二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生的影响

目的:研究二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生情况的影响。方法:小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、二冬膏2.5g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏10g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组。除正常组外,其余各组采用小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制肺肿瘤小鼠模型。给药与造模同时进行,1次/d,连续15w。二冬膏10g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏2.5g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃给予生理盐水。15w后,取血清和肺脏检测。解剖肺脏,观察肺肿瘤发生率及肿瘤结节数;双抗体夹心-酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-10和肺组织TGF-β1的含量;免疫组化检测肺组织TGF-β1活性的表达。结果:二冬膏能使模型鼠肺肿瘤发生率从86.7%降至40.0~66.7%,平均肿瘤结节数从7.32降至3.97~5.53,降低程度明显,并可明显降低血清中TNF-α、IL-10含量,使肺组织中TGF-β1含量和活性的表达也显著下降。结论:二冬膏能通过降低TNF-α、IL-10、TGF-β1的表达来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展。     

丹参水溶性物质SA-B对TGF-β1活化细胞内Smad与p38MAPK信号传导通路的抑制作用

目的:探究丹参水溶性物质SA-B对TGF-β1活化细胞内Smad与p38MAPK信号传导通路的抑制作用。方法:将肾小管上皮细胞培养液中加入不同的药物,诱导组加入20μg/ml的马兜铃酸进行诱导;实验A1、A2、A3组,在诱导组的基础上分别加入5、10、20μg/ml的丹参水溶性物质SA-B;对照组不加任何药物。细胞培养24、48、72h后检测各组的TGF-β1-mRND水平、培养液中TGF-β1的含量、Smad以及p38MAPK的表达进行,记录检测结果。结果:诱导组的TGF-β1-mRND水平、TGF-β1蛋白含量分泌与对照组相比,均具有统计学意义(P0.05),且实验组的同期诱导组相比,水平显著下降(P0.05)。诱导组的Smad与p38MAPK合成趋势明显,而实验组Smad与p38MAPK的表达呈现下降趋势。结论:丹参的水溶性物质-SA-B对TGF-β1活化细胞内Smad与p38MAPK信号传导通路具有显著的抑制作用。     

黄芪后处理对大鼠肝纤维化中的影响及TGF-β1/Smad2、p38MAPK 作用

目的：研究黄芪对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化肝组织中TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 表达的影响,探讨TGF-茁信号通路在黄芪后处理中可能的抗纤维化机制。方法：60 只Wistar 大鼠被随机分成对照组、模型组、黄芪后处理组及鳖甲软肝片组,其中黄芪后处理组又分为小剂量组、常规剂量组和大剂量组,大鼠背部皮下注射CCl4 构建肝纤维化模型,分别用HE 和VG 染色法染色,肝纤维化程度直接在光学显微镜下观测。同时采用SABC 免疫组化方法检测各实验组TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 的表达情况。结果：与对照组比较,模型组TGF-β1、Smad2 表达明显增强（P < 0.05）,而p38MAPK 表达显著下降（P <0.05）。与模型组比较,黄芪后处理各组中大鼠肝组织中TGF-β1 表达均有减弱（P < 0.05）,且随着黄芪剂量的增加而减少;随着黄芪剂量增加逐步下调Smad2 的表达（P < 0.05）、上调p38MAPK 的表达（P <0.05）。此外,黄芪组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论：黄芪后处理明显影响大鼠肝组织TGF-β1 信号表达,且对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化的作用呈剂量依赖性增强,其可能的机制为负性调节TGF-β1,减少Smad2 及增强p38MAPK 的表达。     

丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的影响研究

目的:观察丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎(Mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠肾组织转化因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)的影响。方法:将46只SD大鼠分为正常组、缬沙坦组、模型组、丹参提取物组,除正常组外,其余各组大鼠建立MsPGN模型。丹参提取物组按丹参5 g/(kg·d)的剂量灌胃给药;缬沙坦组按缬沙坦0.01 g/(kg·d)的剂量溶于温水灌胃,模型组和正常组每天给予等量温水灌胃,连续灌胃12周后处死大鼠。Western blot检测大鼠肾组织TGF-β1和p38 MAPK蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β1和p38MAPK的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白水平、TGF-β1和p38MAPK蛋白相对表达量及mRNA表达均显著升高(P<0.05);与模型组比较,给药6周和12周缬沙坦组、丹参提取物组24 h尿蛋白水平显著降低(P<0.05);TGF-β1和p38MAPK蛋白相对表达量及mRNA表达均显著下降(P<0.05);与缬沙坦组比较,丹参提取物组TGF-β1和p38MAPK mRNA表达均下降(P<0.05)。结论:丹参提取物的肾保护作用可能是通过下调TGF-β1、p38MAPK蛋白和mRNA水平,抑制TGF-β1/p38MAPK信号通路激活来实现的。     

姜黄素对Lewis肺癌小鼠TGF-β1信号转导通路的影响

目的:研究姜黄素对Lewis肺癌小鼠在抑制肿瘤生长过程中TGF-β1、Smad3、Smad7和肿瘤微血管密度的影响,探讨其抗肿瘤血管生成作用的机制。方法:采用c57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤源小鼠瘤细胞悬液于右前肢腋部皮下建立c57BL/6小鼠移植瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺组和姜黄素组,称瘤重计算抑瘤率,采用免疫组织化学染色和HE染色,检测小鼠瘤体组织中TGF-β1、Smad3、Smad7表达,计取肿瘤MVD(mi-crovessel density,MVD)。结果:姜黄素组抑瘤率29.96%,该组瘤组织TGF-β1、Smad3表达均降低,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);Smad7表达与模型组相比增加,差异具有显著性(P<0.01)。姜黄素组能显著抑制肿瘤微血管的生长,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:姜黄素对于小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长具有一定的抑制作用,并能抑制瘤组织微血管形成,其作用靶点可能与其上调Smad7和下调Smad3表达,从而减少TGF-β1在肺癌血管生成过程中的过度表达有关。     

蒙药平喘灵胶囊防治支气管哮喘过程中的相关因子分析研究

目的:探讨蒙药平喘灵胶囊对哮喘模型小鼠气道炎症及白细胞介素17A (IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Smad2/3和Smad7的影响。方法:清洁级雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松片组及平喘灵胶囊1、2、4 g/kg组,采用鸡蛋清白蛋白(OVA)建立实验性哮喘小鼠模型,激发第21 d开始灌胃给予相应药物,模型对照组和正常对照组以生理盐水代替,连续给药8 w。末次给药后24 h内,眼球取血处死,细胞计数器计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞分类数目;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;免疫组织化学法(IHC)检测肺组织Smad2/3、Smad7蛋白相对表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF及血清IL-17A、TGF-β1、TNF-α的含量。结果:与正常对照组比较,模型对照组BALF白细胞分类、BALF及血清IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著升高、哮喘小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平显著下调(P<0.01);小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。与模型对照组比较,蒙药平喘灵胶囊各组BALF白细胞分类、BALF及血清中IL-17A、TNF-α及TGF-β1含量显著降低、哮喘小鼠肺组织Smad2/3蛋白表达水平显著下调,小鼠肺组织Smad7蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论:蒙药平喘灵胶囊对哮喘小鼠气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低BALF及血清IL-17A、TNF-α、TGF-β1含量及下调小鼠肺组织smad2/3蛋白表达水平和上调小鼠肺组织smad7蛋白表达水平有关。     

香菇多糖通过调控SIRT1表达对急性呼吸窘迫综合征小鼠肺损伤的改善作用

目的 探究香菇多糖通过调节SIRT1表达调控p38 MAPK/ATF2信号通路对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺损伤的改善作用。方法 小鼠随机分为对照组、模型组和香菇多糖低、高剂量组(50、100 mg/kg),每组15只。通过鼻腔内滴入6 mg/kg LPS至肺构建ARDS模型，在第0、24小时腹腔注射相应剂量药物，第48小时检测各组小鼠动脉血气指标、肺干重比、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、SIRT1 mRNA和蛋白表达、p38 MAPK和ATF2磷酸化水平。人肺上皮BEAS-2B细胞分为阴性对照组、LPS组、香菇多糖组、香菇多糖+siSIRT1组，通过转染siSIRT1抑制细胞中SIRT1蛋白表达，检测细胞SIRT1蛋白表达、p38 MAPK和ATF2磷酸化水平。结果 与对照组比较，模型组小鼠PaO₂/FiO₂值、SIRT1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),肺湿干重比、肺组织损伤评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织p-p38 MAPK/p38 MAPK和p-ATF/ATF蛋白表达升...     

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1和p38MAPK表达的影响

目的探讨肾安提取液对链脲佐菌素诱导(STZ)的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组[厄贝沙坦10mg/(kg.d)]、肾安提取液组[肾安提取液9.088 mg/(kg.d)],另设正常对照组,疗程4周。RT-PCR检测肾脏TGF-β1和p38MAPK mRNA的表达;免疫化学法检测肾脏磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)和纤连蛋白(FN)表达;并检测血糖、24 h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数、肾小球基底膜(GBM)厚度。结果肾安组及厄贝沙坦组肾脏TGF-β1和p38 MAPK mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏p-p38MAPK和FN的表达较模型组明显减少(P<0.01);24h尿蛋白定量、BUN、Scr、肾质量指数、肾小球硬化指数、GBM厚度均较模型组明显改善(P<0.01);肾安组及厄贝沙坦组间上述指标无显著性差异(P>0.05);模型组、厄贝沙坦组及肾安提取液组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制TGF-β1和p38MAPK的表达有关。     

加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌组织、骨髓组织TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的:观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌组织、骨髓组织TGF-β_1/Smad信号通路的影响。方法:建立气阴两虚型C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,随机分为正常对照组、模型组、加味龟鹿二仙胶汤组、顺铂组及顺铂+加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组,每组20只,干预21 d。观察小鼠瘤质量、抑瘤率及骨髓有核细胞计数,Western Blot检测各组移植瘤组织及骨髓组织中TGF-β_1、Smad4和Smad7的蛋白表达。结果:药物干预后,与模型组比较,联合组肿瘤质量均显著降低,移植瘤组织中TGF-β_1、Smad4表达显著降低,Smad7表达显著升高,骨髓组织中TGF-β_1、Smad4、Smad7表达均显著降低(P0.01)。加味龟鹿二仙胶汤组骨髓有核细胞计数显著高于模型组(P0.01)。结论:加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可显著抑制肿瘤增长,提高抑瘤率,减轻骨髓抑制。其机制可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号通路来实现。     

防己黄芪汤对大鼠心肌纤维化的保护作用

目的:研究防己黄芪汤对心肌纤维化大鼠的保护作用及其机制。方法:48只SD大鼠随机分为6组:空白组、模型组、防己黄芪汤4.37g/kg组、防己黄芪汤8.73g/kg组、防己黄芪汤17.46g/kg组、卡托普利0.1g/kg组。模型组、防己黄芪汤各剂量组和卡托普利组大鼠采用皮下多点注射异丙肾上腺素5mg/(kg·d)连续7天,制备心肌纤维化模型,空白组大鼠注射等量生理盐水。造模后灌胃给药,4周后检测各组大鼠心脏血流动力学变化,计算心脏重量指数,HE染色及Masson染色观察心肌病理形态学变化。筛选防己黄芪汤最佳给药剂量并探索作用机制:用ELISA法测大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度,免疫组化法检测心肌中CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达,Western-blot法检测p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1的表达。结果:与模型组比较,防己黄芪汤8.73g/kg剂量组和防己黄芪汤17.46g/kg剂量组心肌功能明显改善,HWI、LVWI、CVF值均明显降低;防己黄芪汤4.37g/kg剂量组不能改善心肌功能,HWI、LVWI值与模型组比较无统计学差异,但一定程度上改善了病理损伤,CVF值较模型组明显降低。防己黄芪汤8.73g/kg组大鼠血浆AngⅡ水平和心肌组织中p38MAPK、p-p38MAPK、TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达较模型组均明显降低。结论:防己黄芪汤对心肌纤维化具有保护作用且8.73g/kg的剂量最佳,其可能机制是通过降低AngⅡ的水平来抑制p38MAPK的表达及其磷酸化,进而下调了TGF-β1的表达,使CollagenⅠ、CollagenⅢ合成减少。     

蜂毒素抑制博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的机制研究

目的:观察蜂毒素对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用。方法:70只SPF级C57BL/6小鼠被随机分为正常组10只和模型组、地塞米松组、蜂毒素低剂量组、蜂毒素中剂量组、蜂毒素高剂量组各12只。除正常组外,均采用气管穿刺注入博莱霉素(BLM)制备肺纤维化小鼠模型。从术后第1天开始,地塞米松组按3 mg/kg的剂量腹腔注射,蜂毒素低、中、高剂量组分别给予5μg/(kg·d)、10μg/(kg·d)、20μg/(kg·d),对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续2周。分别于第7、第14天处死动物,收集小鼠外周血样本,通过ELISA方法检测血清转化生长因子(TGF-β1)、胶原蛋白I(Collagen I)、胶原蛋白III(Collagen III)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的水平。取肺组织进行苏木精-伊红(HE)分析,Masson染色和羟脯氨酸(HYP)评估以观察组织病理学变化和胶原沉积。采用实时荧光定量(Realime PCR)法和蛋白兔疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3等蛋白和基因的表达变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP、TGF-β1、Collagen I、Collagen I的含量升高(P 0. 05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达升高(P 0. 05);与模型组比较,蜂毒素中高剂量组血清HYP、TGF-β1、Collagen I、Collagen I的含量下降(P 0. 05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:蜂毒素可以减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的程度,其机制可能与抑制TGF-β1/Smads通路有关。     

基于TGF-β1/p38MAPK通路探讨益气升清方对糖尿病大鼠肾组织的影响

目的:探讨益气升清方对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1/p38MAPK通路的影响。方法:SPF级大鼠60只,正常组10只,其余腹腔注射STZ制备DM模型。成模后随机分为模型组（等量蒸馏水）、厄贝沙坦组［27 mg/(kg·d)］、中药低剂量组［3.465 g/(kg·d)］、中药中剂量组［6.93 g/(kg·d)］、中药高剂量组［13.86 g/(kg·d)］,每组10只,给药8周,检测血糖、Scr、BUN,观察肾组织的病理,用荧光定量PCR和免疫组化法检测TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA和蛋白的表达。结果:造模后各组血糖较正常组有显著性升高（P<0.01）,但组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组大鼠血清BUN、Scr显著增高（P<0.01）,肾组织有大量TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达（P<0.01）;与模型组比较,各观察组病理损害明显减轻,血清BUN、Scr明显降低（P<0.01）,TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达明显减少（P<0.01）,厄贝沙坦组、中药中、高剂量组优于中药低剂量组（P<0.01）。结论:糖尿病大鼠TGF-β1/p38MAPK通路的激活导致肾间质病变,益气升清方可减少TGF-β1、p38MAPK的表达,从而减少FN的沉积,起到保护肾脏的作用。     

槲皮素对基于TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路抗博来霉素致小鼠肺纤维化的作用及机制研究

目的:研究槲皮素对基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路抑制博来霉素致小鼠肺纤维化的作用及机制。方法:85只ICR小鼠中随机取15只为假手术对照组，另64只肺纤维化模型小鼠随机分为模型对照组、醋酸泼尼松2.5 mg/kg组、槲皮素49、98 mg/kg组，每组16只。造模干预28 d后，各组灌胃相应药物或等体积生理盐水，连续4 w。用动物肺功能检测仪检测小鼠肺功能指标；检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-8及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量；苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化；Masson染色法观察肺组织纤维化程度并进行评分；RT-qPCR法检测小鼠肺部Tgfb1、P38 Mapk、Nfkb mRNA表达；Western blot检测小鼠肺部TGF-β1、P38 MAPK、p-P38 MAPK、NF-κB蛋白相对表达。结果:与假手术对照组比较，模型对照组FVC、FEV _0.1降低，TNF-α、IL-6、IL-8、HYP含量增加，肺组织病理...     

甘草干姜汤对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化SIRT1和TGF-β1蛋白表达的影响

目的:探讨甘草干姜汤对肺纤维化信号转导通路影响作用及机制研究。方法 :SD大鼠60只,随机分为正常对照组,模型组,醋酸泼尼松组,甘草干姜汤0.5g/kg、1g/kg和2g/kg剂量组。采用博莱霉素气管注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,分别测定大鼠肺组织活性氧、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和丙二醛及羟脯氨酸含量,采用免疫组化实验观察肺组织病理学改变,免疫印迹法检测SIRT1和TGF-β1等相关蛋白的表达。结果:与模型组相比,1g/kg和2g/kg甘草干姜汤作用28天后能够显著提高大鼠肺组织超氧化物歧化酶活力,降低活性氧、丙二醛和羟脯氨酸含量,同时,显著下调TGF-β1、Smad3、α-SMA、ColⅠ和SIRT1蛋白表达并上调Smad7蛋白表达。结论:甘草干姜汤能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,并通过增加抗氧化防御系统和调控SIRT1和TGF-β1发挥作用。     

藤茶总黄酮通过调控TGF-β1/p38MAPK通路对肝纤维化大鼠的作用及机制研究

目的 探讨藤茶总黄酮(TF)通过调控转化生长因子β1/p38-促分裂原活化蛋白激酶(TGF-β1/p38MAPK)通路对肝纤维化大鼠的作用及机制.方法 65只Wistar大鼠,随机分为5组,对照组(灌胃生理盐水)、模型组(灌胃生理盐水)、藤茶总黄酮低剂量组(灌胃75 mg/kg)、藤茶总黄酮高剂量组(灌胃300 mg/kg)、激动剂组(灌胃300 mg/kg藤茶总黄酮加腹腔注射2 mg/kg anisomycin),每组13只,除对照组外,余组采用皮下注射25％CCl4建立肺纤维化模型,给予相应药物干预5周.检测5组血清ALT、AST、肝组织ColI、ColⅢ水平,HE染色观察肝组织病理改变,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝组织中TGF-β1、p38MAPK、α 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA相对表达量,Western blot法检测肝组织中TGF-β1、p38MAPK、p-p38MAPK、α-SMA、MMP-9蛋白相对表达量.结果 与模型组比较,藤茶总黄酮低剂量组、藤茶总黄酮高剂量组及激动剂组血清ALT、AST及肝组织ColI、ColⅢ水平均降低,其中藤茶总黄酮高剂量组ALT、AST、ColI低于藤茶总黄酮低剂量组和激动剂组(P<0.05).HE染色结果显示模型组肝组织结缔严重,肝脏明显纤维化,藤茶总黄酮低剂量组、藤茶总黄酮高剂量组、激动剂组肝纤维化程度明显减轻,其中藤茶总黄酮高剂量组肝脏恢复程度最佳.与模型组比较,藤茶总黄酮低剂量组、藤茶总黄酮高剂量组及激动机组TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白相对表达量均降低,p-p38MAPK蛋白相对表达量降低,MMP-9 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P<0.05),其中藤茶总黄酮高剂量组TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白相对表达量及p-p38MAPK蛋白相对表达量均低于藤茶总黄酮低剂量组及激动剂组,MMP-9 mRNA和蛋白相对表达量均高于藤茶总黄酮低剂量组及激动剂组(P<0.05).结论 藤茶总黄酮可显著抑制大鼠肝纤维化,其调控机制可能与TGF-β1/p38MAPK信号通路有关.     

桔梗元参汤对变应性鼻炎小鼠行为学和p38MAPK/COX-2信号转导通路的影响

目的:观察桔梗元参汤对变应性鼻炎(AR)小鼠行为学改变及p38MAPK/COX-2信号转导通路的影响。方法:采用卵白蛋白(OVA)建立变应性鼻炎小鼠模型,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各组IgE水平,辅以行为学评分考察模型制备及药物治疗情况,并用免疫印迹实验检测p38MAPK、COX-2和MUC5AC蛋白表达。结果:桔梗元参汤(3⁹g/kg)能够显著减轻AR小鼠鼻部过敏症状。桔梗元参汤低(3 g/kg)剂量组、中(6 g/kg)剂量组、高(9 g/kg)剂量组与AR模型组比,能够显著降低IgE水平,并显著下调p38MAPK、COX-2和MUC5AC蛋白表达。结论:桔梗元参汤散能够显著改善OVA所致小鼠过敏性鼻炎症状并通过p38MAPK/COX-2信号转导途径发挥作用。     

清脑通络汤对脑梗死小鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的探讨清脑通络汤对脑梗死小鼠脑组织中TGF-β/Smad通路的影响。方法将32只雄性C57BL/6小鼠随机等分为大脑中动脉栓塞(MCAO)组、清脑通络汤组、假手术组和空白组,每组8只。MCAO组和清脑通络汤组均应用线栓法构建右侧大脑中动脉栓塞模型,随后MCAO组给予生理盐水1 mL/100 g灌胃,清脑通络汤组给予清脑通络汤1 mL/100 g灌胃,均3次/d;假手术组仅暴露颈内动脉后缝合皮肤,随后给予生理盐水1 mL/100 g灌胃,3次/d;空白组不进行任何操作。术后72 h,对4组小鼠进行神经功能缺损评分(mNSS),RT-QPCR法检测缺血半暗带脑组织(假手术组和空白组取相应位置脑组织)中TGF-β、Smad2、Smad4和p21表达情况。结果 MCAO组和清脑通络汤组mNSS评分均明显高于假手术组和对照组(P均<0.05),清脑通络汤组mNSS评分明显低于MCAO组(P<0.05)。MCAO组TGF-β、Smad2、Smad4表达水平均显著高于其他3组(P均<0.05),p21表达水平均显著低于其他3组(P均<0.05);清脑通络汤组除Smad2表达水平明显高于假手术组和空白组外(P均<0.05),TGF-β、Smad4和p21表达水平与假手术组和空白组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论清脑通络汤可调控TGF-β/Smad信号通路相关基因的转录与表达,并通过提高靶基因p21的表达而对脑梗死小鼠起到一定的脑保护作用。     

铁皮石斛多糖通过抑制TGF-β_(1)/Smad2/3通路对抗二氧化硅致肺损伤作用北大核心

目的:明确铁皮石斛多糖对二氧化硅(SiO_(2))致矽肺的保护作用及对TGF-β_(1)/Smad2/3通路的影响。方法:采用SiO_(2)致人肺细胞A549损伤模型,铁皮石斛多糖干预后,MTT法检测细胞活力,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;采用滴鼻法给予SiO_(2)复制致小鼠肺组织损伤模型,分别设正常对照组、模型组、铁皮石斛多糖高(500 mg/kg)、低(250 mg/kg)剂量组,HE染色和天狼星红染色观察小鼠肺组织病理学变化;试剂盒检测小鼠血清SOD、MDA水平和肺组织中羟脯氨酸(HYP)水平;蛋白免疫印迹法检测细胞和肺组织中TGF-β_(1/2)、p-Smad蛋白表达。结果:铁皮石斛多糖(200μg/mL)可显著降低SiO_(2)对细胞增殖的抑制作用,降低细胞内ROS水平(P<0.05或P<0.01)。铁皮石斛多糖各剂量组小鼠肺组织炎症细胞和胶原分布均较模型组明显减少。铁皮石斛多糖可有效逆转SiO_(2)引起的血清SOD活性降低及血清MDA和肺组织中HYP含量升高,抑制细胞和肺组织内TGF-β_(1/2)蛋白表达和Smad蛋白磷酸化水平(P<0.05或P<0.01)。结论:铁皮石斛多糖可减轻SiO_(2)诱导人肺泡细胞损伤,改善矽肺小鼠肺纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β_(1)/Smad2/3信号通路有关。     

肝豆扶木汤对TX小鼠肝纤维化的保护作用及机制研究

目的 探讨肝豆扶木汤（Gandou Fumu Decoction, GDFMD）对Wilson病肝纤维化模型TX（toxic milk）小鼠TGF-β1/Smad信号通路表达的影响。方法 60只TX小鼠随机分为模型组、GDFMD高、中、低剂量组和青霉胺组,每组12只,另设正常组12只。GDFMD高、中、低剂量组按31.2、15.6、7.8 g生药/kg进行灌胃,青霉胺组按0.1 g/kg（0.2 mL/10 g）灌胃,模型组和正常组给予等容积生理盐水,每天 1次,连续灌胃4周。采用赖氏法检测血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）活力,溴甲酚绿法检测血清白蛋白（albumin,ALB）含量;采用HE染色、Masson染色观察肝组织病理变化;采用RT-PCR和Western blot检测肝组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA和蛋白的表达。结果 （1）与正常组比较,模型组血清ALT、AST活力升高,ALB含量降低（P<0.01）,与模型组比较,GDFMD高、中剂量组和青霉胺组ALT、AST活力降低,ALB含量升高（P<0.01）,GDFMD低剂量组AST活力降低,ALB含量升高（P<0.05）。（2）模型组可见肝纤维化特征性病理表现,各用药组均有不同程度改善。（3）与正常组比较,模型组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达升高,Smad7 mRNA和蛋白表达降低（P<0.01）,与模型组比较,GDFMD高、中剂量组和青霉胺组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达降低,Smad7 mRNA和蛋白表达升高（P<0.05, P<0.01）,GDFMD低剂量组TGF-β1 mRNA和蛋白、Smad2蛋白表达降低,Smad7蛋白升高（P<0.05, P<0.01）。结论 GDFMD具有抗肝纤维化作用,其作用机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路相关因子的基因与蛋白表达有关。     

参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎模型大鼠IL-1β、IL-4及p38MAPK基因蛋白表达的影响

目的:研究参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜组织内IL-1β、IL-4及p38MAPK基因和蛋白表达的影响。方法:SPF级Wistar大鼠48只,雌雄各半,按随机数字表法分为空白组(n=8)和模型组,采用内外综合因素法复制脾虚湿困型UC大鼠模型,造模成功后将大鼠按随机数字表法分为模型组、参苓白术散组(24g/kg、12g/kg、6g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg),每组8只;其中空白组、模型组大鼠每日按容积10g/kg体重灌服蒸馏水;参苓白术散各组每日分别给予24g/kg、12g/kg、6g/kg剂量的参苓白术散煎剂灌胃;柳氮磺胺吡啶组给予0.2g/kg剂量的柳氮磺胺吡啶药液灌胃,连续治疗3周后,ELISA法检测各组大鼠结肠组织内IL-1β、IL-4含量;q PCR法检测结肠组织内IL-1βmRNA、IL-4 mRNA及p38MAPK mRNA表达;Westernblot法检测结肠组织内p38MAPK蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,结肠组织内IL-1β含量及IL-1βmRNA表达水平显著升高,IL-4含量及IL-4 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),p38MAPK基因和蛋白表达水平明显升高;与模型组比较,参苓白术散组大鼠一般生存状况明显改善,结肠组织内IL-1β含量及IL-1βmRNA表达水平明显降低,IL-4含量及IL-4mRNA表达水平明显升高,p38MAPK基因和蛋白表达水平明显降低,以参苓白术散治疗组(24g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg)治疗作用明显;参苓白术散治疗组(24g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg)相比较,二者之间差异无统计学意义。结论:参苓白术散水煎液(24g/kg、12g/kg)具有改善脾虚湿困型UC大鼠一般生存状况,并通过上调结肠组织IL-4蛋白含量及其mRNA表达水平,下调IL-1β和p38MAPK基因蛋白表达水平而发挥保护结肠黏膜的作用。