原发性肝细胞癌及癌旁组织中环氧合酶-2的表达及其意义

目的：研究人原发性肝细胞癌（HCC）组织和癌旁非瘤组织中的环氧合酶－2（COX－2）蛋白及基因表达情况,方法：采用免疫组织化法和原位分子杂交法,研究27对原发性肝细胞癌及癌旁非肿瘤组织,5例正常肝组织中COX－2的蛋白和基因表达,结果：高分化HCC中COX－2蛋白表达显著高于中分化和低分化HCC（P分别＜0．05）以及癌旁组织和正常组织（P分别＜0．01）,癌旁组织的COX－2表达显著高于正常组织（P＜0．05）,癌旁组织,中分化和低分化HCC之间COX－2的表达强度差异无显著性（P＞0．05）,在COX－2蛋白阳性的肝癌细胞和癌旁肝细胞胸胞胞质中可见到COX－2mRNA呈阳性表达,结论：COX－2的过度表达可能参与了高分子HCC的致癌过程。     

PTEN和磷酸化Smad2在原发性肝癌中的表达

目的探讨肝癌等组织中10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）和磷酸化Smad2（P-Smad2）表达的意义。方法采用免疫组织化学技术检测肝癌组织、癌旁肝组织和非癌性肝组织中P-Smad2和PTEN的表达。结果31份肝癌组织中PTEN表达以细胞质和细胞膜明显,细胞核基本不表达；25份癌旁及13份非癌性肝组织中则以细胞核和细胞质强表达,细胞膜弱表达。PTEN在肝癌组织的表达率（64．5％）低于癌旁肝组织（96．0％）和非癌性肝组织（100．0％）,表达强度（4．19±3．31）低于癌旁肝组织（7．88±0．93）和非癌性肝组织（7．77±0．93）,差异均有统计学意义（P＜0．05）。不同病理分级的肝癌组织中PTEN的表达率差异无统计学意义（P＞0．05）,≥Ⅱ级的肝癌组织细胞质表达强度（3．07±2．87）低于＜Ⅱ级（5．80±3．12）的肝癌组织（P＜0．05）。癌旁有、无肝内血管癌栓的肝癌组织中,PTEN表达率分别为45．5％和85．7％,表达强度分别为3．00±3．46和6．28±2．37,差异均有统计学意义（P＜0．05）。PTEN在肝细胞的表达定位与病理类型呈负相关（r=0．34,P＜0．01）,与肝内血管癌栓呈负相关（r=-0．43,P＜0．05）。非癌性肝组织、癌旁肝组织和病理分级＜Ⅱ级的肝癌组织中,P-Smad2表达以细胞核和细胞质明显,≥Ⅱ级的肝癌组织中则以细胞核为主。P-Smad2在肝细胞的表达定位与病理类型呈正相关（r=0．22,P＜0．05）,P-Smad2在细胞核的表达强度。肝癌组织与癌旁肝组织的差异无统计学意义,也与肝内血管有无癌栓无关。肝癌组织中PTEN和P-Smad2表达呈负相关（r=-0．73,P＜0．01）。结论PTEN的表达、强度以及和P-Smad2的核、质转位可能与肿瘤的发展和恶化有关,二者可能存在相互作用,共同参与肝癌的发生机制。     

CDC25A在肝细胞癌中的表达及意义

目的：观察细胞周期蛋白CDC25A在肝细胞癌组织中的表达,并探讨其与患者预后的关系。方法应用免疫组化法检测50例肝细胞癌、癌旁及正常肝组织中CDC25A的表达,Western blot法检测30例肝细胞癌、癌旁及正常肝组织中CDC25A的表达,分析CDC25A表达与病理特征及临床预后的关系。结果 CDC25A在肝癌组织中高表达,在癌旁及正常肝组织中低表达,CDC25 A与肿瘤分化程度、肿瘤大小有关,与AFP水平及有无肝炎无关;其阳性表达的患者生存期较短。结论 CDC25A表达与病理分化程度、肿瘤大小及患者生存期相关。     

肝细胞癌组织中信号素3F 蛋白表达变化及其与患者预后的关系

目的：探讨肝细胞癌（HCC）组织中信号素3F（SEMA3F）蛋白表达与患者预后的关系。方法采用Western blot法检测32例HCC患者手术切除的HCC组织（ HCC组）和相应癌旁肝组织（对照组）标本中的SEMA3F蛋白表达,分析SEMA3F蛋白表达水平与HCC临床病理特征、复发转移及预后的关系。结果 HCC组及对照组SEMA3F蛋白表达阳性率分别为84％、97％,HCC组SEMA3F蛋白表达量低于对照组（P＜0．05）。肿瘤有包膜者SEMA3F蛋白表达量高于无包膜者,肿瘤为单个结节者表达量高于多个结节者（P均＜0．05）。 HCC组有、无肝硬化者的SEMA3F蛋白表达量差异无统计学意义。15例SEMA3F蛋白低表达者复发率显著高于17例高表达者,生存时间短于高表达者（P均＜0．05）。结论 SEMA3F可能在抑制HCC的侵袭转移中起重要作用。癌组织中SE-MA3F表达水平有助于判断HCC患者的预后。     

HNF—1α在肝癌组织中的表达及意义

收集26例肝癌患者手术新鲜癌组织标本及同次手术病理证实为正常的肝脏组织标本。用4％多聚甲醛固定、石蜡包埋;采用免疫组化染色法观察肝细胞核因子-1α（HNF-1α）在肝癌组织和正常肝组织中的表达及其在细胞中的定位。结果HNF-1α在正常肝组织表达高于肝癌组织（P〈0．05）,HNF-1α在高、中分化肝癌组织中的表达高于低分化（P〈0．05）。提示HNF-1α低表达与肝癌的发生、发展密切相关,HNF-1α可在一定程度上提示肝癌预后。     

肝癌组织中凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3的表达及意义

目的：探讨凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测80例HCC患者肝癌组织及其相应癌旁正常肝组织中Fas、FasL及caspase-3的表达,并分析其表达与 HCC临床病理因素的相关性。结果 Fas、FasL及caspase-3在 HCC、癌旁组织中的表达比较,均差异有统计学意义（P＜0．05）。在TNM 分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中Fas 的阳性表达率明显降低（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中FasL的阳性表达率明显增高（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有淋巴结转移的肝癌组织中 caspase-3的阳性表达率明显降低（P＜0．05）。80例 HCC患者肝癌组织中Fas、FasL与caspase-3的表达,两两之间并无明显关联性（狉＝0．057,P＞0．05）。结论 Fas/FasL系统的失衡及caspase-3低表达导致肝癌细胞凋亡障碍,在 HCC发生、发展及转移中起着重要作用。     

人原发性肝细胞癌中总基因组DNA甲基化变化的研究

目的：研究原发性肝细胞癌组织中总基因组DNA甲基化水平及其与病理学及生物学行为的关系。方法：以甲基化酶温育3H-腺苷甲硫氨酸掺入、液闪计数法分析33例中晚期肝癌手术标本的癌灶和癌旁组织细胞内总基因组DNA甲基化水乎，并以10例正常肝组织作对照比较。结果：肝癌灶内的DNA甲基化水平显著低于癌旁组织（P＜0．05）和正常对照肝组织（P＜0．01），其甲基化水平降低程度与肿瘤的大体形态（多发性或单灶性．结节型或区块型）有关，而与组织学改变（Edmondson分级）、门脉癌栓有否及血清AFP水平无明显关系。结论：人原发性肝细胞癌组织中DNA的甲基化水平有显著降低，值得进一步研究肝细胞癌组织个别癌基因片段甲基化及mRNA表达状况。     

P27和skp2在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨肝细胞癌P27和skp2蛋白的表达情况与临床病理意义。方法用免疫组化二步法检测P27和skp2在60例肝细胞癌及20例癌旁组织中的表达。结果60例肝细胞癌P27的阳性表达率为23％（14／60）,癌旁组织为80％（16／20）,60例肝细胞癌高分化癌阳性表达率为47％（7／15）,低分化癌为16％（7／45）。P27在肝细胞癌中的表达明显低于癌旁组织,P27蛋白的表达随病理分级增高而降低。60例肝细胞癌skp2阳性表达率为47％（28／60）,癌旁组织为15％（3／20）,60例肝细胞癌高分化癌阳性表达率13％（2／15）,低分化癌为58％（26／45）,可见skp2在肝细胞癌中表达明显高于癌旁组织（P〈0．05）,低分化癌明显高于高分化癌（P〈0．01）。结论P27和skp2蛋白的表达情况与肝细胞癌的发生发展及恶性度有关。     

端粒酶基因hTR在乳腺癌中的表达

用原位杂交的方法检测端粒酶基因hTR在46例乳腺及其癌旁组织，53例乳腺良性病变中的表达和分布情况。结果显示，46例乳腺癌中hTR表达阳性率为91．3％；癌旁组织中为0；53例乳腺良性病变中为3．9％。乳腺癌组织中hTR的表达与癌旁组织、良性病变比较差异有显著性（P均＜0．01）。乳腺癌组织中hTR的表达与肿瘤分期相关（P＜0．05），与病理类型、淋巴结转移、肿瘤大小无相关性（P均＞0．05）。认为端粒酶基因hTR表达检测在乳腺癌诊断中有一定价值。     

头颈部鳞状细胞癌组织中 Smad7、Smad4蛋白的表达变化及意义

目的：观察Smad7及Smad4蛋白在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法分别对头颈部鳞状细胞癌组织、癌旁组织、活检留取的正常头颈部组织中的Smad7蛋白、Smad4蛋白、TGF-β1表达进行检测,分析三者间表达及其与肿瘤临床病理参数的关系。结果①TGF-β1和Smad7蛋白在肿瘤组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常组织（F分别为5．71、7．31）,而Smad4蛋白在肿瘤组织中的表达明显低于癌旁组织和正常组织（F为14．92）,P均＜0．05。②随肿瘤分化程度增高,TGF-β1及Smad7蛋白表达呈降低趋势（F分别为11．2、12．8）、Smad4蛋白呈升高趋势（F为7．91）,P均＜0．05;Smad4蛋白表达与肿瘤直径呈负相关、Smad7蛋白表达与肿瘤直径呈正相关（P均＜0．05）,TGF-β1表达与肿瘤直径无明显相关（P＞0．05）;Smad4蛋白表达在淋巴结转移者明显低于无转移者（P＜0．05）,有无淋巴结转移者Smad7蛋白及TGF-β1表达无显著差异（P＞0．05）。③Smad4蛋白表达与TGF-β1呈负相关（r＝-0．32）,与Smad7蛋白呈正相关（r＝0．39）,P均＜0．05。结论头颈部鳞状细胞癌组织中Smad7、Smad4蛋白表达异常,且可能通过调控上皮-间质转化参与肿瘤的侵袭、分化;检测两者（尤其是Smad4蛋白）可为临床分期、预后评估提供依据。     

蛋白翻译起始因子C2在肝癌、胃癌中的表达与分布

目的 研究C2基因在肝细胞癌（HCC）、胃癌中的表达、分布及意义。方法 利用免疫组化法检测C2蛋白在60例HCC、58例胃癌组织中的表达，Western blot法检测C2蛋白在10例HCC及其癌旁组织中的表达。结果 60例HCC及42例癌旁组织中，C2蛋白阳性率分别为27．3％（17／60例）和83．3％（35／42例），C2蛋白在HCC癌组织中表达明显低于其癌旁组织（P＜0．001）；C2的表达与病人年龄、HBsAg及AFP明显关系（P＜0．05）。Western blot结果与免疫组化一致。在HBXAg阳性的49例HCC中，C2蛋白阳性率为20．4％，在HBXAg阴性的11例HCC中，C2蛋白阳性率为63．6％。C2在HBXAg阳性的HCC中的表达明显低于HBXAg阴性者（P＜0．05）。58例原发性胃癌及44例癌旁组织中，C2蛋白阳性率分别占41．4％（24／58例）和77．3％（34／44例）。C2蛋白在胃癌组织中表达明显低于其癌旁组织（P＜0．05），且与胃癌组织的分化程度、浆膜浸润、肿瘤大小有明显的关系（P＜0．05）。结论 C2基因表达下调可能与HCC、胃癌的发生、发展有关。HBXAg对C2的抑制作用可能与HCC的发生，发展有关。C2可能是一潜在的抑癌基因。     

应用组织芯片技术研究Cx43在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨间隙连接蛋白（Cx43）在癌旁组织、肝硬化组织和肝细胞癌中的表达及其在肝细胞癌中的意义。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学技术sP法检测81例癌旁组织、82例肝硬化组织和359例肝细胞癌中Cx43的表达。结果Cx43在肝细胞癌中的表达低于癌旁组织和肝硬化组织,差异有统计学意义（P〈0．001）;癌旁组织高于肝硬化组织,差异有统计学意义（P〈0．05）。Cx43与肝细胞癌的组织学分级、术后无瘤生存时间以及肿瘤直径有关（P〈0．001、P〈0．05和P〈0．05）,而与临床分期、淋巴结转移和脉管或门静脉癌栓无关（P〉0．05）。结论Cx43的异常表达与肿瘤的发生及预后有关,可以作为判断肝细胞癌预后有用指标之一。     

Shh信号通路在肝癌中的表达及与β-catenin的关系

目的探讨原发性肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）中Sonic Hedgehog（Shh）信号通路基因和15-catenin的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法对49例HCC和相应癌旁肝组织中Glil和β-catenin蛋白表达。荧光定量PCR检测2个肝癌细胞系和正常肝细胞中相应基因mRNA的表达情况。结果免疫组化染色与RT-PCR示Glil在HCC组织中的阳性表达率为77．56％,而癌旁肝组织为40．82％,两者差异具有显著意义（P〈0．05）。β-catenin蛋白在HCC中的表达显著高于癌旁肝组织（P〈0．05）,且与Glil的表达呈正相关（r=0．594,P=0．000）。Glil和β-cateninmRNA在肝癌细胞株中高表达,在正常肝细胞中低表达（P〈0．05）。结论Glil和β-catenin在肝癌细胞中均过度表达,可能协同作用促进肝癌细胞异常增殖,参与HCC的发生和发展。     

Plk1与Survivin蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨Plk1和凋亡抑制蛋白Survivin在HCC中表达情况,为临床诊断和治疗提供理论依据。方法采用免疫组化法检测100例肝细胞癌标本中Plk1、Survivin的表达。结果⑴肝细胞癌中,Survivin蛋白的表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）,Survivin在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、AFP表达及是否侵犯肝被膜均无关联（P〉0.05）。与HBsAg表达有关联（P〈0.05）。⑵肝细胞癌组织中,Plk1阳性表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）;Plk1在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、AFP表达、HBsAg表达及是否侵犯肝被膜均无关（P〉0.05）,与肿瘤分化程度相关（P〈0.05）。⑶肝细胞癌组织中,Plk1与Survivin表达呈正相关（P〈0.05）。结论 Plk1与Survivin的联合检测为肝细胞癌的诊断和治疗提供新的依据。     

趋化因子配体18在肝细胞癌中的表达及其对临床病理特征和预后的影响

目的探讨趋化因子配体18(CCL18)在肝细胞癌中的表达及其对临床病理特征和预后的影响。方法选取40例肝细胞癌患者作为研究对象,选取肝细胞癌旁肝组织标本和因良性肝占位行手术切除的正常肝组织标本各40份作为对照。应用免疫组织化学法检测CCL18在肝细胞癌及正常肝组织中的表达,比较CCL18在各组中的阳性表达率。分析肝细胞癌组织中CCL18的阳性表达与临床病理特征的关系,应用Kaplan-Meier法分析CCL18表达对肝细胞癌预后的影响。结果 CCL18在肝细胞癌组织中的阳性表达率为72.5%(29/40),在癌旁肝组织中的阳性表达率为7.5%(3/40),在正常肝组织中的阳性表达率为5.0%(2/40),肝癌组织中CCL18的阳性表达率显著高于正常肝组织和癌旁肝组织(χ2=9.251,P0.05)。随着病理分化程度的降低CCL18的阳性表达率显著增高,有病灶转移的患者中CCL18阳性表达率显著高于无病灶转移的患者。CCL18阳性的肝细胞癌患者的无进展生存期和总生存期显著短于CCL18阴性的肝细胞癌患者。结论 CCL18在肝细胞癌组织中的阳性表达显著增强,且影响患者的预后,CCL18阴性表达的肝细胞癌患者具有更长的生存期。     

喉鳞状细胞癌组织中 Beclin1、COX-2、MVD 的表达变化及意义

目的：观察Beclin1、环氧化酶-2（COX-2）、微血管密度（MVD）在喉鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法60例喉鳞状细胞癌患者,手术切除肿瘤组织,取其中30例患者癌旁正常喉黏膜组织作为对照,应用免疫组织化学二步法对喉鳞状细胞癌组织及正常喉黏膜组织中Beclin1、COX-2的表达进行检测,并检测CD105的表达评估微血管密度（ MVD ）。结果喉鳞状细胞癌组织中 Beclin1、COX-2的阳性表达率分别为56．7％、76．7％,癌旁正常喉黏膜组织分别为93．3％、20．0％,两者比较,P均＜0．05。喉鳞状细胞癌组织中MVD为（14．90±7．40）条,癌旁正常喉黏膜组织为（3．16±1．02）条,两者比较,P＜0．05。 Beclin1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达与肿瘤部位、组织分化程度有关（P均＜0．05）。 COX-2在喉癌组织中的表达与组织分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P均＜0．05）。 MVD在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、浸润深度、临床分期有关（P均＜0．05）。Beclin1与MVD表达呈负相关（r＝0．825,P＜0．01）,COX-2与MVD表达呈正相关（r＝0．763,P＜0．01）,COX-2和Beclin1在喉癌组织中的表达呈负相关（r＝-0．621,P＜0．01）。结论 Beclin1在喉癌组织中表达下调及COX-2在喉癌组织中表达增强与喉癌的浸润性发展和MVD有密切关系,联合检测Beclin1、COX-2和CD105可作为判断喉癌转移潜能和预后的重要指标之一。     

碱性成纤维细胞生长因子在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨bFGF在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法 使用免疫组化SABC法检测41例肝细胞癌手术切除标本及5例外伤性肝破裂肝切取标本。结果 正常对照组bFGF均为阴性。肝细胞癌组bFGF阳性率为70．7％（29／41）。bFGF表达与患者年龄、性别、AFP是否阳性、HBsAg是否阳性无关（P＞0．05）；而与肝癌分化程度、有无癌栓、包膜是否完整有关。在高侵袭转移组与低侵袭转移组间，bFGF阳性率分别为86．4％和52．6％，差异具有显著性（P＜0．05）。结论 bFGF在肝细胞癌中高表达，可以作为判断肝癌恶性程度及转移潜能的参考指标。     

PUMA、Bcl-2在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的观察喉鳞状细胞癌组织中PUMA、Bcl-2的表达,探讨其与喉癌发生发展及预后的关系。方法运用免疫组化sP法检测48例喉鳞癌组织及30例癌旁组织中PUMA、Bcl-2蛋白的表达,并分析二者的表达与临床病理参数的关系。结果PUMA和Bcl-2在喉癌组织中的表达阳性率分别为62．5％、43．8％,在喉鳞癌组织中的表达较喉癌旁组织低（P〈0．05）;PUMA的表达与肿瘤的组织学分化程度、有无颈淋巴结转移及术后生存期显著相关（P均〈0．05）,Bcl-2的表达与肿瘤的组织学分化程度、TNM分期及术后生存期显著相关（P〈0．05）;PUMA蛋白阳性组与PUMA蛋白阴性组的Bcl-2蛋白阳性率有统计学差异（P〈0．05）。结论PUMA、Bcl-2在细胞凋亡及肿瘤发生中起重要作用,对喉鳞癌的早期诊断和预后判断有重要意义。     

细胞周期素D1在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨细胞周期素D1（CD1）与大肠癌的发生、进展及预后的关系。方法：收集24例手术切除的大肠癌标本,同时取距癌灶5cm以外的癌旁组织及10cm以外的正常组织,用原位杂交的方法检测癌组织、癌旁组织及正常组织中CD1mRNA的表达,同时结合临床病理资料进行分析。结果：24例大肠癌组织中CD1mRNA阳性9例,阳性率37．5％;癌旁组织仅有1例阳性,阳性率4．2％;正常组织未见阳性表达。癌旁组织和正常组织均与癌组织有显著性差异（P＜0．01）。CD1mRNA的表达在浸润至浆膜层组明显高于浸润至肌层组（P＜0．05）;有淋巴结转移组及晚期病变（Dukes B C D期）组亦明显高于无淋巴结转移及早期病变（Dukes A期）组（P＜0．05）。CD1mRNA的表达高低与年龄、性别、癌灶直径大小、分化程度及是否有远处转移无明显关系（P＞0．05）。结论：CD1mRNA过度表达与大肠癌的发生、发展及转移有关。     

SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义

目的观察SIRTl在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRTl同胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用Real．timePCR方法检测SIRTlmRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Westernblot和Real．timePCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRTl蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系。结果SIRTImRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）,SIRT1mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高（P均〈0．05）。免疫组化染色结果表明,SIRTl蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）。SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关（P均〈0．05）,同生存时间呈负相关（r=-0．5023,P〈0．05）。结论SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色。