原位杂交ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ阳性率为９６．５％（２８／２９）；ＰＣＲ扩增后尖锐湿疣ＨＰＶ６／１１／１６／１８ＤＮＡ阳性率为１００％（５３／５３）；假性湿疣ＨＰＶ６／１１／１６／１８ＤＮＡ阳性率为２１．４％（３／１４）。观察ＨＰＶ－Ａｇ和ＨＰＶ－ＤＮＡ分布，表明ＨＰＶ增殖性感染和尖锐湿疣特异的病理改变密切相关。     

丙型肝炎病毒基因酶切分型及其在干扰素治疗中的…

为了解广州地区丙型肝炎病毒感染的基因型及其与对干扰素应签效果的关系，应用逆转录－聚合酶链反应对１３３例丙型肝炎病人血清进行ＨＣＶ５’端非编码区基因片段扩增，对１１６例阳性ＰＣＲ产物进行酶切分型。并了国产基因工程干扰素α１对其中５１例慢性丙型肝炎的疗效。     

原位PCR技术检测石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒DNA

应用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测了２５例尸检畸形胎儿石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ及原位杂交（ＩＳＨ）进行了比较。ＩＳＰＣＲ、ＰＣＲ及ＩＳＨ检测阳性率分别为４４％，３６％及２０％。与ＩＳＨ相比较，ＩＳＰＣＲ不仅检出阳性率高，而且信号强度增强。研究结果提示，ＩＳ－ＰＣＲ是诊断ＨＣＭＶ感染的快速、敏感、特异的实用方法。     

婴儿持续性黄疸与巨细胞病毒PCR检测研究

本文应用ＰＣＲ技术对持续性黄疸婴儿进行巨细胞病毒检测，结果６８例患儿血清中巨细胞病毒（ＣＭＶ）３８例阳性，阳性率为５５．９％；尿中ＣＭＶ４５例阳性，阳性率为６６．２％。ＰＣＲ与病毒分离及其它血清学方法相比，既快速又敏感，尿标本用于ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＤＮＡ取材及处理简便，且较血标本检出率为高［１］。     

先天性HCMV感染新生儿尿液中病毒载量与疾病严重度的关系探讨

目的探讨新生儿尿液中人巨细胞病毒（HCMV）病毒载量与先天性感染的关系及与HCMV所致疾病严重程度的关系。方法采集98例经PCR方法确诊的有症状及无症状的先天性HCMV感染新生儿尿液标本,用实时荧光定量PCR法（FQ—PCR）检测尿液中巨细胞病毒载量。结果98例先天性HCMV感染的新生儿中85例在出生后有临床症状（86％）。无症状感染和有症状感染的新生儿尿液中平均HCMV病毒载量分别是1．4×10^5拷贝／ml和3．1×10^6拷贝／ml,P〈0．01,差异有统计学意义。结论先天性HCMV感染的新生儿中无症状感染者尿液中病毒载量显著低于有症状感染者,提示病毒载量与疾病严重程度相关。     

宫颈癌患者外周血中干扰素Epsilon的表达及临床意义

目的 探讨宫颈癌患者外周血中干扰素epsilon的表达及临床意义.方法 选择2013年5月至2015年3月期间30例宫颈癌、50例CIN、150例HPV生殖道感染及50名健康人群为研究对象.检测受试者血清干扰素epsilon水平,并对血清干扰素epsilon表达与官颈癌临床分期、人乳头瘤病毒(HPV)感染、CIN分级进行相关性分析.结果 HPV阳性宫颈癌患者血清INF-ε水平低于HPV阴性宫颈癌患者,差异具有统计学意义(P＜0.05),随着临床分期的增加,血清INF-ε的表达呈降低趋势,且3组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).HPV阳性CIN患者血清INF-ε水平低于HPV阴性CIN患者,差异具有统计学意义(P＜0.05),随着分级的增加,血清INF-ε的表达呈降低趋势,组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).HPV高危组血清INF-ε水平低于低危组及正常人群,3组两两比较,差异有统计学意义(P＜0.05).血清INF-ε水平与宫颈癌临床分期、CIN分级及HPV感染程度呈负相关(P＜0.05).结论 宫颈癌患者血清中干扰素epsilon呈低表达,宫颈癌中干扰素epsilon的表达与宫颈癌的发生、进展及HPV感染密切相关.     

人巨细胞病毒临床分离株糖蛋白B基因型分析

目的 分析巨细胞病毒临床分离株糖蛋白B基因型。方法 以巢式聚合酶链反应(nested-PCR)检测器官移植受者外周血细胞和输卵管妊娠患者生殖道组织中的巨细胞病毒gBn和gBcls基因并测序分型。结果 分离到44例HCMV gBn、gBcls阳性基因，32例有HCMV gBn基因分型结果，其中l型8例(25％)，2型2例(6％)，3型22例(69％)，未见4型，分布以gBn3型为主。HCMV gBcls基因分型结果为26例，其中l型14例(54％)，2型5例(20％)，3型7例(26％)，未见4型，gBcls基因型则散在分布，以1型为多见。21例同时得到gBn、gBcls基因分型结果，其中8例(36％)表现出基因型别不一致。表现为gBclsl-gBn3型。结论 HCMV临床分离株，其糖蛋白基因分别属于gB基因型l-3型，并存在较多的gBcls与gSn基因型别的不对应现象，提示HCMV临床株有较高频率株内基因重组发生，是否由此导致病毒抗原性发生改变，值得进一步研究.