Livin、PTEN基因在卵巢癌中的研究进展

细胞凋亡蛋白(IAPs)家族由8个成员组成,其中包含了Livin基因,与恶性肿瘤的发生密切相关~([1])。近年来,抗凋亡抑制家族中的Livin基因是研究的热点,在细胞凋亡和细胞周期调控中发挥重要作用,与卵巢癌的关系密切。PTEN基因是第一个具有双磷酸酶活性的肿瘤抑制基因,在调节细胞生长、凋亡、黏附迁移方面发挥着重要作用,与卵巢癌也有着不可分割的联系。本综述通过查阅大量文献,介绍了Livin基因及PTEN基因,并讲述了Livin基因及PTEN基因在卵巢肿瘤中表达与预后的关系,以及Livin基因与PTEN基因的相关性。     

凋亡抑制蛋白Livin在消化系肿瘤中的研究进展

消化系肿瘤是临床上最常见的恶性肿瘤,是多种基因联合作用的结果。Livin作为凋亡抑制蛋白家族的新的一员,能直接抑制凋亡的核心物质caspase蛋白酶的活性,从而抑制细胞凋亡。Livin在消化系恶性肿瘤中呈高表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。以Livin为靶点的基因治疗为消化系肿瘤的治疗提供了一个新的方向。现对Livin的分子结构、作用机制及其在消化道肿瘤中的研究进展等方面进行综述。     

Livin与Caspase-9、p53与胃癌关系的研究进展

胃癌的发生是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程.通过研究Livin、caspase-9、p53的生物学特性、作用机制、与胃癌的关系揭示Livin与caspase-9、p53在胃癌发生发展中的作用机制.Livin在胃癌组织中的表达与caspase-9的表达呈负相关,而与p53呈正相关,提示抑癌基因p53的突变和Caspases-9蛋白抑制其介导级联激活反应引起细胞凋亡作用,干扰Livin在胃癌组织中上调或下调机制,影响Livin抗细胞凋亡作用和机制,可能在胃癌的发生发展中起着重要作用.因此研究Livin与caspase-9、p53之间的关系,为肿瘤的早期诊断、基因治疗和细胞治疗提供了新的靶点,为胃癌的检测和治疗提供科学依据.     

Livin在膀胱癌中的研究进展

Livin作为凋亡抑制蛋白家族（ IAP）中的新成员,有抑制细胞凋亡的作用,在许多肿瘤组织中高表达,与肿瘤发病机制密切相关。近年来,许多研究证明Livin与膀胱癌的发生、发展及其复发有密切相关性,本文就Livin的抗凋亡机制及其在膀胱癌诊断和治疗中的研究进展作一综述。     

凋亡抑制基因Livin与消化系统肿瘤的研究进展

肿瘤细胞获得凋亡抗性是肿瘤发生发展的重要基础。凋亡抑制基因Livin在消化系统肿瘤中高表达,参与肿瘤细胞凋亡、细胞运动、信号转导、自然免疫等方面。本文对近年来相关文献进行检索,就Livin 基因的分子结构、信号通路、在消化系统肿瘤中的研究现状做一综述,并对其在该领域的研究前景进行展望。     

Livin在肾癌组织中的表达及意义

【目的】研究凋亡抑制蛋白Livin在肾癌组织中的表达及其与肿瘤病理分级、临床分期之间的关系。【方法】采用免疫组织化学SP法,检测75例肾癌和10例正常肾组织中Livin的表达情况,并探讨其与肿瘤病理分级、临床分期之间的关系。【结果】Livin在10例正常肾组织中均不表达,而在肾癌组织中的表达率为52%。Livin的表达与肾癌的病理分级无明显相关,而与临床分期显著相关。【结论】凋亡抑制因子Livin和肾癌的发生、进展有关,可以用来作为判断肾癌预后的一项重要指标,并为肾癌的基因治疗提供新的靶点。     

胃癌组织中Livin与caspase-9、p53关系的研究进展

胃癌的发生是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程。Livin在胃癌组织中的表达与caspase-9的表达呈负相关,而与p53呈正相关,提示抑癌基因p53的突变和caspases-9蛋白抑制其介导级联激活反应引起细胞凋亡作用。干扰Livin在胃癌组织中上调或下调机制,影响Livin抗细胞凋亡作用和机制,可能在胃癌的发生和发展中起着重要作用。因此,研究Livin与caspase-9、p53之间的关系,为肿瘤的早期诊断、基因治疗和细胞治疗提供了新的靶点,为胃癌的检测和治疗提供科学依据。     

Livin在肿瘤治疗过程中的研究进展

Livin属于凋亡蛋白抑制家族成员之一,其表达与肿瘤的发生、发展密切相关,肿瘤的发生是细胞增殖与凋亡失衡所致。一旦发生凋亡抑制,细胞得以生存和增殖,最终就会导致肿瘤的发生。本文就近年来Livin对抗细胞凋亡机制、在肿瘤中的表达、在抗肿瘤治疗中的成果及展望等方面的研究进展作一综述。     

siRNA沉默Livin基因对顺铂诱导LiBr细胞凋亡及增殖抑制敏感性的影响

目的 为探索沉默Livin基因联合化疗药物提高恶性黑素瘤疗效的可能性和初步机制.方法 在体外以恶性黑素瘤LiBr细胞为研究对象.以低剂量顺铂作用于siRNA沉默Livin后的LiBr细胞.观察沉默Livin基因后LiBr细胞对顺铂诱导的凋亡及增殖抑制敏感性的影响.结果 经TUNEL法和Annexin V-FITC/PI双标法检测凋亡、Western blot检测caspase-3蛋白表达和MTT检测细胞增殖.结果 显示,与单独应用siRNA-3、顺铂相比,siRNA-3联合顺铂可显著诱导细胞凋亡、提高caspase-3活化、抑制细胞增殖.结论 siRNA沉默Livin基因后可明显增加LiBr细胞对顺铂诱导凋亡及增殖抑制的敏感性,恶性黑素瘤的化疗耐药与Livin高表达引起的凋亡抑制密切相关.     

新的凋亡抑制蛋白Livin的研究及临床意义

细胞凋亡是由多种因子介导的细胞主动死亡的过程,对机体或组织维持内环境的稳定和生物体的生长发育、生命周期、衰老死亡都有着重要的作用。凋亡抑制也是肿瘤发生的重要机制,凋亡通路的紊乱、促进凋亡因子的抑制、凋亡抑制因子过表达以及凋亡基因的表达失控都会导致肿瘤的发生、发展。而且,凋亡紊乱还导致肿瘤细胞对化疗药物的抵抗。在肿瘤的治疗过程中如何促进肿瘤细胞凋亡已经引起了人们极大的研究兴趣。近年来,凋亡抑制蛋白引起人们的高度重视,Livin作为一种新发现的凋亡抑制蛋白(IAP)抑制细胞凋亡,与肿瘤的发生、发展及预后相关,将为…     

蟾蜍毒素诱导结肠腺癌细胞HT-29凋亡中对相关蛋白的影响

目的 探讨蟾蜍毒素诱导结肠癌细胞株HT-29凋亡及其机制.方法 MTI检测蟾蜍毒素对结肠腺癌细胞HT-29增殖抑制;瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学变化;流式细胞术分析细胞凋亡;Western-Blot检测livin、Bcl-2、Bax及Capase-3蛋白的表达.结果 蟾蜍毒素抑制HT-29细胞增殖,呈时间、剂量依赖关系;蟾蜍毒素诱导HT-29细胞凋亡,形态学观察到典型的凋亡小体;流式细胞仪检测到明显亚二倍体凋亡峰;蟾蜍毒素诱导细胞凋亡过程中下调livin、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,并活化Caspase-3蛋白.结论 蟾蜍毒素诱导HT-29细胞凋亡可能与下调livin、Bcl-2蛋白、上调Bax蛋白表达并活化Caspase-3有关.     

胶质瘤U251细胞及其干细胞抗凋亡与多重耐药基因的关系

目的利用培养成功的U251胶质瘤干细胞,探讨其抗凋亡和耐药基因的表达差异。方法WST-8法检测胶质瘤干细胞增殖活性,实时荧光定量RT-PCR技术检测Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP1、MRP3 mRNA的表达。结果单层培养的U251细胞比胶质瘤干细胞表现出更强的增殖活性;U251胶质瘤干细胞Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量都有不同程度的升高,而MRP-3 mRNA表达量降低。结论U251胶质瘤干细胞抗凋亡和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量有不同程度的升高,提示胶质瘤干细胞比较其同源的肿瘤细胞具有更强的耐药性,这可能是肿瘤耐药的机制。     

吗啡对乳腺癌MCF-7细胞生存素及livin表达的影响

目的:探讨吗啡对人乳腺癌MCF-7细胞生存素(survivin)和livin的表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MCF-7细胞以1×103个/ml密度接种在6孔板内,随机分为对照组,0.1μmol/L吗啡组,1.0μmol/L吗啡组。于吗啡孵育24 h时,分别采用RT-PCR法和蛋白质印迹法测定细胞内生存素及livin mRNA及蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡改变;于吗啡孵育24,48及72 h时采用MTT法检测细胞增殖改变情况。结果:与对照组比较,0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组生存素和livin蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组细胞增殖降低而细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:吗啡通过下调MCF-7细胞生存素和livin的表达,从而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。     

胶质瘤TJ905细胞及其干细胞抗凋亡与MRP基因的关系

目的 从人脑胶质瘤细胞TJ905中分离、培养肿瘤干细胞,并探讨其生物学特性及其抗凋亡和耐药基因的表达差异.方法 TJ905细胞经免疫磁珠分离获取CD133+细胞,用无血清培养方法获得肿瘤干细胞球,用含有10%的胎牛血清培养基诱导分化,分化前后分别做兔抗人巢蛋白抗体(nestin)、鼠抗人微小管相关蛋白β(tubulin-β)、兔抗人胶质纤维酸性蛋白质(GFAP)、免疫细胞化学荧光染色,WST-8检测干细胞增殖活性,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测Livin、Livinα、Livinβ、生存素和MRP1、MRF3的表达,并观察肿瘤干细胞形态学改变.结果 TJ905细胞中含有少量CD133+细胞,约为0.21%,这些细胞具有典型的干细胞特性,nestin染色为阳性;在无血清培养基中呈悬浮球样生长,能够自我更新和增殖,在有血清培养基中能够分化,tubulin-β、GFAP染色为阳性.TJ905干细胞球Livin、Livinα、Livinβ、生存素和MRP-1、MRP-3 mRNA表达量较TJ905单层培养细胞表达量都有不同程度的降低.结论 TJ905细胞中含有少量肿瘤干细胞,TJ905干细胞球抗凋亡和MRP基因表达量较TJ905单层培养细胞表达量都有不同程度的降低,提示肿瘤干细胞在肿瘤耐药机制中发挥的作用不尽相同,也不总是造成肿瘤耐药的惟一因素.     

Livin和bcl-2 p53基因在宫颈癌组织中表达相关性的初步研究

目的:探讨新的凋亡抑制基因livin在宫颈癌组织中的表达,及其与bc1-2和p53表达的相关性.方法:应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法),检测livin、bcl-2、p53基因在lO例正常宫颈组织及57例宫颈癌组织中的表达.结果:Livin基因在正常宫颈组织中不表达,57例宫颈癌组织中,40例表达阳性,占70.1%.Livin基因表达阳性率与宫颈癌的病理分级和临床分期有关.宫颈癌组织中p53蛋白表达阳性、阴性者中,livin基因表达阳性率分别为76.7%(33/43)、21.4%(3/14),两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);bcl-2蛋白表达阳性、阴性者中,livin基因表达阳性率分别为87.8%(36/41)、25%(4/16),两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Livin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制,在宫颈癌的发生中起一定作用,其表达与宫颈癌组织中p53、bc1-2蛋白的异常表达密切相关.     

mPEG-CS纳米粒介导livin与survivin小干扰RNA杀伤结肠癌细胞

目的 以mPEG-CS纳米粒作为livin基因和survivin基因的干扰RNA的载体,转染人结肠癌细胞HT-29,观察livin和survivin沉默对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 利用离子交联法,制备粒径约60nm的mPEG-CS纳米粒.利用静电吸附法,以纳米粒混悬液与基因溶液配比为3∶1的条件,构建mPEG-CS-livin shRNA纳米粒、mPEG-CS-survivin shRNA纳米粒以及mPEG-CS-(livin shRNA+surviving shRNA)纳米粒,之后,分别转染进人结肠癌HT-29细胞中.利用RT-PCR和Western Blot分别检测livin、survivin基因和蛋白的表达变化;利用MTT法检测livin、survivin基因表达下调对HT-29细胞增殖的抑制效率;利用Hoechst染色检测livin、survivin基因沉默对HT-29细胞凋亡的诱导.结果 各干扰组均能在mRNA和蛋白水平上有效抑制HT-29细胞中livin、survivin的表达.MTT和Hoechst染色结果显示,联合干扰livin和survivin基因可有效抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,并促进细胞凋亡,且效果均强于单独干扰livin或survivin基因.结论 mPEG-CS纳米粒介导的livin和survivin双基因干扰能有效降低人结肠癌HT-29细胞中livin和survivin基因的表达,抑制HT-29细胞的增殖,并促进HT-29细胞的凋亡,其效果强于单独干扰livin或survivin基因.双基因联合干扰具有协同增强效应.     

siRNA沉默livin基因对食管癌细胞生长与凋亡的影响

目的观察小分子干扰RNA（siRNA）沉默livin基因在食管癌细胞中的表达情况,探讨livin基因对食管癌细胞生长、凋亡的影响。方法自行设计两条针对livin基因的siRNA：livin—sh-1,livin—sh-2,构建相应的表达载体分别转染至对数生长期的食管癌,经G418筛选后采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、MTT、TUNEL分别比较检测转染前后食管癌细胞livin基因的表达。结果siRNA对照组与空siRNA载体组的livinw／β mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）;但转染siRNA组Livinl／2mRNA表达显著降低,明显低于siRNA对照组和空siRNA载体组（P〈0．05）。细胞生长曲线测定经F检验三组间差异无统计学意义。转染siRNA载体沉默livina／β表达,细胞凋亡率显著增加。结论siRNA沉默livin基因能抑制食管癌细胞的生长,促进食管癌细胞的凋亡,livin基因有可能成为食管癌治疗的新靶点。     

凋亡抑制蛋白livin在人胃癌中的表达以及和survivin表达的关系

目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot分析livin和survivin蛋白的表达。结果:40例胃癌组织中livin表达阳性率为47.5%、survivin为60%,而在正常和癌旁组未检出阳性结果;livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05);24例survivin阳性样本中有14例livin呈阳性。结论:livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点,livin表达和survivin表达在本实验中结果显示没有相关性(P>0.05)。     

靶向livin的小分子干扰RNA联合表阿霉素对乳腺癌细胞ZR-75-30凋亡的影响

目的 利用RNA干扰技术阻断livin基因的表达,观察其联合表阿霉素对乳腺癌细胞ZR-75-30凋亡的作用.方法 体外化学合成靶向livin的小分子干扰RNA(siRNA),在脂质体(lipofectamineTM2000)的介导下转染人乳腺癌细胞ZR-75-30.荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后ZR-75-30细胞livin基因表达的变化,流式细胞术检测转染靶向livin的iRNA联合表阿霉素作用的ZR-75-30细胞的凋亡率.结果 靶向livin的siRNA可以有效特异地抑制ZR-75-30细胞livin基因的表达,在mRNA水平上其表达抑制率约为53.66%;在蛋白质水平其表达抑制率约为58.32%,转染靶向livin的siRNA 36h后,靶向livin的siRNA联合表阿霉素可以诱导(15.18±0.05)%的细胞凋亡.结论 靶向livin的siRNA能有效、特异地阻断livin基因的表达,阻断livin基因表达联合表阿霉素可促进ZR-75-30细胞的凋亡.     

凋亡抑制蛋白Livin在结肠癌组织中的表达及与细胞增殖的关系

目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin在结肠癌组织中的表达及与细胞增殖的关系.方法 选取结肠癌患者术后病理标本70例,采用S-P免疫组化法检测Livin基因的表达,并探讨其与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和远处转移等生物学行为及细胞增殖的关系.另取30例癌旁正常的结肠组织作对照.结果 结肠癌组织中Livin基因的阳性率明显高于癌旁正常结肠组织（X^2=12.19,P＜0.01）.Livin基因在结肠癌组织中表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织分化程度无关（P＞0.05）,随原发病灶的浸润深度、淋巴结转移和远处转移呈明显上升趋势（P ＜0.01或P＜0.05）.Livin基因表达阴性的结肠癌组织中PCNA的细胞增殖指数明显低于Livin基因表达阳性的组织（P＜0.05）.结论 Livin基因不仅参与结肠癌的发病进展过程,而且还参与了结肠癌的局部侵袭和转移的病理过程.Livin不仅参与结肠癌细胞凋亡的调控,还促进了细胞的增殖过程,可作为大肠癌临床诊断、转移和放化疗疗效及预后评估的敏感指标.