NIRS监测新生儿缺氧缺血性脑病脑氧合代谢和脑血流量的临床研究

目的 观察缺氧缺血性脑病(HIE)的脑氧合代谢和脑血流量变化,早期判定不同程度缺氧缺血性脑病的脑功能状态.方法 采用近红外光谱仪监测24例HIE患儿音乐刺激(MS)前后脑前额皮质区域氧合血红蛋白(HbO2),还原血红蛋白(Hb),总血红蛋白(tHb)的变化,并与对照组(30例 )作比较.结果 对照组HbO2、Hb、tHb明显上升.HIE组:轻度组HbO 2、tHb变化差异无显著性(P＞0.05),Hb明显增加[MS前:(-0.10±0.24)μmol/L, MS后(0.50±0.33)μmol/L,P＜0.05];中度组HbO2、tHb明显减少[MS前:(0.0 7±0.44)μmol/L,( 0.48±0.43)μmol/L,MS后:(-1.72±0.59)μmol/L,(-0.98±0.55)μmol/L,P＜0.05],Hb明显增加[MS前:(0.41±0.28)μmol/L,MS后:(0.74 ±0.36 μmol/L,P＜0.05],重度组三项均降低[MS前:(0.35±0.80)μmol/L,(0.22 ±0.47)μmol/L,(0.57±0.98)μmol/L,MS后:(-3.24±1.37)μmol/L,(0.15±0.51)μm ol/L,(-3.09±1.39)μmol/L,P＜0.05].将HIE的病情程度与MS前后tHb的变化差值进行直线相关分析,结果二者呈显著负相关关系(r=-0.64, P＜0.001).结论 NI RS可以早期监测HIE的脑功能,判定不同程度缺氧缺血性脑病的脑功能状态.     

血叶酸、同型半胱氨酸及尿酸水平与妊娠期高血压疾病发病的相关性分析

目的探讨血清叶酸、同型半胱氨酸(Hcy)和尿酸(UA)水平与妊娠期高血压疾病的关系。方法选择重度子痫前期患者135例及孕周匹配的正常妊娠孕妇135例作为对照组,采用化学发光法测定血清叶酸水平,全自动生化仪测定同型半胱氨酸、尿酸水平。结果妊娠28~41周~(+6),重度子痫前期组血清叶酸、同型半胱氨酸及尿酸水平分别为(8.66±5.63)μg/L、(10.85±5.52)μmol/L和(401.42±88.84)μmol/L,均高于对照组(11.33±6.76)μg/L、(9.22±4.19)μmol/L和(309.56±90.10)μmol/L(P0.05)。其中妊娠28~33周~(+6)重度子痫前期患者血清同型半胱氨酸、尿酸水平均高于对照组(P0.05);妊娠34~36周~(+6)重度子痫前期组血清叶酸水平低于对照组;妊娠37~41周~(+6)重度子痫前期组与对照组比较,仅血清尿酸水平高于对照组(P0.05)。结论血清叶酸、同型半胱氨酸和尿酸水平与重度子痫前期密切相关。     

黄芪治疗绝经后骨质疏松的抗氧化机制研究

目的:研究黄芪改善绝经后骨质疏松的具体机制。方法:选用32只3月龄SD雌性大鼠,随机分为假手术组、单纯去势组、黄芪治疗组和抗氧化剂组。后3组卵巢切除术后4周分别给予相应制剂灌胃,12周处死动物取材,检测血清和骨组织氧化应激水平[丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)]、股骨骨密度和骨代谢指标[碱性磷酸酶(ALP)、血钙(Ca)、血磷(P)和骨钙素(OC)]。结果:单纯去势组的血清和骨组织中氧化应激水平比假手术组升高(P0.01),而股骨骨密度降低(P0.01)。与单纯去势组比较,黄芪治疗组和抗氧化剂组血清和骨组织中氧化应激水平降低(P0.01),同时股骨骨密度升高(P0.05),ALP和OC降低(P0.05)。结论:黄芪水提液能够通过抗氧化效应有效改善去卵巢大鼠的骨量丢失和骨代谢。     

促性腺激素释放激素类似物对化疗大鼠卵巢功能损害的干预作用

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)和拮抗剂(GnRH-ant)对环磷酰胺(CTX)诱导的大鼠卵巢功能损害的干预作用.方法 将72只雌性SD大鼠随机分为6组,即对照组[腹腔注射生理盐水(NS)0.1 ml/d×11 d]、CTX组(第1天腹腔注射CTX 50 mg/kg,第2天起腹腔注射CTX 5 mg/d×10 d)、GnRH-a+NS组[GnRH-a 0.375 mg 1次深部肌内注射(估计释放量为12.5μg/d,持续28～30 d),于用药第14天左右(连续5 d观察阴道涂片均处于动情间期)开始注射NS,用药方法同对照组]、GnRH-a+CTX组(同GnRH-a+NS组注射GnRH-a后,于用药第14天左右的动情间期开始注射CTX,用药方法同CTX组)、GnRH-ant+NS组[GnRH-ant 0.3 mg皮下注射,以后每隔2天注射1次,共4次(估计释放量为100μg/d,共12 d),于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射NS,用药方法同对照组]及GnRH-ant+CTX组(同GnRH-ant+NS组注射GnRH-ant后,于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射CTX,用药方法同CTX组];每组12只.用药前后采用酶联免疫吸附法动态检测各组大鼠卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇水平的变化,并于结束用药后的第1周内和第4～5周内(动情间期),各组分别处死6只大鼠,观察卵泡数量、卵巢重量的变化.结果 (1)血清内分泌激素水平:用药前后,对照组的血清LH、FSH、雌二醇水平无明显变化,CTX组的血清内分泌激素水平呈上升趋势.用药中,血清LH、FSH水平GnRH-a+CTX组为(42±8)、(124±45)μg/L,GnRH-a+NS组为(47±7)、(136±32)μg/L;GnRH-ant+CTX组为(31±5)、(178±54)μg/L,GnRH-ant+NS组为(36±7)、(198±27)μg/L;对照组为(118±16)、(350±35)μg/L;CTX组为(113±15)、(289±42)μg/L;分别比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).血清雌二醇水平GnRH-ant+CTX组为(3.98±0.74)ng/L,GnRH-ant+NS组为(3.58±0.43)ng/L,GnRH-a+CTX组为(1.46±0.22)ng/L,GnRH-a+NS组为(0.98±0.18)ng/L分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).停药后,GnRH-a+CTX组、GnRH-a+NS组及GnRH-ant+NS组的血清LH、FSH、雌二醇水平逐渐接近对照组水平.但停药第4～5周时,GnRH-ant+CTX组LH、FSH水平[(156±12)、(520±44)μg/L]与CTX组[(178±18)、(546±36)μg/L]比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)卵巢重量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(18±8)mg/100 g,GnRH-a+NS组为(12±5)mg/100 g,均明显低于其他各组[(30±9)～(37±8)mg/100 g],差异均有统计学意义(P＜0.05);停药第4～5周,GnRH-ant+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(22±6)mg/100 g,CTX组为(20±4)mg/100 g,均明显低于其他各组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)卵泡数量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠卵巢原始卵泡数为(689±39)个,GnRH-a+NS组为(824±45)个,明显高于GnRH-ant+CTX组[(255±24)个]和CTX组[(343±29)个];生长卵泡数GnRH-a+CTX组为(21±3)个,GnRH-a+NS组为(15±1)个,明显低于GnRH-ant+CTX组[(110±21)个]和CTX组[(87±17)个];分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).停药第4～5周,GnRH-a+CTX组和GnRH-a+NS组的生长卵泡数[(56±16)、(58±11)个]接近对照组水平[(57±9)个];GnRH-ant+CTX组及CTX组的原始卵泡数和生长卵泡数均少于其他4组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 GnRH-a对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害具有保护作用,GnRH-ant对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害没有明显的保护作用.     

雌激素对去势大鼠端粒酶活性的影响

目的:探讨雌激素对去势雌性SD大鼠端粒酶活性的影响,从而研究其抗衰老作用机制。方法:将33只3个月龄雌性大鼠随机分为3组,去势实验组(11只)开始用戊酸雌二醇(E2)+0.9%氯化钠溶液按0.21 mg/kg灌胃,去势对照组(11只)、假手术组(11只)给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d。12周后腹主动脉采血,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清E2、卵泡刺激素(FSH),处死大鼠后快速摘取心脏、肝脏、脑组织,通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和ELISA法分别检测各组织端粒酶活性及端粒酶逆转录酶(TERT)m RNA水平。结果:去势实验组和假手术组血清E2水平高于去势对照组,血清FSH水平低于去势对照组(均P0.05);去势实验组端粒酶活性的ΔA值高于去势对照组和假手术组(均P0.05),去势对照组和假手术组端粒酶的活性均为阴性,ΔA值较低,差异无统计学意义(P0.05);去势实验组大鼠心脏、肝脏和脑组织TERT m RNAΔCt值低于去势对照组及假手术组(均P0.05),而去势对照组和假手术组TERT m RNAΔCt值差异无统计学意义(均P0.05)。结论:雌激素可以显著提高去势雌性大鼠端粒酶活性及TERT m RNA水平,进而发挥其抗衰老作用。     

妊娠期高血压疾病患者CRP变化及与ET-1、NO相关性的研究

目的:探讨妊娠期高血压疾病患者C反应蛋白(CRP)的变化以及与ET-1、NO的相关性。方法:选择2009年2月～6月在我院住院妊娠期高血压疾病(HDCP)患者40例,根据病情分为妊娠期高血压组(GH)13例,轻度子痫前期组(MP)10例,重度子痫前期组(SP)17例;以同期妊娠末期健康妇女20例为对照组。用酶联免疫吸附法检测血清CRP和ET-1浓度;硝酸还原酶法测定血清NO浓度;将CRP浓度与ET-1、NO做相关性分析。结果:(1)妊娠期高血压疾病组血清CRP(8416.48±3646.64ng/ml),ET-1(340.30±127.16μg/ml)浓度水平均显著高于对照组(1573.60±722.45ng/ml),(61.20±29.44ng/ml);NO(82.69±17.12μmol/L)浓度水平显著低于对照组(105.18±7.12μmol/L),差异有显著的统计学意义(P0.001);(2)HDCP各组血清CRP(GH:5634.62±1445.57ng/ml)(MP:8027.90±2593.46ng/ml)(SP:10772.35±3845.01ng/ml),ET-1(GH:245.46±62.20μg/ml)(MP:354.30±86.87μg/ml)(SP:404.59±142.41μg/ml)浓度水平较对照组升高,差异有显著的统计学意义(P0.001)(P0.001);MP组血清CRP,ET-1浓度水平较GH组升高,差异有统计学意义(P0.05)(P0.01);SP组血清CRP,ET-1浓度水平较GH组升高,差异有显著的统计学意义(P0.001)(P0.01);SP组血清CRP浓度水平也较MP组高,差异有显著的统计学意义(P0.01),ET-1浓度水平较MP组有升高趋势,差异无统计学意义(P=0.168);(3)GH血清NO(101.03±4.79μmol/L)浓度水平较对照组(105.18±7.12μmol/L)降低,差异无统计学意义(P=0.197);MP组血清NO(83.47±12.72μmol/L)浓度水平较对照组降低,差异有统计学意义(P0.001);MP组血清NO浓度水平也较GH组低,差异有统计学意义(P0.001);SP组血清NO(68.21±10.48μmol/L)浓度水平较对照组、GH组、MP组也降低,差异有显著的统计学意义(P0.001);(4)CRP浓度与ET-1浓度呈正相关(r=0.805,P=0.000);与NO浓度呈负相关(r=-0.637,P=0.000)。结论:妊娠期高血压疾病患者CRP,ET-1浓度水平升高,NO浓度水平降低,且CRP与ET-1、NO有一定的相关性,临床上可通过检测CRP、ET-1、NO,综合判断病情的发展与预后。     

抑制素B与多囊卵巢综合征不同临床表型相关性研究

目的分层对照分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床基本特征,探讨抑制素B(INH B)对PCOS的临床意义及与不同临床表型的相关性。方法选取2013年6月至2015年12月广东省计划生育专科医院按照Rotterdam标准诊断的148例PCOS患者为病例组,选取月经规律且有正常生育史的女性40例为对照组。收集调查对象基本信息,根据血清睾酮(T)≥1.97 nmol/L分为高雄激素血症(HA)组和非高雄激素血症(NHA)组;根据稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥2.69分为胰岛素抵抗(IR)组和非胰岛素抵抗(NIR)组;根据BMI≥24分为超重组和非超重组;将3组进行对照分析,探讨INH B与PCOS不同临床表型的相关性。结果对照组和PCOS组在BMI、黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、T、抗苗勒管激素(AMH)和HOMA-IR差异有统计学意义[23.13±3.72 vs.30.15±4.42,(7.83±4.53)U/L vs.(4.65±2.00)U/L,1.73±1.82 vs.0.94±0.41,(2.40±1.42)nmol/L vs.(1.45±0.85)nmol/L,(9.21±4.77)μg/L vs.(5.44±3.01)μg/L,3.96±2.45 vs.1.70±0.50,P0.01];INH B差异无统计学意义(P0.05)。在HA组和NHA组的比较中,INH B差异有统计学意义[(53±28)ng/L vs.(112±37)ng/L,P=0.000],AMH、BMI和HOMA-IR比较差异无统计学意义(P0.05);在IR组和NIR组的比较中,BMI和INH B在两组中的差异有统计学意义[21.85±3.41 vs.23.89±3.71,(89±32)ng/L vs.(32±27)ng/L,P0.05],T和AMH差异无统计学意义(P0.05);在超重组和非超重组的比较中,HOMAIR和INH B在两组中的差异有统计学意义[(3.35±1.99 vs.5.02±2.76,(86±24)ng/L vs.(38±22)ng/L,P=0.001),T和AMH差异无统计学意义(P0.05)。结论 PCOS具有高度的临床异质性,高雄激素、胰岛素抵抗和超重等不同临床表型可能具有不同的病理生理机制,导致INH B在不同表型反映不同。     

卵泡液中双酚A在多囊卵巢综合征发病中的作用及相关因素探讨

目的:探讨卵泡液中双酚A(bisphenol A,BPA)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病中的作用。方法:于取卵日收集行体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)的PCOS患者和非PCOS患者的卵泡液,检测患者卵泡液BPA水平和卵泡液性激素水平,并进一步与患者血清抗苗勒氏管激素(AMH)及临床结局等因素行相关性分析。结果:PCOS患者和非PCOS患者的卵泡液BPA水平(446.57±63.57 ng/L vs 336.29±59.02 ng/L,P0.001)、血清AMH水平(12.09±4.78μg/L vs5.69±2.98μg/L,P0.001)、卵泡液FSH(5.58±1.66 IU/L vs 3.95±1.54 IU/L,P=0.008)、LH(4.54±2.97 IU/L vs 0.96±1.10 IU/L,P0.001)和T(54.68±34.34 nmol/L vs 32.48±16.68 nmol/L,P=0.035)组间比较有统计学差异。相关性分析显示,卵泡液中BPA水平与血清AMH水平呈显著正相关(r=0.577,P=0.001)。结论:卵巢局部的BPA暴露可能参与了PCOS疾病的发生、发展。     

香芹酚拮抗大鼠卵巢储备化疗损伤的功能

目的探索香芹酚(CAR)对注射环磷酰胺(CTX)化疗损伤后大鼠卵巢功能的影响。方法 (1)将15只Fischer344大鼠随机分为3组,通过腹腔注射不同浓度CAR(10 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg)在不同时间点利用化学发光法检测各组大鼠血清雌二醇(E_2)水平,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清卵泡刺激素(FSH)水平。(2)64只Fischer344大鼠随机分为4组,分别为空白对照组、CAR组、CTX组和CTX+CAR组,每组16只,分别给予相应的药物后第60日和第90日,检测E_2和FSH水平,同时称量各组大鼠卵巢重量、计数卵泡数量以及卵泡直径,实时荧光定量PCR(q PCR)检测卵巢组织雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、孕激素受体(PR)和雄激素受体(AR)的表达。结果 50 mg/kg CAR组能有效降低E_2[(0.9±0.2)pg/m L]及FSH水平[(1.3±0.3)U/L],与10 mg/kg CAR组比较有统计学意义(P0.05),而与100 mg/kg CAR组无统计学差异(P0.05)。实验第60日质量[(38.5±4.1)mg]显著低于CTX+CAR组[(72.9±5.6)mg](P0.05),CTX组大鼠卵泡总数(1 250±95)显著低于CTX+CAR组(1 750±95),差异具有统计学意义(P0.05);此外,各组大鼠卵巢ERα、ERβ、PR以及AR基因表达无统计学差异(P0.05)。结论 CAR可通过降低E_2及FSH水平,提高卵巢重量和小卵泡数量而减轻CTX对大鼠卵巢功能的损伤。     

五味子乙素对丙戊酸钠肝脏损伤的保护作用

目的观察五味子乙素(SchB)对丙戊酸钠诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法 30只大鼠随机分成丙戊酸钠组、SchB加丙戊酸钠联合给药组及对照组各10只,分别给予丙戊酸钠、SchB+丙戊酸钠、生理盐水灌胃,2周后眼眶采集血液5mL,检测血清转氨酶水平。结果丙戊酸钠组血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶为(72.29±4.14)IU/L、(67.26±2.38)IU/L,对照组分别为(39.80±5.92)IU/L、(33.00±4.59)IU/L,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05);丙戊酸钠加五味子乙素组谷草转氨酶和谷丙转氨酶分别为(32.29±3.68)IU/L、(34.25±5.69)IU/L,与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);各组大鼠总蛋白、白蛋白等比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论丙戊酸钠可造成大鼠肝功能异常,而SchB可缓解肝功能的损害,发挥保肝作用。     

妊娠中期补充锌钙与产时脐血铅、镉水平的关系分析

目的研究妊娠中期补充锌钙与脐带血锌、钙、铅、镉含量的相关关系。方法 研究组150例孕妇于妊娠20~27＋6周口服葡萄糖酸锌钙口服液（锌钙特）15 d,与对照组150例孕妇比较脐带血锌、钙、铅、镉含量,并分析其与孕中期血锌、钙含量的相关关系。结果口服葡萄糖酸锌钙口服液后,妊娠中期孕妇血锌、钙含量明显高于口服前和对照组,孕妇口服锌钙特前后血铅、镉含量无明显变化。研究组分娩后脐血锌[（9.87±3.22）μmol/L vs（6.95±2.78）μmol/L,t=8.41,P〈0.05]、钙含量[（1.59±0.41）mmol/L vs（1.43±0.38）mmol/L,t=3.51,P〈0.05）]均值高于对照组;铅[（0.15±0.13）μmol/L vs（0.19±0.12）μmol/L,t=2.77,P〈0.05）]、镉[（1.43±0.68）μg/L vs（1.68±0.64）μg/L,t=3.28,P〈0.05）]含量均值明显低于对照组。结论孕中期母体补充锌、钙可以增加脐血锌、钙含量,降低脐血铅、镉水平。     

孕鼠血清高胆酸水平对胎鼠大脑组织形态的影响

目的 探讨孕鼠血清高胆酸水平对胎鼠大脑组织形态的影响.方法将30只清洁级成年SD孕鼠随机分为A、B、C 3组,每组10只.在妊娠第13～20天,A组孕鼠每天1次腹腔注射纯胆酸5.5 mg·kg-1·d-1(高胆酸);B组孕鼠每天1次腹腔注射纯胆酸1.4 mg·kg-1·d-1(低胆酸);C组同步注射等量生理盐水.妊娠第21天剖腹取胎,测定胎鼠体重及记录死亡率.测定孕鼠和胎鼠血清总胆酸水平,采用酶联免疫吸附试验测定血神经元特异烯醇化酶(NSE)水平.同时,胎鼠断头取脑,采用光镜和电镜观察胎鼠大脑组织的病理改变.结果 (1)3组孕鼠及胎鼠血清胆酸水平分别为:A组(22.3±8.1)μmol/L,(28.8±8.1)μmol/L;B组(9.8±3.6)μmol/L,(9.3±3.5)μmol/L;C组(3.6±1.8)μmol/L,(4.0±1.2)μmol/L.3组间相互比较,差异有统计学意义(P＜0.01).孕鼠血清总胆酸水平与胎鼠血清总胆酸水平呈正相关关系(r=0.875,P＜0.01).(2)胎鼠死亡率在A、B、C组中分别是30.1%,16.9%和7.1%,3组间相互比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)A、B、C组胎鼠血清NSE水平分别为(31.9±13.1),(13.9±5.9)和(9.3±3.9)ng/L,A组明显高于B组及C组(P＜0.01);B组与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).胎鼠血清NSE水平与总胆酸水平呈正相关(r=0.758,P＜0.01).(4)胎鼠大脑皮层组织光镜下病理改变:A、B组胎鼠均表现为不同程度的大脑皮层组织层次紊乱,神经元变性坏死,密度降低,胞核固缩深染.胎鼠神经元变性面积积分在A、B、C组中分别是(1.4±0.6),(1.5±0.7)和(0.7±0.3),A组和B组明显高于C组(P＜0.01);A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).胎鼠神经元变性面积积分与胎鼠血清NSE水平的r为0.282(P＞0.05).胎鼠神经元坏死面积积分在A、B、C组中分别是(1.8±0.7),(0.9±0.4)和(0.6±0.3),A组明显高于B组和C组(P＜0.05);B组与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).胎鼠神经元坏死面积积分与胎鼠血清NSE水平呈正相关关系(r=0.798,P＜0.01).(5)胎鼠神经细胞透射电镜下病理改变:A、B组胎鼠均表现为不同程度的神经细胞核膜双层结构模糊,核固缩及核仁消失,染色质浓缩;内质网和线粒体数目减少,残留线粒体肿胀破坏,嵴空化消失.胎鼠神经细胞内线粒体数密度(Nv)在A、B、C组中分别是(21.9±9.0),(45.5±13.1)和(36.1±12.1)μm-3.A组明显低于B组和C组(P＜0.01);B组与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).胎鼠神经细胞内线粒体平均体积((V))在A、B、C组中分别是(7.0±1.8),(5.7±1.6)和(3.2±1.2)×10-4μm3.A组和B组明显高于C组(P＜0.01);A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕鼠血清中胆酸可使胎鼠脑组织出现明显的病理改变,低水平胆酸主要导致神经细胞变性和线粒体体积增大,而高水平胆酸主要导致神经细胞坏死和线粒体数目减少.胎鼠血清NSE水平与总胆酸水平呈正相关关系.     

血小板生长因子对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑细胞凋亡率和血清神经元特异性烯醇化酶的影响

目的 研究血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的新生鼠神经细胞凋亡率及血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)浓度的影响,进而探讨其对HIBD的神经保护作用. 方法 7日龄新生Wistar大鼠48只制备HIBD模型,并分为PDGF治疗组和生理盐水对照组,每组各24只.另取24只为假手术组.治疗组在缺氧缺血后即刻给PDGF-BB 50 ng/kg腹腔注射.对照组和假手术组腹腔注射等体积的生理盐水.每组于处置后12、24和72 h随机取8只处死,留血清标本,酶联免疫吸附法检测大鼠血清标本NSE浓度;取右侧大脑组织制备脑细胞悬液,双染法流式细胞仪检测脑细胞凋亡率.采用单因素方差分析及q检验进行统计学分析. 结果 (1)脑细胞凋亡率:治疗组[(6.09±0.70)％、(9.67±1.52)％和(14.15±1.52)％]和对照组[(8.00±1.10)％、(11.45±2.42)％和(22.90±2.03)％]3个时点的脑细胞凋亡率均较假手术组(2.11±0.54)％、(2.34±0.46)％和(2.21±0.49)％]显著增加(P均＜0.01或＜0.05),治疗组较对照组各时点脑细胞凋亡率均明显降低(P均＜0.01或＜0.05),3组大鼠在12、24、72 h时的组间比较差异均有统计学意义(F=39.01、66.60、194.20,P均＜0.01).(2)血清NSE浓度:各时点对照组[(10.04±0.19) μg/L、(9.33±0.15)μg/L和(8.36±0.16)μg/L]和治疗组[(8.43±0.17)μg/L、(6.73±0.16) μg/L和(6.12±0.13)μg/L]较假手术组[(4.22±0.53)μg/L、(3.96±0.60) μg/L和(3.59±0.55) μg/L]NSE浓度增加(P均＜0.01),治疗组较对照组各时点NSE浓度降低(P均＜0.01),3组大鼠在12、24、72h组间比较差异均有统计学意义(F=371.25、245.61、236.22,P均＜0.01). 结论 PDGF能抑制新生大鼠HIBD后神经细胞凋亡及降低血清NSE浓度,对HIBD新生大鼠有神经保护作用.     

血根碱对紫杉醇耐药卵巢癌A2780/taxol细胞生长及化疗敏感性影响的研究

目的:探讨血根碱对紫杉醇耐药卵巢癌A2780/taxol细胞生长及化疗敏感性的影响和机制。方法:培养A2780/taxol细胞,分为对照组、血根碱组、紫杉醇组、血根碱+紫杉醇组,对照组加0.9%氯化钠液,血根碱组加2.0μmol/L血根碱,紫杉醇组加2μg/ml紫杉醇,血根碱+紫杉醇组同时加2.0μmol/L血根碱及2μg/ml紫杉醇。应用MTT法、流式细胞仪和Western blot法检测血根碱对A2780/taxol细胞增殖、凋亡、克隆形成及Bax、β-tubulinⅢ蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,血根碱组、紫杉醇组及血根碱+紫杉醇组均能显著抑制A2780/taxol细胞增殖,血根碱+紫杉醇组抑制率最高(P0.05);紫杉醇组、血根碱组及血根碱+紫杉醇组细胞克隆形成率[(35.67±7.37)%、(27.67±2.52)%和(8.87±3.38)%]明显降低,血根碱+紫杉醇组降低最为明显(P0.05);紫杉醇组、血根碱组及血根碱+紫杉醇组细胞凋亡率[(18.01±7.13)%、(57.03±12.91)%和(81.68±11.23)%]明显增加,血根碱+紫杉醇组细胞凋亡率最高(P0.05);紫杉醇组、血根碱组、血根碱+紫杉醇组Bax蛋白表达显著上调、β-tubulinⅢ蛋白表达显著降低,血根碱+紫杉醇组表达量变化最大(P0.05)。结论:血根碱可下调β-tubulinⅢ表达,诱导肿瘤细胞凋亡,增强紫杉醇对耐药卵巢癌细胞的生长抑制作用,从而促进其对紫杉醇药物的敏感性。     

细胞外信号调节激酶信号转导通路活化在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用

目的 观察细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulated kinase,ERK)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用.方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、缺氧缺血组和PD98059(ERK抑制剂)组,通过结扎右侧颈总动脉,恢复2 h后,吸入含8%氧气的氧氮混合气体2 h的方法 建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,PD98059组结扎右侧颈总动脉前10 min股静脉注射PD980592 mg/kg.各组新生大鼠于模型制作后6 h剥离结扎侧海马及皮层脑组织,分别测定脑组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和细胞凋亡水平.Western印迹法检测ERK1和ERK2,Bcl-2和Bax蛋白的表达.组间差异比较采用方差分析及q检验.结果 缺氧缺血组细胞凋亡率明显高于假手术组[(18.80±1.37)%和(3.53±0.34)%](q=6.06,P＜0.01),PD98059组细胞凋亡率[(15.53±0.64)%]低于缺氧缺血组(q=3.87,P＜0.01).缺氧缺血组MDA含量为(342.9±10.8)μmol/L,明显高于假手术组[(181.5±17.0)μmol/L](q=6.35,P＜0.01)和PD98059组[(252.0±17.1)μmol/L](q=5.28,P＜0.01),而SOD活性[(34.8±4.3)U/ml]明显低于假手术组[(63.4±4.3)U/ml](q=4.99,P＜0.01)和PD98059组[(51.5±3.8)U/ml](q=4.17,P＜0.01).3组总ERK1和ERK2蛋白表达差异无统计学意义.缺氧缺血组磷酸化ERK1和磷酸化ERK2蛋白表达明显高于假手术组(q分别=3.82和4.08,P均＜0.01)和PD98059组(q分别=4.79和5.12,P均＜0.01).缺氧缺血后Bcl-2和Bax蛋白表达明显高于假手术组(q分别=3.55和3.42,P均＜0.01);PD98059组较缺氧缺血组抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,促凋亡蛋白Bax表达降低(q分别=3.71和5.86,P均＜0.01).结论 ERK激活通过调节凋亡蛋白表达参与了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的发生.

Abstract：

Objective To investigate the effects of extracellular-signal regulated kinase (ERK) on hypoxic-ischemic brain damage of neonatal rats.Methods The hypoxic-ischemic brain damage model of neonatal Wistar rats was established as following:first the right common carotid artery of the rats was ligated;2 h after operation,the rats began to inhale 8%-oxygen oxygen-nitrogen gas mixture lasting for 2 h.Rats were randomly divided into three groups:sham-group,hypoxic-ischemic group and ERK inhibitor PD98059 group (the rats were injected PD98059 2 mg/kg 10 min before the ligation).Six hours after the models were done,hippocampi and cortex of the ligation side of rats in the three groups were collected,and the levels of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) were measured.Apoptosis of neuron was assessed by TUNEL staining.The expression of ERK1,ERK 2,Bcl-2 and Bax were examined by Western blot.The differences among the groups were analyzed with ANOVA and q test.Results Compared with the sham-group,the MDA level [(342.9± 10.8) μmol/L vs (181.5± 17.0) μmol/L,q= 6.35,P＜0.01) and the apoptosis rate of neuron [(18.80±1.37)% vs (3.53±0.34)%,q=6.06,P＜0.01) of hypoxic-ischemic group was higher,and SOD level was lower [(34.8±4.3) U/ml vs (63.4±4.3) U/ml,q=4.99,P＜0.01].While the apoptosis rate of neuron [(15.53±0.64) %] and MDA level [(252.0± 17.1) μmol/L] of PD98059 group were lower than those of hypoxic-ischemic group(q=3.87 and 5.28,P＜0.01respectively),the SOD level [(51.5 ± 3.8) U/ml] was higher than that of hypoxic-ischemic group (q=4.17,P＜0.01).There were no differences of ERK1 and ERK2 expressions among the three groups.The phosphorylated ERK1 and ERK2 levels of hypoxic-ischemic group were higher than those of sham-group (q=3.82 and 4.08,P＜0.01) and PD98059 group (q=4.79 and 5.12,P＜0.01).The expression of Bcl-2 and Bax of hypoxic-ischemic group were higher than those of sham-group (q=3.55 and 3.42,P＜0.01).Compared with hypoxic-ischemic group,Bcl-2 expression (q=3.71,P＜0.01) of PD98059 group was higher,and Bax expression (q=5.86,P ＜ 0.01) was lower.Conclusions ERK is involved in hypoxic-ischemic brain damage of neonatal rats through regulating the expression of apoptosis protein.     

长期进食高糖饲料对雌性小鼠卵泡超微结构的影响

目的:探讨长期进食高糖饲料对雌性小鼠卵泡超微结构的影响。方法:将40只4周龄的C57BL/6J的雌性小鼠随机分为正常饲料组20只和高糖饲料组20只,分别连续喂养180 d后,测量雌性小鼠体质量、血清性激素、糖代谢指标、动情周期和各级卵泡数目。应用电子显微镜观察雌性小鼠卵泡的超微结构。结果:长期进食高糖饲料的雌性小鼠体质量明显增加(P0.05),血清雌二醇(E_2)水平升高(82.05±15.62 ng/L vs 68.25±4.90 ng/L,P0.05),空腹胰岛素显著升高(64.11±39.97 mIU/L vs 14.25±7.33 mIU/L,P0.05),动情周期延长(10.3±1.5 d vs 6.0±0.9 d,P0.01),其中动情前期(2.3±0.6 d vs 1.3±0.4 d,P0.05)、动情后期(3.0±0.8 d vs 1.0±0.3 d,P0.001)及动情间期延长(2.7±0.9 d vs 1.3±0.5 d,P0.01)更显著,窦前卵泡和窦卵泡数目均显著减少(P0.05)。长期进食高糖饲料的小鼠卵泡颗粒细胞发生凋亡;部分卵母细胞核染色质排列紊乱;卵母细胞内线粒体增生水肿;高尔基体结构异常;透明带形态及厚度异常;卵母细胞微绒毛明显减少。结论:长期进食高糖饲料小鼠体质量增加,E_2水平升高,动情周期延长,卵泡中的卵母细胞和颗粒细胞超微结构受损。     

替勃龙联合更安宁对雌性去势大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的:观察替勃龙联合补肾中药(更安宁)在雌性去势大鼠加高脂饮食状态下,对血管内皮细胞的保护作用。方法:9月龄雌性Sprague-Dawley大鼠50只,随机分为假手术组(SHAM)、卵巢切除组(OVX)、卵巢切除后药物联合治疗组(OVX+E)、高脂血症组(OVX+HC)、高脂血症药物联合治疗组(OVX+HC+E)。在卵巢切除术后14d起,OVX组、OVX+HC组给予生理盐水灌胃,OVX+E组、OVX+HC+E组予替勃龙+补肾中药更安宁溶液灌胃,OVX+HC组、OVX+HC+E组同时喂饲高脂饮食。12周后处死大鼠,测定血浆雌二醇(E2)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)、胆固醇(Tch)、甘油三脂(TG)、一氧化氮(NO)、血管性假性血友病因子(vWF),在光镜及电镜下观察主动脉管壁结构的改变。结果:OVX+E组与OVX组相比,OVX+HC+E组与OVX+HC组相比,均表现Tch、LDL-c明显降低,HDL-c明显升高,血浆NO含量增加;OVX组存在轻度动脉粥样硬化坏死,OVX+HC组动脉管壁损伤严重,伴随vWF明显升高;OVX+E组与OVX+HC+E组动脉管壁结构正常。结论:替勃龙联合补肾中药更安宁治疗能保护血管内皮细胞,对抗高脂血症对动脉管壁的损伤。     

Lactacystin及联合顺铂对子宫颈癌HeLa细胞的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂Lactacystin(LAC)及其与顺铂(DDP)联合对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞技术(FCM)检测宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制率和凋亡率。细胞并分为4组:对照组、LAC组、DDP组及LAC+DDP,每组均干预HeLa细胞48h。结果MTT检测结果显示,LAC可有效抑制HeLa细胞的增殖,呈浓度(r=0.864,P0.05)及时间依赖性(r=0.926,P0.05),48h时的半数抑制量(IC_(50))为4.98μmol/L;与DDP组比较,LAC+DDP组对细胞增殖的抑制作用明显增强(P0.05)。DDP的IC_(50)由63.71μmol/L下降至28.93μmol/L。FCM检测结果显示,细胞凋亡率随LAC作用时间的延长而上升,具有时间依赖性(r=0.869,P0.05);与DDP组凋亡率[(17.49±3.82)%]和LAC组[(24.98±4.61)%]比较,LAC+DDP组[(38.06±5.72)%]诱导细胞凋亡的作用显著增强(P0.05)。结论蛋白酶体抑制剂LAC可有效抑制宫颈癌HeLa细胞的体外增殖作用,并通过诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡,增强DDP对宫颈癌HeLa细胞株的作用。     

血浆溶血磷脂酸诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤价值初探

目的:初步探讨血浆溶血磷脂酸(LPA)诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的潜在价值.方法:分别测定31例早期卵巢恶性上皮性肿瘤(Ⅰ～Ⅱ期),20例卵巢良性肿瘤,20例卵巢巧克力囊肿及20例正常妇女血浆LPA和血清癌抗原125(CA125)水平.结果:早期卵巢恶性上皮性肿瘤组、卵巢良性肿瘤、卵巢巧克力囊肿组、正常妇女组血浆LPA水平分别为4.12±1.36 μmol/L、1.74±0.71μmol/L、2.99±1.28μmol/L.、1.85±0.35μmol/L,早期卵巢恶性上皮性肿瘤组血浆LPA水平高于卵巢良性肿瘤组及卵巢巧克力囊肿组及正常妇女组(P均＜0.05).血浆LPA和血清CA125诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的敏感性分别为80.65%和54.84%,血浆LPA水平在诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤的敏感性方面要优于CA125(P＜0.05);但两者的特异性分别为85.00%、76.67%,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:早期卵巢恶性上皮性肿瘤组血浆LPA水平高于卵巢良性肿瘤组及卵巢巧克力囊肿组及正常妇女组,敏感性优于CA125,血浆LPA检测对诊断早期卵巢恶性上皮性肿瘤可能具有一定的积极意义.     

血清bFGF表达水平在宫颈病变中的临床意义

目的:探讨血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平在宫颈病变中的意义及与宫颈鳞癌同期放化疗预后的关系。方法:选择经病理检查确诊为中晚期宫颈鳞癌的患者92例(宫颈鳞癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)20例(CIN组)、体检健康人25例(健康组)作为研究对象。酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定研究对象血清bFGF基线水平,以及宫颈鳞癌组同期放化疗后3个月血清bFGF水平,分析其与临床疗效的关系。结果:宫颈鳞癌组血清bFGF基线水平为103.36±34.32μg/L,明显高于CIN组78.77±23.34μg/L和健康组71.78±18.67μg/L(P0.05)。血清bFGF水平与宫颈鳞癌的临床分期、分化程度及淋巴结转移有关。完全缓解患者的b FGF水平放化疗前87.34±39.24μg/L、治疗后76.46±28.78μg/L均最低,无效患者bFGF水平治疗前148.34±53.12μg/L、治疗后129.56±47.23μg/L均最高(P0.05)。结论:血清bFGF水平对宫颈病变病情程度的判断及宫颈鳞癌同期放化疗预后的预测均有一定的价值。