江苏淮阴地区单采浆献血员员丙型肝炎病毒分型及发病情况

目的了解江苏淮阴地区单采浆献血员丙型肝炎病毒(HCV)感染后发病情况和病毒基因分型.方法应用ELISA法及RT-nestedPCR法检测67例单采浆献血员感染HCV后抗-HCV和HCVRNA,并用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)进行病毒基因分型.结果67例单采浆献血员,在感染HCV后,急性丙型肝炎发病率为17.9%(12/67),最终发展成慢性丙型肝炎者49.3%(33/67),HCV慢性持续感染68.8%(46/67).HCV基因分型1b/Ⅱ型占95.5%(64/67),2a/Ⅲ型1.5%(1/67),1b/2a混合型3.0%(2/67).结论淮阴地区单采浆献血员HCV感染以1b/Ⅱ型为优势株,慢性化比例高.     

丙型肝炎病毒基因NS5区酶切分型研究

目的：了解丙型肝炎病毒（HCV）感染的基因型及其与临床的关系。方法：用逆转录套式聚合酶链反应（RT－PCR）和限制性片断长度多态性（RFLP）分析的方法,对78例HCV感染患进行HCV NS5区基因分型。结果：HCV1b型感染71例（91％）,HCV2a型7例（9％）,未发现其它基因型;丙型肝炎患有无输血史,是否重叠HBV感染,其基因分型构成比均无显性差异（P＞0．05）;1b型HCV血清ALT异常（63．4％）明显多于2a型（14．3％）（P＜0．05）。结论：本组HCV感染的基因型多数为1b型,少数为2a型,1b型更易致肝细胞损伤,并可能与活动性肝病有关。     

丙型肝炎病毒基因NS_5区酶切分型研究

目的 :了解丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与临床的关系。方法 :用逆转录套式聚合酶链反应 (RT PCR)和限制性片断长度多态性 (RFLP)分析的方法 ,对 78例HCV感染患者进行HCVNS5区基因分型。结果 :HCV 1b型感染 71例 (91% ) ,HCV 2a型 7例 (9% ) ,未发现其它基因型 ;丙型肝炎患者有无输血史、是否重叠HBV感染 ,其基因分型构成比均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;1b型HCV血清ALT异常者 (6 3.4% )明显多于 2a型(14.3 % ) (P <0 .0 5 )。结论 :本组HCV感染的基因型多数为 1b型 ,少数为 2a型 ,1b型更易致肝细胞损伤 ,并可能与活动性肝病有关     

中国东北地区HCVRNA阳性血清RT－PCR产物的RFLP分型

为了解东北地区ＨＣＶ感染的基因型，对东北地区４５例ＨＣＶＲＮＡ阳性血清的ＰＣＲ产物用ＲＦＬＰ分析进行基因分型，结果：ＨＣＶⅡ型占８２．２％，Ⅲ型占１５．６％，Ⅱ／Ⅲ混合型占２．２％型。与国内其它地区ＨＣＶ基因型构成比无显著性差异。证明东北地区ＨＣＶ感染也以Ⅱ型为主。     

中国东北地区HCV RNA阳性血清RT—PCR产物的RFLP分型

为了解东北地区ＨＣＶ感染的基因型，对东北地区４５例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清的ＰＣＶ产物用ＲＦＬＰ分析进行基因分型，结果：ＨＣＶⅡ型占８２．２％，Ⅲ型占１５．６％，Ⅱ／Ⅲ混合型占２．２％型。与国内其它地区ＨＣＶ基因型构成比无显著性差异。证明东北地区ＨＣＶ感染也以Ⅱ型为主。     

贵州地区丙型肝炎病毒基因分型的研究

目的：了解贵州地区丙型肝炎病毒（HCV ）基因型的分布特点及其与感染途径、性别、年龄因素的关系。方法在198份抗HCV抗体和HCV RNA均阳性的血清标本中,分别提取HCV RNA ,通过逆转录巢式PCR（RT nested-PCR）扩增C基因的羧基端至E1基因的氨基端长度为474 bp的片段,测定其核苷酸序列,与GenBank中已知的 HCV序列进行系谱分析,确定HCV基因亚型。结果198例患者中,HCV 1a型4例（2．0％）;1b型例71例（35．9％）;2a型9例（4．6％）;3a型29例（14．7％）,3b型47例（23．7％）,6a型37例（18．7％）,6d型1例（0．5％）。各基因型在男女性别分布比较,差异无统计学意义（χ2＝6．518, P＝0．885）;不同年龄人群 HCV基因型分布比较,差异有统计学意义（χ2＝49．056,P＝0．005）;不同感染途径人群 HCV基因型分布比较,差异有统计学意义（χ2＝99．245,P＝0．005）。结论贵州地区 HCV 基因型主要为1b型,其次为3b、6a、3a型,同时还存在1a、2a和6d等基因型。HCV基因型与其感染途径有关,基因亚型呈现多样性。     

乙型肝炎病毒毒株X基因/C基因启动子的热点变异

目的ＨＢＶ／Ｘ基因存在调控ＨＢＶ复制的调节序列,Ｘ基因变异将影响这些调节序列功能,研究中国ＨＢＶ毒株Ｘ基因／Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区的变异情况。方法设计ＢＣＰ下游反义链错配引物,将点突变附近的一个碱基（ｎｔ１７６７）由Ａ→Ｔ,则正好可在ＢＣＰ变异株中引进一个ＢｃｌＩ（Ｔ↓ＧＡＴＣＡ）酶切位点,结合限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）筛检１４３例中国人感染的ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区变异,并与前Ｃ区变异比较。结果１１４例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性ＨＢＶ感染者,ＢＣＰ区和／或前Ｃ区变异者４９例（４３％）,ＢＣＰ变异者３７例（３２％）。ＢＣＰ变异无论在ＨＢｅＡｇ阳性或阴性慢性肝炎病例的发生率均显著高于慢性ＨＢＶ无症状感染者。ＢＣＰ可与前Ｃ终码变异共存或单独出现。结论在中国ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区存在热点变异。ＨＢＶ毒株ＢＣＰ变异可能影响ＨＢＶ前Ｃ基因组ｍＲＮＡ转录,是ＨＢＶ感染持续和肝病变进展的原因之一。     

PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较5

目的：探讨PCR与ELISA2种方法检测丙型肝炎病毒和惭型肝炎病毒的差异和临床意义。方法：随机抽取无偿献血者标本300份，分为ALT升高组和ALT正常组，用ELISA法检测抗－HCV和HbsAg，用RT－PCR检测HCV－RNA和HBV－DNA。结果：抗－HCV阳性标本26例阳性率为8．7％，经RT－PCR检测，HCV－RNA均为阳性，抗HCV阴性的标本中有2例HCV－RNA为阳性。HCV－RNA的阳性率为16％，2种方法检测结果差异有统计学意义（P＜0．01）；300份标本中HBsAg阳性和HBV－DNA阳性比率分别为11．3％和12．7％，两者无明显差异（P＞0．05）。结论：ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象，应用RT－PCR检测HCV－DNA利于早期诊断，也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法。     

丙型肝炎病毒基因分型检测方法的研究

丙型肝炎病毒(HCV)是一极易变异的正链RNA病毒，因其易变异及含量低等原因，常能逃避机体的免疫应答使感染慢性化。HCV存在多种基因型，而不同基因型与HCV感染的临床表现、预后、干扰素疗效、肝硬化及肝癌的关系等均有一定相关性。因此HCV基因型别的研究对丙肝慢性化的作用以及研制有效的疫苗等，均具有重要的     

乌鲁木齐地区不同人群中丙型肝炎病毒检测报告

我们从1994年6月至1997年5月,应用抗-HCV第二代酶联免疫试验,对乌鲁木齐地区不同人群进行了血清抗-HCV检测,现将结果报告如下。材料与方法一、资料来源:收集乌鲁木齐地区不同人群血清标本3012人份,其中: 1.健康人群480人,为HBsAg阴性、肝功能正常,无肝炎病史及无输血、手术史的健康体检者。 2.中学生组360人,为随机抽取的乌鲁木齐地     

广西地区丙型肝炎病毒的基因分型及其临床意义

目的：探索广西地区丙型肝炎病毒（HCV）基因型的分布特征。方法：收集广西地区137例HCV—RNA阳性患者的血清样本,采用逆转录巢式PCR法扩增HCVNS5B区段,对PCR终产物纯化测序,测序结果与Genbank中的标准株全基因序列比对,并构建HCVNSSB区段系统进化树。结果：广西地区137例样本中,主要基因型为1b型（58．4％）,其次是6a型（12．4％）,3b型（10．2％）,la型（7．3％）,2a型（7．3％）,3a型（4．4％）。进一步分析表明,HCV基因型分布与性别无关（P〉0．05）,而与年龄有关（P〈0.05）,3型及6a型主要见于年轻患者。结论：构建HCVNSSB区段系统进化树能得到准确的HCV基因型;广西地区HCV基因型呈多样化,以1b型为主,6a型和3b型次之,且新发现6例3a型;基因分型为不同基因型的HCV感染者的治疗和疗效预测提供了理论依据。     

逆转录—多聚酶链反应检测丙型肝炎病毒RNA方法的建立及实…

对逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ）的方法学进行了探讨，逆转录与多聚酶反应是否在同一反应管内进行，对ＨＣＶＲＮＡ检测结果没有明显影响，但在操作难易程度，ＴａｑＤＮＡ聚合酶的选择等方面有差别，在防止污染的前提下，套式ＰＣＲ可提高ＨＣＶＲＮＡ检出率（７．８３％）这对于极低水平ＨＣＶ感染的诊断十分重要，本文对受检标本的贮存方法也进行了初步探讨。     

献血员、血透及肝病患者丙型肝炎病毒基因分型

探讨本地区丙型肝炎病毒感染者的基因分型。方法应用逆转录聚合酶链反应进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测,并对其阳性产物进行ＨＣＶ非结构５区的限制性片段长度多态性分析,结果：安徽省丙型肝炎患者ＨＣＶ基因型有五种,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅱ／Ⅲ型,其构成比分别为０．５３％、７５．６６％、１３．２３％、０．５３％、６．３５％。丙肝患者不同病种与ＨＣＶ基因型分布差异无显著性,献血员与输血后丙型肝炎患者间分布差异无显著性,血透     

2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒基因组非结构4区全长序列的扩增、克隆及分析

目的 获得2a／Ⅲ型丙型肝炎病毒（HCV）基因组全长非结构（NS）4区克隆并作序列分析。方法 用限制性长段长度多态性分析（RFLP）基因分型方法筛选出2a／Ⅲ型HCV一株。为了获得该毒株全长NS4区基因序列，依据代表株序列的NS3区之′末端及NS5区之5′末端相对保守区域合成引物，以RT－nseted-PCR方法扩增一段1.3kb的片段cDNA；将此片段插入pUC19质粒载体。结果 克隆了丙型肝炎基因组非结构NS4区全长基因，构建了pUC-NS4重组体，对重组体进行酶切鉴定，克隆的cDNA与预计的片段大小相符，并作序列测定。结论 获得全长NS4区基因克隆，经序列分析表明，与日本HC－J6有较高的同源性（92.1%）。     

乙型肝炎病毒基本核心启动子T1762A1764 联合突变的临床意义

目的:研究乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)基本核心启动子(BCP)T^1762A^1764联合突变情况及其临床意义。方法:采用聚合酶链反应(PCR)与限制性长度片段多态性分析(RFLP)相结合，检测130例乙型肝炎患者BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764碱基G→A联合突变。结果：HBeAg( )和HBeAb( )两组患者中BCP T^1762A^1764联合突变率的不同频率分别为慢性乙型肝炎患者(Chronic hepatitis B，CHB)40．0％和85．7％，无症状携带者(Asymptomatic carrier，ASC)22．2％和65．0％，献血员为5％。BCP T^1762A^1764双点联合突变组HBV-DNA≥10^5 cps／ml检出例数81例(96．4％)，非突变组HBV-DNA≥10^5 cps／ml检出例数25例(54．3％)。结论：BCP T^1762A^1764联合突变与乙型肝炎的发生、发展以及预后有关，可能是CHB与ASC患者HBeAg(-)的原因之一，可促进乙肝病毒繁殖。对慢性乙型肝炎患者检测HBV BCP T^1762A^1764联合突变有一定的临床意义。     

湖北省不同年份汉坦病毒的RT-PCR检测及分型

目的：探讨湖北省不同年份引起肾综合征出血热的汉坦病毒的主要型别，为进一步研究该型汉坦病毒的基因变异打下基础。方法：根据汉坦病毒M基因片段G1编码区核苷酸序列设计I型和Ⅱ型分型引物，利用RT—PCR对105份不同年份的病程在7日以内的肾综合征出血热(HFRS)患(经临床诊断和ELISA确诊)血清标本进行检测及基因分型，并对扩增出的基因片段选用3种限制性内切酶AluI、RsaI、MboI进行酶切分析。结果：用I型引物通过：RT—PCR检测75份血清标本(1996～2000年)和30份血清标本(1986～1987年)的阳性率分别为77．3％和10％，而用Ⅱ型引物检测前阳性率为8．0％，后均为阴性。对4份I型引物扩增产物用3种限制性内切酶进行酶切分析，发现4份阳性产物其限制性片段长度多态性均与I型汉坦病毒标准株76～118完全不同，但其中3份与I型汉坦病毒湖北地方株HV114相同，1份与HV114不完全相同。结论：不同年份引起湖北地区HFRS的主要毒株均为I型汉坦病毒(HTN)湖北地方株。     

某地区吸毒人员丙型肝炎病毒的流行病学和基因分型研究

目的：了解吸毒人群中丙型肝炎病毒（HCV）的流行和基因分布现状,探索HCV的传播规律。方法：采集本市强制戒毒所576份吸毒人员和本站体检的从业人员210份血清标本,用ELISA法对所有标本进行抗HCV的检测;检出抗HCV阳性的血清进一步用特异性引物RT－PCR法进行基因分型。结果：576份标本中,经血途径（静脉吸毒、共用注射器）吸毒或有输血史和用血制品史的吸毒者,其抗HCV检出率（13．8％）明显高于经口吸毒者（6．3％）,说明静脉吸毒、共用注射器吸毒、用血制品、输血都是感染HCV的危险因素。经口吸毒者抗HCB检出率明显高于从业人员,提示经口吸毒在传播HCV上具有重要意义。此外,本地籍吸毒者的抗HCV检出率（5．7％）明显低于外省吸毒者（27．7％）、外省有血途径感染机会的吸毒者,83．3％都感染了HCV,本地有同样途径有吸毒者,仅有8．6％感染了HCV;这可能与外省有关城市的高感染率有关。结果还显示,山西省吸毒人群的HCV基因型的分布与从业人员较一致,均以1b型为主（78．9％）,其次为2a型（15．8％）和1b/2a混合型（5．3％）;未检出1b型、2b型和3a型。结论：该吸毒人群中HCV基因以1b型占优势。其分布与南方城市和本省的其他人群相近^[6]。血途径仍是HCV感染的主要途径,但经口吸毒在HCV传播上的重要意义应引起重视。     

延边地区341例慢性丙型肝炎病毒基因分型的检测临床观察

[背景]观察延边地区慢性丙型肝炎病毒(HCV)基因分型情况.[病例报告]采用荧光PCR法检测HCV RNA含量,并对含量≥104 U/mL的341例标本进行HCV基因分型检测.结果见,慢性HCV基因Ⅰ型阳性的朝鲜族和汉族分别为48,68例,阳性率分别为37.2%,32.1%,两者间差异无统计学意义(χ~2=0.942,P>0.05);慢性HCV基因Ⅰ型阳性的男性和女性分别为97,19例,阳性率分别为36.7%,24.7%,两者间差异有统计学意义(χ~2=3.867,P<0.05).[讨论]延边地区朝鲜族和汉族慢性HCV基因Ⅰ型感染阳性率间无明显差异,但性别间有显著差异.