不同胎龄的胎儿和少儿皮肤中bax,bcl-2和p53基因表达的变化

目的：探讨凋亡相关基因bax,bcl-2和p53在不同胎龄的胎儿皮肤和少儿皮肤组织中表达的变化特征及其可能的生物学意义。方法：运用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺口标记技术(TUNEL)检测18例不同胎龄(13-32周)的胎儿皮肤和6例少儿皮肤组织中细胞凋亡的变化后,提取这些皮肤组织中的总RNA,分离mRNA,用RT-PCR方法检测bax,bcl-2和p53基因在不同组织中的表达变化特征。结果：随着胎儿的生长发育,皮肤组织中的细胞凋亡率逐渐增加。在早期妊娠胎儿的皮肤中,bcl-2基因表达水平较高,随着胎龄的增加,bcl-2基因的转录本含量逐渐降低,在少儿的皮肤组织中,这种基因的表达量明显低于早期妊娠胎儿皮肤（P0.05）。结论：晚期妊娠胎儿和少儿皮肤组织中细胞增殖减缓,细胞趋向分化或凋亡的增加可能与p53基因表达增强,bcl-2表达降低相关;而p53表达降低,bcl-2表达升高可能是早期妊娠胎儿皮肤中细胞凋亡较少的机制之一。     

肝脏缺血再灌注损伤与细胞凋亡

Hepatic ischemia/reperfusion injury (HIRI) exists in lots of process of clinical pathology and operation. Apoptosis is an active process controlled by some gene and factors such as Fas/FasL, Caspases and Bcl -2 families. More and more studies suggest that HIRI is associated with apoptosis. This article summarized the mechanisms and gene modulation of apoptosis during HIRI and the significance of suppressing auoutosis in preventing HIRI.     

小脑颗粒神经元低钾性凋亡过程中Arnt2核浆转位的分析

目的：分析大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)“低钾”性凋亡过程中Arnt2亚细胞定位的变化。方法：Westernblotting法分析“低钾”性凋亡过程中CGNs核抽提物中Arnt2蛋白质的表达变化,间接免疫荧光结合激光扫描共聚焦显微术(LSM)分析Arnt2蛋白质亚细胞定位的变化。结果：在CGNs细胞核抽提物中,“低钾”诱导30min后Arnt2蛋白质已明显表达上调,1h后达至峰值水平,“低钾”诱导6h后上调表达的Arnt2回落至正常对照水平;LSM分析显示位于正常CGNs细胞核内的Arnt2在“低钾”作用下逐步向胞浆转移,并在CGNs凋亡末期与胞浆线粒体定位的HSP60完全重叠。结论：Arnt2在小脑颗粒神经元“低钾”性凋亡过程中发生了核浆转位;结果提示,Arnt2很可能是通过传递“低钾”诱发的细胞凋亡或存活信号而直接参与小脑颗粒神经元“低钾”性凋亡的调控。     

5-氟胞嘧啶对胞嘧啶脱氨酶基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨5-氟胞嘧啶(5-FC)对基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的影响及特征。方法:以腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)基因转染胰腺癌SW1990细胞,以Westernblot检测目标基因蛋白水平表达,通过细胞形态学、脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳和流式细胞术观察5-FC对表达CD基因的SW1990细胞凋亡的影响作用。结果:以含CD基因的重组腺病毒转染的SW1990细胞,给予5-FC100μmol·L-1,培养48h,细胞出现典型的凋亡形态、DNA梯形改变及凋亡峰,细胞在G1,S和G2/M各期分别为64%、11%和7%,凋亡率达34.6%。结论:5-FC的上述诱导凋亡作用可能是胰腺癌CD基因疗法的重要机制。     

醛糖还原酶对大鼠肾脏系膜细胞表达纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的影响

目的探讨醛糖还原酶(AR)对大鼠肾脏系膜细胞(MsC)表达细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)蛋白的影响,以及AR在肾小球硬化病变过程中的可能作用及其机制。方法采用酶切、连接方法构建真核表达质粒pCDNA3-AR,采用脂质体介导以及G418筛选的方法,将pCDNA3-AR稳定转染至MsC中,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法和免疫荧光检测转染MsC表达AR情况;以Western印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC、应用AR抑制剂Sorbinil和Zopolrestat的正常MsC、转化生长因子-β1(TGF-β1)作用后的正常MsC的FN和ColⅣ蛋白表达情况。结果与正常MsC相比,TGFβ1作用后的正常MsCFN和ColⅣ蛋白表达水平分别增高1.6和1.7倍(P<0.01);AR转基因MsC的FN、ColⅣ表达分别增加1.8倍和1.5倍;应用Sorbinil时,FN和ColⅣ分别降低1.8倍和1.4倍(P<0.05);应用Zopolrestat时,FN和ColⅣ分别降低1.7倍和1.4倍(P<0.05)。结论AR高表达或活性受抑制时可以明显影响MsCFN、ColⅣ的蛋白表达,提示AR可能与肾小球硬化的病理过程有关。     

褐藻糖胶对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究褐藻糖胶对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其凋亡机制。方法:不同浓度(100mg/L、300mg/L、500mg/L、1000mg/L)褐藻糖胶处理MCF-7细胞48h后,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖;Hoechst33258染色、琼脂糖凝胶电泳法观察细胞的凋亡的形态学及生化改变;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹分别测定细胞〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗和baxmRNA及其蛋白的表达。结果:不同实验浓度(100mg/L、300mg/L、500mg/L、1000mg/L)的褐藻糖胶均能抑制MCF-7细胞的增殖（P<0.01）,抑制率呈浓度依赖性增大;褐藻糖胶诱导MCF-7细胞凋亡数增加,且可见明显的、凋亡特有的DNA梯形条带;在褐藻糖胶存在下,〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗mRNA和蛋白表达减少,而baxmRNA和蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值下降（P<0.05）。结论:褐藻糖胶可抑制MCF-7细胞增殖,且诱导其凋亡,其凋亡机制是下调Bcl-2和上调Bax蛋白的表达。     

同型半胱氨酸诱导PC12细胞凋亡的研究

目的：研究同型半胱氨酸（Hcy）在生理浓度铜离子（10μmol/LCu2+）作用下能否诱导PC12细胞凋亡及对bcl-2、bax基因表达的影响。方法:将细胞随机分成对照组和处理组,采用MTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡;半定量RT-PCR分析bcl-2和baxmRNA的表达水平。结果:0.125-1.0mmol/LHcy在Cu2+的作用下可以导致PC12细胞凋亡,具有明显的剂量-效应关系;bcl-2mRNA表达降低,baxmRNA表达升高,且效应与Hcy浓度相关。结论:高浓度Hcy在生理浓度Cu2+作用下可诱导PC12细胞凋亡,且凋亡作用与Hcy浓度相关。其机制可能是通过调节bcl-2和baxmRNA的比值起作用的。     

Rarity of hypertensive stigmata in aging renocortical arteries of Bolivians

Numerous reports have accumulated from around the world throughout the twentieth century of small, remote, self-sufficient populations that do not show a rise of blood pressure with age. Knowing that renocortical arteriosclerosis, a defining feature of hypertensive nephrosclerosis, is a close commensurate of blood pressure, it can be predicted that the elderly members of such populations should fail to show arteriosclerosis of hypertensive degree in the renal cortex. Emigrants from such populations sometimes come to medical attention in places like La Paz, Bolivia. Reported here are findings in autopsy samples of kidney tissue examined in La Paz. These samples have revealed remarkably little renovasculopathy at all ages up to 80 years, a phenomenon that has not previously been observed. Because of these findings, it can now be seen as biologically possible for a whole population of elderly persons to avoid renovasculopathy of hypertensive degree, and by implication, perhaps never experience hypertensive cardiovascular disease.     

细胞凋亡相关基因研究进展

细胞凋亡研究已成为当今国内外研究的新热点,本文就近年来有关与细胞凋亡相关的基因或因子研究的进展做一综述,着重阐述了bcl-2、myc、p53和APO-l/Fas以及TGFβ_1等对细胞 凋亡的影响和作用,以期有助于进一步揭示细胞凋亡的分子机理。     

细胞凋亡及其相关基因蛋白在阿霉素肾病中的作用

目的：探讨细胞凋亡及其相关基因蛋白在阿霉素（ADR）肾病发病中的作用及机制。方法：复制ADR肾病模型,用超氧化物歧化酶（SOD）干预,用原位末端标记法、免疫组化法、原位杂交法分别检测细胞凋亡、基因蛋白表达、野生型p53mRNA,同时测定肾皮质匀浆丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果：模型组皮质部肾小球、近曲及远曲肾小管细胞凋亡数和c-Myc蛋白及野生型p53转录水平、近曲和远曲肾小管细胞Bax蛋白表达、肾皮质MDA水平明显高于对照组（P<0.01）,肾皮质GSH-Px活性、近曲和远曲肾小管细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（P<0.01）;SOD组肾小球和近曲、远曲肾小管细胞凋亡数明显少于模型组（P<0.01）。结论：ADR肾病病鼠的发病与肾小球、近曲和远曲肾小管细胞凋亡有关,氧自由基（OFR）可能通过上调诱导细胞凋亡的基因蛋白表达,下调抑制细胞凋亡的基因蛋白表达而引起细胞凋亡。     

细胞凋亡和Fas/FasL表达在移植肾急性排斥时意义

目的:探讨移植肾急性排斥(AR)时细胞凋亡与Fas和Fas配体(FasL)表达的作用及其临床意义.方法:分别用原位末端标记技术 (TUNEL法)和免疫组织化学方法检测23例移植肾AR标本中细胞凋亡和Fas/FasL的表达.结果:细胞凋亡和Fas/FasL表达主要在AR移植肾小管上皮发生,且凋亡指数和Fas/FasL表达与肾组织病理损伤程度平行,与正常肾对照组和移植肾功能稳定组比较差异有统计学意义( P <0.01).结论:肾小管上皮细胞凋亡在AR所致的移植肾损伤中起重要作用,Fas/FasL系统可能参与移植肾AR,是造成肾小管上皮细胞凋亡的重要因素.TUNEL法检测细胞凋亡可作为判断移植肾病理变化和预后的重要指标.     

肝癌中细胞凋亡相关基因的表达及其意义

目的　为了探索肝癌发生中细胞凋亡相关基因所起的作用 ;方法 :利用免疫组化法 ,检测肝癌中bcl 2、bax和c myc基因的表达 ;结果 :肿瘤发生时 ,肝癌组织中bcl 2基因表达增强 ,抑制细胞凋亡 ;bax表达降低 ,促细胞凋亡的作用下降 ;c myc表达增强 ,其刺激细胞凋亡的作用可能消失。结论 :肝癌发生过程中 ,bcl 2、bax和c myc基因相互协调作用 ,细胞凋亡作用降低 ,使细胞增殖维持一定状态。     

肾细胞癌中抑癌基因PTEN的表达及生物学意义

目的 :研究抑癌基因PTEN在肾细胞癌的表达及其生物学意义。方法 :应用免疫组织化学S P法检测 5例正常肾组织、18例癌旁肾组织和 40例肾细胞癌组织中抑癌基因PTEN的表达。结果 :5例正常肾组织和 18例癌旁肾组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,二者PTEN蛋白的表达强度、阳性细胞的分布形式无差异。抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达不同于正常肾组织和癌旁肾组织 ,12 5 %的肾细胞癌呈PTEN蛋白阴性 ;17 5 %的肾细胞癌PTEN蛋白呈弱阳性 ;70 %的肾细胞癌PTEN蛋白呈阳性或强阳性 ,与癌旁组织PTEN蛋白的染色强度无差异。PTEN蛋白阴性的肾细胞癌 ,肾门淋巴结转移率为80 % ;PTEN蛋白阳性的肾细胞癌 ,肾门淋巴结转移率为 2 0 %。PTEN蛋白阴性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率与PTEN阳性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :肾细胞癌中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和异常 ;抑癌基因PTEN的表达异常可能与肾细胞癌的发生、发展有关 ,抑癌基因PTEN是肾细胞癌的一种新的相关基因。     

细胞凋亡及其基因调控

１细胞凋亡的概念及其生物学意义细胞凋亡（ａｐｏｐ－ｔｏｓｉｓ）的概念,首先是由英国病理学家Ｋｅｒｒ等［１］在１９７２年提出的,用以描述一种在形态学上有别于细胞坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）的细胞死亡过程。但在相当长的时间内这一认识没有引起人们的重视,直至８０年代末,随着细胞生物学、遗传学、分子生物学等发展,对细胞凋亡的本质才有逐步深入的认识。凋亡源于希腊语,指秋叶调落而言,其语源是“ａｐｏ＝脱离”与“ｐｔｏｓｉｓ＝落下”,秋天落叶是自然现象,是为了防止冬天水分过多蒸发以备来春生长,具有积极意义。细胞凋…     

孕激素对更年期雌性大鼠脾细胞凋亡及相关基因的调控作用

为了解孕激素对更年期雌性大鼠脾细胞凋亡及相关基因的调控作用。首先通过应用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪测定脾细胞凋亡率;通过RT-PCR检测脾细胞凋亡基因Bcl-2、Bax的表达;RIA法测血孕酮(P)水平。结果发现更年期组血孕激素水平明显低于青年组和孕激素组(P<0.01),孕激素组与青年组相比差别无显著意义(P>0.05);更年期组大鼠脾细胞凋亡率高于青年组(10.3%和7.7%,P<0.05),促凋亡基因Bax的转录水平也高于青年组;孕激素组脾细胞的凋亡率与更年期组比较无显著差异,孕激素组促凋亡的Bax基因转录水平高于更年期组大鼠(P<0.01),而Bcl-2基因未见显著差异。研究结果提示,衰老过程中脾淋巴细胞凋亡增加,并受到相关基因的调控,孕激素治疗未能逆转更年期雌性大鼠脾细胞凋亡的增加,且使更年期大鼠脾细胞促凋亡的Bax基因表达上调。     

细胞凋亡的基因调控及应用展望

细胞凋亡的基因调控及应用展望１苏长青综述２龚西马俞审校作者单位：１南京八一医院电镜室，南京２１０００２２安徽医科大学病理学教研室，合肥２３００３２目前，虽然对细胞凋亡的激发与抑制的详细机制还不十分清楚，但已有许多研究资料证实，有多种基因参与了细胞凋亡...     

细胞凋亡相关基因研究进展

细胞凋亡现象由于广泛地存在于个体发生过程及免疫机制中，且与抗癌、抗衰老、防治ＡＩＤＳ等密切相关，因而引起越来越多科学家们的重视，对其的研究也已推进到分子水平。通过分子生物学技术的应用，对细胞凋亡相关基因的研究也不断深入，本文主要综述了近年来细胞凋亡相关基因的研究进展。     

p19ARF对白血病细胞增殖与凋亡的影响

摘要目的:克隆正常人p19ARF基因,探讨其对肿瘤细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法:用流式细胞术、MTT测定及末端标记观察p19ARF基因对白血病细胞HEL和K562的作用。结果:将p19ARF导入HEL细胞后可明显抑制细胞繁殖,细胞周期被阻滞在G1期并可导致部分细胞凋亡。但是p19ARF对于p53基因突变的K562细胞的增殖和细胞周期没有明显的影响,也不能诱导其凋亡。结论:p19ARF可显著抑制人白血病细胞的增殖,其抑制作用依赖于p53基因的存在。