黄芩苷对Chang Liver细胞CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响

目的 在Chang Liver细胞中观察黄芩苷处理对CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响.方法 在Chang Liver细胞中分别加入DMSO 0.1% (v/v) (溶剂对照) 和不同浓度的黄芩苷 (0.01、0.1和1 μM) 24、36和48h后,用半定量RT-PCR的方法分别检测CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达量的改变.结果 用不同浓度黄芩苷分别处理Chang Liver细胞24和36 h,CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达均呈现出增强的趋势;但是黄芩苷处理48 h后各浓度对CYP3A4和CYP2C9的表达产生显著的抑制效应 (P<0.01) . 结论黄芩苷对细胞中CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达具有影响作用,这种影响作用随药物处理时间不同而表现出双向效应.     

隐丹参酮对细胞色素P450酶CYP3A4和CYP2C9的影响

目的 研究丹参中脂溶性成分隐丹参酮对Chang肝脏细胞细胞色素P450酶（CYP450）CYP3A4、CYP2C9表达的影响,明确丹参主要成分对CYP450酶的作用,以阐明基于CYP450酶隐丹参酮与其他药物间相互作用的分子基础,为临床合理使用含隐丹参酮的丹参制剂提供依据。方法 采用CCK-8法考察隐丹参酮对Chang肝脏细胞活力的影响,以确定药物的给药剂量范围;通过Western bloting法考察隐丹参酮在给药后1、3和7 d对Chang肝脏细胞中CYP3A4和CYP2C9蛋白表达的影响;通过定量RT-PCR法考察隐丹参酮对Chang肝脏细胞中CYP3A4和CYP2C9 mRNA表达的影响。结果 给药1 d,隐丹参酮对CYP3A4蛋白及mRNA表达无显著影响。但随时间延长,给药3 d和7 d,隐丹参酮可抑制CYP3A4蛋白及mRNA的表达（P <0.05）。给药1、3和7 d,隐丹参酮对CYP2C9蛋白及mRNA的表达均无显著影响。结论 连续给予隐丹参酮可抑制CYP3A4 mRNA和蛋白的表达。提示临床在连续使用含隐丹参酮时,需要关注其与CYP3A4底物药物之间可能的相互作用。     

CYP2C9、CYP2A6基因多态性对丙戊酸钠血药浓度的影响

目的：研究CYP2C9、CYP2A6基因多态性对癫痫患儿丙戊酸钠血药浓度的影响。方法：收集单用丙戊酸钠治疗的癫痫患儿,应用荧光偏振免疫法测定丙戊酸钠血药浓度;分别采用直接测序法、巢式PCR法检测CYP2C9、CYP2A6的基因型;应用单因素方差分析研究基因多态性对丙戊酸钠血药浓度的影响。结果：83例癫痫患儿根据CYP2C9、CYP2A6基因型分为3组：强代谢组（CYP2C9*1*1合并CYP2A6*1*1）、中代谢组（CYP2C9*1*3合并CYP2A6*1*1或CYP2C9*1*1合并CYP2A6*1*4）和弱代谢组（CYP2C9*1*3合并CYP2A6*1*4或CYP2A6*4*4）,3组分布频率分别为73.5%、24.1%和2.4%。中代谢组的标准化血药浓度显著高于高代谢组（P<0.05）,低代谢组的标准化血药浓度均数比其他两组高,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：CYP2C9、CYP2A6的基因多态性能影响丙戊酸钠血药浓度,可通过检测基因型选择合适的丙戊酸钠初始剂量。     

CYP2C19、CYP3A4基因多态性与十二指肠球部溃疡疗效的关系

目的检测肝脏细胞色素氧化酶CYP2C19、CYP3A4的基因多态性,并观察不同基因多态性患者予奥美拉唑治疗十二指肠溃疡的疗效,以明确CYP2C19、CYP3A4基因多态性对药物治疗效果的影响。方法65例十二指肠溃疡患者分别检测CYP2C19、CYP3A4基因多态性及幽门螺杆菌（Hp）,予奥美拉唑治疗及根治Hp治疗,观察治疗后腹痛缓解情况,并复查胃镜,观察溃疡缩小情况。结果在65例患者中,CYP2C19t3基因野生型为43例（66．15％）,突变型为12例（18．46％）,杂合型为10例（15．38％）,CYP3A4＊18未见基因多态性。CYP2C19＊3突变型腹痛缓解时间短于野生型及杂合型（P〈0．01）。治疗后2周CYP2C19＊3突变型患者溃疡缩小率大于野生型及杂合型（P〈0.01）,但治疗后4周无明显差异（P〉0．05）。结论在观察病例中可见CYP2C19基因多态性,未见CYP3A4基因多态性,CYP2C19基因多态性影响奥美拉唑治疗十二指肠溃疡的疗效。     

CYP2C19和CYP2C9基因型与苯妥英血药浓度关系的研究

目的　探讨细胞色素氧化酶P4 5 0 2C19(CYP2C19)和CYP2C9基因型对癫痫患者苯妥英血药浓度的影响。方法　对 32例癫痫患者应用变性高效液相技术分析中国人常见的 2个CYP2C19和 1个CYP2C9等位基因变异 ,应用荧光偏振免疫法测定患者苯妥英的血药浓度 ,在进行标准化以排除剂量和体重对血药浓度的影响后 ,分析CYP2C19和CYP2C9基因型和苯妥英血药浓度的关系。结果　服用单一苯妥英药物的 32例患者中 ,CYP2C19 2、CYP2C19 3和CYP2C9 3等位基因频率分别为 31%、8%和 6 %。根据携带CYP2C19和CYP2C9突变等位基因的数量 ,将患者分为基因型为CYP2C19 1/ 1合并CYP2C9 1/ 1的野生型纯合子强代谢者 (EM) ,基因型为CYP2C19 1/ 2或CYP2C19 1/ 3的杂合中间代谢者 (IM) ,基因型为CYP2C19 2 / 2或CYP2C19 2 / 3或CYP2C19 1/ 2合并CYP2C9 1/ 3的突变型纯合子弱代谢者 (PM)。 3组频率分别为 34%、4 4 %、和 2 2 %。并且突变基因携带数量与标准化血药浓度呈正相关。PM患者服用同等剂量苯妥英时血药浓度比EM患者高 34% (P <0 0 1)。结论　苯妥英代谢受CYP2C9和CYP2C19基因调控。根据患者CYP2C19和CYP2C9基因型可以预测患者的药物浓度 ,有利于临床选择适宜的苯妥英初始剂量     

CYP3 A4和CYP2 D6基因多态性对阿片类药物术后镇痛效应影响的研究进展

阿片类药物作为术后镇痛常用药物,其缓解术后疼痛的效果呈现较大的个体差异。国内外多个研究发现,基因多态性是影响阿片类药物术后镇痛效果的重要因素之一。研究表明,细胞色素P450(CYP)是体内参与药物生物转化的主要酶系,其家族中CYP3A4和CYP2D6基因对多种镇痛药的代谢均有关键性作用,CYP3A4和CYP2D6基因多态性通过影响阿片类镇痛药物的代谢速率和活性药物的血药浓度而影响其镇痛效果甚至毒性不良反应作用,因此,本文就CYP3A4和CYP2D6基因多态性对常用镇痛药物的药代动力学和药物效应动力学影响进行总结和介绍,为进一步探索基因多态性对术后镇痛用药的指导意义提供一定的研究方向。     

CYP3A4和CYP286药物诱导剂体外筛选体系的建立

目的构建CYP酶药物诱导剂的体外筛选技术平台。方法利用双荧光素酶报告基因系统，将包含hPXR蛋白识别和结合调控元件的CYP3A4和286启动子序列插入报告基因上游，将表达载体和报告载体共转染HepG2细胞，用含有利福平或DMSO培养基培养48h后裂解进行双荧光素酶活性检测。结果经利福平处理的细胞裂解物荧光素酶比活性值与阴性对照组和溶剂组差异显著。结论本研究构建的CYP3A4和286体外筛选平台，可以有效地用于体外诱导剂的筛选。     

温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9基因多态性分析

目的：研究温州地区汉族人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性分布。方法：采用聚合酶链式反应和测序方法,对287例健康人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性进行分析。结果：温州地区汉族人群的CYP2C19*1、CYP2C19*2和CYP2C19*3三种等位基因的频率分别为65.16%、29.27%和5.57%;CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*2/*2和CYP2C19*3/*3基因型的频率分别为44.95%、33.45%、6.97%、4.18%、10.45%和0.00%,弱代谢率为14.63%;CYP2C9*1和CYP2C9*3等位基因频率分别为97.74%和2.26%,CYP2C9*1/*1和CYP2C9*1/*3的基因频率为95.47%和4.53%,未发现CYP2C9*3/*3。结论：温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9弱代谢率与已报道的汉族人群基本一致,与日本人群相近,显著高于欧美人群。     

注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响

目的 研究注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响。方法 将SD大鼠分成盐酸头孢他美给药组和生理盐水空白组,每组6只,雌雄各半,给药组尾静脉注射盐酸头孢他美50 mg/(kg·d),连续给药7 d,每天2次。HPLC法同时测定CYP450的3种同工酶特异性探针底物在SD大鼠肝微粒体内代谢产物生成量和原型探针底物降解量,判断酶亚型活性变化。分析柱Diamonsil C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm),流速1.0 mL/min。CYP1A2代谢样品测定条件为甲醇(0.1%甲酸)(A)-水(0.1%甲酸)(B),0~5 min: 18%A,5~10 min: 18%~60%A,10~15 min: 60%A,检测波长为247 nm;CYP3A4代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(0.02%甲酸)(B),0~11 min: 40%~60%A,检测波长为223 nm;CYP2E1代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(B),0~10 min: 37%~75%A,检测波长为287 nm。结果 探针底物及其代谢产物在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 7),精密度RSD<6％(n=5),提取回收率83.2%～97.5%。SD大鼠连续注射给予盐酸头孢他美后,CYP3A4的活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),可能存在诱导作用;CYP1A2和CYP2E1的活性与对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)。结论 静注给予盐酸头孢他美能诱导SD大鼠肝微粒体CYP3A4,对CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用。提示经CYP3A4 代谢的药物在临床上与注射用盐酸头孢他美合用时,可能存在潜在药物-药物相互作用。     

中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析

目的：通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据。方法：筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体健康自愿者的血液样本获得基因组DNA,根据单碱基延伸技术通过 GenomeLabTM SNPstreamR 基因分型系统进行SNP分型。结果：本次检测的11个SNP位点在研究人群中全部具有多态性（最小等位基因频率>0.01）,其中7个SNP（RS28624811、RS28670611、RS9623531、RS5758589、RS3735451、RS2246709、RS2404955、RS4646440）位点的等位基因频率在此人群与白种人相比差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：汉族人群可能有继承特定的遗传信息,导致与其他人群具有不同药物代谢率。     

二甲亚砜对细胞色素P450酶3A4和2C9的影响

目的 研究0.01%、0.05%、0.1%二甲亚砜（DMSO）对细胞色素P450（CYP450）酶系中3A4、2C9两个亚型基因及蛋白表达水平的影响。方法 Chang肝脏细胞经处理后,分为空白对照组（仅含培养液）、DMSO组（分别采用0.01%、0.05%、0.1%DMSO处理）、睾酮组（分别采用1、10、100μmol/L睾酮处理）、利福平组（分别采用1、10、100μmol/L利福平处理）、DMSO＋睾酮组（分别采用0.01%、0.05%、0.1%DMSO＋10μmol/L睾酮处理）、DMSO＋利福平组（分别采用0.01%、0.05%、0.1%DMSO＋10μmol/L利福平处理）。利用逆转录定量PCR的方法,测定CYP3A4、CYP2C9基因水平的表达。利用蛋白免疫印迹法,测定CYP3A4、CYP2C9蛋白水平的表达。结果 0.1%DMSO组CYP3A4 m RNA高于空白对照组（P〈0.01）,且0.1%DMSO组CYP3A4蛋白的表达也高于空白对照组。0.01%、0.05%DMSO组CYP3A4 m RNA表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但0.01%、0.05%DMSO组CYP3A4蛋白的表达高于空白对照组。0.01%、0.05%、0.1%DMSO组CYP2C9 m RNA表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,0.01%、0.05%、0.1%DMSO组CYP2C9蛋白表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。0.01%、0.05%DMSO＋10μmol/L睾酮组CYP3A4 m RNA的表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但0.01%、0.05%DMSO＋10μmol/L睾酮组CYP3A4蛋白的表达高于睾酮组。0.01%、0.05%、0.1%DMSO＋10μmol/L利福平组CYP2C9 m RNA的表达与利福平组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但0.01%、0.05%、0.1%DMSO＋10μmol/L利福平组CYP2C9蛋白的表达高于利福平组。结论0.01%、0.05%、0.1%三个浓度的DMSO在体外肝细胞实验中对CYP3A4的表达有一定的影响,而对CYP2C9的表达影响不明显,当DMSO作为药物溶剂的时候,可能会影响药物单用时的实验结果。     

银杏外种皮提取物杀灭钉螺的初步研究

目的：比较银杏外种皮的石油醚提取物与水提物对钉螺的杀灭作用。方法：采用超声萃取和热水浴凹流的方法分别制得银杏外种皮石油醚提取物和水提物浸膏,再用去氯水分别制成不同浓度的药液,采用浸泡法杀灭钉螺,并定时观察灭螺效果。结果：两种提取物的药液均有杀灭钉螺的作用,其中石油醚提取物的杀螺效果尤佳,其浓度为0.125g／L浸泡24h时,钉螺死亡率达100％。结论：用银杏外种皮提取物制备的生药剂杀灭钉螺效果良好,是一种很有开发前景的植物杀螺剂。     

精神分裂症患者CYP2C19、CYP2C9的基因多态性与氯氮平血药浓度的关联分析

目的:探讨CYP2C9和CYP2C19基因多态性与氯氮平代谢个体差异之间的相关性.方法:应用PCR与DNA测序相结合的方法检测精神分裂症患者CYP2C19、CYP2C9基因多态性.应用高效液相色谱测定氯氮平的血药浓度,以阳性和阴性症状量表(positive and negatve symptom scale,PANSS)评分减分率评价药物临床疗效.基因型和等位基因频率分布的两组间比较采用x2检验.组间血药浓度和疗效比较采用ANOVA检验.结果:91例氯氮平治疗的精神分裂症患者,氯氮平血药浓度与CYP2C9 *3、CYP2C19 *2、CYP2C19 *3基因多态性之间没有相关性(P0.05).结论:CYP2C9 *3、CYP2C19 *2和CYP2C19 *3基因多态性与氯氮平血药浓度之间不存在基因剂量关系.     

银杏叶提取物与阿司匹林抗血栓栓塞作用的比较研究

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extracts,GBE)对血栓栓塞的作用及机制,与小剂量阿司匹林对比研究.方法 通过在体电刺激颈动脉制备大鼠血栓栓塞模型,动态观察颈动脉栓塞形成程度同时观察血管栓塞显微照片,研究评价在相当人临床用量的GBE和小剂量阿司匹林对血栓栓塞的抑制作用;采用放免法测定血栓形成大鼠血浆前列环素和血栓素的含量,研究探讨GBE抑制血栓形成的机制.采取冷应激法制备大鼠血液流变学病理模型,测定全血粘度、血浆粘度、血沉和细胞压积指标,研究和评价GBE和小剂量阿司匹林对血液流变学的影响.结果 6.7 mg/kg GBE、20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均使大鼠颈动脉栓塞程度明显减轻,明显对抗电刺激引发的血栓素升高和前列环素水平下降;20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均明显减轻应激状态全血粘度、血浆粘度和细胞压积指标的增高,6.7 mg/kg GBE仅能抑制细胞压积的增高.通过对比分析,9 mg/kg阿司匹林抑制血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,强于6.7 mg/kg GBE组,与20 mg/kg GBE组基本相当.结论 相当人临床用量的GBE对大鼠血栓栓塞有抑制作用,明显弱于小剂量阿司匹林,可对抗血浆前列环素和血栓素的异常变化,对多种血液流变学指标异常增高的影响不明显;剂量提高3倍的GBE,对抗大鼠血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,与小剂量阿司匹林基本相当.     

广东人群CYP2C9等位基因及基因型分布频率

目的了解广东人群CYP2C9等位基因及基因型分布频率。方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术，对100例健康广东人个体进行CYP2C9基因分型。结果CYP2C9＊1及CYP2C9＊3等位基因频率分别为0．965及0．035，未检测到CYP2C9＊2等位基因；基因型CYP2C9＊1／CYP2C9＊1和CYP2C9＊1／CYP2C9＊3的频率分别为0．930、0．070，符合Hardy—Weinberg平衡分布。结论广东人群CYP2C9＊3等位基因频率与国内其他人群及亚洲其他各国人群相比，差异无显著性，而与欧美高加索人群显著不同。广东人群使用CYP2C9底物药时，应进行相应的CYP2C9基因型检测，以指导临床合理用药和个体化医疗。     

宁夏回族人群CYP2C9基因多态性研究

目的了解宁夏回族人群CYP2C9等位基因和基因型分布频率以及与其他不同民族之间的差异。方法通过扩增引进限制性酶切位点（ACRS）和聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术分析CYP2C9基因多态性,并与其他民族CYP2C9基因多态性分布进行比较。结果宁夏回族人群中共检测到2种等位基因,CYP2C9＊1、CYP2C9＊3等位基因的频率分别为0.970、0.030,基因型CYP2C9＊1＊1、CYP2C9＊1＊3的频率分别为0.940、0.060。结论宁夏回族人群CYP2C9＊3等位基因频率与新疆维吾尔人群、欧美地区人群差异有统计学意义,与亚洲其他民族人群相比差异无统计学意义。