脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景:目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达,但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究,对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。目的:探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。设计:随机分组设计、动物实验。单位:吉林大学体育学院运动医学系。材料:实验于2003-03/2004-01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只,随机数字表法分为正常对照组7只,单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组:阻断血流30min7只,阻断血流60min7只;缺血再灌注组:根据脊髓缺血30min后再灌注30,60min,2,4,6,9,12,24h又分为8个时相点,每个时相点7只。方法:采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1mRNA和白细胞介素1βmRNA表达量。主要观察指标:白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。结果:纳入动物77只,均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA(A值)表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著(分别为1.07±0.33,0.60±0.22,0.57±0.12,t=3.7517,11.8526,P<0.01)。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(33.7±3.2),(23.8±4.5),(23.1±2.1),t=2.7988,9.9627,P<0.01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为0.94±0.12,0.52±0.11,0.51±0.10,t=0.3270,6.1274,P<0.01]。④缺血再灌注4,6,12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(316.90±26.00),(361.40±18.00),(406.00±23.00),(164.21±2.00),(180.00±32.00)μg/L,t=1.4103,9.1193,P<0.01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(15.00±2.00),(7.50±1.67),(6.67±1.00)nkat/g,t=3.0122,P<0.01]。结论:再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础,在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化的影响

目的:观察重组人促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后脂质过氧化和超微结构改变的影响。方法:实验于2004-05/08在吉林大学第二医院中心实验室完成。选择健康成年SD大鼠27只,采用改良Allen’s法制作脊髓损伤模型。27只SD大鼠随机数字表法分为3组:治疗组(n=9):造模后立刻给予重组人促红细胞生成素腹腔内注射(5000U/kg)1次;生理盐水对照组(n=9):造模后立刻给予等量生理盐水腹腔内注射1次。正常组(n=9):不作任何处置。采用硫代巴比妥酸法检测脊髓损伤后2,24,48h丙二醛含量变化,使用透射电镜技术评估脊髓损伤后各时相点的超微结构评分。结果:纳入大鼠27只,均进入结果分析。①生理盐水对照组和治疗组伤区丙二醛含量随伤后时间的增加呈不断升高的趋势,生理盐水对照组伤后2,24,48h伤区丙二醛含量较正常组明显增加,差异有显著性意义[分别为(92.45±6.22),(65.62±2.22)nmol/g;(112.56±6.68),(68.20±1.84)nmol/g;(142.38±7.24),(66.40±2.04)nmol/g,P<0.05]。治疗组伤后2,24,48h丙二醛含量较生理盐水对照组明显降低[分别为(68.54±5.88),(92.45±6.22)nmol/g;(75.24±6.28),(112.56±6.68)nmol/g,P<0.05;(88.34±8.52),(142.38±7.24)nmol/g,P<0.01]。②生理盐水对照组的超微结构评分随伤后时间的增加呈不断升高的趋势,而治疗组的超微结构评分随伤后时间的增加则变化不大,相对稳定。治疗组伤后2,24,48h的超微结构评分均较生理盐水对照组明显降低,差异有显著性意义[分别为(1.28±0.45),(3.84±0.25)分;(1.38±0.28),(4.24±0.38)分;(1.42±0.36),(4.98±0.52)分,P<0.05]。结论:重组人促红细胞生成素能够明显降低脊髓损伤后丙二醛含量,减轻脊髓损伤后的脂质过氧化,显著降低脊髓损伤后的超微结构评分,明显减轻脊髓损伤后的超微结构改变,有效地保护脊髓组织,具有明显的神经保护作用。     

2型糖尿病患者交感神经皮肤反应检测的特征

目的:探讨交感神经皮肤反应在2型糖尿病周围神经病变中的诊断价值。方法:于2002-08/2005-12选择青岛大学医学院附属医院内分泌科收治的2型糖尿病患者98例,为糖尿病组,其中病程<5年47例,病程≥5年51例;糖化血红蛋白A1正常36例,糖化血红蛋白A1异常62例。对照组为健康志愿者80例。所有受试对象均采用电刺激法检测交感神经皮肤反应,分别测量上下肢交感神经皮肤反应起始点及峰波幅,取最短潜伏期和最高波幅值用于结果分析。异常判断标准:①未引出交感神经皮肤反应波形。②起始潜伏期大于对照组的x±2.5s。③波幅低于对照组的最小值。结果:纳入糖尿病患者98例和健康志愿者80例,均进入结果分析。①糖尿病组交感神经皮肤反应异常率为58.2%(57/98)。②糖尿病组上下肢交感神经皮肤反应起始潜伏期高于对照组,差异均有显著性意义[上肢分别为(1.83±0.32),(1.45±0.28)s,下肢分别为(2.49±0.53),(1.86±0.47)s,P<0.05],波幅差异无显著性意义(P>0.05)。③交感神经皮肤反应与病程、血糖的关系:糖尿病组病程<5年患者上下肢交感神经皮肤反应起始潜伏期低于病程≥5年患者,差异有显著性意义[上肢分别为(1.71±0.22),(1.98±0.23)s,下肢分别为(2.31±0.33),(2.72±0.29)s,P<0.05],波幅差异无显著性意义(P>0.05)。病程≥5年患者上下肢交感神经皮肤反应波幅低于对照组,差异有显著性意义[上肢分别为(0.78±0.76),(0.96±0.87)mV,下肢分别为(1.47±0.51),(0.67±0.65)mV,P<0.05]。糖化血红蛋白A1正常患者交感神经皮肤反应起始潜伏期低于糖化血红蛋白A1异常患者,差异有显著性意义[上肢分别为(1.75±0.25),(1.97±0.21)s,下肢分别为(2.33±0.23),(2.66±0.36)s,P<0.05],波幅差异无显著性意义(P>0.05)。结论:交感神经皮肤反应可作为评价2型糖尿病周围神经早期植物神经功能状态的敏感指标,交感神经皮肤反应异常与患者的病程、血糖水平相关。     

实时超声剪切成像定量评价肢体挤压伤后局部肌肉损伤

目的 探讨实时超声剪切成像(supersonic shear imaging,SSI)的定量超声弹性图在肢体挤压伤所致局部肌肉损伤中的价值.方法 健康新西兰白兔23只,使用袖带气囊加压法于兔后腿制作肌肉挤压伤动物模型.于解压后30 min、2h、6h、24 h、72 h分别进行实时超声组织弹性成像,获取肌肉组织的弹性值,分析使用组织弹性值评价肌肉损伤程度的准确性.结果 23只兔全部建模成功.左后腿挤压伤面积占体表面积的2.6％～3.0％.灰阶超声显示左后腿肌肉的挤压部分与非挤压部分分界清晰.解压后30 min、2h、6h、24 h、72 h的最大弹性值分别为(19.51±6.74)kPa、(21.47±5.54)kPa、(11.36±5.35)kPa、(15.09±3.31)kPa、(13.72±3.74)kPa,平均弹性值分别为(12.44±3.77)kPa、(13.20±3.60)kPa、(6.80±2.86)kPa、(10.04±2.95)kPa、(6.94±0.97)kPa,均显著高于非挤压区的最大弹性值和平均弹性值(P＜0.001).ROC曲线显示,使用最大弹性值和平均弹性值能够诊断肢体肌肉挤压区,且弹性值越大,诊断价值越大.结论 肢体肌肉挤压伤的弹性平均值与弹性最大值可以定量测定挤压区组织弹性变化,反映组织的硬度和压力变化,在诊断肢体肌肉挤压伤中是常规超声有价值的补充.     

局部亚低温治疗脑出血患者改善神经功能缺损的近期疗效

目的:探讨局部亚低温治疗脑出血的临床疗效。方法:将42例脑出血患者按1∶1配对分为亚低温组(21例)和对照组(21例),对照组给以常规治疗,亚低温组在常规治疗的基础上应用局部亚低温治疗48h,监测患者鼓膜温度和生命体征,采用多田氏公式计算脑水肿量,采用欧洲卒中评分方法评价两组患者神经功能缺损程度。结果:治疗1周及2周后对照组脑水肿量分别为(21.52±5.52),(19.48±5.47)mL;而亚低温组脑水肿量分别为(17.14±4.57),(12.57±4.01)mL;二者比较差异有显著性意义(t=5.66,8.45,P<0.05)。治疗1周及2周后对照组欧洲卒中评分分别为(53.95±8.78),(62.43±7.95)分;亚低温组欧洲卒中评分分别(60.90±8.73),(71.38±7.21)分;两者比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:局部亚低温脑保护治疗结合常规治疗能减轻脑出血患者脑水肿量,减轻脑出血患者的神经功能缺损,提高临床疗效。     

神经生长因子调控随意皮瓣血流速度和皮温的作用

目的:研究皮瓣愈合过程中在神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)作用下皮瓣血流速度和皮温变化。方法:采用大鼠背部随意皮瓣动物模型,以自身对照,于术后实验组一次局部注射66.7μgNGF,应用激光和光导纤维技术连续观察皮瓣血流速度和皮温变化。结果:从术后1d开始,实验组皮瓣各部血流速度均较对照组增加显著,实验组尾部、中部和蒂部的血流速度分别为(0.94±0.32),(1.09±0.53),(1.11±0.94)mm/s,对照组分别为(0.85±0.29),(0.96±0.31),(1.01±0.34)mm/s,两者相比具差异有显著性意义(t=2.39,1.98和2.13,P<0.05),至术后5d,实验组皮瓣中部和蒂部的血流速度各为(0.99±0.42),(0.96±0.25)mm/s,对照组的血流速度各为(0.83±0.37),(0.80±0.41)mm/s,增加非常显著(t=2.60和3.31,P<0.01)。皮瓣中部和尾部的皮温差异从术后1d开始,而蒂部则从3d开始,术后1d时实验组皮瓣中部和尾部的皮温分别为(30.91±1.13),(30.15±0.92)℃,对照组分别为(28.95±1.06),(29.05±1.23)℃,术后3d时实验组蒂部皮温为(30.52±0.62)℃,对照组皮温为(29.31±1.19)℃,两者差异有显著性意义(t=2.12,1.99和2.31,P<0.05)。结论:NGF能通过增加皮瓣的血流速度来提高超长随意皮瓣的成活。     

三七皂甙对烧伤延迟复苏大鼠血管通透性的调控

目的:观察三七皂甙在烧伤休克延迟复苏大鼠中的抗渗作用及对肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素10的调控。方法:实验于2003-07/2005-05在长海医院烧伤中心实验室完成。选择健康成年SD大鼠36只,随机数字表法分为假烫伤组、烫伤组、治疗组,每组12只。烫伤组大鼠采用恒温水烫仪以100℃水烫背部13s,造成大鼠30%TBSAⅢ度烧伤(病理证实)。假烫伤组大鼠以38℃水模拟烫伤过程;治疗组伤后0.5h腹腔注射三七皂甙(100mg/kg);烫伤组及治疗组均于伤后6h腹腔注射乳酸林格液进行延迟复苏。伤后24h采用干湿质量法检测肺脏、心脏及肾脏的组织含水量,采用伊文思蓝比色法测定各脏器血管通透性,采用酶联免疫吸附法测定血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素10的浓度水平。结果:纳入动物36只,均进入结果分析。①烫伤后24h,烫伤组大鼠的肺脏、心脏及肾脏组织含水量显著高于假烫伤组[分别为(82.04±2.05)%,(76.85±2.18)%;(79.09±2.46)%,(73.86±1.49)%;(79.13±1.71)%,(73.39±2.45)%,P<0.01],明显高于治疗组[治疗组分别为(79.91±1.86)%,(76.54±1.73)%,(75.85±1.63)%,P<0.05];而假烫伤组与治疗组大鼠的肺脏、心脏及肾脏组织含水量差异均有显著性意义(P<0.05)。②烫伤组大鼠脏器的血管通透性显著高于假烫组及治疗组[分别为(457.86±43.33),(49.46±10.16),(313.05±19.30)μg/g;(323.69±56.74),(62.86±19.38),(196.72±27.60)μg/g;(346.51±32.27),(59.14±23.24),(216.52±26.48)μg/g,P<0.01];而假烫组与治疗组间大鼠脏器的血管通透性也有显著性差异(P<0.01)。③烫伤组大鼠血清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素10的浓度高于假烫伤组,差异有非常显著性意义(P<0.01);治疗组大鼠三者浓度高于假烫伤组,低于烫伤组,差异也均有显著性意义[分别为(258.91±20.40),(32.68±9.33),(612.30±75.03)ng/L;(101.37±29.86),(15.87±7.46),(208.45±49.04)ng/L;(103.14±26.17),(6.99±2.84),(221.39±33.14)ng/L,P<0.01]。结论:大鼠严重烧伤后,早期使用三七皂甙,能下调肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素10在血浆中的总体水平,控制烧伤后过度全身炎症反应,有助于减轻脏器的水肿,从而减轻烧伤早期脏器损害。     

脑缺血不同时期胰岛素样生长因子-1在大鼠脑内的表达及其意义

目的:观测脑缺血不同时期胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfac-tor,IGF)在脑内的表达,同时探讨IGF-1生物制剂对脑缺血损伤的保护作用。方法:将55只SD大鼠单纯随机分为3组,正常对照组5只,用药组和非用药组各25只。后两组分别再按缺血时间分为1,3,5,7,10d组,每组5只大鼠。除正常对照组外,均建立脑缺血模型,造模后1h非用药组侧脑室内注射生理盐水;用药组侧脑室内注射IGF-1,定时间处死动物,取脑组织固定。免疫细胞化学ABC法,动态观测不同时期大脑皮质IGF-免疫反应阳性细胞数的变化情况。结果:脑缺血后第1,3,5,7天大脑皮质IGF-1免疫反应阳性细胞数非用药组分别为(13.6±0.41),(14.9±0.67),(15.6±0.89),(13.2±0.69)个,较正常对照组(12.2±0.56)个明显增高,差异有显著性意义(t=2.03～3.23,P<0.05或0.01);用药组为(14.5±0.95),(16.3±0.79),(17.1±0.65),(14.2±0.45)个,较相应非用药组比较均有增高趋势,差异有显著性意义(t=1.90～3.06,P<0.05,0.01)。结论:脑缺血损伤后IGF-1表达有明显变化,同时提示了IGF-1可能在脑缺血损伤中起保护作用。     

黄芪对脑创伤早期局部脑皮质血流速度变化的影响

背景:黄芪作为传统的中药,具有抗自由基、增加机体免疫力、改善微循环、保护血管内皮细胞及保护神经系统等多种作用。其中,黄芪的神经血管保护作用与其对局部脑皮质血流速度的调节有关。目的:观察脑创伤后黄芪对局部脑皮质血流速度变化的影响。设计:随机配对设计。单位:解放军兰州军区神经外科研究所。材料:实验于 2000-02/05在兰州军区神经外科研究所外伤实验室进行。取健康雄性 SD 大鼠 75只,随机分成正常对照组 5只、盐水对照组和黄芪组各 35只,后两组又分为创伤后 1,3,6,8,12,24和 48h 等 7个时间点,每个时间点 5只动物。方法:正常对照组不造模,其他 2组采用改进的 Feeney’s方法建立颅脑创伤模型;伤后黄芪组立即腹腔注射黄芪注射液(5g/kg),盐水对照组腹腔注射 0.5m L 生理盐水。主要观察指标:测定创伤后相应时间点大鼠脑组织局部脑皮质血流速度。正常对照组打开骨窗后直接测量。结果:经补充后 75只大鼠进入结果分析。局部脑皮质血流速度:盐水对照组伤后 1h 即低于对照组[(6.90±0.68),(7.94±0.65),P <0.05],伤后24h 降至最低点,伤后 48h 开始回升[(5.86±0.61),(6.15±0.60)]。黄芪组各时间点均高于盐水对照组(P <0.05)。结论:黄芪具有明显增加局部脑皮质血流速度的作用,其作用与黄芪的神经血管保护作用有关。     

靶肌肉注射环磷酸腺苷对周围神经再生的作用

目的:观察靶肌肉注射外源性环磷酸腺苷对大鼠坐骨神经再生的治疗作用。方法:实验于2004-10/2005-03在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠48只,制备大鼠左侧坐骨神经挤压伤模型。实验动物随机数字表法分为3组,每组16只,高剂量组:腓肠肌内注射0.2mL环磷酸腺苷1mg。低剂量组:腓肠肌内注射注射0.2mL环磷酸腺苷0.1mg。对照组:腓肠肌内注射0.2mL生理盐水。术后每日给药1次,共4周。术后4,8周时检测左侧小腿三头肌湿质量。术后8周时检测坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及形态学观察神经再生情况。结果:纳入动物48只,均进入结果分析。①术后4,8周时高剂量组和低剂量组大鼠左小腿三头肌湿质量显著高于对照组[术后4周分别为(1.70±0.58),(1.26±0.71),(0.91±0.24)g;术后8周分别为(2.26±0.62),(1.65±0.16),(1.24±0.37)g],且高剂量组明显高于低剂量组,差异有显著性意义(P<0.01)。②术后8周高剂量组和低剂量组坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及有髓神经纤维计数、髓鞘厚度、轴突直径均高于对照组[运动神经传导速度分别为(33.54±2.65),(26.96±4.12),(19.83±2.74)m/s;复合肌肉动作电位波幅分别为(2.435±1.257),(1.867±0.566),(1.218±0.647)mV;复合肌肉动作电位潜伏期分别为(2.946±0.658),(4.537±0.932),(5.825±1.043)ms;有髓神经纤维计数分别为(1693±201),(1357±185),(876±124)个;髓鞘厚度分别为(1.149±0.138),(0.924±0.086),(0.633±0.105)μm;轴突直径分别为(1.045±0.150),(0.794±0.095),(0.512±0.138)μm],且高剂量组显著高于低剂量组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:靶肌肉注射环磷酸腺苷可促进周围神再生,高剂量环磷酸腺苷对神经再生具有更好的促进作用。