一氧化氮及一氧化氮合酶在哮喘大鼠气道高反应中的作用

目的：探讨一氧化氮及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)在哮喘大鼠气道炎症中的作用及激素对其活性的影响，以期为该病的预防、康复措施介入提供理论依据。方法：实验选用雄性豚鼠30只，按随机数字法将豚鼠分为3组：①哮喘组：用100g／L卵蛋白腹腔注射1mL致敏，2周后用10g／L卵蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作。②激素组：诱喘同前，每次诱喘前腹腔内注射甲基强的松龙10mg／kg。③对照组：用生理盐水代替诱喘剂。每组分别测定其血浆和肺组织NO2^-／NO3^-水平、肺组织诱导型NOS(inducible nitric oxide synthase，iNOS)和原生型NOS(constitute nitric oxide synthase，cNOS)活性水平，并用组织化学染色法观察NOS在豚鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果：3组豚鼠血浆NO2^-／NO3^-水平差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，哮喘组肺组织中NO2^-／NO3^-和iNOS活性水平[(0．87&;#177;0．08)μmol／g，(56&;#177;14)nmol／g]明显高于对照组和激素组[(0．19&;#177;0．06)μmol／g，(12&;#177;6)mnol／g；(0．18&;#177;0．07)μmol／g，(12&;#177;5)nmol／g](P&;lt;0．01)。对照组肺组织化学方法显示的阳性产物呈蓝色沉淀，主要分布于各级支气管上皮细胞，哮喘组及激素组阳性产物变化不明显。哮喘组肺组织iNOS活性水平和肺组织NO2^-／NO3^-水平呈高度正相关(r=0．782．P&;lt;0．05)。结论：一氧化氮可引起气道高反应性而导致和(或)加重哮喘发病。用甲基强的松龙治疗哮喘可减轻气道炎症，使哮喘大鼠肺组织中iNOS表达降低。     

一氧化氮及一氧化氮合酶在哮喘大鼠气道高反应中的作用

目的:探讨一氧化氮及一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)在哮喘大鼠气道炎症中的作用及激素对其活性的影响,以期为该病的预防、康复措施介入提供理论依据。方法:实验选用雄性豚鼠30只,按随机数字法将豚鼠分为3组:①哮喘组:用100g/L卵蛋白腹腔注射1mL致敏,2周后用10g/L卵蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作。②激素组:诱喘同前,每次诱喘前腹腔内注射甲基强的松龙10mg/kg。③对照组:用生理盐水代替诱喘剂。每组分别测定其血浆和肺组织NO2-/NO3-水平、肺组织诱导型NOS(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)和原生型NOS(constitutenitricoxidesynthase,cNOS)活性水平,并用组织化学染色法观察NOS在豚鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果:3组豚鼠血浆NO2-/NO3-水平差异无显著性意义(P>0.05),哮喘组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS活性水平犤(0.87±0.08)μmol/g,(56±14)nmol/g犦明显高于对照组和激素组犤(0.19±0.06)μmol/g,(12±6)nmol/g;(0.18±0.07)μmol/g,(12±5)nmol/g犦(P<0.01)。对照组肺组织化学方法显示的阳性产物呈蓝色沉淀,主要分布于各级支气管上皮细胞,哮喘组及激素组阳性产物变化不明显。哮喘组肺组织i-NOS活性水平和肺组织NO2-/NO3-水平呈高度正相关(r=0.782,P<0.05)。结论:一氧化氮可引起气道高反应性而     

诱导型和内皮型一氧化氮合酶在膀胱癌中的表达及意义

目的 探讨诱导型和内皮型一氧化氮舍酶在膀胱移行上皮细胞癌（TECC）中的表达及意义。方法 通过免疫组化方法对诱导型和内皮型一氧化氮合酶在51例TECC和9例正常膀胱黏膜中的表达进行检测，探讨其在TECC中表达的意义及与TECC分级、分期等的关系。结果 诱导型在多数TECC肿瘤细胞及部分炎性细胞和成纤维细胞有表达而正常移行上皮细胞不表达，诱导型在G。组的表达高于G2、G3组（P〈0．05）；诱导型在不同年龄、性别、分期、初复发组间的表达无显著性差异。内皮型在多数肿瘤细胞、肿瘤和正常组织的血管内皮细胞有表达，正常移行上皮细胞不表达。内皮型在不同年龄、性别、分级、分期、初复发组间的表达无显著性差异。结论 诱导型和内皮型产生的NO在TECC生长中发挥作用，诱导型的表达与TECC分级有关，诱导型存在于炎性细胞中提示NO与机体肿瘤免疫有关。内皮型的表达与肿瘤血管的形成有关。     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织(宫颈癌组)与10例正常宫颈组织(对照组),采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义(P<0.05);iNOS表达与VEGF-C呈正相关(r=0.78,P<0.01);宫颈癌组iNOS(+)VEGF-C(+)者淋巴转移的发生率(54.55%)明显高于iNOS(-)VEGF-C(-)者(27.27%)(P<0.05)。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）与血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织（宫颈癌组）与10例正常宫颈组织（对照组）,采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）;iNOS表达与VEGF-C呈正相关（r=0.78,P〈0.01）;宫颈癌组iNOS（＋）VEGF-C（＋）者淋巴转移的发生率（54.55%）明显高于iNOS（-）VEGF-C（-）者（27.27%）（P〈0.05）。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

血管内皮生长因子在哮喘小鼠的表达及细辛脑的干预作用

目的 (1)观察哮喘小鼠肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化;(2)研究细辛脑干预对VEGF表达的影响。方法 24只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、细辛脑干预组(C组),每组各8只。建立小鼠哮喘模型,酶联免疫吸附测定法(ELISA)对各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中VEGF进行定量分析;Western blot检测VEGF表达;免疫组化法检测小鼠肺组织中VEGF的表达。结果 ELISA法测定结果显示:与对照相比,哮喘组的VEGF在血清和BALF中表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);细辛脑干预组的VEGF含量比哮喘组降低(P<0.05)。Western blot检测哮喘组VEGF表达量相比于对照组升高(P<0.05),细辛脑组小鼠VEGF表达量相对于哮喘组降低(P<0.05)。免疫组化结果显示哮喘组大部分肺泡上皮细胞、支气管平滑肌和血管周围VEGF均呈阳性表达,细辛脑组有一定程度的减轻,对照组几乎没有。结论 VEGF在哮喘小鼠的肺组织内高度表达,可能参与气道重塑过程,细辛脑在一定程度上可改善气道重塑的病理生理过程。     

诱导型一氧化氮合酶在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义。方法：选择临产前行剖宫产终止妊娠的孕妇60例,其中早产胎膜早破组（pPROM）、足月胎膜早破组（tPROM）作为研究组,正常足月妊娠组为对照组,每组各20例,采用免疫组织化学染色法检测胎膜组织中iNOS的表达,采用苏木素-伊红染色检测胎膜的炎症情况,分析胎膜组织中iNOS的表达与绒毛膜羊膜炎的关系。结果：3组胎膜中均有一定程度iNOS表达,iNOS主要表达于炎症细胞中,pPROM组胎膜中的iNOS表达水平高于对照组（P〈0.01）。绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜中的iNOS表达水平高于非绒毛膜羊膜炎孕妇（P〈0.01）。结论：iNOS在pPROM胎膜组织中的表达水平较高,这种高表达可能与绒毛膜羊膜炎的发生有关。     

诱导型一氧化氮合酶在肿瘤组织中的作用

诱导型一氧化氮合酶（iNOS）与恶性肿瘤关系密切，被认为与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移有关，但它在肿瘤起始及演进过程中的作用机制仍不十分清楚，继续进一步研究并弄清这些问题，将有可能在肿瘤的发生、发展及治疗等领域的研究取得较大的突破。     

卵巢肿瘤的血管内皮生长因子表达和肿瘤微血管密度计数的意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达和肿瘤微血管密度(MVD)与卵巢恶性肿瘤预后的关系。方法采用免疫组织化学染色的方法检测94例卵巢上皮性肿瘤患者(其中良性上皮性肿瘤患者17例,交界性上皮性肿瘤患者13例,上皮性卵巢癌患者64例)中VEGF表达情况及MVD计数。结果在上皮性卵巢癌、交界性上皮肿瘤、良性卵巢肿瘤中VEGF阴性分别为:2例(3%)、4例(31%)、16例(94%);VEGF低度表达分别为:31例(48%)、7例(54%)、1例(6%);VEGF高度表达分别为:31例(48%)、2例(15%)、0例。VEGF蛋白高度表达与肿瘤的临床分期、细胞分化程度及患者预后有明显的相关性。MVD与肿瘤的临床病理特征无明显的相关性。VEGF蛋白高度表达者的生存率比VEGF无或低度表达者差。结论VEGF蛋白表达的测定可以帮助判断卵巢上皮癌患者的预后,在指导临床治疗方面有重要意义。     

血管内皮生长因子及其受体在颈椎病椎体软骨终板中的表达变化

目的： 研究VEGF和VEGFR在终板软骨细胞中的表达，进一步探讨椎间盘退变的发病机理。方法: 应用免疫组化SP染色法检测VEGF和VEGFR在37例颈椎病及11例正常椎体软骨终板中的表达，并对其阳性表达结果进行比较。结果：VEGF在正常终板软骨细胞表达的阳性率为90.9％，与颈椎病终板软骨细胞表达的阳性率（40.5％）相比，差异有显著性 (P<0.05) 。VEGF在正常的终板软骨细胞的表达明显高于退变的终板软骨。VEGFR在正常的终板软骨细胞表达的阳性细胞率为72.7％，与颈椎病终板软骨细胞表达阳性细胞率（37.8％）相比，差异有显著性（P<0.05）。结论：椎体软骨终板的退变过程中VEGF和VEGFR的表达发生明显的变化，终板软骨细胞VEGF分泌的减少导致终板血管芽的维持不足。VEGF参与了椎间盘退变的形成和发展，表明细胞因子在椎间盘退变的发病中可能起非常重要的作用。调节细胞因子VEGF在终板软骨细胞中的表达，可能为椎间盘退变的治疗提供一种新的途径。     

Exogenous nitric oxide regulates activity and synthesis of vascular endothelial nitric oxide synthase

Background Nitric oxide (NO) – a major signalling molecule of the vascular system – is constitutively produced in endothelial cells (EC) by the endothelial NO synthase (eNOS). Since a reduced NO synthesis is an early sign of endothelial dysfunction and NO delivering drugs are used to substitute the impaired endothelial NO production, we addressed the effect of exogenous NO on eNOS in human umbilical venous endothelial cell cultures. Materials and methods The synthetic NO donor DETA/NO (trade name, but in the following we refer to detNO), that releases NO in a strictly first order reaction with a half life of 20 h, was used in our experiments. Results Short‐term (20–30 min) detNO treatment of EC increases the Ser¹¹⁷⁷ phosphorylation of the constitutively expressed endothelial NOS and the production of endogenous NO generated by eNOS from [³H]arginine. The phosphorylation of eNOS is Akt‐dependent and completely reverted by the phosphatidylinositol‐3 kinase (PI‐3K) inhibitor LY294002. A prolonged continuous exposure of EC to detNO 150 µmol L^?1 over a period of 24–48 h causes a reversible cell cycle arrest at G₁‐phase associated with a larger cell volume and increased cell protein content (hypertrophic phenotype of EC). The eNOS protein and mRNA of the hypertrophic cells and the generation of endogenous NO are reduced but eNOS phosphorylation could still be elevated by stimulation with vascular endothelial growth factor. Conclusions Our data explain clinical studies describing a short‐term but not a long‐term benefit of NO treatment for patients with cardiovascular risk factors. The results could be a rational approach to develop a generation of NO donors accomplishing a retarded release from NO donors that mimic the low continuous pulsatile stress‐induced release of endogenous NO.     

血清血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的临床意义

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(EM)诊疗中的意义。方法采用酶联免疫吸附法动态检测25例EM患者和25例非EM患者手术前后血清中VEGF的含量。结果EM患者术前血清中VEGF水平明显高于非EM患者(P<0.01),Ⅲ～Ⅳ期EM患者血清VEGF水平高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.01),术后EM患者血清VEGF水平迅速下降,2例术后3个月复发患者的血清VEGF水平呈增高趋势。结论血清VEGF在EM发病中起着重要作用,并可作为评价EM临床疗效及病情转归的重要指标。     

扁平苔藓中Ki-67和VEGF的表达

目的:研究扁平苔藓皮损中Ki-67和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,探讨它们在扁平苔藓发病中的作用。方法:采用免疫组化法检测20例扁平苔藓皮损中Ki-67和VEGF的表达情况,20例正常皮肤作为对照。结果:扁平苔藓组中Ki-67和VEGF的表达水平明显高于对照组,差别具有统计学意义(P<0.01);扁平苔藓皮损中Ki-67和VEGF的表达呈正相关(r=0.74,P<0.01)。结论:Ki-67、VEGF的异常高表达可能参与了扁平苔藓的发病。     

八肽缩胆囊素对脂多糖诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶表达变化的抑制作用

目的探讨八肽缩胆囊素（CCK-8）对脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氯合酶（iNOS）表达变化的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞。用0．01、0．1和1mg／L LPS处理2～24h，用生理盐水、10mol／LCCK-8和0．1mg／L LPS＋10^-8、10^-7、10^-8mol／L CCK-8处理16h；用比色法检测培养液中一氧化氮（NO）含量、细胞NOS活性，免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹法检测iNOS蛋白表达。结果与生理盐水处理的对照组比较，LPS诱导培养液NO含量增多、细胞NOS活性增高、iNOS蛋白表达上调；CCK-8剂量依赣性抑制LPS的上述效应。而单独作用对iNOS蛋白表达、NOS活性和NO含量均无明显影响。结论CCK-8可以明显抑制LPS引起ECV-304细胞iNOS蛋白表达上调。减少NO生成。     

趋化因子受体4和血管内皮生长因子在肾癌中的表达及其临床意义

目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)和血管内皮生长因子(VEGF)在肾癌的发生、发展中的作用及临床意义.方法 采用免疫组织化学技术SP法检测CXCR4和VEGF在56例肾癌标本(包括20例伴有淋巴结转移的肾癌组织及肾周转移的淋巴结)、10例癌旁正常组织中的表达.结果 56例肾细胞癌组织中CXCR4、VEGF的表达阳性率分别为66.1%(37/56),73.2%(41/56),明显高于正常肾组织的表达阳性率20.0%(2/10)、30.0%(3/10),两者间差异有统计学意义(P＜0.05＝.肾癌组织中CXCR4和VEGF的表达呈正相关(r=0.315,P＜0.05＝,CXCR4和VEGF的表达与肾细胞癌的分期(χ2=9.520,P=0.023;χ2=9.072,P=0.027),肿瘤的侵袭转移(χ2=4.972,P=0.026;χ2=3.910,P=0.034)及微血管密度(P＜0.05＝有关,与患者的性别(χ2=0.020,P=0.887;χ2=0.001,P=0.716)、肿瘤的大小(χ2=0.003,P=0.995;χ2=0.108,P=0.990)、病理类型(χ2=1.960,P=0.900;χ2=0.112,P=0.994)无关.结论 CXCR4和VEGF在肾癌中呈高表达并且表达呈正相关,与肾癌的发展转移及预后密切相关.可以作为判断肾癌的侵袭转移及预后的重要指标,并给肾癌的治疗提供前景.

Abstract：

Objective To study the role and clinical significance of chemokine receptor-4 (CXCR4) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the occurrence and development of renal cell carcinoma. Methods Expression of CXCR4 and VEGF were detected by SP immunohistochemical technique in 56 cases of kidney carcinoma tissues (including 20 cases of lymph node metastasis), 10 normal tissues nearby kidney cancer. Results The positive rates of CXCR4 and VEGF were 66. 1% (37/56) and 73. 2% (41/56),which were significantly higher than those in normal tissues( 20. 0% (2/10) and 30. 0% (3/10), respectively) (P ＜ 0. 05 ＝. The expression of CXCR4 protein was significantly positively correlated with that of VEGF protein (r = 0. 315 ,P ＜ 0.05 ＝ in renal cell carcinoma. The expression of CXCR4 and VEGF was closely related to stages of tumor ( χ2 = 9. 520, P = 0. 023; χ2 = 9. 072, P = 0. 027 ), lymphatic metastasis, degree of invasion ( χ2 =4. 972, P = 0. 026; χ2 = 3.910, P = 0. 034 ), and microvessel density ( MVD) ( P ＜ 0. 05 ＝. However, they were not related to sex ( χ2 = 0. 020, P= 0. 887; χ2 = 0. 001, P = 0. 716 ), tumor size ( χ2 = 0. 003, P = 0. 995; χ2 =0. 108, P = 0. 990) and pathologic types ( χ2 = 1. 960, P = 0. 900; χ2 = 0. 112, P = 0. 994). Conclusion There is a significant positive correlation between high expressions of CXCR4 and VEGF proteins in renal cell carcinoma,the high expressions of CXCR4 and VEGF proteins may be related to the metastasis and prognosis of renal cell carcinoma,thus they could be used as important indicators in judging the metastasis prognosis of renal cell carcinoma,and offer prospects for the treatment of renal cell carcinona.     

原发性肝癌血管内皮生长因子及一氧化氮的检测及意义

目的 探讨原发性肝癌患者治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)及一氧化氮(NO)的变化及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),分光光度法对35例原发性肝癌患者,30例健康人的血清进行检测.结果 肝癌患者治疗前血清VEGF 362.39±72.42 pg/ml,血清NO 94.23±21.24 μmol/L,高于健康对照组(P＜0.01);肝癌稳定组治疗前后血清VEGF分别为324.51±44.24和128.93±40.86 pg/ml,血清NO分别为82.42±4.80和75.76±10.01 μmol/L,VEGF在治疗前后有统计学意义(P＜0.01),NO在治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05);肝癌恶化组治疗前后血清VEGF分别为384.77±77.20和428.77±87.29 pg/ml,差异有统计学意义(P＜0.01),血清NO分别为101.21±24.08和119.32±20.53μmol/L差异有统计学意义(P＜0.01).结论 血清VEGF及NO的检测可以为临床原发性肝癌的治疗及预后判定提供依据.