肾移植患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的观察肾移植患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于移植前（P〈0．01）。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7～21d，其CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。     

三种生物骨衍生材料移植早期外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的观察三种生物骨衍生材料移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法用复合型完全脱蛋白骨(CFDB)、部分脱蛋白骨(PDPB)、部分脱钙骨(PDCB)三种生物骨衍生材料修复兔桡骨节段性缺损,术后1、2、4周取材,用流式细胞仪检测三种材料移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化,并通过常规组织学检测观察4周时三种材料的成骨作用,以新鲜异种骨(FXB)和空白缺损为对照。结果三种材料移植后外周血T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值在各个阶段与空白对照组无显著差异(P>0.05),与FXB组有显著性差异(P<0.05)。4周时组织形态观察可见新骨贴附三种材料向缺损方向生长。结论三种材料移植早期未引起严重的免疫排斥反应,且不影响新骨形成,可望用于修复骨缺损。     

尿毒症患者和肾移植受者外周血调节性T细胞表达的意义

目的探讨尿毒症患者和肾移植受者外周血CD4^＋CD127^-调节性T细胞（CD4^＋CD127^- Treg）的表达水平及意义。方法采用流式细胞术测定13例尿毒症患者（尿毒症组）、13例肾移植受者（肾移植组）和20例健康志愿者（对照组）外周血CD4^＋CD127^- Treg和CD4^＋CD25^＋CD127^- Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果尿毒症组和肾移植组CD4^＋细胞中CD4^＋CD127^- Treg的比例明显低于对照组（P〈0．05，P〈0．01）；肾移植组CD4^＋CD25^＋CD127^- Treg的比例明显低于对照组（P〈0．05）。结论尿毒症患者外周血CD4^＋CD127^- Treg数量降低，免疫功能紊乱。肾移植受者外周血CD4^＋CD127^- Treg和CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg数量降低，免疫反应性增强。     

基因修饰的组织工程骨修复节段性骨缺损及相关免疫学研究

目的：观察骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因修饰的组织工程骨修复节段性骨缺损效果及异种骨支架体内应用的安全性。方法：①制备去抗原牛松质骨块（BCB），植入小鼠股四头肌袋内，术后行淋巴细胞转化试验和组织学观察。②在腺病毒载体介导下将BMP-2基因导入兔骨髓间质干细胞后，种植到BCB支架中，构建基因修饰的组织工程骨。于兔双侧桡骨中段造成15mm骨缺损，采用5种方法进行处理：BMP-2基因转染细胞＋B（B（A组）；未转染细胞＋重组BMP-2＋BCB（B组）；对照基因转染细胞＋BCB（C组）；未转染细胞＋B（B（D组）；单纯BCB（E组）。术后4、8、12周行X线、组织学和生物力学检测。结果：①BCB具有较低的抗原性和良好的组织相容性；②A组术后4周诱导生成软骨组织并向编织骨转化，12周骨缺损修复，髓腔再通，新骨强度明显优于其他各组（P〈0．01）。结论：BMP-2基因修饰的组织工程骨是修复节段性骨缺损的好方法。     

利用人源化小鼠研究组织工程材料的体内免疫原性

目的建立并利用人源化小鼠模型,研究组织工程材料的体内免疫原性。方法利用NOD／SCID小鼠（非肥胖型糖尿病鼠与重症联合免疫缺陷鼠反交鼠模型）．通过腹腔注射人外周血单个核细胞（PBMC）（100×10^6）建立人源化小鼠,在人源化小鼠皮下植入异体人皮肤（阳性对照）、人体脂肪干细胞与脱钙骨构建的组织工程骨（实验组）、单纯脱钙骨材料（阴性对照）。在植入后1周、2周、3周、4周,取小鼠尾静脉血,流式细胞仪检测人CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞比例。4周后,取小鼠的移植局部皮肤进行HE染色分析,同时检测脾细胞人CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞比例。结果NOD／SCID小鼠腹腔注射人PBMC4周内,在外周血和脾中均可测到人CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞。病理分析结果显示：在人源化小鼠皮下植入的组织工程材料及成体干细胞构建的组织工程骨组未见炎性细胞浸润;而单独植入人皮肤组可见明显的炎性细胞浸润。结论人源化小鼠可作为组织工程材料体内免疫原性的研究的良好模型。     

复合环孢菌素同种异体骨的免疫学与组织学评价

目的对比评价复合环孢菌素同种异体骨（CAB）的免疫学特性及成骨特性。方法54只新西兰兔随机分为三组（每组18只）：实验组（植入CAB修复兔桡骨中段骨缺损）、对照组（植入深冻／冻干辐照同种异体骨修复兔桡骨中段骨缺损）、材料提供组。于不同时间点抽血行淋巴细胞亚群分析并取材，标本经处理后分别行CD25分子免疫组化染色和改良马松三色法染色并图像分析，对淋巴细胞亚群及新骨面积行统计学分析。结果术后16周对照组CD25分子密度明显高于实验组，且对照组各个时间点间的CD4^＋T淋巴细胞百分数及CD8^＋T淋巴细胞百分数波动明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组各骨缺损修复部位新骨生成面积均大于对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论免疫学及组织学结果初步显示，与深冻／冻干辐照同种异体骨相比，CAB可以更稳定持久地抑制免疫排斥反应并更好地促进新骨生成。     

骨形态发生蛋白2基因治疗在修复骨缺损中对血管化影响的实验研究

目的观察骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因治疗在修复骨缺损中对血管化的影响。方法分离培养兔骨髓基质干细胞（MSCs），经BMP-2腺病毒载体转染后复合异种骨支架移植修复1．5cm桡骨缺损。分为5组：①BMP-2基因转染细胞＋去抗原牛松质骨支架（BCB）；②未转染细胞＋重组BMP-2＋BCB；③对照基因转染细胞＋BCB；④未转染细胞＋BCB；⑤BCB。术后4、8、12周行微血管墨汁灌注、血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化染色、组织学等检测。结果术后4周，基因治疗组骨间血管的密度在周边区域较高，通常每一个骨小梁孔隙中都有一支新形成的小血管；透射电镜见成骨细胞总是毗邻血管内皮细胞而存在，并随着微血管的增生而逐渐向骨细胞发展；间质细胞VEGF表达明显增强。结论BMP-2基因治疗可通过上调VEGF表达，间接诱导移植骨血管化，对骨不连、骨缺损的治疗具有重要意义。     

慢性HBV感染者不同免疫状态下及抗病毒治疗后外周血T细胞亚群比例和细胞因子水平特点

目的：观察不同免疫状态的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者及抗病毒治疗后外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例、CD4^＋/CD8^＋比值及血清中细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平的变化特点及与HBeAg血清学转换的相关性。方法纳入79例处于不同免疫状态的慢性HBV感染者（其中非活动性HBV携带期15例、免疫耐受期20例、免疫活化期44例）及21例健康对照者为研究对象,采用流式细胞术检测其外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例。对其中33例免疫活化期患者进行核苷（酸）类似物抗病毒治疗并随访至48周。分别于治疗前（T0期）及治疗后4周（T1期）、8周（T2期）、12周（T3期）、24周（T4期）和48周（T5期）采集外周血,流式细胞术检测各时间点患者外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例。同时对部分患者血清标本中的细胞因子水平进行检测。结果在慢性HBV感染者中,免疫活化组患者外周血CD4^＋T细胞比例及CD4^＋/CD8^＋比值显著低于健康对照组（P均＜0.05）,而CD8^＋T细胞比例显著高于健康对照组（F =3.610,P ＜0.05）。抗病毒治疗后,△T0～T1、△T0～T2期,HBeAg血清学转换组外周血CD8^＋T细胞比例升高率显著高于未转换组（P均＜0.05）;△T0～T5期,HBeAg血清学转换组外周血CD4^＋T细胞比例升高率显著高于未转换组（Z =-2.200,P ＜0.05）。免疫活化组患者血清IL-10、IFN-γ水平均显著高于对照组和免疫耐受组（P均＜0.05）。免疫活化组患者抗病毒治疗后12周及24周,血清IL-10水平显著下降（t=3.037、3.180,P均＜0.05）,与ALT水平、HBV DNA载量呈正相关关系（P均＜0.05）。结论慢性HBV感染者在不同免疫状态下外周血T细胞亚群比例及血清细胞因子水平表现不同,免疫活化期患者与健康对照者比CD4^＋T比例及CD4^＋/CD8^＋下降,CD8^＋T比例升高,血清IL-10水平显著升高。HBeAg阳性患者,核苷（酸）类似物抗病毒治疗过程中外周血CD8^＋T细胞和CD4^＋T细胞的比例升高可能有助于预测HBeAg的血清学转换。     

rhIL-10抑制小肠移植急性排斥反应的研究

目的观察rhIL-10对小肠移植急性排斥反应和T细胞增殖的抑制作用。方法将移植后的大鼠随机分为同基因组、对照组和3种不同剂量的rhIL-10治疗组，各组n=6。术后3、5、7d取移植肠管，行病理检查，测外周血T细胞亚群及术后7d肝、肾功能的重要参数：天冬酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血肌酐（Crea）和血尿素（BUN）。结果对照组术后3d发生轻度排斥，5d发生中度排斥，7d发生重度排斥；中、高剂量组除部分标本在术后5、7d发生轻度排斥外，无排斥征象；低剂量组与对照组改变相似，但排斥的病理改变发生较晚、较轻。术后3、5、7d，低、中、高剂量组外周血CD3^＋T细胞数及CD4^＋／CD8^＋比值与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。各组AST、ALT、Crea和BUN差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论（1）对小肠移植急性排斥的抑制，低剂量作用是明确的，但疗效有限。中、高剂量作用较明显；与同基因组、对照组比较，不增加肝、肾毒副作用；（2）动态检测外周血CD3^＋T细胞数及CD4^＋／CD8^＋比值可作为器官移植术后监测排斥反应的重要指标之一。     

核心结合因子α1基因修饰骨髓间充质干细胞对骨缺损的修复研究

目的 探讨以核心结合因子α1（core-binding factor a1，Cbfa1）基因修饰骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）作为种子细胞，与猪脱细胞骨基质材料复合构建组织工程骨修复兔桡骨缺损的可行性。方法选择3月龄日本大白兔40只，建立桡骨1．2cm缺损模型，根据不同的修复方式分成4组。A组：Cbfa1基因修饰MSCs与脱细胞骨基质材料复合后修复；B组：未行基因修饰的MSCs与脱细胞骨基质材料复合后修复；C组：单纯脱细胞骨基质支架材料修复；D组：空白对照，不作任何植骨处理。术后4、8和12周分别行大体、X线片和组织学观察评价修复效果，并对修复后桡骨进行生物力学检测。结果大体观察至术后12周取材时，A组原骨缺损植骨区新生骨成熟度好、饱满、质硬；B组植骨区有骨性连接，质软；C组可在植骨区发现少量骨性连接；D组形成骨不连。X线片和组织学观察示：术后4、8周A组支架材料降解、新骨生成及髓腔再建优于其它3组。术后12周A组支架材料完全降解，新骨塑形完成，骨髓腔通畅，皮质骨改建成正常的板层骨结构；B组缺损区近端部分骨髓腔塑形再通；C组截骨两端骨痂向植骨中长入，髓腔塑形不明显；D组纤维组织充填，形成骨不连。以前述各组健侧桡骨为正常对照组（仍为D组），余分组同前，行破坏压缩载荷检测，结果示12周后A、B组与D组比较差异无统计学意义（P〉0．05），而C组与D组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Cbfa1基因修饰MSCs与脱细胞骨基质材料复合构筑的组织工程骨可较好地修复兔桡骨址螺     

Osteogenesis in xenogeneic bone transplantation, using an immunosuppressant: Rabbit-rat experiments

We investigated osteogenesis and lymphocyte subsets in xenogeneic bone transplantation, using the immunosuppressant FK506 (FK). Iliac bones of rabbits were transplanted as fresh and frozen xenogeneic bone grafts into an intramuscular pouch of rats. FK was injected intramuscularly in half of the rats in a dose of 3 mg/kg/day for 14 days after transplantation. At 2,4, and 8 weeks, transplanted grafts and the lymphocyte subsets of these rats were examined. in the group not given FK, the grafted bone became necrotic and infiltrated with small round cells around the trabeculae. in the FK group, at 2 and 4 weeks, new bone was formed in the fresh xenografts without infiltration of lymphocytes. At 8 weeks, the new bone became necrotic and lymphocytes were present. the percentage of T cells (CD 5), B cells and the ratio of CO 4 cells/CD 8 cells were smaller in the FK group. Using an immunosuppre-sant we concluded that xenogeneic bone has an osteogeneic potency.     

生物衍生骨复合骨髓基质干细胞修复山羊胫骨缺损的血管化研究

目的研究生物衍生骨与骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells, MSCs)复合修复山羊胫骨缺损的血管化过程,了解其修复长段管状负重骨缺损的血管化情况. 方法制备生物衍生骨作为支架材料,培养、诱导MSCs作为种子细胞,二者在体外复合构建组织工程骨.20只山羊双侧胫骨中段制备成20 mm长的骨-骨膜缺损模型,采取自身左右侧对照,实验侧(右侧)缺损处植入组织工程骨,对照侧(左侧)植入单纯支架材料,采用钢板内固定.术后2、4、6及8周用墨汁灌注透明标本及血管面积图像分析方法观察血管化过程,组织学观察血管形成及成骨情况. 结果术后2、4周,实验侧血管形成较对照侧少(P<0.05);术后8周,两侧均完全血管化,差异无统计学意义(P>0.05).实验侧于术后6、8周新骨形成逐渐增加,材料降解吸收较对照组快;对照侧术后8周材料孔隙内仍无明显新骨形成. 结论生物衍生骨作为骨组织工程的支架材料,能够较快发生血管化;组织工程骨成骨能力较单纯支架材料强.     

组织工程骨膜异体体内成骨修复兔骨缺损的初步观察

目的探讨以兔BMSCs和猪SIS复合构建的组织工程骨膜，在异体兔体内成骨的可行性。方法取新西兰大白兔BMSCs与SIS复合构建组织工程骨膜。选2月龄新西兰大白兔12只，制备双侧桡骨1．5～2．0cm缺损模型。随机选一侧植入组织工程骨膜，作为实验组；另一侧仅植入单纯SIS，作为对照组。术后观察动物一般情况，4周后摄X线片观察，取骨缺损中段标本行HE及Masson染色观察。结果两组动物术后饮食及日常活动基本正常：伤口无红肿、溢脓等：伤肢基本能负重行走。x线片观察：实验组骨缺损处有长条状新生骨形成，密度与正常骨相同，新生骨桥接骨缺损；对照组骨缺损无骨形成征象，骨缺损处密度与周围软组织影相近。组织学观察：实验组骨缺损处有新骨形成，骨组织中可见血管腔及不规则髓腔样结构；未见明显异物巨噬细胞及淋巴细胞浸润征象：对照组骨缺损处仅为胶原瘢痕组织，无骨组织形成。结论以SIS和BMSCs构建的组织工程骨膜在同种异体体内可以成骨，有修复骨缺损的可行性。     

脱细胞异种骨基质植入后受体外周血T淋巴细胞亚型的变化

目的　观察异种脱细胞去抗原骨基质植入后受体细胞免疫状态的变化。　方法　新西兰大耳白兔2 0只,随机分为4组,每组5只,制成股后肌袋模型,分别植入自体骨、异种脱细胞猪肋骨基质和酒精浸泡猪肋骨,设立假手术组作为对照。术后1、2、4和6周采集外周血,流式细胞仪检测外周血CD4 + 、CD8+ 和CD2 5 + T淋巴细胞的变化;分别于植入后2周和6周,将植入骨块连同周围组织取出,行组织学观察。　结果　同一时间点,外周血中CD4 +、CD8+ T淋巴细胞在酒精浸泡组显著增高,与其余组差异有统计学意义(P<0 .0 5 ) ,其余各组间差异无统计学意义(P>0 .0 5 ) ;CD2 5 + T淋巴细胞在酒精浸泡猪肋骨组2周后显著高于其它组,差异有统计学意义(P<0 .0 5 )。2周时局部组织中见炎性细胞浸润,以粒细胞为主;6周时自体骨及异种脱细胞骨基质组炎性细胞明显减少,代之以大量成纤维细胞及少量淋巴细胞,可见软骨岛形成。　结论　经脱细胞处理的异种骨基质植入后,近期对受体细胞免疫无明显影响。     

Effect of cyclosporine on T lymphocyte development. Relationship to syngeneic graft-versus-host disease

This report investigates the effects of cyclosporine on the reconstitution of T lymphocytes after syngeneic bone marrow transplantation and its role in the development of a novel T cell-mediated autoimmune disease, syngeneic graft versus host disease. We analyzed the effect of CsA treatment on T lymphocyte differentiation during reconstitution after bone marrow transplantation and correlated the maturation of CD4+ and CD8+ T cell subsets with the onset of syngeneic GVHD. Administration of CsA following syngeneic bone marrow transplantation leads to a developmental arrest of mature CD4+ and CD8+ T lymphocytes in the thymus and a marked reduction in cells expressing the alpha beta T cell receptor. The reduction of CD4+ and CD8+ T cell subsets is also reflected in the peripheral lymphoid compartment with an altered CD4/CD8 ratio. Functional assessment of the cells revealed that CD8+ cells respond normally to mitogenic signalling whereas CD4+ cells exhibit marginal proliferative responses. Both subsets of T lymphocytes respond to syngeneic B lymphoblasts, comparable to the response of T lymphocytes from non-CsA-treated syngeneic BMT recipients, suggesting that autoreactive cells are produced despite CsA treatment. Following discontinuation of CsA, T cell differentiation in the thymus is rapidly restored to normal. However, concurrent with the onset of syngeneic GVHD, a compensatory insurgence of CD4+ T helper cells is observed.     

异种脱蛋白松质骨为载体构建组织工程骨用于脊柱横突间融合的实验观察

目的探讨异种脱蛋白松质骨（deproteinization bone,DPB）作为骨组织工程载体的性能及其用于山羊脊柱横突间融合的作用。方法取成年猪股骨远端松质骨通过理化方法制成DPB载体,对其形态结构、组成成分、生物力学特性以及材料对种子细胞生物学行为的影响进行检测分析。将载体材料复合一定量的自体骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）重组人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP-2）构建组织工程骨。取6～8月龄雄性山羊12只,制成L3-4双侧横突间植骨模型,左侧植入组织工程骨为A组,右侧植入等体积自体髂骨作对照为B组。分别于4、8及12周行X线片和组织学观察并对比分析。结果采用脱蛋白处理后的松质骨可见大小不等、相互交通、开放孔隙的网架结构。孔径200～500μm,孔隙率60％左右。其无机成分为羟基磷灰石,有机成分为胶原,力学性能保存良好,有良好的细胞相容性。两组移植后不同时间点X线表现：A组植入横突间第4周与横突桥接处部分区域模糊,以内侧明显;第8周上下桥接部间隙变小,大量连续骨痂生成;12周后完全融合。早期A组密度略低于B组,12周后基本相同。移植区组织学观察：A组植入后第4周以多点方式形成新骨,第8周岛状生长的骨组织贯穿整个移植材料,12周编织骨交错排列,髓腔形成,成骨活性接近自体髂骨移植。B组,4周时有较多新骨形成;8周时出现大量胶原纤维,周边成骨明显;12周时,纤维组织减少,成骨活跃。结论异种DPB是一种良好的组织工程骨载体材料,可为再血管化和成骨细胞的分化提供一个稳定的环境。     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4诱导新鲜异体骨移植免疫耐受的实验研究

目的　利用外源性细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 ( cytotoxic T lymphocyte- associated antigen 4immuno globlin,CTL A4 - Ig)阻断T细胞反应的第2信号,诱导新鲜同种异体骨移植免疫耐受。　方法　采用近交系小鼠BAL B/C 6 6只作为骨移植的受体,进行异位肌袋一次及第2次骨移植。一次移植分为3组,每组18只,一组移植C5 7BL/6小鼠骨骼,注射L6 (对照品) ,为AL组;一组移植C5 7BL/6小鼠骨骼,注射CTL A4 - Ig,为AC组;一组移植同系BAL B/C小鼠骨骼,注射PBS缓冲液,为AB组。在第2、4及6周,进行血淋巴细胞亚群分析,血清抗体测定,供体细胞及抗原二次刺激实验及组织学观察。另取12只BAL B/C小鼠,进行第2次移植实验,供体为C5 7BL/6小鼠的骨骼,注射CTL A4 - Ig后2周,分别移植C5 7BL/6 ( BC组)和C3H( BH组)小鼠的骨骼,检测产生免疫耐受的特异性。　结果　AL组与AB组比较,产生了强烈的免疫排斥反应,移植后2、4及6周,CD4 T细胞的增殖明显增加( P<0 .0 5 ) ,血清抗体明显增多( P<0 .0 5 ) ,供体细胞及骨抗原二次刺激的细胞增殖也明显增加( P<0 .0 5 ) ;AC组免疫排斥反应较轻,在CD4 T细胞的增殖、血清抗体及二次刺激的细胞增殖方面均与AB组相似( P>0 .0 5 ) ;组织学观察也显示,异体骨周围的淋巴细胞浸润消失,软骨诱导及新骨形     

Immunosuppression with FK506 increases bone induction in demineralized isogeneic and xenogeneic bone matrix in the rat.

The aim of the present study was to investigate a systemic induction of bone formation in rats by immunosuppression with FK506 (1 mg/kg body weight intraperitoneally [ip]) in a model of osteoinduction of isogeneic and xenogeneic demineralized bone matrix (DBM) for a period of 28 days. In particular, alterations of in vitro cytokine synthesis and changes of lymphocyte subsets were studied. DBM was implanted intramuscularly in the abdominal wall of Lewis rats (seven per group). Blood was sampled on days -7, 0, 7, and 28 for determination of in vitro tumor necrosis factor a (TNF-alpha) synthesis and lymphocyte subsets by flow cytometry (CD3+, CD4+, CD8+, CD45+, ED9+, and Ia+ antibodies). Ossicles of de novo formed bone and the tibias were removed on day 28 after double tetracycline labeling for histomorphometric analysis. Immunosuppression with FK506 significantly decreased lipopolysaccharide (LPS)-stimulated in vitro cytokine synthesis after 7 days and 28 days (p < 0.05). Compared with control animals FK506 treatment significantly increased the volume of induced bone in isogeneic (2.1 +/- 0.3 mm3 vs. 10.8 +/- 0.9 mm3) and xenogeneic (O mm3 vs. 4.7 +/- 0.8 mm3) DBM. Bone histomorphometry of the tibias revealed that immunosuppression increased both bone formation and bone resorption, accompanied by a significant reduction in the relative trabecular area (Tb.Ar). FK506 caused a decrease in the counts of CD8+ T cells probably because of destruction or dislocation of these cells. This suggests that the amount of CD8+ cells and the degree of T cell activation in terms of mean fluorescence intensity (MFI) may be associated with bone metabolism. In support of this, statistical analysis revealed a significant positive correlation between parameters of bone formation as well as bone resorption and the CD4+/CD8+ ratio. There was a significant negative correlation between parameters of remodeling of the metaphysis of the tibia and induced bone volume (BV), respectively, and MFI values of CD3+/Ia+ cells. These findings suggest an important role of T lymphocytes in bone formation and bone resorption in vivo. FK506 caused a marked increase of bone formation in DBM. However, the conclusion that immunosuppression increases fracture healing warrants further investigation.     

猕猴组织工程化骨异体植入修复骨缺损T淋巴细胞亚群的检测

目的　通过对T淋巴细胞亚群的检测 ,从免疫学方面探讨同种异体细胞来源的组织工程化骨植入猕猴体内修复长段骨缺损的可行性。方法　用骨髓基质干细胞 (MSCs)经诱导分化为成骨样细胞后与生物衍生骨材料复合培养 ,体外构建组织工程化骨 ,植入 15只异体猕猴体内桥接桡骨 2 .5cm节段骨缺损作为实验组 ;用单纯生物衍生骨材料桥接对侧同样大小骨缺损作为对照组 ;分别于术后 1、2、3、6、12周抽取静脉血和作双侧局部组织取材 ,样本应用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD3 /CD4 /CD45 、CD3 /CD8 /CD45 和CD2 8 阳性率。结果　术后第 1、2、3、6、12周实验组和对照组T淋巴细胞亚群CD3 /CD4 /CD45 、CD3 /CD8 /CD45 和CD2 8 阳性率两者差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　生物衍生骨材料和猕猴MSCs复合构建组织工程化骨植入异体猕猴体内其术后 12周内免疫反应水平低 ,可用以修复猕猴节段骨缺损。