当前流行的乙型流感病毒血凝素蛋白抗原性及其基因特性

通过抗原性分析弄清了近年来连续２次乙型流感病毒在我国人群中造成流感流行，是由于乙型流感病毒株发生抗原性变异所造成。通过毒粒基因分析发现，我国人群中流行的Ｂ／Ｐａｎａｍａ／４５／９０类毒株，其ＨＡ１区氨基酸序列比国际代表性毒株Ｂ／Ｐａｎａｍａ／４５／９０病毒在１６５位点上多一个氨基酸，乙型流感病毒流行株可能具有地区性差异。     

当前流行的乙型流感病毒血凝素蛋白的抗原性及其基因特性

通过抗原性分析弄清了近年来连续２次乙型流感病毒在我国人群中造成流感流行，是由于乙型流感病毒株发生抗原性变异所造成。通过毒粒基因分析发现，我国人群中流行的Ｂ／Ｐａｎａｍａ／４５／９０类毒株，其ＨＡＩ区氨基酸序列比国际代表性毒株Ｂ／Ｐａｎａｍａ／４５／９０病毒在１６５位点上多一个氨基酸（天冬酰胺），乙型流感病毒流行株可能具有地区性差异。     

2001年中国新分离维多利亚系乙型流感病毒的抗原性及基因特性分析

目的：研究2001年中国新分离维多利亚（Victoria)系乙型流感病毒的抗原性及基因特性。方法：鸡胚传代流感病毒，从尿囊液中提取流感病毒的RNA，进行逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR），扩增产物用纯化试剂盒纯化后测序，然后用MegAlign软件进行基因种系发生树分析。结果：B／Sichuan/63/2001和B／Zhejiang/2/2001毒株的抗原性与B／Shandong/7/97毒株间存在有差异，编码血凝素重链区基因已发生了突变并导致了HA1蛋白抗原性表位两个位点（197和199）氨基酸不同于B／Shandong/7/97毒株，基因种系发生树分析同样也证明了它们的HA1基因不同于B／Shandong/7/97病毒。然而，B／Sichuan/63/2001与B／Zhejiang/2/2001毒株间无论抗原性还是HA1基因特性均很相似。结论：2001年我国人群中流行的乙型流感病毒维多利亚毒株系的抗原性已发生进一步的漂移。     

2004-2005年中国B型流感病毒抗原性及基因特性研究

目的 阐明2004-2005年中国流行的B型流感病毒血凝素抗原性及其基因变异情况.方法 对2004-2005年分离的B型毒株先进行单向血凝抑制试验;在此基础上选取不同时间、地点的B型流感毒株进行血凝素基因HA1区核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,然后进行基因进化特性分析.结果 2004-2005年我国人群中同时流行着B型Yamagata系和Victoria系毒株.Yamagata系毒株与B/Shanghai/361/02比较,2004年有3.7%病毒单向血凝抑制效价有4倍以上差异,2005年有4.5%病毒单向血凝抑制效价有4倍以上差异,并且在血凝素基因HA1区发生9个氨基酸替换,在196为增加一个糖基化位点.Victoria系毒株与B/Hong kong/330/01比较,2004年有8.5%病毒单向血凝抑制效价有4倍以上差异,2005年有20.6%病毒单向血凝抑制效价有4倍以上差异,并且在HA1区发生9个氨基酸替换,在197位增加一个糖基化位点.结论 2004-2005年我国人群中流行的B型流感病毒的抗原性与B/Shanghai/361/02、B/Hong kong/330/01相比抗原性已经发生了变化.     

2006年中国流感病毒抗原性及基因特性研究

目的分析2006年中国季节性流感的流行状况，以及病毒的抗原性和基因变异情况。方法对来自流感监测网络的毒株进行单向血凝抑制试验，在此基础上选择不同时间、地点分离的毒株进行血凝素基因的序列测定，然后分析其基因特性。结果2006年我国同时流行A型（H1N1亚型、H3N2亚型）和B型流感病毒。H1N1亚型毒株和B型Victoria系流感病毒为优势毒株。对H1N1亚型毒株的HA1区序列比较发现，2006年分离的毒株与A，湖北洪山／53／2005（H1N1）比较，在192、193、196、198位发生氨基酸替换的毒株．这些位点位于抗原决定簇的B区。H3N2亚型毒株与A，云南，1145／2005（H3N2）比较，在142、144位发生氨基酸替换。我国流行的B型流感毒株无论是Victoria系和Yamagata系毒株的抗原性均没有发生变异，与2005--2006年我国的流行株B／shenzhen／155／2005、B／tianjin／144／2005类似。结论2006年中国流行的H1N1亚型和H3N2亚型流感病毒的抗原性及基因特性已经发生改变；B型流感病毒的抗原性和基因特性没有改变。     

江苏省2011年乙型流感病毒血凝素和神经氨酸酶分子流行特征

目的 分析2011年江苏省乙型流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的分子流行特征.方法 选择13株2011年江苏省不同地区、不同流行时间的乙型流感毒株进行全基因组测序,通过生物信息学方法对HA、NA分子流行特征进行分析.结果 13株乙型流感毒株中,10株属于Victoria系,3株属于Yamagata系.10株Victoria系毒株的NA基因来源于Yamagata系病毒,是基因重配流行株.与疫苗株相比,10株Victoria系毒株和3株Yamagata系毒株的HA蛋白分别在197和196位增加一个糖基化位点.结论 2011年江苏省乙型流感Victoria系和Yamagata系病毒同时流行,其中重配的Victoria系病毒占优势.     

2004-2008年我国流行的A型流感病毒抗原性及HA1基因特性的研究

目的 了解我国2004-2008年A(H1N1、H3N2)型流感病毒流行情况、抗原性和基因特性变异关系,了解疫苗株与我国流行株之间抗原性变化情况.方法 选择2004年以来我国分离的A(H1N1、H3N2)型流感病毒进行抗原性及HA1区基因序列,通过比对HA1蛋白位点变异情况,分析我国流感病毒抗原性及基因特性变化情况.结果 A(H1N1)亚型流感毒株抗原性2004-2007年分离的A(H1N1)亚型流感病毒的抗原性与疫苗株A/New Caledonia/20/1999(H1N1)类似;2008年我国流行的A(H1N1)亚型毒株的抗原性与2008-2009年北半球的流感疫苗株A/Brisben/59/2007(H1N1)类似.2004-2005年分离的A(H3N2)亚型流感病毒的抗原性与疫苗株A/Fujian/411/12002(H3N2)比较发生了变异;2006-2007年我国流行的H3N2毒株与A/Wiscansin/67/2006(H3N2)类似,2008年我国流行的H3N2毒株与疫苗株A/Brisben/10/2006(H3N2)类似.结论 2004-2008年我国流行的A(H1N1、H3N2)亚型流感病毒的抗原性和基因特性发生了改变.     

甲型流感病毒（N1N2）亚型毒株血凝素和神经氨酸酶基 …

目的 研究新分离到的Ｈ１Ｎ２亚型毒株血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）基因的来源。方法 病毒通过鸡胚增殖后提取其ＲＮＡ,通过逆转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增和产物纯化,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定,并用ＭｅｇＡｌｉｇｎ（１．０３版）和Ｅｄｉｔｓｅｑ（３．６９版）软件进行种系发生学分析。结果 新分离到Ｈ１Ｎ２毒株ＨＡ１区氨基酸序列与Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）和Ａ／Ｇｕａｍｇｄｏｎｇ／６／９     

2006年广东省流感病毒流行的分子基础

目的了解广东省2006年流行性感冒（流感）流行情况的分子基础。方法选择广东省流感监测网络实验室分离的11株流感毒株,对血凝素基因进行基因和抗原性的分析。此外,还检测人群抗体水平。结果2006年流行的H1N1亚型病毒血凝素蛋白重链（HA1）区氨基酸序列与A/New Caledonia/20/99（H1N1）相比,同源性为95.7%～96.3%,有2个抗原决定簇的氨基酸发生了替换。Victoria系的HA1区基因与B/HongKong/330/2001相比,同源性为97.2%～97.5%,有6个位于抗原决定簇的氨基酸发生了替换,这种变化和B/Malaysia/2506/2004相一致,这在B型的基因种系发生树也得到证实。同时发现人群针对H1N1亚型和B/Victoria的抗体水平较低。结论2006年广东H1N1亚型和B/Victoria系病毒株发生了一定程度的变异,以及人群保护性抗体水平较低,共同造成其在本地的流行。     

H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析

目的:应用生物信息学方法预测H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性,为研制H1N1亚型流感病毒的表位疫苗奠定基础.方法:依据近年流感病毒流行趋势,从GenBank下载具有代表性的H1N1亚型流感病毒HA蛋白氨基酸序列.进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性.通过Balb/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清与表位肽的结合试验,初步鉴定候选表位抗原性.结果:综合多项预测及空间构像模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA_(73～87)、HA_(125～139)、HA_(188～205).候选表位处于H1N1亚型流感HAI蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H1N1亚型流感病毒HA相应区域具有较好的一致性.而不同候选表位在BMB/e小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能.结论:所筛选的表位具有成为H1N1亚型流感病毒HA Th和B细胞相关抗原表位的可能.此研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H1N1亚型流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础.     

1998～1999年北京地区流感病毒监测及血凝素基因分析

目的　监测北京地区流感病毒流行 ,探讨其流行规律及血凝素抗原基因变异特征。方法　在 1998年冬北京地区流感病毒暴发流行期间 ,于首都儿科研究所附属医院门诊及北京市防疫站采集标本进行病毒分离、鉴定 ,并对其中 3株病毒的血凝素重链区 (HA1)进行了核苷酸和氨基酸序列分析。结果　共分离到流感病毒 88株 ,经血清学鉴定为甲 3型。与参考株A/Nanchang/ 933/ 95的核苷酸同源性为 (97.0～ 97.7) % ,氨基酸同源性为 (94.2～ 95 .4) % ;与参考株A/Sydney/ 0 5 / 97的核苷酸同源性为 (98.0～ 98.9) % ,氨基酸同源性为 (96 .4～ 97.6 ) %。结论　本次北京地区流行的流感病毒为甲 3型。与近年国内甲 3流行参考株A/Nanchang/ 933/ 95相比 ,其HA1区发生了较大变异 ,而与国际上新出现的A/Sydney/ 0 5 / 97株相近 ,提示本次流行的毒株可能与国外有共同的起源。这是国内首次报道此次流行变异株的核苷酸序列。     

H5N1亚型禽流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析

目的:预测H5N1亚型禽流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性.方法:依据近年H5N1亚型禽流感病毒流行趋势,下载得到相关HA蛋白氨基酸序列.进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性.通过BALB/c小鼠和SPF鸡H5N1亚型禽流感病毒阳性血清,初步鉴定候选表位抗原性.结果:综合多项预测及空间构象模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA141～155、HA206～223、HA302～316.候选表位处于H5N1亚型禽流感HA1 蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H5N1亚型禽流感病毒HA相应区域具有较好的一致性.而不同候选表位在BALB/c小鼠和SPF鸡H5N1亚型禽流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能.结论:所筛选的表位具有成为H5N1亚型禽流感病毒HA Th和B细胞相关抗原表位的可能.本研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H5N1亚型禽流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础.     

抗甲型流感病毒血凝素通用抗体的制备及鉴定

目的 建立针对甲型流感病毒血凝素的通用抗体.方法 通过对流感病毒数据库中血凝素基因的分析,寻找保守的序列并合成多肽.将多肽耦联在载体匙孔血监蛋白(KLH)上,多次皮下免疫家兔,制备高效价抗体.结果 序列分析发现血凝素第二亚单位(HA2)上氨基端14个氨基酸极端保守,耦联多肽经4次免疫后效价达到1:80000,以免疫印迹方法证明此通用抗体能与流感病毒H1～H13亚型的血凝素蛋白特异反应.结论 通过寻找保守蛋白并耦联在合适载体上,免疫家兔获得了针对甲型流感病毒血凝素抗原的通用抗体.     

乙型肝炎病毒表面抗原S基因在人5型重组腺病毒中…

从美国Ｗｙｅｔｈ公司引进ｐＡｄ５△Ｅ３载体，将乙型肝炎病毒表面抗原基因（ＨＢＶＳ）ＰｒｅＳ２＋Ｓ，腺病毒晚期表达盒＋ＨＢＶＳ基因插入Ｅ３区，与ＥｃｏＲＩ消化的Ａｄ５ＤＮＡＡ片段共转染细胞获得重组腺病毒，相应命名为ｒＡｄ５Ｓ，ｒＡｄ５ＭＳ，ｒＡｄ５Ｓ２Ｓ。对所获得的重组病毒进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）分析，证实重组病毒中含有目的基因，用ＥＬＩＳＡ分析ｒＡｄ５ＭＳ的表达量，其病变细胞和上清液滴度均为１：     

我国人群中一种新重配的H1N2亚型流感病毒株的发现

１９９６年１月太原铁路卫生防疫站从上感患者中分离到３株流感病毒。经血清学鉴定，它们不同于１９８９和１９９２年所发现的Ｈ１Ｎ２亚型毒株，其ＨＡ的抗原性类似于Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）病毒，而明显不同于当前人群中流行的Ｈ１Ｎ１亚型毒株。病毒粒不同基因节段迁移率比较表明，它们的１～４基因节段迁移率接近于Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）毒株，５～６基因节段迁移率类似于Ａ／武汉／３５９／９５（Ｈ３Ｎ２）病毒，而７～８两节段既不同于Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１），又不同于Ａ／武汉／３５９／９５（Ｈ３Ｎ２）病毒。故可认为它们是一种新重配的Ｈ１Ｎ２亚型毒株。     

北京市2021—2022年流行季首起乙型流感疫情的血凝素基因分析

目的:分析2021—2022年流行季北京市首起乙型流感Victoria系（BV）疫情的病毒血凝素（HA）的基因变异和进化特征以及与流感疫苗株的匹配性。方法:采集北京市朝阳区某小学乙型流感疫情流感样病例的咽拭子标本,提取核酸后利用二代测序技术进行测序分析。应用BioEdit分析HA基因的核苷酸和氨基酸变异位点,采用Meg...