庚型肝炎病毒是肝炎病毒吗？

庚型肝炎病毒是肝炎病毒吗？金冬雁作者单位：１０００５２北京中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室１９９７年８月２６日收稿１０月５日修回非甲－戊型输血后肝炎及重症肝炎的病原学研究历来是肝炎病毒研究的重点和热点之一〔１〕。１９９５至１９...     

丁型肝炎病毒抗原肽的合成及应用

本研究设计并用固相法合成了丁型肝炎病毒与蛋白上的二个抗原肽,肽的纯度达到高压液相鉴定均.两种复肽均具有丁肝病毒抗原活性,在抗HDVELISA检测中有应用价值,混合包被的效果更佳.     

合成肽制备乙型肝炎病毒前S_1抗体

根据乙型肝炎病毒前S_1蛋白中的第21～47氨基酸决定簇人工合成肽P21～47。将P21～47与破伤风类毒素偶联成免疫原,免疫家兔获得了抗体。该抗体不仅可与P 21～47反应,还可与乙型肝炎病毒的PreS_1抗原发生反应。鉴于PreS_1与乙型肝炎病毒吸附于靶细胞表面受体有关,本抗体不仅可用于检测PreS_1抗原,还可研究病毒与受体间相互关系。     

庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价

目的 表达庚型肝炎病毒（HGV）基因且NS5区部分基因重组抗原，分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGV NS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThoiC表达载体上，构建成3个重组表达质粒，分别大肠埃希菌JM109（DE3），用IPTG诱导表达重组蛋白。表达产物经纯化后采用Western blot和间接ELISA方法分析3个重组蛋白的抗原性。结果 经酶切和序列分析鉴定正确，3种表达蛋白均高效表达且相对分子质量与预期大小相符。Western blot分析和间接ELISA试验表明，3种表达蛋白均能与抗－HGV阳性血清发生特异性反应。将应用重组蛋白检测的抗－HGV抗体与混合重组抗原（包括C区合成肽、NS5a合成肽、NS3区基因重组抗原）的检测结果进行了比较，在混合重组抗原阳性的22份血清中，P5a检出率为68％（15／22），P5b检出率为91％（20／22），Pc-5b检出率为73％（16／22）。在70份阴性标本中，3种抗原的检出率分别为P5a:7%(5/70);P5b:1%(1/70);Pc-5b:6%(4/70)。3个重组抗原单独检出阳性的标本，其中有一部分经RT－PCR检测亦为阳性。结论 原核表达的NS5区蛋白所检测的抗－HGV抗体不能完全被其他区段的抗原所覆盖，是免疫诊断HGV感染所必需的抗原表位之一。     

831名健康青年庚型肝炎病毒和人免疫缺陷病毒感染的调查

目的了解我国健康青年中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）和人免疫缺陷病毒的感染情况。方法采用酶联免疫法（ＥＩＡ）检测６省８３１名健康青年血清中的ＨＧＶ和ＨＩＶ抗体，对抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性的血清再用逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果发现抗－ＨＣＶＩｇＧ阳性率为２５３％（２１／８３１），２１例阳性者中ＨＧＶＲＮＡ阳性８例，两者符合率为３８１％；抗－ＨＩＶ均阴性。结论我国健康青年人群中确实存在ＨＧＶ感染。     

乙型肝炎病毒前S2抗原／抗体检测方法的改进及其应用

通过改进乙型肝炎病毒表面前Ｓ２抗原（Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ）、前Ｓ２抗体（Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ）的检测方法,对１２８份正常人标本Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ进行测定,确定了Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ抑制率的阳性界值。用改进后的方法检测不同人群中的Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ及Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ,发现在慢性乙型肝炎患者中Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ比ＨＢｅＡｇ／Ａｂ系统更能反映机体的ＨＢＶＤＮＡ复制水平（Ｐ＜０．０１）,而Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ的检出则与急性乙型肝炎的预后密切相关,同时,Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｂ也可作为评价含有Ｐｒｅ－Ｓ２Ａｇ的乙肝疫苗主动免疫效果的指标。     

海南省部分人群血清中庚型肝炎病毒抗体的调查

海南省部分人群血清中庚型肝炎病毒抗体的调查冯清贵何启军卢孝东阮国涛游明李国栋李玉英我国是病毒性肝炎高发区之一，迄今已发现了甲、乙、丙、丁和戊型肝炎病毒以外的新型肝炎病毒。随着新的分子生物学技术和方法的建立和应用，对新的肝炎病毒的发现和确证提供了科学依...     

庚型肝炎病毒(HGV)E2区cDNA的克隆与表达

目的　克隆ＨＧＶ Ｅ２ 基因并在原核细胞系统中表达ＨＧＶ Ｅ２ 蛋白。方法　从ＨＧＶＲＮＡ 阳性血浆中抽提病毒ＲＮＡ,利用半巢式ＲＴＰＣＲ 法扩增ＨＧＶ Ｅ２ 基因片段并进行序列分析。然后将该片段克隆到ｐＧＥＸ５ｘ１ 表达载体上,进行诱导表达。表达产物用抗ＨＧＶ 阳性血浆作Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 活性鉴定。结果　获得ＨＧＶ Ｅ２ Ｎ 端长度为７７９ 个核苷酸的基因片段。该片段与美国株ＨＧＶ（Ｕ４４４０２） 、西非株ＧＢＶＣ（ Ｕ３６３８０） 、中国株ＨＧＶ（ Ｕ７５３５６） 的核苷酸序列同源性分别为８４ ％ 、８５ ％ 、９１ ％ ,推测的氨基酸序列同源性分别为８８ ％ 、９３ ％ 、９４ ％ 。表达产物为相对分子质量约５０ ×１０３的ＧＳＴＥ２ 融合蛋白,在细胞内形成包涵体。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 反应中在约５０ ×１０３ 处有显色条带。结论本研究成功地在原核细胞系统中表达了具有抗原性的ＨＧＶ Ｅ２ 蛋白,为进一步研究ＨＧＶ Ｅ２ 蛋白及Ｅ２ 抗体的生物学功能打下了基础。     

用合成肽抗原检测Epstein—Barr病毒抗体

用合成肽抗原检测Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒抗体刘海鹰周玲邓洪周维雅Ｊ．Ｍｉｄｄｅｌｄｏｒｐ曾毅Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）进入宿主细胞后能产生多种由ＥＢＶ决定的抗原，包括早期抗原（ＥＡ），壳抗原（ＶＣＡ）和核抗原（ＥＢＮＡ）等。这些由ＥＢＶ基...     

一种同时检测丙型与庚型肝炎病毒的逆转录-巢式聚合酶链反应方法

目的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）同属黄病毒科，且传播途径相似，重叠感染率高，本研究旨在建立一种同时检测ＨＧＶ与ＨＣＶ感染的方法。方法根据ＨＣＶ与ＨＧＶ的基因序列分别选取５’－ＵＴＲ（ＨＣＶ）与ＮＳ３（ＨＧＶ）的两套引物，在同一管内进行逆转录－巢式聚合酶链反应，并初步应用于１５３例标本。结果该方法能同时检出ＨＧＶ与ＨＣＶ感染，扩增片段大小与设计相符。结论该方法简便特异，适用于临床检测     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法化学发光检测的应用

目的 探讨丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法化学发光检测的应用.方法 利用重组融合HCV抗原分别标记生物素及吖啶酯,建立起双抗原夹心法化学发光检测试剂盒,与间接法同时检测了866例阴性标本,440例阳性标本,3套BBI阳转血清盘.结果 双抗原夹心法与间接法灵敏度分别为100％、100％,特异性分别为99.9％、98.7％,特异性差别1.2％(95％可信区间:0.5％～2.1％),BBI阳转血清相对敏感性系数为-1.33.结论 双抗原夹心法特异性及早期感染检测能力优于间接法,将会成为丙型肝炎病毒抗体检测的主要方法.     

中国人庚型肝炎病毒E1区5‘端基因相关多肽的抗原性初步研究

用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应从１例中国庚型肝炎患者血清中扩增出仿前区部分基因及Ｅ１区５‘端共３０９ｂｐ基因片段，对其中包括Ｅ１区９６ｂｐ在内的１２０ｂｐ核苷酸进行了序列分析，发现此区段基因与录入号为Ｕ４４４０２Ｇｅｎｅｂａｎｋ报道的美国发现的ＨＧＶ相关序列具有９３％的同源性。     

检测抗丙型肝炎病毒总抗体的双抗原夹心法的建立

以丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构区和非结构区基因工程表达抗原及人工合成多肽包被酶标板，用辣根过氧化物酶标记抗原，建立了检测血清中抗－ＨＣＶ总抗体的双抗原夹心法。与普遍采用的检测抗－ＨＣＶＩｇＧ的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）比较，其灵敏度（１∶１２８）稍高于间接法（１∶６４），特异性相同，均为１００％。该法可同时检测抗－ＨＣＶ各类抗体，使检出率提高１０％。     

甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用

目的 研究甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用，以期代替现有试剂中的多克隆抗体，得到灵敏度高、特异性好、重复性和准确性好的甲肝抗原检测试剂。方法 采用双抗体夹心法将甲肝多抗包被96孔酶标板后，加入甲肝抗原，分别用酶标单抗和酶标多抗两种方法进行检测甲肝抗原．对单抗试剂的真实性和可靠性进行评价。结果 单抗试剂的灵敏度为100％、特异度为100％，变异系数均小于15％。结论 单抗试剂可用于甲肝抗原的定性和定量检测，结果准确可靠。     

利用gp41蛋白的合成肽抗原检测HIV—1抗体

采用固相多肽合成技术对人免疫缺损病毒-1型(HIV-1)gp41蛋白的一段代表优势抗原表位的22肽进行了化学合成,经反相高效液相层析(HPLC)和多肽序列测定表明,合成肽成品均质性良好,其氨基酸序列与设计相符。利用该合成肽作为包被抗原,以间接 ELISA 法检测 HIV-1血清抗体,其特异性、灵敏性和重复性均达到与国外生产的 gp41合成肽抗原相同的水平.     

PT—PCR检测庚型肝炎病毒和GB病毒感染

ＨＧＶ和ＧＢＶ是近二年发现的新肝炎病毒，引起非Ａ￣Ｅ肝炎。目前实验室检测ＨＧＶ和ＧＢＶ感染主要靠ＲＴ－ＰＣＲ。本文就ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＧＶ和ＧＢＶ ＲＮＡ的临床标准处理、引物、扩增条件、产物检测和目前临床应用研究予以介绍。     

庚型肝炎病毒IgM抗体检测方法的建立及其临床意义

目的建立一种早期、快速诊断庚型肝炎的血清学检测方法。方法以辣根过氧化物酶标记庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）多肽ＮＳ３,ＮＳ５区段抗原,建立了捕获酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,用于检测血清中ＨＧＶＩｇＭ抗体。结果本法不受特异性ＩｇＧ的竞争和类风湿因子的干扰;与其它致肝炎的病毒（ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＥＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶ）无交叉反应。检测４６例非甲、乙、丙、戊型肝炎患者血清,抗－ＨＧＶＩｇＭ阳性１４例,阳性率３０．４３％,其中,６例同时为ＨＧＶＲＮＡ阳性,阳性符合率为４２．８６％（６／１４）,检测１２例庚型肝炎病人双份血清,其中,急性期血ＨＧＶＩｇＭ抗体均为阳性。结论该法检测ＨＧＶＩｇＭ抗体特异性强,敏感性高,且简便快速,适用于临床对庚型肝炎新近感染的早期诊断,有推广应用价值。     

北京地区部分人群血清中抗庚型肝炎病毒抗体的检测

以庚型肝炎病毒合成肽为抗原，建立酶联免疫吸附试验，检测北京地区部分自然人群，健康献血员及乙型肝炎病毒感染指标阳性的住院和门诊部虱血清中的抗－ＨＧＶ，其阳性率分别是１．５９％，５．３０％和８．０６％。证实了我国存在ＨＧＶ感染，并揭示确有ＨＧＶ与ＨＢＶ同时或重叠感染。