bFGF对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中HIF-1α表达的影响及研究

目的 探讨bFGF对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中HIF-1α表达的影响以及在临床治疗过程中的临床疗效.方法 选取健康新生7日龄Wistar大鼠96只,雌雄不限,随机分为三组即假手术组(10)、HIBD组、bFGF治疗组.后两组再根据处死动物的时间不同随机分为5个亚组:12h组、24h组、72h组,7d组,每亚组8只.HIBD组制备HIBD模型,bFGF治疗组制备HIBD模型24h后腹腔注射药物.结果 通过使用bFGF对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤进行治疗后,H1F-1α得到了较好的抑制.结论 在临床治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤的过程中,使用bFGF对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤进行治疗能够取得较好的效果,同时能够较好的抑制住HIF-1α的表达,在临床上值得推广应用.     

地塞米松对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织AQP-4表达的研究

目的探讨DEX（地塞米松）对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织AQP-4表达的影响,为临床治疗新生儿缺氧缺血脑病提供实验和理论依据,揭示其发病机制,以期指导该病的早期治疗。方法将健康7日龄SD新生大鼠96只,清洁级,雌雄不限,平均体重12-18g,随机分为假手术组,HIBD组,DEX组,各组32只,分离左侧颈总动脉并结扎,吸入92%N2＋8%O2氮氧混合气体行缺氧处理3h,制成HIBD模型。假手术组只作分离左侧颈总动脉而不结扎,不作缺氧处理,不给与药物处理。DEX治疗组于建模成功后立即腹腔注射10mg/kg,假手术组及HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水,上述各组均于术后6h、24h、48h、72h随机抽取8只,于麻醉下处死取脑组织,通过Western blot方法检测新生大鼠脑组织AQP-4蛋白表达及实时定量PCR检测AQP-4 mRNA的表达。结果 SD鼠在缺氧处理后出现异常行为学改变。AQP-4 mRNA及蛋白的表达在缺氧诱导后显著升高,DEX的治疗则使SD鼠异常行为的表现程度减轻,后趋于正常,且能够降低HIBD导致的AQP-4的升高。结论 DEX对HIBD的治疗具有一定的疗效。     

黄芪对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织Nogo-A蛋白表达的作用及意义

目的探讨Nogo-A蛋白在缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织中的表达特点及黄芪对其表达的影响方法 7日龄Wistar新生大鼠72只,清洁级,雌雄不限,平均体重10-16g,随机分为假手术组,HIBD组,黄芪治疗组,每组24只。分离左侧颈总动脉并结扎,吸入92%N2+8%O2氮氧混合气体行缺氧处理2h,制成HIBD模型。假手术组只作分离左侧颈总动脉而不结扎,不作缺氧处理,不给与药物处理。黄芪治疗组于建模成功后立即及3h腹腔注射0.5ml/只,假手术组及HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水,上述各组均于术后6h、12h、24h、72h随机抽取6只,于麻醉下处死取脑组织,HE染色观察脑组织病例变化,免疫组化法检测Nogo-A蛋白表达情况。结果与假手术组相比,HIBD组术后脑组织Nogo-A蛋白表达增高,但Nogo-A蛋白随各时间点有先上升后下降的趋势,差异有统计学意义(P0.05),与HIBD组相比,黄芪治疗组各时间点Nogo-A蛋白,差异有统计学意义(P0.05)。结论提示黄芪可下调缺氧缺血性损伤大鼠脑组织Nogo-A蛋白的表达,对神经元和神经纤维具有保护作用。     

miR-9在阿魏酸钠改善缺氧缺血性脑损伤大鼠学习记忆中的作用

目的:探讨miR-9在阿魏酸钠(SF)改善缺氧缺血性脑损伤新生大鼠学习记忆中对海马神经元NMDAR1和NgR1的调节作用。方法:88只7日龄SD大鼠随机分为假手术组(sham)、缺氧缺血性脑损伤组(HIBD)、阿魏酸钠治疗组(HIBD+SF)、miR-9抑制组(HIBD+LNA-miR-9),每组各22只。假手术组仅分离左侧颈总动脉,其余组结扎左侧颈总动脉进行缺氧后制作HIBD模型。于21日龄,阿魏酸钠治疗组连续5 d腹腔注射阿魏酸钠,miR-9抑制组经左侧脑室注射一次LNA-miR-9。于30日龄行Morris水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力。于26日龄,real time RT-PCR检测各组大鼠左侧海马神经元miR-9、NMDAR1mRNA和NgR1mRNA的表达,Western Blot检测NMDAR1和NgR1蛋白的表达。结果:Morris水迷宫实验显示:与假手术组比较,HIBD组逃避潜伏期延长(P<0.05)、在目标象限逗留时间缩短(P<0.05);阿魏酸钠治疗组、miR-9抑制组较HIBD组均有逃避潜伏期缩短(P<0.05)、在目标象限逗留时间延长(P<0.05)。real time RT-PCR、Western Blot检测显示:HIBD组NMDAR1和NgR1的mRNA和蛋白表达以及miR-9表达较假手术组均明显上调(P<0.05);阿魏酸钠治疗组、miR-9抑制组较HIBD组各指标均明显下调(P<0.05)。结论:阿魏酸钠可能通过下调miR-9来抑制NMDAR1和NgR1的表达从而改善缺氧缺血大鼠的学习记忆能力。     

天麻素对缺血缺氧脑损伤新生大鼠小胶质细胞Sirt3表达的影响

目的:研究天麻素对缺血缺氧脑损伤(HIBD)新生大鼠脑内激活的小胶质细胞Sirt3表达的影响。方法:选取39只3 d龄SD幼年大鼠随机分为对照组(control)、缺血缺氧脑损伤组(HIBD)、天麻素组(HIBD+gastrodin)。采用左侧颈总动脉结扎结合缺氧法建立新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)模型,使用免疫荧光染色观察HIBD模型后新生大鼠大脑胼胝体区小胶质细胞的分布情况;使用免疫荧光双标染色及Western Blot检测大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞Sirt3的表达变化。结果:免疫荧光染色结果显示HIBD后新生大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞出现明显激活,确定模型建立成功。免疫荧光双标染色及Western Blot结果均显示,与对照组相比,HIBD模型组Sirt3的表达水平明显升高(P<0.05);与HIBD模型组相比,天麻素组Sirt3的表达进一步增强(P<0.05)。结论:天麻素可能通过促进新生大鼠脑内小胶质细胞Sirt3的表达,发挥其神经保护作用。     

低氧环境下骨髓间充质干细胞中血管内皮生长因子的表达

背景:作为种子细胞来源的骨髓间充质干细胞移植后能否在相对缺氧的体内环境下生存,是移植成功与否的重要环节。因此研究体外低氧环境下骨髓间充质干细胞的生长状态,可以为体内细胞移植提供实验依据。目的:观察体外低氧环境对大鼠骨髓间充质干细胞生长及血管内皮生长因子表达的影响。方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,光镜观察细胞的形态;取第3代骨髓间充质干细胞,按氧浓度分为两组,分别在常氧条件下(体积分数为21%氧气)和低氧条件下(体积分数为3%氧气)培养72 h。用CCK-8法和流式细胞术检测两组细胞的增殖情况,Western-blot印迹法检测常氧组和低氧组细胞中缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子蛋白的表达。结果与结论:①成功分离和培养了骨髓间充质干细胞,光镜下细胞呈长梭形,形态均一。②CCK-8法结果显示各时间点低氧组的细胞数目均高于常氧组,在36,48 h时活力增加显著(P0.05)。③流式细胞术结果显示,与常氧组比较,低氧组处于S期的细胞数量增加,且细胞增殖指数也显著增加(P0.05)。④Western-blot印迹法结果显示,常氧组细胞缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子蛋白仅有少量的表达,而低氧组两蛋白表达量均呈时间依赖性上调(P0.05)。以上结果说明低氧可诱导体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,又上调了缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子蛋白的表达,随着低氧时间的延长呈升高趋势。     

缺氧缺血新生大鼠脑组织水通道蛋白4的表达变化

目的 研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的作用及其意义.方法 120只7日龄新生Wistar大鼠按照完全随机化方法分为4部分,每部分(n=30)再分为对照组、HIBD后6 h、24 h、3 d、5 d和7 d共6组,每组5只.分别测定脑组织含水量;原位杂交和免疫组化检测AQP-4表达;检测脑组织病理变化.结果 HIBD组6 h,24 h,3 d的脑组织含水量较对照组显著增加(P＜0.05);且各组脑组织含水量随时间延长而增加,组间差异有统计学意义(P＜0.05);HIBD 5 d,7 d组脑组织含水量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白少量表达(吸光度A值为0.29±0.07和0.06±0.01).与对照组相比,HIBD后6～24 h,AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白表达显著增加.AQP-4 mRNA的A值由0.42±0.04上升到0.80±0.02(P＜0.05);AQP-4蛋白A值由0.14±0.03上升到0.23±0.05(P＜0.05),同时光镜下可见脑组织轻度水肿;3 d时AQP-4 mRNA和蛋白表达达高峰,AQP-4 mRNA的A值为0.91±0.08,AQP-4蛋白A值为0.41±0.04,此时脑组织严重水肿,神经元、胶质细胞和内皮细胞明显肿胀;第5～7天AQP-4的表达已下降(尤其mRNA明显),但仍显著高于对照组(P＜0.05),此时脑水肿已减轻.在整个HIBD脑水肿形成的过程中,AQP-4 mRNA和蛋白的表达呈正相关(rs＞0.82,Ps＜0.05).结论 AQP-4参与了HIBD的发生发展过程,AQP-4在HIBD脑水肿的形成过程中可能起重要作用.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤caspase-3表达与自由基损伤机制的研究

目的:研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠caspase-3表达与自由基损伤的机制。方法:建立7日龄新生大鼠HIBD模型,分为HIBD组和假手术组,两组分别于HI后6、12、24、48、72、96 h取脑组织,应用TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测caspase-3蛋白的表达,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:HIBD组神经细胞凋亡数量及caspase-3的表达量6 h开始增多,48 h达高峰,各时间点两者均显著高于假手术组(P0.05)。HIBD组MDA含量6 h增高,24 h达高峰,各时间点均较假手术组增高(P0.05)。HIBD组SOD含量6 h下降,24 h降至最低,各时间点均较假手术组降低(P0.05)。凋亡细胞数量与caspase-3蛋白表达量和MDA含量均呈正相关(r=0.748、0.654,P均0.05),与SOD含量呈负相关(r=-0.576,P0.05)。结论:HIBD时自由基损伤促进caspase-3的表达及神经细胞的凋亡。     

神经干细胞缺氧/复氧损伤中的低氧诱导因子1α和诱导型一氧化氮合酶

背景：在缺氧状态可诱导机体产生缺氧诱导因子,而诱导型一氧化氮合酶表达产生的一氧化氮(NO)可抑制低氧诱导因子1α的活性。 目的：探索低氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶与神经干细胞的低氧/复氧损伤关系。 方法：无菌条件下将出生24 h以内的Wistar大鼠处死,并分离大鼠海马组织,制作成脑组织的细胞悬液,分离培养神经干细胞后,将细胞分为常氧组、低氧组及低氧-复氧组,后两组以150 μmol/L氯化钴溶液制备低氧模型,而后低氧-复氧组细胞在低氧4 h时复氧。 结果与结论：低氧条件下,神经干细胞凋亡数量及细胞中低氧诱导因子1α和诱导型一氧化氮合酶 mRNA表达水平增加;而缺氧-复氧组中凋亡神经干细胞数量高于缺氧组,但低氧诱导因子1α和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达水平低于缺氧组。说明这两种因子参与细胞低氧损伤过程。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

促红细胞生成素干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠神经干细胞巢蛋白的表达(英文)

背景:巢蛋白是一种存在于神经干细胞的特异性抗原,在神经系统发生病变或损伤引起再生时广泛表达,因此巢蛋白表达常用作判定神经系统发生病变或损伤后能否促进神经再生的一种手段。目的:从神经再生和神经干细胞激活的角度,探讨外源性促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经干细胞巢蛋白表达的影响。方法:结扎大鼠右侧颈总动脉和8%低氧暴露2h制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型。对照组仅游离右侧颈总动脉,不予结扎和缺氧处理。干预组大鼠缺氧缺血后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素5000IU/kg,1次/d,连用3d。缺氧缺血性脑损伤组大鼠缺氧缺血后连续腹腔注射等量生理盐水溶液3d。每组随机取8只分别于术后4,7,14d处死。应用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测不同时点海马齿状回巢蛋白标记阳性细胞的变化。结果与结论:各时点缺氧缺血性脑损伤组巢蛋白阳性细胞数较对照组增加(P0.05);各时点干预组巢蛋白阳性细胞较对照组和缺氧缺血性脑损伤组均增加(P0.05)。3组大鼠海马齿状回区巢蛋白阳性细胞数均于术后7d达高峰。结果提示早期给予重组人促红细胞生成素可促使新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回区巢蛋白表达增加,促进神经干细胞的增殖再生,在缺氧缺血性脑损伤后神经再生、修复中发挥一定的保护作用。     

胎盘间充质干细胞移植降低大鼠低氧缺血性脑损伤

目的 探讨胎盘间充质干细胞(PDMSCs)治疗新生大鼠低氧缺血性脑病(HIBD)的效果及其作用机制.方法 HIBD模型乳鼠随机分为对照组、HIBD组、HIBD+ PDMSCs治疗组和HIBD+成纤维细胞治疗组.细胞治疗后14 d评估各组生长发育及神经功能,用RT-PCR法和EIISA法检测海马和外周血中TNF-α、IL-17、IFN-Υ和IL-10的变化.结果 HIBD组损伤侧大脑明显萎缩、神经行为严重障碍,发育较对照组明显落后(P＜0.05),PDMSCs治疗后脑萎缩、神经行为障碍均改善,且幼鼠的体质最显著升高(P＜0.05).细胞治疗后14 d,HIBD组海马和外周血中TNF-α、IL-17和IFN-y较对照组均升高,而IL-10水平降低(P＜0.05);PDMSCs治疗组TNF-α、IL-17、IFN-Υ较HIBD组有所降低,而IL-10水平升高(P＜0.05).结论 PDMSCs治疗能够改善新生HIBD大鼠的神经功能和发育,其作用机制可能是通过减轻机体的炎性反应.     

新生大鼠缺氧缺血脑白质损伤模型学习记忆能力的变化

目的通过缺氧、缺血法建立新生大鼠脑白质损伤(WMI)模型,评价大鼠各个生长时期的学习记忆能力及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达变化。方法新生4日龄SD大鼠100只随机分为对照组和缺氧、缺血WMI组,应用HE染色法观察脑组织病理学改变。于术后4周、8周与12周分别观察大鼠神经行为学和学习记忆能力改变,并应用免疫荧光染色法和Western blotting法观察MBP在大鼠脑内的定位定量表达变化。结果 HE染色显示,WMI组大鼠出现缺氧、缺血脑白质损伤病理改变。WMI组大鼠神经行为学及学习记忆能力较对照组减弱,差异具有统计学意义(P0.01)。WMI组各时间点的MBP表达量较对照组降低,差异具有统计学意义(P0.01)。结论新生4日龄SD大鼠发生缺氧、缺血脑白质损伤后,各个生长时期的学习记忆能力均减弱,MBP蛋白表达均减少,推测学习记忆能力减弱可能与MBP蛋白表达减少有关。     

高压氧对大鼠骨髓间充质干细胞分化和Wnt3表达的影响

背景:高压氧治疗可以促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的增殖和分化,且其机制与Wnt信号通路的活化有关,但在体外高压氧对干细胞分化的影响是否也通过Wnt信号通路起作用目前尚未见相关报道。目的:观察高压氧对大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响,认识其相关机制。方法:全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,贴壁纯化,取传至第3～5代细胞,加入含bFGF,EGF,B27的DMEM/F12培养基诱导培养24h。诱导后细胞随机分为2组,对照组未做任何处理,高压氧组给予0.10MPa的压力治疗,稳压时间60min,稳压期间平均氧浓度不低于90%。免疫荧光染色检测巢蛋白、NSE,GFAP,O4等抗体的表达,Western-blot法检测Wnt3蛋白的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞用神经干细胞经典培养基诱导后巢蛋白呈阳性表达。与对照组比较,高压氧组NSE,O4阳性细胞分化率均显著增加(P0.01),GFAP阳性细胞分化率无明显差异(P0.05),Wnt3蛋白的表达明显升高(P0.05)。高压氧可以促进骨髓间充质干细胞向神经元细胞和少突胶质细胞分化,但对星形胶质细胞的分化无明显影响,其机制可能与Wnt3蛋白的活化有关。     

神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Akt表达的影响

目的神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Akt表达的影响。方法 108只SD成年大鼠随机分为假手术组(36只)、脑外伤组(36只)和神经干细胞移植组(36只)。采用改良的Feeney氏法制作大鼠脑外伤动物模型,损伤1周后在皮质处局部注射移植神经干细胞,分别在细胞移植后的第7天、14天和21天进行神经功能评分。免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠脑组织Akt与p-Akt蛋白的表达。结果脑外伤组大鼠出现明显的神经功能障碍,神经干细胞移植后第7、14和21天大鼠的神经功能评分明显降低(P0.05)。与假手术组相比,不同时间点脑外伤组大鼠脑组织Akt与p-Akt蛋白的表达水平显著降低(P0.05);与相同时间点的脑外伤组大鼠相比,神经干细胞移植组大鼠脑组织的Akt与p-Akt蛋白的表达水平显著升高(P0.05)。结论神经干细胞移植促进脑外伤大鼠神经功能的恢复可能与上调Akt的表达相关。     

miR-198过表达抑制视网膜母细胞瘤生长及侵袭的实验研究

目的探究微小RNA-198(miR-198)过表达对视网膜母细胞瘤(RB) Y79细胞系生长、侵袭及裸鼠异体移植瘤的影响。方法培养RB Y79细胞系,随机分为空白对照组(Control组)、阴性对照组和过表达组,采用Lipofectamine~?2000分别转染miR-NC、miR-198模拟物至阴性对照组和过表达组Y79细胞。qRT-PCR检测转染后Y79细胞中miR-198的相对表达水平;利用干细胞成球试验和Transwell小室试验分别检测各组Y79细胞的增殖及侵袭能力; Western blot检测各组Y79细胞中Ki67、SOX2、OCT4、VEGF、Fibronectin蛋白表达水平。将培养好的miR-NC和miR-198 mimic细胞分别进行裸鼠皮下注射,60只裸鼠分为阴性对照组和过表达组,各组每5 d随机处死3只裸鼠,检测RB质量及体积,qRT-PCR检测瘤体中miR-198的mRNA相对表达水平;免疫组化法检测Ki67、SOX2、VEGF阳性表达率。结果与Control组及阴性表达组比较,过表达组Y79细胞中miR-198的相对表达水平较高(P 0.05),并且干细胞成球直径、数量、细胞侵袭率均较低(P 0.05); Western blot结果显示,与Control组及阴性表达组比较,过表达组Y79细胞中Ki67、SOX2、OCT4、VEGF、Fibronectin蛋白表达水平均较低(P 0.05)。过表达组裸鼠的瘤体质量及体积均小于阴性对照组(P 0.05),并且过表达组裸鼠瘤体组织中miR-198的mRNA相对表达水平高于阴性对照组(P 0.05),过表达组Ki67、SOX2、VEGF的阳性表达率低于阴性对照组(P 0.05)。结论 miR-198可能在RB中作为抑癌基因发挥作用,过表达miR-198可明显抑制RB的增殖及侵袭能力,并抑制裸鼠瘤体生成。     

低氧增强骨髓间充质干细胞对缺氧诱导心肌细胞凋亡的可能性

背景：骨髓间充质干细胞移植入缺血心肌后存活率低,而低氧有可能增强骨髓间充质干细胞的增殖,促进其存活。 目的：体外模拟心肌细胞缺血微环境,探索低氧预处理后,骨髓间充质干细胞对持续缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用。 方法：取第4代SD大鼠骨髓间充质干细胞用于制备条件培养液。取胚胎大鼠心肌细胞株,随机分成4组：对照组：心肌细胞正常培养组;模型组：心肌细胞单纯缺氧;骨髓间充质干细胞组：心肌细胞与骨髓间充质干细胞条件培养液共缺氧;低氧组：心肌细胞与骨髓间充质干细胞低氧条件培养液共缺氧。MTT检测各组细胞活力变化,Annexin V-FITC双染标记心肌细胞凋亡,免疫组化检测各组Bax和Bcl-2蛋白的表达。 结果与结论：免疫组化显示,低氧组的Bcl-2表达较其他各组增强,而Bax的表达比模型组和骨髓间充质干细胞组减弱,Bcl-2/Bax比值最大。与对照组和骨髓间充质干细胞组相比,低氧组的细胞活力高(P < 0.05),凋亡率降低(P < 0.05)。提示低氧可能是通过增强旁分泌机制,从而对Bax和Bcl-2进行调节,对心肌细胞凋亡有保护效应。     

不同程度低氧诱导因子-1α表达对SD大鼠髓核细胞凋亡的影响

目的探讨培养的髓核细胞中低氧诱导因子(HIF-1α)表达程度的不同与细胞凋亡之间的关系,进而探讨低氧诱导因子与间盘退变的关系。方法 1取30日龄SD大鼠髓核进行原代培养,将传代得到的细胞分为4组施加处理因素:正常氧条件组;低氧条件组;低氧条件并经CoCl2诱导组(HIF-1α高表达组);正常氧条件并经Genistein处理组(HIF-1α表达受抑制)。各组在各自条件下培养24h,运用western-blot检测各组低氧诱导因子表达量,通过流式细胞仪技术检测各组细胞凋亡情况,运用SPSS11.5软件对实验结果进行相关分析。结果氧浓度越低,髓核细胞低氧诱导因子表达的量越多,髓核细胞凋亡率越高。正常氧条件并经Genistein处理后,髓核细胞凋亡率较HIF-1α高表达组显著降低(P0.05)。结论 HIF-1α高表达可以诱导髓核细胞凋亡,过度的低氧刺激是间盘退变的一个重要诱因。     

低氧诱导因子1α基因修饰脐血间充质干细胞移植治疗脊髓缺血再灌注损伤

背景:脊髓缺血再灌注损伤目前尚无有效治疗手段,多数研究集中于干细胞移植治疗。目的:观察肾下腹主动脉移植低氧诱导因子1α基因修饰的脐血间充质干细胞对脊髓缺血再灌注损伤大鼠的治疗作用。方法:30只成年SD雌性大鼠随机分为3组:对照组,未转染组,基因转染组,每组10只。手术阻断肾下腹主动脉1 h后恢复脊髓再灌注,分别经腹主动脉置管推注1 m L 10%PBS,1 m L脐血间充质干细胞悬液,1 m L低氧诱导因子1α修饰的脐血间充质干细胞悬液。术后1,6,12 d对大鼠进行BBB评分,Western blot法检测脊髓组织低氧诱导因子1α蛋白的表达,术后12 d行运动诱发电位测定。结果与结论:与对照组比较,未转染组和基因转染组大鼠BBB评分均显著升高(P0.05),脊髓组织低氧诱导因子1α蛋白表达明显上调(P0.05),运动诱发电位潜伏期缩短(P0.05),波幅增加(P0.05)。与未转染组比较,基因转染组BBB评分明显升高(P0.05),脊髓组织低氧诱导因子1α蛋白表达上调(P0.05),运动诱发电位潜伏期缩短(P0.05),波幅增加(P0.05),结果表明低氧诱导因子1α修饰的脐血间充质干细胞治疗脊髓缺血再灌注损伤效果更加显著。     

bFGF和EGF对胚胎神经干细胞分化为神经元及神经胶质细胞的影响

目的：观察碱性成纤维生长因子（bFGF）和表皮生长因子（EGF）对体外培养胚胎神经管神经干细胞生长和分化的影响。方法：从孕12天大鼠胚胎神经管分离神经干细胞，进行原代培养，分为bFGF组、EGF组、bFGF＋EGF组及对照组：培养过程中观察干细胞的生长，培养2小时做nestin染色鉴定神经干细胞，培养第5天用免疫组化方法检测培养细胞神经元特异烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达，以观察神经干细胞分化为神经元及神经胶质细胞的状况。结果：取材细胞大部分为nestin免疫阳性细胞；各实验组均可促进培养细胞的生长和分 化。免疫组化中，EGF使神经干细胞增殖成团，增加GFAP的表达（P＜0．01）；bFGF能明显增加NSE及GFAP的表达（P＜0．01）；两种因子联合应用，神经元和神经胶质细胞均比对照组增多（P＜0．01）。结论：EGF和bFGF两类生长因子均能促进胚胎神经干细胞的生长，在分化方面，EGF倾向于诱导干细胞增并向着胶质细胞分化，bFGF则诱导干细胞分 成更多的神经元。     

Macamide B对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠脑中雌激素受体表达的影响

目的:观察玛卡酰胺B(Macamide B)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠脑组织中雌激素受体α(ER α)和雌激素受体β(ER β)表达的影响。方法:选择出生7 d C57BL/6小鼠30只并将其分为3组:假手术组(sham)、缺氧缺血性脑损伤组(HIBD)、玛卡酰胺B处理组(Macamide B+HIBD),每组10只。采用Rice法建立新生小鼠HIBD模型,采用免疫荧光组织化学染色对ER α和ER β在新生小鼠HIBD脑内的细胞定位进行分析,Western Blot方法检测Macamide B对新生鼠HIBD脑内ER α和ER β表达的影响。结果:ER α和ER β在HIBD新生小鼠脑内神经元和星形胶质细胞中均有表达;与sham组相比,HIBD组ER α和ER β的表达量均明显降低;与HIBD组相比,Macamide B可显著上调ER α和ER β的表达。结论:Macamide B可通过上调新生小鼠脑内ER α和ER β表达表达水平对HIBD发挥神经保护作用。