辛伐他汀保护缺血-再灌注损伤心肌的线粒体蛋白质组学研究

目的建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,通过蛋白质组学的方法研究辛伐他汀对大鼠缺血-再灌注损伤心肌线粒体代谢的保护作用。方法将大鼠随机分为辛伐他汀干预组(n=14)和生理盐水对照组(n=14),建立缺血-再灌注损伤模型,通过伊文思蓝和TTC染色评估梗死面积,提取大鼠左心室心肌线粒体蛋白行双向凝胶电泳,应用质谱分析鉴定差异蛋白点。结果辛伐他汀组和对照组相比,梗死区与危险区(梗死区+缺血区)的比值有统计学差异(29.4%±8.4%vs57.7%±6.5%,P0.0001);梗死面积与左室面积的比值有统计学差异(15.9%±5.6%vs29.0%±8.9%,P=0.012)。双向凝胶电泳图谱分析有19个蛋白点的表达有差异,质谱鉴定了9种差异蛋白,相比对照组,辛伐他汀组4个蛋白表达上调:三功能酶亚基α(线粒体前体)、电子转移黄素蛋白脱氢酶、肌动蛋白α(心肌)、细胞色素c氧化酶亚基5A亚单位(线粒体前体);5个蛋白表达下调:L-乳酸脱氢酶B链、异柠檬酸脱氢酶[NAD]α亚基(线粒体前体)、α晶状体蛋白B链、内膜蛋白(线粒体)、肌动蛋白类似物(细胞质)。结论辛伐他汀组大鼠心肌在缺血-再灌注损伤后,心肌梗死面积显著减少,辛伐他汀改变线粒体呼吸链、能量代谢等途径上的蛋白,为阐明辛伐他汀保护缺血再灌注损伤提供了理论依据。     

辛伐他汀缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨辛伐他汀缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及机制。方法采用Langendorff离体心脏灌流模型,将32只大鼠随机分为四组各8只。对照组用改良K-H缓冲液持续灌流;I/R组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌、再灌;治疗组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌后,在K-H缓冲液中加入辛伐他汀20μmol/L再灌;K-H缓冲液再灌;N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌后,在K-H缓冲液中加入辛伐他汀20μmol/L、L-NAME 100μmol/L再灌,K-H缓冲液再灌。观察各组再灌注心律失常发生情况,检测其冠脉流出液中的肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、NO,心肌组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、丙二醛（MDA）及细胞凋亡指数（AI）。结果与I/R组比较,治疗组心律失常发生率下降,CK、LDH、MDA及细胞AI降低,T-SOD活性、NO升高（P均〈0.01）;与治疗组比较,L-NAME组心律失常发生率升高,CK、LDH、MDA及细胞AI升高,T-SOD活性、NO降低（P均〈0.01）。结论辛伐他汀缺血后处理能减轻大鼠心肌I/R损伤,其作用机制与清除氧自由基、增加NO含量、减少心肌细胞凋亡有关。     

单克隆抗体在缺血再灌注损伤中的心肌保护作用

细胞粘附蛋白可介导中性粒细胞与内皮细胞的相互作用,引起内皮细胞功能不良,导致缺血再灌注损伤。实验证明,应用某些单克隆抗体可抑制这些粘附分子的作用,从而提高心脏对缺血再灌注损伤的耐受性,使心脏手术更安全。     

缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

缺血后处理是指在缺血发生后、长时间的再灌注之前,对心脏进行数次短暂的再灌注/缺血循环的处理方法.与缺血预适应一样,缺血后处理能减轻再灌注后心肌的损伤.由于缺血后处理可在心肌缺血发生后应用,所以比缺血预适应具有更大的临床应用价值.     

缺血后适应对缺血/再灌注损伤的心肌保护

急性心肌梗死的再灌注治疗一方面恢复了心肌的血供,另一方面也可能加重缺血心肌的损伤（再灌注损伤）。近年来研究发现,在冠状动脉再灌注开始时对冠脉进行短暂、重复的开通及再闭过程,随后恢复冠状动脉血流,即"缺血后适应",能减少缺血心肌的再灌注损伤,缩小缺血心肌的梗死面积。本文就其研究现状综述如下。     

辛伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤（CIRI）中凋亡相关基因Fas表达的影响,探讨其通过抗凋亡机制发挥脑保护作用。方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型加溶媒组、辛伐他汀预处理组,以线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,予缺血2h再灌注24h后进行神经功能评分,并断头取脑分别测定脑梗死体积、凋亡细胞数及Fas的表达。结果与模型加溶媒组相比,辛伐他汀预处理组的脑梗死体积明显减小（P〈0．05）,神经功能缺损评分获不同程度改善（P〈0．05）,脑组织Fas的表达及凋亡细胞数减少（P〈0．01）。结论辛伐他汀对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,通过抑制脑组织中fas的表达,进而减少细胞凋亡。     

氙气对神经系统缺血再灌注损伤的保护作用

正氙气被认为是一种性能稳定的麻醉气体[1],具有诱导迅速、血流动力学稳定及苏醒快等优点[2-4]。根据一些动物实验的结果显示,氙气还具有显著的器官保护作用,尤其体现在对缺血再灌注损伤的保护作用[5]。神经系统损伤是心血管手术后主要并发症之一[6],因此氙气对神经系统缺血再灌注损伤的保护作用值得关注。1.氙气对神经系统缺血再灌注的保护作用机制尽管已经有了很多相关研究,但氙气的神经保护作用机制尚未十分明确,被认为可能与以下几个机制有关。     

缺血心肌再灌注损伤的临床研究

对８１例急性心肌梗塞患者行尿激酶１００～１５０万Ｕ静脉溶栓治疗，再通１８例，未通１３例。再通组其溶栓治疗后４、１２、２４和７２小时测定的血浆丙二醛（ＭＤＡ）浓度较溶栓前显著升高（Ｐ＜０．０１），同期测定的血尿酸（ＵＡ）浓度在溶栓治疗后４小时较溶栓前明显升高（Ｐ＜０．０５），未通组的血浆ＭＤＡ和ＵＡ浓度在溶栓前后均无明显变化（Ｐ＞０．０５）。溶栓治疗后４小时血浆ＭＤＡ和ＵＡ浓度的变化，在再通组呈正相关（ｒ＝０．４３，Ｐ＜０．０１），未通组则无相关关系（ｒ＝０．０２７，Ｐ＞０．０５）。说明人体缺血心肌再灌注时有氧自由基（ＯＦＲ）生成。黄嘌呤氧化酶系统是人体ＯＦＲ生成的主要途径。     

胰岛素对缺血再灌注的保护作用

文章阐述了胰岛素在中枢神经系统的来源，胰岛素在全脑缺血和局灶性脑缺血中的应用及其神经保护机制，指出胰岛素的应用有望成为缺血性脑血管病的一种治疗方法。     

鲜生地汁对大鼠肠缺血再灌注损伤的防护作用

目的:探讨鲜生地汁对大鼠肠缺血再灌注损伤(I/R)的防护作用及其机制。方法:采用肠系膜上动脉(SMA)夹闭方法制作I/R模型。实验大鼠随机分为正常组、I/R模型组、I/R 鲜生地汁大剂量组、I/R 鲜生地汁小剂量组、I/R 乳果糖组。观察肠系膜上动脉夹闭0.5小时再灌注24小时、48小时、72小时后肠黏膜损伤程度,测定血浆内毒素水平。结果:各时点I/R 鲜生地汁大剂量、I/R 小剂量组及I/R 乳果糖组肠黏膜损伤程度、血浆内毒素水平均低于I/R模型组(P<0.05)。结论:鲜生地汁对肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜具有保护作用。     

辛伐他汀后适应对血脂正常大鼠缺血再灌注心肌保护作用

【】 目的：探讨辛伐他汀药物后适应对缺血再灌注损伤大鼠髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)的影响,探讨其减少心肌损害的可能机制。方法：将30只SD大鼠随机分为假手术组(SH)、缺血/再灌注组(I/R组)、辛伐他汀后适应组(SIM组)。通过结扎大鼠冠状动脉前降支制作心肌梗死模型。SH组、I/R组：再灌注前经颈静脉注射生理盐水1ml;SIM组：再灌注前经颈静脉给予辛伐他汀(1mg.100g-1)注射。再灌注2小时后抽静脉血测定CK-mb、MPO、MDA及心肌梗死面积。结果：①各组大鼠血脂测定均在正常值范围内;②与SH组比较,I/R组、SIM组CK-mb、MPO、MDA均有增高(P<0.05);与I/R组比较,SIM组CK-mb、MPO、MDA下降(P<0.05);③与SH组比较,I/R组、SIM组心肌梗死面积明显(P<0.05);SIM组心肌梗死面积小于I/R组 (P<0.05)。结论：辛伐他汀后适应治疗可以减轻大鼠心肌炎症反应及心肌梗死面积,保护心肌并减轻缺血再灌注损伤的作用。     

Mediated protective effect of electroacupuncture pretreatment by miR-214 on myocardial ischemia/reperfusion injury

Background Electroacupuncture pretreatment plays a protective role in myocardial ischemia/reperfusion （I/R） injury and microRNAs （miRNAs） could act on various facets of cardiac function. However, the role of miRNAs in the cardioprotection by electroacupuncture pre-treatment on myocardial I/R injury remains unknown. The purpose of the study was to examine whether miR-214 was involved in cardio-protection by electroacupuncture. Methods Using rat myocardial I/R model, we examined the role of electroacupuncture pretreatment in myocardial I/R injury and analyzed the changes in the expression of miR-214. In addition, I/R was simulated in vitro by performing oxy-gen-glucose deprivation （OGD） on H9c2 cell cultures, and the effect of electroacupuncture pretreatment on I/R injury as well as expressional level of miR-214 were examined in vitro. Furthermore, the miR-214 mimic was transfected into OGD-treated H9c2 cells, we analyzed the cell apoptosis, lactate dehydrogenase （LDH） and creatine kinase （CK） activities, intracellular free Ca2＋concentration （[Ca2＋]i） as well as the relative protein levels of sodium/calcium exchanger 1（NCX1）, BCL2-like 11 （BIM）, calmodulin-dependent protein kinase IIδ（CaMKIIδ） and Cyclophilin D （CypD）. Results The in vivo results revealed that compared with the I/R group, the electroacupuncture pretreatment group showed significant decreased myocardial infarct size, as well as the increased indices of the cardiac function, including heart rate, mean arterial pressure, left ventricular systolic pressure and maximal rate for left ventricular pressure rising and declining （±dp/dt max）. In addition, electroacupuncture pretreatment could inhibit the elevation of LDH and CK activities induced by I/R injury. The quantitative PCR （qPCR） results demonstrated electroacupuncture pretreatment could provide cardioprotection against myocardial I/R injury in rats with miR-214 up-regulation. In the meanwhile, in vitro, electroacupuncture pretreatment protected     

后适应在兔心肌缺血再灌注损伤中的实验研究

目的：观察缺血后适应对兔心肌缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法将30只新西兰大白兔随机分为缺血-再灌注组（IR组）,缺血后适应组,后适应加5-羟基癸酸盐（5-HD）组,延迟后适应组及假手术组5组,每组6只。采用硫代巴比妥酸比色法检测5组大白兔心肌组织丙二醛含量,依文思兰加氯化四氮唑兰双重染色法及称重法测定心肌梗死范围大小。结果丙二醛含量缺血后适应组显著低于IR组和延迟后适应组（均P＜0.01）,与后适应加5-HD组相近,但显著高于假手术组（P＜0.05）。心肌梗死面积在IR组、后适应加5-HD组、延迟后适应组之差异无统计学意义（P＞0.05）,但大于缺血后适应组,差异均有显著统计学意义（均P＜0.01）。结论缺血后适应在兔心肌IRI模型中有明显的心肌保护作用;特异性线粒体ATP敏感钾通道抑制剂5-HD可完全取消后适应的心肌保护作用;延迟5min后实行后适应操作其保护作用完全消失。     

肝缺血再灌注损伤时乳酸脱氢酶活性的变化和川芎嗪的保护作用

目的:探讨肝缺血再灌注损伤(HIRI)时乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变及川芎嗪的保护作用.方法:制备 HIRI模型,随机将21只家兔分为三组(对照组,7只;盐水组,7只;川芎组,7只),观察血清及肝组织LDH活性的动态变化及川芎嗪对它们的影响.结果:盐水组血清LDH活性进行性升高,肝组织LDH则明显下降;川芎组变化不明显,血清及肝组织LDH活性与盐水组比较,均有显著性差异.结论:川芎嗪对HIRI时LDH活性的异常改变有明显的保护作用.     

不同剂量硝酸甘油预处理对缺血再灌注心肌的作用

目的 探讨不同剂量硝酸甘油对大鼠血流动力学的影响及对大鼠离体缺血再灌注心肌的影响.方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):缺血再灌注(I/R)组、2μg· kg-1·min-1硝酸甘油预处理(PC1)组、4 μg·kg-1 ·min-1硝酸甘油预处理(PC2)组、6μg· kg-1·min-1硝酸甘油预处理(PC3)组.分别用静脉注射微量泵通过尾静脉持续1h泵入不同剂量的硝酸甘油,实时监测颈动脉血压及离体心功能,检测冠脉流量及心肌组织中cTnI及NO含量.结果 PC1组对大鼠血压无明显影响,但却明显改善心功能,增加冠脉流量,心肌组织中cTnI的含量较其他各组明显降低,NO含量较I/R组明显升高(P＜0.05);PC3组血压及心功能明显降低,心肌组织中cTnI及NO含量极明显升高(P＜0.05).结论 NO对缺血再灌注心肌的作用与剂量有关:静脉持续1h泵入小剂量硝酸甘油(2 μg·kg -1·min -1)对大鼠血流动力学无明显影响,但却能明显减轻心肌组织缺血再灌注损伤,大剂量硝酸甘油(6μg·kg-1·min -1)则加剧损伤.     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法实验大鼠40只,随机分为5组：假手术组（8只）,再灌注模型组（8只）,牛磺酸低、中、高剂量（30mg／kg、100mg／kg、300mg／kg）组（各8只）。再灌注后观察各组血清SOD、LDH、MDA含量,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果①牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后血清SOD、LDH、MDA含量的影响：与假手术组比较,其余各组大鼠血清SOD活性明显降低,LDH、MDA含量明显增高（P〈0．05,P〈0．01）;与模型组比较,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清SOD活性明显升高（P〈0．01）,LDH、MDA含量明显降低（P〈0．05,P〈0．01）。②牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注（I／R）损伤后细胞凋亡的影响：I／R后心肌细胞凋亡指数（AI）为（45．6±4．6）,明显高于假手术组的（8．50±1．13）（P〈0．01）,牛磺酸低、中、高组分别为（37．03±3．52）、（30．32±8．23）和（25．62±6．12）,均明显低于I／R（P〈0．01）。结论牛磺酸可降低再灌注损伤大鼠氧自由基值,抑制心肌细胞凋亡。     

辛伐他汀对脑缺血-再灌注大鼠神经细胞的保护作用

目的探讨辛伐他汀对局灶性脑缺血-再灌注大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法随机将36只大鼠分为3组:即假手术组6只,缺血组15只,辛伐他汀干预组15只。干预组大鼠在模型制备前用辛伐他汀20mg/kg连续灌胃3d,1次/d;假手术组及缺血组用相同体积的等渗盐水连续灌胃3d。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,缺血2h,再灌注4h。采用硝酸盐比色法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、NO含量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定梗死体积;TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果缺血-再灌注后干预组、缺血组及假手术组血清中NO含量分别为(89.3±3.0)、(124.9±4.6)、(66.5±3.1)μmol/L;iNOS活性分别为(15.8±2.7)、(23.0±2.9)、(11.1±2.5)U/ml;与缺血组比较,辛伐他汀干预能减少NO的含量,降低iNOS的活性(均P<0.01)。缺血组及干预组凋亡细胞数分别为(18.8±3.6)、(13.0±2.9)个/高倍视野,梗死体积分别为(160±10)、(135±11)mm3。结论辛伐他汀干预能减少脑缺血-再灌注损伤大鼠梗死体积及神经细胞凋亡。其机制可能是通过抑制iNOS的活性,降低NO的含量,从而起到神经保护作用。     

凯时注射液对无心跳兔供体肺缺血再灌注损伤的影响

目的研究凯时注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将24只健康新西兰大白兔随机平均分为三组,肝素化后处死,对照组立即予以LPD液灌注及保存,实验组1在处死后1h予LPD液灌注及保存,实验组2将凯时注射液（20ug／L）加入LPD液灌注及保存,两实验组在4℃保存5h后再灌注1h,对照组保存6h后灌注1h;测定经肺氧合后动脉血氧分压值（PaO2）和肺气道峰压值（PawP）,于再灌注结束后取右上肺组织,测其湿重（W）与干重（D）、计算湿／干重比（W／D）、ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,免疫组化法检测核因子-κB及ICAM-1的表达．并用光学显微镜和透射电子显微镜观察再灌注后肺组织结构的病理变化。结果再灌注45min后,实验组1的PaO2降低最明显、PawP升高最显著,实验组2及对照组的PaO2降低程度及PawP的升高程度均低于实验组1（P〈0．01）;实验组1的（SOD）明显低于对照组及实验组2,实验组1的（MDA）降低程度明显高于实验组2及对照组,实验组1的肺组织（W／D）、NF—κB及ICAM-1的表达高于对照组及实验组2（P〈0．01）,肺组织的病理变化实验组1最重。结论凯时注射液能减轻无心跳兔肺缺血／再灌注损伤,改善肺功能,具有肺保护功能。     

辛伐他汀对高糖诱导乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的探讨辛伐他汀对高糖所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离SD乳鼠心肌细胞原代培养72h后,随机分为5组并加入相应的处理药物,即对照组（control组）;高浓度葡萄糖刺激组（GS组）;不同浓度的辛伐他汀干预组,分别为GS＋10^-7MSim组、GS＋10^-6MSim组和GS＋10^-5MSim组。测定各组心肌细胞活力及心肌细胞培养基中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力及细胞内总谷胱甘肽（GSH）含量。结果辛伐他汀呈剂量依赖性地提高高糖损伤乳鼠心肌细胞的细胞活力（P〈O．01）;培养基中MDA的生成减少（P〈0．05）,而SOD活力及GSH含量明显增高（P〈0．05）。结论辛伐他汀可能通过稳定细胞膜、抗脂质过氧化反应及提高清除氧自由基,对高糖所致的心肌细胞过氧化损伤发挥剂量依赖性的保护作用。