肺炎链球菌大环内酯类耐药表型与相关基因的关系

目的了解肺炎链球菌临床分离株红霉素耐药基因的流行情况和耐药表型的关系。方法对42株肺炎链球菌用E-试验和K-B纸片扩散法检测其对10种抗生素的敏感性;用红霉素和克林霉素双纸片协同试验确定其耐药表型;用PCR扩增这些菌株的耐药基因ermB、mefA和mefE。结果 42株肺炎链球菌中耐药基因ermB总检出率为95.2%(40/42),mefE总检出率为26.1%(11/42),未检出mefA基因。耐药基因组合ermB(+)mefE(-)和ermB(+)mefE(+)占95.2%,两者均呈cMLSB耐药表型。ermB(-)mefE(+)占4.8%(2/42),耐药表型为M型。结论耐药基因ermB导致的cMLSB耐药是大环内酯类耐药的主要原因。大环内酯类抗生素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制研究

目的了解肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制和转座子整合酶的流行情况。方法188株红霉素耐药肺炎链球菌，用E试验和K—B纸片扩散法检测其对11种抗菌药物的敏感性；用双纸片法（红霉素和克林霉素）确定其耐药表型；用PCR扩增这些菌株的耐药基因ermB、mefa、mefE、tetM及转座子整合酶基因intTn。结果188株红霉素耐药株中耐药基因ermB总检出率为91．5％（172／188），mefE总检出率为38．3％，未检出mefA基因。97．9Yoo的红霉素耐药株中存在转座子整合酶intTn。耐药基因组合ermB（＋）mefE（-）和ermB（＋）mef（＋），占91．5％，两者均呈cMLSB耐药表型。ermB（-）mefE（＋）占8．5％，耐药表型为M型。结论我院分离的肺炎链球菌大环内酯耐药以errnB介导的cMLS。耐药表型为主。转座子可能在本地区肺炎链球菌耐药基因的水平转移和克隆播散中起重要作用。     

肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性调查及对大环内酯类抗生素耐药机制研究

目的：调查成都地区肺炎链球菌对抗菌药物的敏感性，研究成都地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法：收集2001年9月-2002年9月成都地区临床分离的肺炎链球菌，测定其对13种抗菌药物的耐药性及对大环内酯类抗生素的耐药表型；用聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因ermB和mefA，并对ermB和mefA进行基因序列分析。结果：82株肺炎链球菌中13株对青霉素低度耐药(占15．9％),肺炎链球菌对大环内酯类抗生素和克林霉素表现出较高的耐药率，对红霉素和克林霉素耐药率分别为80．5％(66／82)和68．3％(56／82)。耐大环内酯类肺炎链球菌中,96．4％菌株表现为内在型耐药。标准菌株ATCC49619及16株红霉素敏感菌株均未检测到ermB基因及mefA基因；ermB基因和；mefA基因分别在62和11株耐红霉素肺炎链球菌中检测到，其中7株菌同时检测到ermB基因和mefA基因。所测ermB和mefA基因序列与基因库收录序列高度一致。结论：成都地区临床分离的肺炎链球菌对青霉素耐药率较低，但对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药却非常普遍。ermB基因介导的靶位改变是成都地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的主要耐药机制。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药及传播机制研究

目的 研究上海3所医院临床分离肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制及传播方式。方法收集上海市3所医院临床分离的红霉素耐药肺炎链球菌共118株，用E试验和K-B纸片扩散法检测对12种抗菌药的敏感度；用双纸片法（D试验）确定大环内酯类耐药表型；用PCR扩增检测耐药基因ermB、mefA、mefE、msrD及Tn1545-Tn916家族转座子整合酶基因intTn；用转化试验证实耐药传播方式。结果①118株肺炎链球菌对红霉素的MIC范围为4-256mg／L，其中5．9％对克林霉素敏感，对青霉素不敏感率达72．7％。左氧氟沙星、阿莫西林-克拉维酸对红霉素耐药的肺炎链球菌仍有较好的体外活性；②该组细菌耐药基因ermB检出率为88．1％，mefE、msrD检出率各为50％，未检出，mefA基因，转座子整合酶基因intTn检出率达97．5％。耐药基因组合模式以ermB（＋）reefE（＋）msrD（＋）intTn（＋）和ermB（＋）mefE（-）msrD（-）intTn（＋）为主，两者均为cMLSB型耐药。ermB（-）mefE（＋）msrD（＋）intTn（＋）模式占5．9％，耐药表型为M型。③cMLSB型耐药代表菌株ET37和M型耐药代表菌株RJ324基因组DNA均成功转化敏感株，使之表现红霉素耐药性并可传代。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯抗生素耐药以ermB介导的cMLSB耐药表型为主；大环内酯外排基因有流行趋势，但仅限于起源于肺炎链球菌的，mefE。耐药基因可以转化方式进行传播，转座子可能在本地区肺炎链球菌耐药基因的传播中起重要作用。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况及耐药基因研究

目的调查上海地区肺炎链球菌对红霉素的敏感度，研究肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法对中山医院57株临床分离肺炎链球菌进行红霉素药敏试验；应用聚合酶链反应（PCR）技术对上海4所医院中分离的53株红霉素耐药肺炎链球菌检测耐药基因（ermB，mefA，merE）。结果57株肺炎链球菌中12株（21．0％）敏感，3株（5．3％）中介，42株（73．7％）耐药。53株红霉素耐药肺炎链球菌中，ermB基因、mere基因、mefA基因分别在51株（96．2％）、22株（41．5％）和1株（1．9％）中检测到。其中21株（39．6％）同时检测到ermB基因和mefE基因，1株（1．9％）同时检测到ermB基因和mefA基因，1株（1．9％）未检测到ermB基因、mefE基因或mefA基因。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药率较高。ErmB介导的靶位改变是最常见的耐药机制，mef（特别是mefE）介导外排机制引起者也较常见。     

肺炎链球菌红霉素相关耐药基因与耐药表型的关系

目的:了解肺炎链球菌(Streptococcuspneum oniae,SP)临床分离株红霉素耐药基因的流行状况及和耐药表型的关系。方法:对住院儿童分离到的43株肺炎链球菌进行红霉素药敏试验,并用PCR法检测与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB)、主动外排转运基因(mefA)。结果:43株肺炎链球菌红霉素药敏试验40株耐药(占93%),3株敏感。红霉素ermB基因总检出率为76.7%(33/43),mefA基因总检出率为23.3%(10/43)。3株红霉素敏感的肺炎链球菌均未检出ermB基因和mefA基因;40株红霉素耐药肺炎链球菌ermB基因和mefA基因的PCR检出率分别为82.5%(33/40)和25%(10/40)。共有35株肺炎链球菌检出ermB基因或/和mefA基因,其中单独携带ermB基因的耐药表型为25株(占71.4%);单独携带mefA基因的耐药表型2株(占5.7%);同时携带ermB基因和mefA基因的耐药表型8株(占22.9)%。结论:ermB基因和mefA基因同时表达或单独表达均可导致红霉素耐药,ermB基因表达是儿童肺炎链球菌对红霉素耐药的主要原因,mefA基因表达是造成对红霉素耐药的次要原因。红霉素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

β溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

目的 了解β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的表型和基因型.方法 按CLSI推荐的K-B法测定并判读β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,用D试验检测红霉素诱导β溶血链球菌对克林霉素耐药的表型,并且用PCR方法确定所检测的菌株是否携带的ermB基因和mefA基因.结果 49株红霉素耐药的β溶血链球菌结果显示有35株β溶血链球菌只扩增到ermB基因,有9株只扩增到mefA基因,有3株同时扩增到ermB和mefA基因,有2株没有扩增到ermB和或mefA基因;17株红霉素耐药克林霉素敏感菌株中D试验阳性8株细菌都只扩增到ermB,D试验阴性9株细菌中都只扩增到mefA;红霉素敏感的β溶血链球菌没有扩增到ermB或mefA基因.结论 β溶血链球菌的耐药表型与基因型高度一致,临床上可用PCR方法和D试验检测,D试验检测更为简单方便,临床应该用D试验检测β溶血链球菌的iMLS型耐药.     

A群β溶血性链球菌药敏试验及大环内酯类抗生素耐药基因检测

目的研究我国儿科A群β溶血性链球菌（GAS）临床分离株抗菌药物敏感性情况。方法收集5所儿童医院2005--2006年222株GAS感染的临床菌株，采用琼脂稀释法测定11种抗菌药物的MIC值；诱导试验分析大环内酯类抗生素耐药表型；PCR检测大环内酯类抗生素耐药基因ermB、erm RT和mefA。结果分离株对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药率在93．69％～98．65％，MIC90〉512mg／L；对四环素的耐药率为94．14％；对青霉素、头孢他啶的敏感率高达100％。分离株大环内酯类抗生素耐药以耐大环内酯类、林可酰胺类和链阳性菌素B表型（cMLS）为主，占99．04％，iMLS表型仅2株，未检测到M型；ermB、ermRT和mefA阳性率分别为94．71％、2．89％和0。结论所测儿科GAS感染流行菌株对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药率高，主要耐药机制为ermB编码的23SrRNA甲基化酶导致靶位改变，青霉素类和头孢菌素类抗生素是治疗我国GAS感染首选药物。     

肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药监测及耐药机制研究

目的研究肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素类抗菌素的耐药机制。方法K-B纸片法测定肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药性。对全部红霉素耐药菌株和部分红霉素敏感菌株用聚合酶链反应(PCR)检测ermB和mefA基因。结果97株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药率分别为60.8%、58.8%、0和0。59株红霉素耐药菌株均检出ermB和/或mefA基因,其中34株(57.6%)ermB阳性,18株(30.5%)ermB和mefA同时阳性,7株(11.8%)mefA阳性。5株敏感菌株ermB和mefA基因均为阴性。结论本研究显示肺炎链球菌对泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀高度敏感,而对红霉素和林可霉素则表现出较高的耐药性。肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药机制以ermB基因介导的靶位改变为主。     

葡萄球菌对大环内酯类抗生素耐药及诱导耐药表型与基因型的相关性研究

目的了解葡萄球菌对大环内酯类抗生素生物耐药表型与基因型的符合情况,分析耐药基因检出与生物耐药诱导的关系,并预测细菌耐药流行趋势,从基因水平指导临床合理用药。方法用KB纸片法检测本院2004-2005年分离的136株葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,以聚合酶链反应（PCR）法检测葡萄球菌MsrA、vgb、Sat4、ermA、ermB、ermC、mphA、MefA／E、ereA、ereB10种耐药基因,并将其耐药表型与基因型进行比较。将对红霉素表型敏感而耐药基因阳性的菌株进行诱导,对比诱导前后药敏结果。结果136株葡萄球菌对红霉素耐药的占80．88％,对红霉素和克林霉素同时耐药占43．38％,结果表明葡萄球菌对大环内酯类有较高的耐药率。耐药基因检测结果表明,共检出MsrA、Sat4、ermA、ermB、ermC、mphA、ereB7种耐药基因,耐药基因检出率为83．82％。其中核糖体甲基化酶基因ermC的阳性率最高,占检测基因的67．54％;其次为Sat4、MsrA、ereB、ermA、ermB、mphA,分别占50．00％、28．95％、22．81％、15．80％、9．65％、1．75％。MRSA、MRCNS、MSSA、MSCNS菌株耐药基因的检出率分别为100．00％、90．78％、73．08％、55．55％。11株对红霉素敏感而耐药基因阳性的菌株经红霉素诱导后有9株转为耐药,诱导阳性率为81．82％。结论葡萄球菌对大环内酯类抗生素有较高的耐药性,在部分敏感株中检测出耐药基因,经诱导可产生耐药,提示菌株有潜在耐药性,需特别引起临床的重视。临床微生物实验室应同时开展表型及基因型检测,指导临床更加合理使用抗生素。     

重症监护病房中多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因型及同源性分析

目的分析22株重症监护病房(ICU)中多重耐药鲍曼不动杆菌耐药表型,耐药基因型及基因同源性。方法菌株鉴定采用Vitek-32细菌鉴定仪,药物敏感试验采用K-B法。三维试验检测ESBLs和AmpC酶,协同试验检测金属酶(MBL)。PCR检测各类β-内酰胺酶类、氨基糖苷类抗菌药耐药基因及喹诺酮类相关gyrA基因。脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因同源性分析。结果 (1)对亚胺培南耐药率最低为4.5%,头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低为22.7%,对其他所测抗菌药耐药率均大于90%。(2)产AmpC酶21株占95.5%;产ESBLs和MBL各5株,分别占22.7%。(3)100%携带AmpC酶基因、TEM-1型广谱β-内酰胺酶基因、aacA4氨基糖苷乙酰转移酶基因;aacC1、aadA1型氨基糖苷乙酰转移酶基因各占95.5%;有gyrA型DNA旋转酶基因突变;各1株检测到OXA-23型碳青霉烯酶基因、PER型ESBLs基因和aphA1型氨基糖苷乙酰转移酶基因,分别占4.5%;未检测到SHV型β-内酰胺酶基因、VEB型ESBL基因I、MP型和VIM型金属酶基因、OXA-24型碳青霉烯酶基因。(4)PFGE结果显示20株出现完全相同条带,具有高度同源性,另2株各自为独立株。结论 22株多重耐药鲍曼不动杆菌中存在一个克隆流行株,携带AmpC酶基因、TEM-1型β-内酰胺酶基因及aacA4、aacC1、aadA1型氨基糖苷类修饰酶基因,高产AmpC酶,治疗应首选亚胺培南。     

Mupirocin resistant MRSA in Japan

Mupirocin is a unique antibiotic that is produced by Pseudomonas fluorescens, and is available for elimination of nasal carriage of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). However, there have been many reports that high level mupirocin resistant S. aureus were discovered in Europe, South or North American countries. In Japan, mupirocin has been only available for nasal ointment of MRSA eradication since 1996. After introduction of mupirocin, we have screened mupirocin resistance routinely in our hospital. On January 1998, we had high level mupirocin-resistant MRSA isolated from a nose of a neonate with severe nephrotic syndrome. The mupA was detected by PCR and the mupirocin-resistance could transfer to S. aureus RN2677 by filter-mating with co-transfer of gentamicin, tobramycin, kanamycin and erythromycin. This strain was eradicated after prophylactic use of vancomycin for her nephrectomy. To our knowledge, this is the first isolate of high level mupirocin-resistant MRSA in Japan.     

Distressed and stress resistant nurses

This study examines the relative contribution of personality, coping, and family support to adaptation to stress in nursing. The sample (N = 1,043, mean age = 33.8 years) were nurses from three large public hospitals in Singapore. The findings indicated that stress resistant nurses who adapted to high work stress with good mental health status as measured by the General Health Questionnaire (GHQ-12) developed by Goldberg (1972) had a higher self-esteem and were more internal in locus of control than the distressed nurses who reported poor mental health status under high work stress. The use of negative emotion focused coping was less frequent among the stress-resistant nurses who also had greater supports from family relationships. Discriminant function analysis revealed that behavioral coping (e.g., enhancement of ability and physical health) had greater contribution to stress resistance than cognitive coping (e.g., acceptance of situations or change of perspectives). The findings were discussed with reference to the high level of performance demanded by nursing.     

耐三代头孢菌素的肠道病原菌的增长趋势和耐药谱

目的监测我院2001—2010年与腹泻有关的耐三代头孢菌素肠道病原菌的增长趋势和耐药谱。为本地区的流行病学研究及临床合理用药提供依据。方法通过大便标本培养,致病菌经生化及血清学进一步鉴定到种或群．并以纸片扩散法测定抗菌药物的敏感性。采用WHONET5．3软件对药敏结果进行统计和分析。结果10年分离出219株耐三代头孢菌素的腹泻病原菌,占同期整个肠道致病菌的9．91％,包括沙门菌9株（4．11％）、志贺菌120株（54．79％）、气单胞菌20株（9．13％）、类志贺毗邻单胞菌2株（0．91％）、致泻大肠埃希菌40株（18．26％）及弧菌28株（12．79％）,检出率由2001年的1．5％上升至2010年的近30．0％。219株耐三代头孢菌素病原菌对广谱青霉素和复方新诺明的耐药率均在85．0％以上．对头孢吡肟、头孢美唑、氟喹诺酮类、氯霉素的耐药率在20．0％～36．5％,对磷霉素的耐药率最低（6．7％）。福氏志贺菌、致泻大肠埃希菌、气单胞菌和弧菌对氟喹诺酮类的耐药率明显高于宋内志贺菌;气单胞菌和弧菌对头孢美唑的耐药率高于福氏志贺菌、致泻大肠埃希菌和宋内志贺菌;气单胞菌对磷霉素的耐药率显著高于其他致病菌。结论耐三代头孢菌素的肠道病原菌上升迅速,耐药广泛,不同种属的耐药性不同,应重视监测,加强防治。     

Lipid and lipoprotein dysregulation in insulin resistant states

Insulin resistant states are commonly associated with an atherogenic dyslipidemia that contributes to significantly higher risk of atherosclerosis and cardiovascular disease. Indeed, disorders of carbohydrate and lipid metabolism co-exist in the majority of subjects with the "metabolic syndrome" and form the basis for the definition and diagnosis of this complex syndrome. The most fundamental defect in these patients is resistance to cellular actions of insulin, particularly resistance to insulin-stimulated glucose uptake. Insulin insensitivity appears to cause hyperinsulinemia, enhanced hepatic gluconeogenesis and glucose output, reduced suppression of lipolysis in adipose tissue leading to a high free fatty acid flux, and increased hepatic very low density lipoprotein (VLDL) secretion causing hypertriglyceridemia and reduced plasma levels of high density lipoprotein (HDL) cholesterol. Although the link between insulin resistance and dysregulation of lipoprotein metabolism is well established, a significant gap of knowledge exists regarding the underlying cellular and molecular mechanisms. Emerging evidence suggests that insulin resistance and its associated metabolic dyslipidemia result from perturbations in key molecules of the insulin signaling pathway, including overexpression of key phosphatases, downregulation and/or activation of key protein kinase cascades, leading to a state of mixed hepatic insulin resistance and sensitivity. These signaling changes in turn cause an increased expression of sterol regulatory element binding protein (SREBP) 1c, induction of de novo lipogensis and higher activity of microsomal triglyceride transfer protein (MTP), which together with high exogenous free fatty acid (FFA) flux collectively stimulate the hepatic production of apolipoprotein B (apoB)-containing VLDL particles. VLDL overproduction underlies the high triglyceride/low HDL-cholesterol lipid profile commonly observed in insulin resistant subjects.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的临床分离及耐药谱分析

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌在医院内的流行情况及耐药谱的特性,以利于临床合理选用抗生素。方法用Vitek32型全自动细菌分析系统检测铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性,用E-test法检测对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果1997～1999年对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌占当年分离到铜绿假单胞菌株数分别为3.8%(8/58)、18.7%(23/123)、19.3%(53/275)。在三年中分离到耐亚胺培南菌株,其来源按标本分以痰液最多见,分别为62.5%(5/8)、60.9%(14/23)、73.6%(39/53)。按病区分以重症监护病房(ICU)最高,分别为37.5%(3/8)、43.5%(10/23)、43.4%(23/53)。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其他种类抗生素敏感试验显示,其耐药率对氨基糖苷类中的妥布霉素相对较低,其次为哌拉西林和复合三代头孢菌素中的头孢哌酮/舒巴坦。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌在医院内的分离率有随年度增加趋势,其主要来源为ICU病房,主要致病部位为呼吸道。治疗此类细菌感染宜参考实验室的细菌药敏结果选用敏感的氨基糖苷类或哌拉西林。