壬基酚对子宫肌瘤作用的实验研究

目的:研究环境雌激素(environmental estrogens,EEs)中壬基酚(NP)对体外培养子宫肌瘤细胞的作用效应及可能机制。方法:对子宫肌瘤细胞进行原代、传代培养及细胞鉴定。CCK-8法分析不同浓度NP在24小时、48小时、72小时对子宫肌瘤细胞活性的作用效应。采用荧光定量RT-PCR法检测各干预组雌激素受体α(ERα)mRNA、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。采用Western Blot法检测ERα、IGF-1、VEGF蛋白的表达情况。结果:不同浓度的NP作用于子宫肌瘤细胞24小时、48小时、72小时,结果显示NP对子宫肌瘤细胞有促增殖作用,这种作用具有时间和浓度的依赖性。不同浓度的NP促进ERα、IGF-1、VEGF相关基因和蛋白的表达,该作用随着NP作用浓度的增加而增强,差异有统计学意义(P0.05)。结论:NP可促进子宫肌瘤细胞增殖,其作用机制可能与通过ERα介导的IGF-1、VEGF等促肿瘤生长因子的表达增加有关。     

紫杉醇脂质体对宫颈癌HeLa细胞作用的实验研究

目的探讨注射用紫杉醇脂质体对人宫颈癌细胞系的杀伤作用。方法以0．01μmol／L、0．1μmol／L、1μmol／L、10μmol／L和100μmol／L浓度梯度的含注射用紫杉醇脂质体培养基作用于人宫颈癌细胞系HeLa细胞，并设对照（普通培养基，不含药物），通过MTT、显微镜观察细胞形态、流式细胞分析技术检测该药对细胞生长的影响；以Western blot分析细胞外信号调节激酶（ERK）、磷酸化细胞外信号调节激酶（P—ERK）蛋白表达情况。结果经上述不同浓度紫杉醇脂质体作用48h后，细胞存活率下降；镜下观察显示部分细胞皱缩变形，崩解坏死，细胞脱壁悬浮；流式细胞结果显示细胞凋亡率逐渐增加，分别为（14．16±4．78）％、（43．68±16．21）％、（63．70±3．74）％、（63．51±2．29）％、（72．84±10．77）％和（74．69±7．52）％；细胞周期各时相中，S期比例减少；Western blot显示HeLa细胞的P—ERK蛋白表达逐渐减弱（0．7645±0．0198、0．7592±0．0072、0．2655±0．0356、0．3232±0．0229、0．1467±0．0091）。结论紫杉醇脂体可抑制宫颈癌HeLa细胞的生长，对HeLa细胞的作用可能通过抑制MAPK信号转导通路达到抑制肿瘤的目的。     

表皮生长因子对子宫肌瘤细胞MAPK信号通路的活化作用

目的：研究表皮生长因子（EGF）对子宫肌细胞（HM-SMCs）和子宫肌瘤细胞（HL．SMCs）中有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）信号转导通路的活化作用。方法：收集30例子宫肌瘤患者的子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织进行原代细胞培养。采用激光扫描细胞法（LSC法）检测BrdU渗入率;Western blot法检测p44／42MAPK及其磷酸化水平和p44／42MAPK特异性底物ELK-1的表达,MAPK特异性抑制剂PD98059和EGFR受体抑制剂AG1478对p44／42MAPK表达的抑制作用,以及p44／42MAPK的时间依赖性表达以及细胞周期相关蛋白p27的表达。结果：EGF诱导p-p44／42MAPK和ELK-1水平显著上调,HM．SMCs中的表达量显著高于HL-SMCs。AG1478和PD98059可抑制EGF对MAPK的诱导作用。HM-SMCs中p44／42MAPK对EGF的刺激呈持续平稳的激活,伴随着p27的显著上调;HL．SMCs中则呈快速短暂的激活,伴随着p27低水平上调。结论：EGF通过活化MAPK信号通路促进细胞增殖可能是子宫肌瘤发病的-个重要的机制,为肌瘤的非手术治疗提供了可能。     

山奈酚对子宫肌瘤体外抑制作用的实验研究

目的:研究山奈酚对离体人子宫肌瘤细胞增殖的影响,为其用于子宫肌瘤的临床药物治疗进行前期的摸索。方法:进行人子宫肌瘤细胞原代、传代培养及鉴定。取用第3~5代子宫肌瘤细胞,3个浓度的山奈酚(12μmol/L、24μmol/L、48μmol/L)干预24小时、48小时、72小时,并设溶剂对照组(无水乙醇,体积比为0.1%)。采用CKK-8法检测子宫肌瘤细胞的增殖变化;并通过荧光定量RT-PCR法和Western-blot法检测雌激素受体(ER)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA和蛋白表达。结果:不同时间和浓度组间的A450值比较,差有统计学意义(P0.05),山奈酚对子宫肌瘤有一定抑制增殖作用。山奈酚可抑制ER mRNA、IGF-1 mRNA表达,且该作用随山奈酚浓度增加而有所增强(P0.05)。山奈酚可抑制VEGF mRNA,该作用与山奈酚浓度无明显关系(P0.05)。山奈酚可抑制ER、VEGF、IGF-1蛋白的表达,且该作用随山奈酚浓度增加而有所增强(P0.05)。结论:山奈酚能抑制离体人子宫肌瘤细胞增殖,下调ER、IGF-1和VEGF mRNA和蛋白的表达。     

MTT比色法测定药物对HeLa细胞作用的实验研究

目的 :观察顺铂、5-FU、甲氨蝶呤在体外对人宫颈肿瘤细胞的作用。方法 :用MTT测定法观察以上 3种化疗药物单用及合用对HeLa细胞的影响 ,用流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。结果 :顺铂和 5-FU单独应用及合用时 ,随着药物剂量增加抑制效应增加。结论 :顺铂和 5-FU能有效抑制HeLa细胞的生长 ,甲氨蝶呤在本实验条件下无此作用。     

促性腺激素释放激素激动剂对体外培养子宫肌瘤细胞的作用

目的 :探讨促性腺激素释放激素激动剂 (GnRH -a)对体外培养子宫肌瘤细胞的作用。方法 :选取绝经前妇女子宫切除标本 35例 ,原代单层培养子宫肌瘤细胞 ,分别在 10 %小牛血清及DMEM培养液中加入GnRH -a ,每 2 4h显微镜下观察细胞形态的改变 ,连续观察 4天 ,并分别计细胞数 ,用半定量反转录PCR法于GnRH -a作用 0 ,6 ,12 ,2 4 ,4 8h后 ,分别检测肌瘤细胞中GnRH受体mRNA的量。结果 :GnRH -a在含 10 %小牛血清培养条件下 ,可抑制实验组出现细胞球状凝集构造 (P <0 .0 5 ) ,减少细胞数 (P <0 .0 1) ,而对GnRH受体mRNA的表达无明显影响。结论 :GnRH -a能通过直接作用抑制子宫肌瘤细胞的生长     

子宫肌瘤患者综合治疗中Vit A的作用

Tykal等提出肌瘤组织与无改变的子宫肌层相比,雌三醇量是增加的。所以寻求一种能降低子宫肌层对雌激素已升高的敏感性,促使甾体性激素代谢正常化因而对子宫肌瘤有治疗作用的药物是十分正确的。Herschberg等在实验和临床观察的基础上提出乙种胡罗卜素有降低雌激素对子宫和乳腺的作用。     

激活素A对早孕胎盘细胞滋养细胞凋亡的作用

激活素A是转换生长因子13家族中的一员。研究表明，激活素A在细胞增殖、凋亡以及癌变过程中都有重要的调节作用；其中激活素A对具有增殖功能的细胞可诱导其发生凋亡。人的细胞滋养细胞是具有增殖能力的正常细胞，细胞膜上有激活素A受体表达，在妊娠期与激活素A结合，继而影响细胞滋养细胞增殖与凋亡。本研究旨在探讨激活素A对细胞滋养细胞凋亡的调节作用，报道如下。     

双酚A对多囊卵巢综合征发病机制的影响

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是以高雄激素表型为典型特征的育龄期女性常见的内分泌疾病,其发病机制尚不明确,现多认为雄激素对其发病具有重要影响。双酚A(bisphenol A,BPA)作为环境内分泌干扰物,能够上调相关雄激素合成酶的表达,通过过量雄激素暴露来诱导PCOS的发生。研究表明BPA暴露能够抑制芳香化酶的活性,阻止雄激素与受体的结合,从而诱导高雄激素血症。BPA还可通过氧化应激、雌激素相关途径、下丘脑-垂体-卵巢轴以及对肥胖和胰岛素抵抗的调节等途径调控PCOS患者的卵巢功能。综述BPA通过调控高雄激素诱发PCOS的神经内分泌机制及相关信号通路,以期阐述BPA具体的生物学功能,为后续研究提供参考。     

环孢菌素A增强顺铂抗癌作用的实验研究

目的：观察环孢菌素Ａ对顺铂抗癌作用的增强效应。方法：采用人卵巢腺癌ＣＯＣ１细胞及其耐药亚株ＣＯＣ１／顺铂（ＤＤＰ）细胞，在裸鼠体内外观察免疫抑制剂环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）对ＤＤＰ抗癌作用的增效作用。结果：１～５μｇ／ｍｌ的ＣｓＡ与ＤＤＰ联合应用，可增强对ＣＯＣ１细胞的杀伤作用，表明有协同效应，２ｍｇ／Ｌ的ＣｓＡ可基本克服ＣＯＣ１／ＤＤＰ中等水平的耐药性，其增效作用呈浓度依赖关系。氚－胸腺嘧啶核苷掺入实验表明，ＤＤＰ佐以ＣｓＡ可增强对卵巢癌细胞ＤＮＡ合成的抑制，降低瘤细胞增殖速度。裸鼠体内抑癌实验也证实了体外实验的结果。结论：ＣｓＡ有可能作为ＤＤＰ的增效剂，用于卵巢癌的治疗。     

子宫肌瘤细胞凋亡及增殖状况研究

目的 探讨细胞凋亡与凋亡调控基因在子宫肌瘤的发生、发展中的作用。方法 2000～2001年应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(terminal deoxynucleotity transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)技术和免疫组织化学染色观察子宫肌瘤和正常子宫肌层组织中细胞凋亡和凋亡调控基因增殖细胞核抗原(PCNA的表达。结果 子宫肌瘤组织中细胞凋亡指数显著高于正常子宫肌层组织(P<0.01)。子宫肌瘤组织中PCNA蛋白阳性率高于正常子宫肌层组织(P<0.01)。凋亡细胞多分布在PCNA蛋白阴性区,阳性区仅有少量分布,且PCNA阴性区细胞凋亡指数高于阳性区。结论 细胞凋亡失控在子宫肌瘤生成过程中起重要作用,PCNA蛋白表达能比较准确地反映子宫平滑肌瘤的细胞增殖信息,子宫肌瘤的发生与增殖和(或)凋亡失衡密切相关。     

子宫肌瘤动物模型构建方法的实验研究概况

子宫肌瘤是女性生殖器官最常见的良性肿瘤,其病因及发病机制尚不明确。动物实验是研究该病发病机制及临床前药物筛选的重要方法之一。国外子宫肌瘤动物模型有外源性性激素诱导模型、自发性模型、转基因小鼠模型和异种移植模型。国内多采用外源性性激素诱导模型,但在造模中给药的剂量、频率、时间不一致。本论文对国内外的各种造模方法进行了综述。     

子宫肌瘤与孕激素及细胞凋亡的相关研究

目的　通过检测孕激素受体 (PR)、增殖细胞核抗原 (PCNA)、凋亡抑制基因Bcl- 2蛋白在子宫肌瘤组织中的表达 ,探讨子宫肌瘤的发生与孕激素及细胞凋亡的关系。方法　应用免疫组化SP法检测 30例子宫肌瘤及其邻近肌层组织中PR、PCNA、Bcl - 2的表达。结果　PR、PCNA、Bcl- 2在子宫肌瘤细胞中的表达明显高于其邻近肌层 (P <0 0 5 ,P <0 0 5 ,P <0 0 0 1)。PR的表达与PCNA、Bcl- 2的表达均呈正相关。结论　子宫肌瘤是卵巢性激素依赖性肿瘤。孕激素是促进子宫肌瘤生长的重要因素 ,子宫肌瘤与细胞凋亡有关     

大型子宫肌瘤对膀胱功能和症状的作用

大型盆腔子宫肌瘤常引起尿频、尿急和尿失禁等膀胱压力增高的症状。切除肌瘤可以解除患者泌尿系症状;但是手术也切除了其神经支配可使泌尿系症状加重。所以泌尿系统症状是子宫切除术最不适宜的指征。本文旨在主观和客观地估计用非手术方式缩小大型子宫肌瘤后对膀胱的影响。作者对14例子宫体积大于17孕周且有下泌尿道症状的患者选用促性腺激素释放激素(GnRH)类似物去减小子宫体积。平均年龄44.2岁(39～50),平均产次2.6(1～4)。按照超声学椭圆肿瘤公式计算子宫体积。在术前2月和1月注射黄体生成素释放激素(LHRH)微胶囊(3.2mg)并记录病史     

环境剂量的双酚A暴露对雄性小鼠生殖功能的影响

目的:研究环境剂量的双酚A(BPA)暴露对雄性小鼠生殖功能的影响及可能的分子机制。方法:84只3周龄C57BL/6J雄性小鼠按体质量随机分为3组,分别为5μg/kg BPA组、50μg/kg BPA组、乙醇溶剂对照组,每组28只。每日灌胃给药1次,连续给药5周后,检测生殖器官脏器指数、附睾尾精子数量、睾丸组织学形态;同期与正常雌性小鼠配种检测雄鼠的生育力。应用MBDq PCR方法检测睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平变化。结果:1 BPA暴露组与对照组间的生殖系统脏器指数无统计学差异(P0.05)。2 50μg/kg BPA暴露组附睾尾精子数量下降20.1%;睾丸曲细精管管腔中有生精细胞脱落等病理现象。3 BPA暴露组与对照组间的生育率无统计学差异(P0.05),但50μg/kg BPA暴露组每胎平均产仔数下降。4 BPA组睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降(P0.01)。结论:环境剂量的BPA暴露对雄鼠生殖器官脏器指数没有影响,50μg/kg BPA能引起小鼠生精功能下降,睾丸Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降。     

白介素-28 A增加顺铂对卵巢癌细胞毒性的作用及机制研究

目的:探讨白介素-28A(IL-28A)增强顺铂对卵巢癌的细胞毒性作用及其机制.方法:实时荧光定量PCR法检测卵巢癌组织和细胞及正常卵巢上皮组织和细胞中IL-28A水平.IL-28A(100ng/ml)预处理C13K细胞24h,CCK-8和流式细胞术分别检测顺铂对C13K细胞半数抑制浓度(IC50)、细胞存活率和细胞凋...     

双酚A对卵巢卵泡发育和雌性生殖系干细胞的影响

目的探讨双酚A(BPA)对小鼠卵巢卵泡发育及雌性生殖干细胞(FGSC)的影响及其机制。方法雌性小鼠腹腔注射不同BPA(12.5、25和50mg/kg/d)浓度,同时对小鼠FGSC进行体外培养,进行细胞增殖、凋亡及蛋白质组学分析。结果 BPA处理后中剂量组、高剂量组中原始卵泡、初级卵泡、窦卵泡和闭锁卵泡数低于对照组(P0.05)。50和100μM BPA处理组与对照组相比,FGSC数量无统计学差异(P0.05)。150μM BPA组在48和72 h时FGSC的数量明显减少(P0.05);150μM BPA处理组的凋亡率高于其他各组(P0.05)。BPA-处理卵巢中(SLTM)蛋白表达低对照组(P0.05)。结论 BPA对卵巢卵泡发育和雌性生殖系干细胞具有抑制作用。     

子宫肌瘤与细胞凋亡关系初探

目的 探讨子宫平滑肌瘤的发生与细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组化技术监测子宫肌瘤患者的肌瘤核组织（实验组）及其周围正常肌组织（对照组）中,ｐ５３基因蛋白产物、Ｆａｓ基因蛋白产物、Ｆａｓ配体（Ｆａｓ－Ｌ）基因蛋白产物及Ｂｃｌ－２基因蛋白产物的表达。结果 实验组各项阳性表达：ｐ５３蛋白为３６．６７％,Ｆａｓ－Ｌ蛋白为５６．６７％,Ｂｃｌ－２蛋白为７７．４２％;对照组各项阳性表达;ｐ５３蛋白为２０．００     

三苯氧胺对子宫肌瘤治疗作用的评价

近年来 ,子宫肌瘤的药物治疗有了较大进展 ,但对绝经前患者来说 ,任何药物治疗仅是暂时抑制子宫肌瘤生长 ,也就是说 ,用药可使子宫肌瘤缩小 ,但停药后随体内激素水平的恢复 ,子宫肌瘤再复生长。近年来用于治疗子宫肌瘤的药物较多 ,本文就三苯氧胺 (ｔａｍｏｘｉｆｅｎ)在子宫肌瘤治疗中的有关问题进行讨论。1　子宫肌瘤与甾体激素的关系　　子宫肌瘤是一种激素依赖性肿瘤 ,它的发生、发展与雌、孕激素有关。临床上青春期前少女罕见子宫肌瘤 ,绝经后妇女随卵巢功能衰退 ,肌瘤渐渐缩小 ,甚至消失 ;子宫肌瘤患者常合并子宫内膜增生过长、子宫内…     

青春期雄性小鼠双酚A暴露对生殖功能及子代性别比的影响

目的:研究双酚A(BPA)暴露对青春期雄性小鼠成年后生殖功能及对子代的影响。方法:21日龄C57BL/6J雄性小鼠每日腹腔注射BPA 50 mg/kg连续7 d,35 d后检测成年后雄鼠附睾尾精子数量、精子畸形率、睾丸组织学变化;与正常雌性小鼠配种,观测生育力指标以及仔鼠的出生情况。结果:BPA暴露能引起小鼠附睾尾精子数量下降20.6%(P0.01);精子畸形率增加9.65%(P0.05);睾丸组织结构异常;BPA暴露对雄性小鼠成年后的生育力没有明显影响;但能引起子代雄∶雌出生性别比升高。结论:青春期雄鼠BPA暴露能引起成年雄鼠生精功能下降,仔小鼠雄性比例增加。