自噬在艾滋病毒感染巨噬细胞中作用的研究进展

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所致的慢性传染病,侵犯巨噬细胞并使其成为病情复发的重要源头。自噬(autophagy)是有核细胞内的生理过程,参与免疫应答。近年来自噬逐渐成为研究热点,本文将就HIV各成分对巨噬细胞自噬过程的调节及机制研究最新进展作一综述,希望能为AIDS的治疗提供新思路。     

自噬调控巨噬细胞参与构建肿瘤微环境研究进展

自噬作为细胞高度保守的胞内代谢产物及衰老、损伤细胞器的降解途径，参与维持细胞稳态。肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAMs）是构成肿瘤微环境的关键细胞，通过极化为M2型促进肿瘤发生、发展及转移。自噬通过调控TAMs极化、代谢来参与肿瘤微环境的构建。本文就自噬调控巨噬细胞与肿瘤微环境相互作用的机制进行阐述，旨在为靶向肿瘤微环境内TAMs和肿瘤细胞自噬调控的治疗提供新的理论基础。     

ARDS中肺泡巨噬细胞自噬对肺损伤调节作用的研究进展

失控的炎症反应是急性呼吸窘迫综合征（ARDS）发生发展的关键环节,而肺泡巨噬细胞自噬在ARDS的炎症反应中发挥重要的调节作用。本文对相关文献进行回顾,以深入了解在ARDS中肺泡巨噬细胞发生自噬的具体机制及肺泡巨噬细胞自噬对肺损伤的影响,为ARDS的治疗提供进一步的研究方向。     

巨噬细胞极化与代谢性疾病的研究进展

<正>随着社会的日益进步,肥胖的发病率越来越高,肥胖及由它引起的各种代谢疾病已成为21世纪威胁人类健康的重要原因之一,因而肥胖及相关的代谢综合征已成为当前研究的热点。肥胖常伴随着一系列的代谢性疾病,包括胰岛素抵抗、2型糖尿病、脂肪肝、动脉粥样硬化及退行性疾病(如痴呆)、呼吸     

自噬和抗肿瘤免疫关系的研究进展

自噬是真核细胞进化过程中相对固定的蛋白质降解途径。真核细胞通过自噬实现对长寿命蛋白质和细胞器的降解和重复利用。自噬在维持真核细胞合成代谢和分解代谢的平衡作用上备受关注。肿瘤细胞普遍存在着合成代谢和分解代谢的     

巨噬细胞极化与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化是一种大中动脉壁的慢性炎症疾病,巨噬细胞参与了动脉粥样硬化的整个过程,病变中初始巨噬细胞在微环境极化因子的诱导下,改变自身表型和功能,极化为经典M1、替代M2型Mφ,两个表型及功能不同的巨噬细胞的相对比例影响动脉粥样硬化的进展及消退。下面就动脉粥样硬化中巨噬细胞极化、极化调节及二者与动脉粥样硬化关系进行综述,以期寻找新的治疗动脉粥样硬化的方法。     

干眼症小鼠模型自噬水平变化及其对炎症反应的调节作用研究

目的 探究干眼症小鼠模型自噬水平变化及其对炎症反应的调节作用研究。方法 选取6～8周龄无特定病原级雄性小鼠120只,随机数字表法分为正常组、假手术组、手术对照组、雷帕霉素组4组,每组各30只。通过切开双侧睾丸和附睾制备干眼症小鼠模型,正常组小鼠不做任何处理,假手术组小鼠手术只切开阴囊而不切除睾丸,手术对照组小鼠于建模后经腹腔注射0.9%氯化钠溶液,雷帕霉素组于建模后经腹腔注射200μL雷帕霉素。各组分别于给药后2、4、8、24 h取3只小鼠行泪腺破裂时间检查、角膜荧光素染色检查及取双眼泪腺、角膜组织做切片,行免疫组织化学染色观察小鼠角膜上皮细胞自噬泡聚集数量及炎症因子白细胞介素2(IL-2)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 与正常组、假手术组比较,手术对照组2、4 h时泪腺破裂时间更长,8、24 h时泪腺破裂时间更短,差异均有统计学意义(P <0.05);与手术对照组比较,雷帕霉素组2、4 h时泪腺破裂时间更短,8、24 h时泪腺破裂时间更长,差异均有统计学意义(P <0.05)。与正常组、假手术组比较,手术对照组各时间点IL-2、CRP...     

推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠炎症、氧化应激及细胞自噬相关因子的影响

目的 观察推拿对大鼠骨骼肌急性钝挫伤修复过程中炎症、氧化应激、细胞自噬相关因子的影响,探讨推拿治疗骨骼肌损伤可能的作用机制。 方法 采用随机数字表法将42只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为正常组（n=6）、模型组（n=18）、治疗组（n=18）,模型组和治疗组再根据取材的时间点随机分为1d、7d、14d三个亚组（n=6）。模型组和治疗组用自备打击器建立腓肠肌急性钝挫伤模型,治疗组于造模48h后开始推拿治疗,每日1次,每次15min。各组分别于各自的取材时间点心脏采血后取损伤侧腓肠肌,苏木精-伊红染色(HE）观察损伤部位腓肠肌形态学变化;酶联免疫法（ELISA）检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E2（PGE2）表达水平;紫外-可见分光光度法检测各组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）含量;Western blotting检测各组大鼠腓肠肌自噬微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Bcl-2同源结构域蛋白Beclin1、泛素结合蛋白P62表达水平。 结果 骨骼肌损伤修复过程中,HE染色显示,各时间点模型组较正常组细胞形态崩塌,肿胀明显,7d和14d亚组有成肌细胞核出现。各时间点治疗组较模型组恢复更好,新生肌细胞较多,形态更趋正常。ELISA结果显示,模型组各取材时间点较正常组同取材时间点血清促炎因子明显升高,但治疗组1d和7d组较模型组同取材时间点显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。紫外-可见分光光度法结果显示,模型组血清SOD和MDA含量较正常组明显升高,治疗组SOD较模型组同取材时间点显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）,MDA较模型组同取材时间点显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。Western blotting结果显示,模型组各取材时间点较正常组腓肠肌LC3（II/I）、Beclin1明显降低,P62明显升高,而治疗组较模型组同取材时间点LC3（II/I）、Beclin1显著升高,P62显著降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 骨骼肌损伤后,其炎症及氧化应激水平明显升高,细胞自噬活性明显降低,通过推拿治疗能有效减轻机体炎症反应,降低其氧化应激损害,提高组织细胞自噬活性,从而加速受损组织的修复,这可能是推拿促进骨骼肌损伤修复的机制之一。     

自噬对慢性髓系白血病的双重作用

自噬是溶酶体介导的,以降解和清除衰老的细胞器及错误折叠蛋白质为主,并产生游离氨基酸、脂肪酸供细胞循环利用,以维持细胞内环境稳定的自降解过程。自噬与慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)的发生、治疗、耐药、复发等方面密切相关。自噬是一把双刃剑,对CML具有诱导细胞死亡和促进细胞存活双重作用。明确不同治疗条件下自噬对CML的不同作用,探索不同的自噬途径,有针对性联合自噬诱导剂或自噬抑制剂,对于提高疗效,克服耐药和复发,促进CML的治愈具有重要意义。本文就自噬对慢性髓系白血病的双重作用做一综述。     

巨噬细胞极化对溃疡性结肠炎病情发展的影响

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因不明的结肠直肠非特异性或特发性炎症,病变呈连续性弥漫性分布,病程迁延不愈,轻重不等。该病在西方国家较常见,欧美和北美的UC发病率为(10~20)/100 000,而患病率达(100~200)/100 000。我国近年报道的UC病例明显增多,基于多家医院病例统计推测,我国的UC患病率为11.6/100 000,且有     

自噬与心肌纤维化

<正>组织纤维化几乎可累及人体所有器官、系统,是许多慢性疾病的基本病理改变,引起许多致残、致死性疾病的发生。心肌纤维化与心房颤动、慢性心力衰竭等多种心血管疾病的发生密切相关。自噬是真核细胞内特有的一种高度保守的代谢过程,与细胞的生长、发育及细胞稳态的平衡的维持密不可分。多项研究表明自噬     

线粒体自噬与自身免疫性疾病的研究进展

线粒体作为代谢活动供能的细胞器被大家所熟知,在免疫系统更是扮演不可或缺的角色。因线粒体功能缺陷而产生大量细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS),引起细胞功能障碍,从而也决定了细胞生存能力下降和免疫系统功能异常等结局。线粒体自噬作为目前研究比较热门的一种选择性自噬,其发生机制及所涉人类疾病也是目前研究热点。本文对线粒体自噬与免疫系统的研究进展进行综述,从而了解线粒体自噬与自身免疫系统疾病所存在的关系。     

结核分枝杆菌Rv3737抑制巨噬细胞自噬促进耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活

目的 了解结核分枝杆菌跨膜蛋白Rv3737对耻垢分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的作用。方法 通过PCR扩增结核分枝杆菌Rv3737目的基因,T4连接酶连接Rv3737及穿梭质粒pMV261,构建pMV261-Rv3737,双酶切及测序验证pMV261-Rv3737,通过电转将pMV261-Rv3737及pMV261-Vector电转至耻垢分枝杆菌感受态细胞中以构建过表达Rv3737的耻垢分枝杆菌菌株（MS::pMV261-Rv3737）和对照菌株（MS::pMV261）,PCR及Western blot验证过表达Rv3737的耻垢分枝杆菌菌株。利用分光光度计检测OD600评估过表达Rv3737对耻垢分枝杆菌体外生长的影响。将MS::pMV261-Rv3737及MS::pMV261感染巨噬细胞,通过菌落形成单位（CFU）计数检测耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活,用Western blot及激光共聚焦检测自噬相关蛋白LC3II的变化。结果 Rv3737不影响耻垢分枝杆菌的体外生长,但促进耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活,过表达Rv3737明显抑制LC3II的表达,激光共聚焦结果显示过表达Rv3737...     

自噬真核细胞在不动杆菌清除中的机制及诱导巨噬细胞凋亡的蛋白质组织学研究

目的观察自噬真核细胞在不动杆菌清除中的机制及对诱导巨噬细胞凋亡蛋白质组织学的影响。方法取OCR雌性小鼠24只,建立小鼠不动杆菌感染模型,随机分为对照组(n=12)和观察组(n=12)。对照组注射生理盐水,观察组注射自噬真核细胞,测定两组小鼠不动杆菌清除情况及诱导巨噬细胞凋亡的蛋白质组织学情况。结果两组小鼠植入后即刻病灶组织细菌定量比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组植入后24、48h病灶组织细菌定量,显著低于对照组(P0.05);观察组小鼠注射自噬真核细胞后肺部组织基本正常,肺泡腔开放,未见异常物质,肺泡壁无明显增厚,且壁内未见炎性细胞浸润。对照组小鼠由于注射生理盐水缺乏不动杆菌清除能力导致肺部可见大量炎性细胞浸润,血管扩张,部分小鼠存在充血现象。结论不动杆菌小鼠体内注射自噬真核细胞能提高机体清除率,诱导巨噬细胞凋亡。     

巨噬细胞极化及其信号通路的研究进展

<正>机体内巨噬细胞来源广泛,由血液中的单核细胞、骨髓中的造血干细胞和胸腺内的早期T淋巴细胞分化而来,其中血液中的单核细胞穿出血管进入结缔组织分化形成巨噬细胞是最主要的途径。巨噬细胞分布于全身组织,具有组织特异性,包括存在于肝组织中的KCs(Kuppfer细胞)、肺组织中的肺泡巨噬细胞、脑组织中的小胶质细胞、脂肪组织中的脂肪组织巨噬细胞、骨组织中的破骨细胞和腹腔中的腹腔巨噬     

双氯芬酸钠对骨关节炎大鼠模型软骨细胞炎症和滑膜巨噬细胞极化的影响

目的探究双氯芬酸钠对骨关节炎(OA)大鼠模型软骨细胞炎症和滑膜巨噬细胞极化的影响。方法 45只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠用于本研究,大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射单碘乙酸(MIA)溶液诱导OA模型。根据实验目的将实验大鼠分为3组:对照组(关节内注射无菌0.9%氯化钠溶液作为实验对照,n=15),OA模型组(大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射MIA诱导OA模型,n=15),双氯芬酸钠组(MIA注射后14 d,用双氯芬酸钠口服治疗8 d,n=15)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-12和IL-10浓度。使用相应试剂盒测定大鼠血清丙二醛、还原型谷胱甘肽(GSH)和过氧化物歧化酶(SOD)浓度。通过蛋白印迹分析炎症介质相关蛋白的表达。通过免疫组织化学分析检测CD86和Arg1的蛋白表达。通过免疫细胞化学测定检查大鼠滑膜组织中CD86⁺和CD163⁺巨噬细胞的数量。组织学和免疫组织化学分析大鼠关节组织。通过膝弯曲试验和步态分析得分评估各组大鼠的关节疼痛。...     

细胞凋亡与自噬关系的探讨

细胞凋亡与自噬同属于程序性细胞死亡,而上述二者对于维持细胞和机体的稳态均是必不可少的基本生理机制.细胞凋亡与自噬之间既有区别又有联系,而两者关系较为复杂,迄今为止尚未被完全阐明.笔者对细胞凋亡与自噬之间的关系进行综述,以期为临床研究及基础实验提供理论参考.     

巨噬细胞集落刺激因子对巨噬细胞极化及卵巢癌细胞侵袭、转移的影响

目的探讨卵巢癌微环境中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)促进M2型巨噬细胞的极化和浸润,及其对于癌细胞侵袭、转移的影响。方法选取卵巢癌细胞系A2780和SKOV3与THP-1来源巨噬细胞,在体外构建共培养模型,ELISA和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测培养基中M-CSF含量及其mRNA的表达水平。流式细胞术分析CD68~+CD163~+M2型巨噬细胞的极化比例。Transwell迁移试验检测2种卵巢癌细胞系与M2型巨噬细胞共培养后侵袭、转移能力的变化。免疫组化染色法检测卵巢癌(52例)及同期卵巢良性肿瘤(18例)石蜡组织切片中M-CSF、CD68~+、CD163~+和E-钙黏蛋白(E-cad)的表达及其相关性,并分析M-CSF与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果 A2780和SKOV3细胞与巨噬细胞共培养后,其上清中M-CSF浓度明显高于2种癌细胞单独培养组(t分别为14.315、12.338,P均0.01)。荧光定量PCR结果显示,升高的M-CSF来源于共培养后卵巢癌细胞的分泌(t分别为29.915、36.826,P均0.01)。CD68~+CD163~+M2型巨噬细胞在A2780和SKOV3共培养组的极化比例分别为(6.14±0.50)%和(7.32±0.67)%,明显高于单独培养组(1.82±0.34)%,差异有统计学意义(t分别为12.289、12.711,P均0.01)。Transwell试验结果显示,2种卵巢癌细胞共培养后其侵袭能力增强(24.00±4.81 vs 75.20±6.42,t=11.058;18.40±2.31 vs 61.60±9.66,t=7.537,P均0.01)。卵巢癌组织中M-CSF的表达与CD68~+、CD163~+阳性细胞数正相关且均高于对照组(r分别为0.690、0.596,P均0.01),而E-cad阳性表达则与之呈负相关且低于对照组(r=-0.566,P0.01)。M-CSF表达在不同肿瘤FIGO分期、分化程度和淋巴结转移情况组间差异有统计学意义(χ~2分别为6.240、6.612、4.544,P均0.05)。结论卵巢癌微环境中M-CSF的表达升高诱导CD68~+CD163~+M2型巨噬细胞的极化和浸润,进而促进癌细胞的侵袭、转移。     

叶酸、自噬与宫颈癌关系的研究进展

宫颈癌是最常见的生殖道恶性肿瘤之一。宫颈癌的具体发病机制复杂,高危型人乳头瘤病毒感染是导致宫颈癌发生的主要原因之一,但并非唯一危险因素,多项研究表明叶酸的缺乏是导致宫颈癌发生的重要危险因素。细胞自噬是真核生物细胞内物质进行周转的相对保守的重要生理过程,近年来在肿瘤发生发展的研究中,细胞自噬机制的研究受到越来越多的关注,且许多研究证实自噬在宫颈癌的发展过程中起着至关重要的作用。