电针对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡巨噬细胞M1极化的影响

目的:观察电针"足三里"和"肺俞"对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺泡巨噬细胞M1极化的影响,探讨电针抗炎的可能机制。方法:将40只SD大鼠随机分为正常组、正常电针组、模型组和模型电针组,每组10只。采用单纯烟熏法复制COPD大鼠模型。正常电针组和模型电针组大鼠给予电针双侧"足三里"和"肺俞",每次30 min,隔日治疗1次,持续2周。于治疗结束后检测大鼠肺功能;HE染色法观察大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;Western blot法和荧光定量PCR法分别检测肺泡巨噬细胞(AM)中M1极化标志物(CD86、iNOS)及信号通路蛋白髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB p65(NF-κB p65)的表达;免疫组织化学法观察肺组织中CD86的分布及免疫表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织内炎性细胞浸润明显,肺泡壁增厚;用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1)、第0.3秒用力呼气量(FEV0.3)、FEV0.1占FVC之比(FEV0.1/FVC),FEV0.3占FVC之比(FEV0.3/FVC)均显著下降(P0.01);BALF中TNF-α、iNOS含量及AM中CD86、iNOS、MyD88、NF-κB p65蛋白及mRNA表达明显升高(P0.01),肺组织中CD86阳性表达明显升高(P0.01)。与模型组比较,模型电针组的炎性细胞浸润及肺泡壁厚度均有改善;FVC、FEV0.1、FEV0.3、FEV0.1/FVC及FEV0.3/FVC均显著上升(P0.05,P0.01);BALF中TNF-α、iNOS含量及AM中CD86、iNOS、MyD88、NF-κB p65蛋白及mRNA表达明显下降(P0.01,P0.05),肺组织中CD86阳性表达明显降低(P0.01)。结论:电针"足三里"和"肺俞"可以降低COPD大鼠肺内炎性反应,其机制可能与电针通过抑制MyD88/NF-κB p65信号通路从而抑制AM向M1型极化有关。     

益肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症和气道黏液高分泌的影响

目的观察益肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠的防治作用,从气道炎症和气道黏液高分泌角度探讨其作用机制。方法采用烟熏和大鼠气管内注入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法建立COPD模型。将雄性SD大鼠随机分为空白对照组(对照组)、模型组、益肺健脾方组(中药组),每组6只。采用肺功能仪检测大鼠用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、0.1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.1 second,FEV0.1)、FEV0.1/FVC、呼气峰值流速(peak expiratory flow,PEF),HE染色观察大鼠支气管、肺组织病理变化。采用阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色观察气道杯状细胞。采用ELISA法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中IL-8、IL-17及TNF-α的含量。采用免疫组织化学法检测大鼠气道中黏附分子1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、核因子κB(nuclear factor-κb,NF-κB)、黏蛋白5AC(mucin 5AC,Muc5AC)和T0ll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白的表达。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,real-time qPCR)检测支气管肺组织中Muc5AC和TLR4 mRNA的表达。结果模型组大鼠支气管、肺组织改变符合COPD病理表现。与模型组比较,中药组肺损伤程度减轻。与对照组比较,模型组FVC、FEV0.1、FEV0.1/FVC、PEF降低(P0.01),BALF中IL-8、IL-17和TNF-α含量升高(P0.01),支气管肺组织中ICAM-1、NF-κB、Muc5AC蛋白、TLR4蛋白、Muc5AC mRNA及TLR4 mRNA表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,中药组FVC、FEV0.1、FEV0.1/FVC、PEF升高(P0.01,P0.05),其余各指标均降低(P0.01,P0.05)。结论益肺健脾方可降低COPD模型大鼠BALF中IL-8、IL-17、TNF-α水平,抑制气道和肺组织内ICAM-1、NF-κB、Muc5AC和TLR4蛋白的表达,通过减轻气道炎症和气道黏液高分泌作用达到防治COPD目的。     

痰热清注射液对COPD大鼠体内炎症因子及气道黏液高分泌的影响

目的:观察痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响,初步探讨痰热清注射液通过炎性介质路径干预COPD大鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠60只,随机分为空白组、模型组、痰热清组,每组20只,除空白组外,其余2组采用脂多糖(LPS)联合烟熏建立COPD大鼠模型。痰热清组腹腔注射痰热清注射液,空白组和模型组同时给予等量生理盐水腹腔注射。检测大鼠肺功能,肺组织切片行HE染色,测定肺组织匀浆中IL-8、TNF-α及肺泡灌洗液中MUC5AC的含量。结果:与空白组比较,模型组和痰热清组大鼠体量明显下降,模型组气道阻力(RI)和肺总量(TLC)显著升高,第0.1秒用力呼气量与用力肺活量的比值(FEV0.1/FVC)显著降低,肺泡灌洗液中MUC5AC的含量和肺组织匀浆中的炎症因子IL-8、TNF-α显著升高,差异均有统计学意义(P0.01);肺动态顺应性(Cdyn)无显著变化。与模型组比较,痰热清组大鼠体量增加,RI和TLC下降,FEV0.1/FVC升高,MUC5AC和TNF-α含量显著下降,差异均有统计学意义(P0.01);IL-8和Cdyn无显著变化。结论:痰热清注射液可以通过抑制炎症介质的释放、调节MUC5AC分泌,来减轻气道炎症,从而改善气道黏液高分泌症状,在一定程度上起到延缓肺功能恶化的作用。     

百令胶囊结合盐酸氨溴索对COPD合并肺部感染ICU患者肺功能及炎性因子的影响

目的:探讨百令胶囊结合盐酸氨溴索对COPD合并肺部感染ICU患者肺功能及血清NF-κB、TNF-α、IL-8等因子的影响。方法:选择COPD合并肺部感染ICU患者120例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各60例。所有患者视病情给予常规对症治疗,在此基础上,对照组患者给予盐酸氨溴索治疗,观察组患者给予百令胶囊结合盐酸氨溴索治疗,比较两组患者治疗前后肺功能指标,血清NF-κB、TNF-α、IL-8变化及临床疗效。结果:治疗前,两组患者FEV1、FEV1/FVC、FEV1%Pre肺功能指标,血清NF-κB、TNF-α、IL-8水平比较差异均无统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者FEV1、FEV1/FVC、FEV1%Pre指标均升高,血清NF-κB、TNF-α、IL-8水平降低(P0.05);观察组治疗后FEV1、FEV1/FVC、FEV1%Pre均高于对照组,血清NF-κB、TNF-α、IL-8水平均低于对照组(P0.05)。观察组患者总有效率为95.00%,高于对照组的83.33%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:百令胶囊结合盐酸氨溴索可显著改善COPD合并肺部感染的ICU患者肺功能,降低气道炎症反应状态,疗效确切,值得临床进一步推广和应用。     

虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探究虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的缓减作用,并初步探究其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白对照组、模型组、虎杖苷30、60、120mg/kg组、地塞米松0.09mg/kg组。采用肺功能检测仪检测用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气容积(FEV0.1)、呼气峰流速(PEF)、最大呼吸中段气流(MMF)、肺顺应性(Cldyn);吉姆萨染色法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及中性粒细胞(PMN)、肺泡巨噬细胞(AM)、淋巴细胞(LYM)比例;酶联免疫吸附法检测BALF中TNF-α、IL-8、IL-1β水平;HE染色观察肺组织病理学变化;高碘酸希夫氏染色(PAS)观察支气管病理学变化;免疫印迹法检测肺组织中TLR4、NF-κB、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达;免疫组化法检测肺组织中TLR4、NF-κB蛋白阳性表达率。结果:与对照组相比,模型组肺组织病理半定量评分显著升高;FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn明显降低,BALF中AM细胞比例明显降低,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例明显升高,TNF-α、IL-8、IL-1β水平明显升高,支气管气管壁、平滑肌厚度升高,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率明显升高。与模型组相比,虎杖苷各组、地塞米松组肺组织病理半定量评分显著降低。FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn升高,BALF中AM细胞比例显著升高,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例显著降低,TNF-α、IL-8、IL-1β水平显著降低,支气管气管壁、平滑肌厚度降低,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率显著降低。结论:虎杖苷可改善肺组织、支气管组织形态,降低大鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

肺康颗粒通过TLR4/ NF-κB信号通路干预COPD大鼠炎症的相关机制

目的观察肺康颗粒对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症的机制。方法将60只SD大鼠随机分成6组:正常组,模型组,肺康颗粒低、中、高剂量组(10.11,20.22,40.44 g·kg~(-1),以生药量计),地塞米松组(1 mg·kg~(-1))。采用持续熏烟(20周)联合气管滴注脂多糖(LPS)法建立大鼠COPD模型。第5周开始,灌胃给予肺康颗粒进行干预,连续给药16周。采用苏木素-伊红(HE)染色观察COPD模型大鼠肺脏组织病理变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及其种类;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠BALF中炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-17含量;qRT-PCR法检测肺组织中TNF-α、IL-6、TLR4 mRNA表达;Western Blot法检测肺组织细胞胞浆蛋白TLR4、p-IκB、IκB及胞核蛋白NF-κB p65的蛋白表达。结果与模型组比较,肺康颗粒各剂量组治疗后肺泡结构均有所恢复;肺康颗粒中、高剂量组的IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-17含量明显降低(P0.01);肺康颗粒各剂量组的白细胞总数明显降低(P0.01),肺康颗粒中、高剂量组的中性粒细胞及高剂量组的淋巴细胞亦明显减少(P0.05,P0.01);肺康颗粒中、高剂量组肺组织中TNF-α、IL-6 mRNA的表达量均明显下调(P0.05,P0.01),而TLR4 mRNA表达则明显上调(P0.01);肺康颗粒各剂量组的TLR4、IκB蛋白表达明显上调(P0.05,P0.01),胞核蛋白p65的表达明显下调(P0.01),肺康颗粒高剂量组的p-IκB蛋白表达亦显著下调(P0.01)。结论肺康颗粒可能通过TLR4/NF-κB信号转导通路干预炎症基因的表达,减轻COPD大鼠的炎症反应。     

灵芝多糖对脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及TLR4/NF-κB通路的影响

目的探究灵芝多糖对盲肠结扎穿孔导致的脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及肺组织炎症的影响。方法 SD大鼠随机分成对照组、模型组及灵芝多糖低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和乌司他丁组,除对照组外,其余各组大鼠均采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。给予灵芝多糖和乌司他丁进行干预,采用全自动血气分析仪检测大鼠O_2分压[p(O_2)]和CO_2分压[p(CO_2)];取大鼠右肺中叶计算肺组织湿/干质量;采用ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠肺组织病理变化;采用Western blotting法检测大鼠肺脏组织中Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)、p65、磷酸化p65(p-p65)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织结构破坏,肺泡间隔明显增厚,有大量炎性细胞浸润,肺组织炎症评分显著升高(P0.05);肺组织湿质量/干质量显著升高(P0.05);p(CO_2)显著升高(P0.05),p(O_2)显著降低(P0.05);肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α和NF-κB水平均显著升高(P0.05);肺组织TLR4和p-p65/p65蛋白表达水平显著升高(P0.05)。与模型组比较,灵芝多糖组大鼠肺组织损伤减轻,肺泡完整性较好,炎症细胞浸润减少,肺组织炎症评分显著降低(P0.05);肺组织湿质量/干质量显著降低(P0.05);p(CO_2)显著降低(P0.05),p(O_2)显著升高(P0.05);肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α和NF-κB水平均显著降低(P0.05);肺组织TLR4和p-p65/p65蛋白表达水平显著降低(P0.05),呈剂量相关性。结论灵芝多糖能够通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而减轻脓毒症大鼠炎症反应并保护肺功能。     

清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症和黏液分泌的调控作用研究

目的:探讨清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)大鼠模型气道炎症和黏液分泌的调控机制研究。方法:建立COPD大鼠模型。50只大鼠随机分为对照组、COPD模型组和清肺化痰汤低、中、高剂量组。Real-time RT-PCR法检测肺组织MUC5AC mRNA的表达,免疫组织化学法检测肺组织MUC5AC蛋白表达,ELISA检测肺泡灌洗液中MUC5AC的表达,ELISA检测肺组织TNF-α和IL-1β的表达,Western Blot检测肺组织中NF-κB的表达。结果:(1)COPD模型组大鼠肺组织中MUC5AC mRNA明显升高,和正常对照组比较有统计学差异(P0.05),清肺化痰汤治疗后MUC5AC mRNA的表达水平下降,呈剂量依赖性,和模型组相比较,中剂量组和高剂量组差异有统计学意义;(2)免疫组化结果显示,对照组呈弱阳性表达,COPD模型组可见大量的MUC5AC表达,清肺化痰汤各组治疗后MUC5AC的表达明显下降;(3)ELISA结果显示COPD模型组大鼠肺泡灌洗液中MUC5AC蛋白量明显高于正常对照组(P0.05);清肺化痰汤各组治疗后,肺泡灌洗液中MUC5AC蛋白量明显低于COPD模型组(P0.05);(4)ELISA结果显示COPD模型组大鼠肺组织中TNF-α和IL-1β蛋白量明显高于对照组(P0.05);清肺化痰汤各组治疗后,大鼠肺组织中TNF-α和IL-1β蛋白量明显低于COPD模型组(P0.05),呈剂量依赖性;(5)Western Blot结果显示COPD模型组大鼠肺组织中NF-κB表达明显高于对照组(P0.05);清肺化痰汤各组治疗后,大鼠肺组织中NF-κB的表达水平低于COPD模型组(P0.05),呈剂量依赖性。结论:清肺化痰汤通过抑制NF-κB信号通路调节TNF-α、IL-1β炎症因子的表达,从而抑制气道上皮MUC5AC的表达。     

麦粒灸合补肺祛瘀方对肺纤维化大鼠肺功能和核因子κB信号通路的影响

目的：探讨麦粒灸合补肺祛瘀方对肺纤维化(PF)大鼠肺功能及核因子κB信号通路的影响。方法：选取60只成年SD大鼠(雌雄各半)按随机数字表法均分为空白对照组、模型组、泼尼松龙组、麦粒灸组、方药组、灸药组,每组10只。气管内注射博来霉素制备PF模型,泼尼松龙组灌胃给予泼尼松龙(5 mg/kg)、麦粒灸组进行麦粒灸、方药组给予补肺祛瘀方灌胃、灸药组同时进行麦粒灸和灌胃补肺祛瘀方(5 g/kg)空白对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。30 d后检测大鼠肺功能,对PF大鼠肺组织进行病理学检测,同时检测支气管肺泡灌洗中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)水平及肺组织中核因子κB、转化生长因子-β(TGF-β)和Smad2 mRNA水平。结果：空白对照组大鼠肺组织未见明显异常;模型组肺组织中胶原沉积明显,炎症细胞浸润,肺泡壁增厚,肺泡破坏和紊乱以及肺泡间隙部分塌陷;经泼尼松龙、麦粒灸和方药治疗后,肺组织胶原沉积明显减少,炎症和纤维化明显改善,其中泼尼松龙组改善最显著。与空白对照组比较,其余组大鼠用力肺活量(FVC)、最大通气量(MVV)和动态顺应性...     

鱼腥草注射液对慢性阻塞性肺疾病患者炎症细胞因子与肺功能的影响

目的:观察鱼腥草注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者炎症细胞因子与肺功能的影响。方法:将80例患者随机分为两组,均予西药常规治疗,治疗组加用鱼腥草注射液。分别于治疗前后观察两组白介素-8(IL-8),肿瘤坏死因子(TNF-α)及第1秒用力肺活量(FEV1),用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC的变化。结果:治疗组IL-8、TNF-α明显下降,显著优于对照组,FEV1、FVC、FEV1/FVC较对照组明显提高(P<0·05)。结论:鱼腥草注射液能有效降低炎症细胞因子,改善肺功能,与西药合用于COPD急性加重期能取得更好的疗效。     

加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织核转录因子-κB、锌指蛋白A20表达的影响

目的:观察加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织核转录因子-κB 65(NF-κB65)、锌指蛋白A20蛋白及其基因表达的影响。方法:Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松和加味小青龙汤组。采用脂多糖气管滴注联合烟熏方法建立COPD大鼠模型,检测支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β含量,检测肺组织NF-κB65、A20蛋白及其基因表达,观察加味小青龙汤对上述指标及肺组织病理形态学变化的影响。结果:与正常组比较,模型组TNF-α、IL-1β、NF-κB和A20蛋白及其基因表达均明显上调;与模型组比较,加味小青龙汤组TNF-α、白介素-1β、NF-κB蛋白表达明显降低,加味小青龙汤组A20基因表达显著上调。病理观察结果显示,与正常组比较,模型组肺组织炎症细胞浸润,管腔中有大量中性粒细胞及黏液聚集,管壁明显增厚,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;加味小青龙汤组肺组织病理改变明显轻于模型组,加味小青龙汤组肺组织少数呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生。结论:加味小青龙汤能够减轻COPD模型大鼠肺组织损伤,对COPD模型肺组织有保护作用,其机理可能与其降低TNF-α和白介素-1β含量、下调NF-κB蛋白表达、上调A20基因表达有关。     

清肺化痰汤加减联合穴位敷贴治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床观察

目的观察清肺化痰汤加减联合穴位敷贴治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)疗效及对患者肺功能、炎症因子的影响。方法 AECOPD(痰热郁肺证)患者177例采用单盲法随机分组,对照组行西医常规方案干预;观察组在西医常规干预基础上配合清肺化痰汤加减加穴位敷贴治疗。比较两组治疗前后肺功能指标最大呼气流速(PEF)、用力肺活量(FVC)、1秒用力呼气容积(FEV1)及FEV1/FVC比值;白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、降钙素原(PCT)等炎症因子水平。结果治疗后,两组肺功能(PEF、FVC、FEV1、FEV1/FVC),炎症因子(TNF-α、PCT、IL-6、IL-8),中医症状积分均较治疗前显著改善(P 0.05),观察组改善更为显著(P 0.05)。观察组治疗有效率为94.38%,明显高于对照组的82.95%(P 0.05)。结论清肺化痰汤加减联合穴位敷贴治疗AECOPD(痰热郁肺证)效果良好,能显著改善肺功能,调节机体免疫,减轻炎症因子,且中医药整体、综合的治疗方式可对患者全身进行多系统调理,减少AECOPD再发风险。     

紫菜多糖抑制哮喘大鼠模型NF-κB信号通路

目的研究紫菜多糖对哮喘大鼠模型肺组织中NF-κB信号通路表达的作用。方法卵清蛋白致敏建立哮喘大鼠模型,紫菜多糖干预后评估大鼠症状变化,观察肺组织炎症表现,Western blot法检测NF-κB蛋白表达,ELISA法检测肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6水平。结果紫菜多糖组大鼠肺组织炎症病理变化减轻,NF-κB蛋白表达及TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6水平降低,过敏性炎症反应减轻,其检测值和症状评估接近健康大鼠。结论紫菜多糖可缓解哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路表达有关。     

基于白细胞介素8/黏蛋白5ac信号探讨益气活血化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响

目的 观察益气活血化痰方通过调控白细胞介素8(IL-8)/黏蛋白5ac(MUC5ac)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响。方法 选取53只SPF级SD雄性大鼠，随机抽取10只作为健康组，剩余43只大鼠建立COPD模型，40只采用数字随机表法分为模型组、中药组、抑制剂组、联合组，每组10只。中药组大鼠给予益气活血化痰方32 g/kg灌胃，抑制剂组大鼠予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)100 mg/kg,联合组予益气活血化痰方灌胃后腹腔注射PDTC 100 mg/kg。健康组、模型组正常饲养，不予干预。采用动物肺功能检测仪测定各组大鼠肺功能[用力肺活量(FVC)、呼气峰值流速(PEF)、第1 s用力呼气容积(FEV₁)],酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，蛋白免疫印迹法检测肺组织IKB激酶2(IKK2)、磷酸化IKB激酶α(p-IKBα)、核转录因子κB(NF-κB)、MUC5ac蛋白表达，苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果 与健康组比较，模型组、中药组、抑制剂组...     

麻杏调肺汤通过抑制炎症反应治疗慢性阻塞性肺病的探讨

目的:探讨麻杏调肺汤对慢性阻塞性肺病(COPD)的治疗效果,为后期的研究提供实验依据。方法:SD大鼠采用香烟烟雾暴露联合气管注射脂多糖(0.1 m L)法制造COPD大鼠模型,随机分为5组,分别为模型组,醋酸泼尼松组(3.3mg·kg~(-1)·d~(-1)),麻杏调肺汤低、中、高剂量组(1.7,3.4,6.8 g·kg~(-1)·d~(-1)),另设正常组,每组10只。待伤口愈合7 d后开始给药,连续5周;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),核转录因子-κB(NF-κB),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),IL-8,IL~(-1)0;观察肺功能情况及肺病理组织学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠细胞因子TNF-α,NF-κB,IL~(-1)β,IL-8含量明显升高,IL~(-1)0含量明显降低(P0.01),肺部组织的病变明显,肺功能明显降低;与模型组比较,麻杏调肺汤高剂量组能明显降低大鼠细胞因子TNF-α,NF-κB,IL~(-1)β,IL-8,升高IL~(-1)0含量(P0.05,P0.01);减轻肺部组织的病变程度,改善肺功能。结论:麻杏调肺汤通过调节炎症反应中相关细胞因子TNF-α,NF-κB,IL~(-1)β,IL-8,IL~(-1)0治疗COPD模型大鼠,并对肺脏具有的保护作用。     

藏红花素对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺组织NOD样受体蛋白3表达及血清IL-1β水平的影响

目的:探讨藏红花素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达及血清白细胞介素-1β(IL-1β)水平的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组、模型组和藏红花素小、大剂量组。采用肺功能检测仪检测大鼠肺功能指标,TUNEL染色检测肺上皮细胞凋亡情况,比色法检测血清丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,RT-qPCR和Western blot法检测NLRP3表达,ELISA法检测大鼠血清IL-1β水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠呼气峰流量(PEF)、吸气峰流量(PIF)、0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV0.3/FVC)显著降低(均P<0.05),肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织NLRP3表达水平以及血清IL-1β、MDA和LDH水平显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,藏红花素小、大剂量组大鼠PEF、PIF、FEV0.3/FVC显著升高(均P<0.05),肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织NLRP3表达水平及血清IL-1β、MDA和LDH水平显著降低(均P<0.05)。结论:藏红花素可有效改善COPD急性加重期大鼠的肺功能,抑制氧化应激和炎症反应,减少肺泡上皮细胞凋亡,其机制与下调NLRP3表达有关。     

复方龙星片对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺功能及血清TNF-α影响的实验研究

目的观察复方龙星片对慢性阻塞性肺疾病(以下简称慢阻肺)模型大鼠肺功能及血清炎症因子TNF-α的影响。方法采用气管内注射脂多糖加烟雾熏吸法复制COPD动物模型;大鼠采用随机数字表法随机分为正常组、模型组、复方龙星片低、中、高剂量组。正常组、模型组灌胃生理盐水(10 m L/kg·d),复方龙星低剂量组(0.23 g/kg·d)、复方龙星片中剂量组(0.45g/kg·d)、复方龙星片高剂量组(0.9 g/kg·d)溶于生理盐水分别灌胃10 m L/kg·d,连续灌胃14 d。采用PFT肺功能检测分析系统观察慢阻肺模型大鼠的肺功能;ELISA测定血清TNF-α含量。结果与对照组比较,模型组肺活量(FVC)、200毫秒FVB用力呼吸量(FEV200)、FEV200/FVC、最大呼气中期流速(MMEF)、最大呼气流量(PEF)均显著降低;模型组与正常组比较,TNF-α增加明显,有显著性统计学差异(P<0.01)。与模型组比较,复方龙星片低、中、高剂量治疗组TNF-α均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,复方龙星片高剂量组FEV200、FEV200/FVC、PEF、MMEF升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方龙星片可以降低COPD模型大鼠血清炎症因子TNF-α含量,从而减轻炎症反应;并且可改善COPD模型大鼠的肺功能。     

血府逐瘀汤对COPD模型小鼠炎症因子及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 运用分子生物技术探究血府逐瘀汤对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型小鼠炎症因子与TLR4/衔接蛋白髓样分化因子（MyD88）/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的作用。方法 香烟烟熏联合LPS滴鼻法制作COPD模型小鼠,血府逐瘀汤给药处理后,通过HE染色法镜下比较各组小鼠肺组织病理改变;ELISA检测小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)水平;免疫组化检测小鼠肺组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平。结果 镜下HE染色可见血府逐瘀汤不同剂量组小鼠小气道、肺泡、血管的病理改变及炎性细胞的聚集均有不同程度地减轻。血府逐瘀汤各剂量组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17的含量较模型组明显下降（P <0.05）。免疫组化观察到血府逐瘀汤各剂量组小鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达较模型组更低（P <0.05）。结论 血府逐瘀汤可以减少COPD小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8...     

大黄厚朴组分配伍对大鼠AP的治疗作用及其机制的影响

目的:研究大黄厚朴中大黄素、芦荟大黄素、厚朴酚、和厚朴酚4种主要成分配伍组方对急性胰腺炎(acute pancueatitis,AP)大鼠的治疗作用及其可能的机制。方法:采用均匀设计法将4种组分配成C~H 6个配伍方。采用牛磺胆酸钠逆行注射胰胆管法,建立急性胰腺炎大鼠模型。大鼠术后15 min给药,24 h腹主动脉取血,测定血清中淀粉酶,胰脂肪酶,白细胞介素-6(IL-6),IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化。另取胰腺、肺组织行病理切片检查,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肺组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结果:各治疗组大鼠血清淀粉酶、胰脂肪酶,IL-6,TNF-α含量与模型组比较,均有显著下调(P0.05,P0.01);IL-10含量亦有所下降,但仅H组统计有显著降低(P0.01)。病理检查结果显示,模型组大鼠胰腺组织大量片状坏死,胰腺腺泡结构不清;肺泡腔明显变小,肺泡上皮出现增生,间隔显著增大;而各治疗组胰腺和肺组织病灶坏死明显有所减轻。各治疗组肺组织中NF-κB蛋白表达与模型组比均显著下调。结论:大黄厚朴4种药效成分大黄素、芦荟大黄素、厚朴酚、和厚朴酚配伍组方对大鼠急性胰腺炎有明显治疗作用,其机制可能与NF-κB蛋白调节,炎症因子介导有关。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨止咳定喘汤治疗慢性阻塞性肺疾病作用机制的实验研究

目的:观察止咳平喘汤对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease, COPD)大鼠肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)、血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factorr,VEGF)、肺组织的影响,探讨止咳定喘汤可能通过干预TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症表达的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、止咳定喘汤低剂量、止咳定喘汤中剂量、止咳定喘汤高剂量组、地塞米松组,每组10只,采用经典慢性阻塞性肺疾病大鼠模型(烟熏联合气道内注射脂多糖法)。空白组和模型组以蒸馏水灌胃,对照组以地塞米松混悬液灌胃;其余治疗组以止咳定喘汤灌胃,干预30天后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠支气管肺泡灌洗液中的炎性指标:IL-8、VEGF、TNF-α;采用苏木素-伊红染色观察大鼠肺组织病理形态学的改变,采用Western Blot法检测肺组织细胞胞浆蛋白TLR4、p-IκB、IκB及胞核蛋白NF-κBp65的蛋白表达。结果:与模型组比较,止咳定喘汤各剂量组治疗后肺组织均有所改善;止咳定喘汤各组的大鼠血清TNF-α、IL-8表达水平明显均有下降趋势、VEGF表达水平明显有上升趋势,差异有统计学意义(P 0.05);止咳定喘汤各剂量组的TLR4、IκB蛋白表达明显上调(P 0.05),胞核蛋白NF-κBp65的表达明显下调(P 0.05)。结论:止咳定喘汤可能通过TLR4/NF-κB信号转导通路干预炎症因子的表达,减轻慢性阻塞性肺病大鼠的炎症反应。