多西环素对缺氧大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨多西环素对缺氧大鼠H9c2心肌细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx 43)表达的影响及其可能的机制。方法培养大鼠H9c2心肌细胞,用Western Blotting法检测缺氧6 h、12 h、24 h后Cx43总蛋白的表达量及基质金属酶抑制剂(多西环素)、PI3K抑制剂(LY294002)、ERK1/2抑制剂(U0126)干预缺氧H9c2心肌细胞后Cx43总蛋白的表达量改变。结果缺氧组较空白对照组Cx43总蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。缺氧6 h时,多西环素和U0126干预组较缺氧组Cx43总蛋白表达量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧12 h时,U0126干预组Cx43总蛋白表达量仍较缺氧组增高,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧24 h时,多西环素和U0126干预后Cx43总蛋白表达量与缺氧组比较,差异无统计学意义(P>0.0.05)。LY294002干预组Cx43总蛋白表达量在观察时间范围内均较缺氧组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在培养的大鼠H9c2心肌细胞中,多西环素通过抑制基质金属酶增加缺氧心肌细胞Cx43总蛋白表达量,该作用至少部分抑制由ERK1/2信号介导的传导通路。     

美托洛尔对陈旧性心肌梗死大鼠心脏Cx43与p-Cx43表达的影响

目的探讨美托洛尔对陈旧性心肌梗死大鼠心脏缝隙连接蛋白(Cx)43与其磷酸化状态(p-Cx43)表达的影响。方法清洁级Wistar大鼠80只,随机分为假手术组、心肌梗死组、实验1组和实验2组,每组20只。构建心肌梗死模型,实验1组和实验2组分别于建模成功24 h后以灌胃酒石酸美托洛尔10.0 mg/kg和15 mg/kg;假手术组和心肌梗死组灌胃等量蒸馏水,每天灌胃1次,连续30 d。实验结束后,检测心室颤动阈值;Western印迹检测心肌组织Cx43及p-Cx43蛋白表达水平。结果心肌梗死组、实验1组和实验2组大鼠心室颤动阈值均显著低于假手术组(P0.05);实验1组和实验2组大鼠心室颤动阈值均显著高于心肌梗死组(P0.05),且实验2组显著高于实验1组(P0.05)。心肌梗死组大鼠心肌组织p-Cx43和P-Cx43/Cx43显著低于假手术组(P0.05);实验1组和实验2组大鼠心肌组织p-Cx43和P-Cx43/Cx43显著高于假手术组(P0.05);实验1组和实验2组大鼠心肌组织p-Cx43和Cx43/p-Cx4均显著高于心肌梗死组(P0.05),且实验2组显著高于实验1组(P0.05)。各组大鼠心肌组织Cx43蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论心肌梗死后大鼠心肌组织Cx43去磷酸化,心室颤动阈值降低,应用美托洛尔可促进Cx43的磷酸化,从而逆转心电传导异常。     

益气活血药对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43表达及室颤发生的影响

目的探讨益气活血药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43(Cx43)表达及室颤发生的影响。方法采用结扎心脏左冠状动脉前降支的方法建立心肌梗死大鼠模型,另设假手术(只穿线,不结扎)作对照。术后随机分为模型组、假手术组、卡托普利组和益气活血组。卡托普利组给予卡托普利片4.39 mg/(kg·d)溶解灌胃;益气活血组给予生脉注射液3.51mL/(kg·d),血塞通注射液17.54mg/(kg·d)腹腔注射;模型组和假手术组给予生理盐水,疗程4周。治疗结束后取材,采用real time PCR法检测左心室梗死边缘区Cx43mRNA的表达;Western blot法检测Cx43蛋白表达;在体电刺激记录室颤诱发率。结果与假手术组比较,模型组Cx43的mRNA和蛋白表达均显著降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,卡托普利组和益气活血组Cx43的mRNA和蛋白表达均显著升高(P0.05或P0.01)。在体电刺激室颤诱发率模型组最高,卡托普利组和益气活血组的室颤诱发率降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论生脉注射液联合血塞通注射液可以减少心肌梗死后室颤的发生,其机制与改善心室Cx43表达有关。     

参松养心胶囊对心肌梗死大鼠心肌细胞的保护作用

目的探究参松养心胶囊对心肌梗死模型大鼠心肌细胞的保护作用及其可能的机制研究。方法采用冠状动脉前降支结扎术建立心肌梗死模型。将60只SD大鼠随机分为梗死组与非梗死组,非梗死组采取开胸后冠状动脉穿线,但不做结扎。模型制作成功后,将两组随机平分为对照组10只,美托洛尔组10只,参松养心胶囊组10只,术后分别以普食、普食+美托洛尔、普食+参松养心胶囊原粉喂食。8周后处理大鼠,取心肌梗死周围组织,检测各组大鼠心肌缝隙连接蛋白(Cx43)和信使RNA(mRNA)的表达量。结果在非梗死各组中Cx43蛋白表达强烈,且均匀的分布在细胞与细胞之间的连接处;与非梗死组比较,梗死组的对照组Cx43表达明显减弱,甚至全部消失,而参松养心胶囊组及美托洛尔组梗死区的Cx43表达减弱和分布的紊乱弥散程度均较小;非梗死各组的蛋白和mRNA表达水平差异无统计学意义(P0.05);在梗死组中,对照组Cx43蛋白和mRNA表达明显低于参松养心胶囊组及美托洛尔组(P0.05),但参松养心胶囊组与美托洛尔组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论参松养心胶囊能够显著改善大鼠心肌梗死后Cx43的表达,可能与其报道中能改善心肌梗死后心律失常和心功能不全有关。     

Ghrelin对大鼠心肌梗死后电重构的影响

目的 观察Ghrelin对大鼠心肌梗死后电重构的作用.方法 将65只SD大鼠随机分成假手术组(n=15)和心肌梗死组(n=50).假手术组开胸后剪开心包腔,不结扎冠状动脉.心肌梗死组大鼠结扎冠状动脉前降支制作心肌梗死模型.存活7d的大鼠随机分成Ghrelin干预组(n=17)和梗死对照组(n=17).Ghrelin干预组按Ghrelin 100 μg/kg的剂量皮下注射,2次/d.梗死对照组和假手术组皮下注射等量生理盐水.28 d后采用程控刺激进行在体电生理测定,采用免疫组化方法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的分布,免疫印迹法检测Cx43蛋白表达,实时定量PCR法检测Cx43 mRNA表达.结果 与梗死对照组相比,Ghrelin能显著降低室性心动过速(室速)的诱发率(P＜0.05),心律失常评分也显著降低(P＜0.05).与假手术组相比,梗死心肌内Cx43表达显著降低(P＜0.05),Ghrelin干预使梗死周边心肌Cx43及其mRNA水平增加(P＜0.05).结论 Ghrelin能改善心肌梗死后大鼠心脏的电生理学特性,增加心肌Cx43的表达,防止室性心律失常的发生,可能对心血管系统具有保护作用.     

阿托伐他汀对血管紧张素Ⅱ诱导的心房肌细胞结缔组织生长因子及缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨阿托伐他汀对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心房肌细胞结缔组织生长因子(CTGF)和缝隙连接蛋白(Cx43)表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠40只随机分为A组(15只,给予0.9%氯化钠溶液)、B组(12只,给予盐酸异丙肾上腺素)和C组(13只,给予盐酸异丙基肾上腺素+阿托伐他汀钙片)。分别用放射免疫法测定AngⅡ浓度,凝胶成像系统分析转化生长因子(TGF)-βmRNA、CTGF和Cx43 mRNA的表达。结果三组大鼠血浆和心肌AngⅡ水平均有统计学差异(P0.05),B组大鼠血浆和心肌AngⅡ水平均高于A组(P0.05),C组与A组无统计学差异(P0.05)。三组大鼠TGF-β1 mRNA、CTGF和Cx43 mRNA表达水平均有统计学差异(P0.05),B组大鼠TGF-β1 mRNA、CTGF和Cx43 mRNA表达水平均高于A组(P0.05),C组与A组无统计学差异(P0.05)。结论阿托伐他汀能够降低AngⅡ诱导的心房肌细胞CTGF和Cx43 mRNA表达,减轻与CTGF和Cx43 mRNA表达相关的心肌纤维化和心脏重构进展,在房颤的预防和治疗中具有一定的临床意义。     

饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌细胞线粒体损伤的影响

目的探讨饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌细胞蛋白激酶C(PKC)/热休克蛋白90(HSP90)信号通路和线粒体损伤的影响。方法选取18月龄健康老年清洁级雄性SD大鼠150只,采用随机数字表法分为5组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、饱和氢盐水组、生理盐水组,每组30只。HE染色观察心肌病理学。透射电镜观察线粒体超微结构。蛋白质印迹法和RT-PCR法检测心肌细胞PKC、HSP90、缝隙连接蛋白43(Cx43)、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达。结果与空白对照组和假手术组比较,缺血再灌注组、饱和氢盐水组和生理盐水组大鼠心肌缺血再灌注后12h和24h心肌细胞线粒体损伤程度评分明显升高,PKC、HSP90、Cx43、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。与缺血再灌注组和生理盐水组比较,饱和氢盐水组大鼠心肌缺血再灌注后12h和24h心肌细胞线粒体损伤程度评分明显降低[(1.34±0.12)分vs(2.54±0.28)分、(2.61±0.29)分,(1.27±0.13)分vs(2.57±0.27)分、(2.64±0.28)分,P0.05],PKC、HSP90、Cx43、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论饱和氢盐水可减轻线粒体损伤,从而减轻老年大鼠心肌再灌注损伤。     

大鼠心肌梗死后左心室重构、电重构和交感神经重构的关系

目的 应用超声心动图、免疫组织化学技术和电生理技术记录心肌梗死大鼠梗死周边区的有效不应期(ERP)及缝隙连接蛋白43(Cx43)改变,交感神经神经(TH)及神经生长因子(GAP43)改变,探讨心肌梗死大鼠心室重构、电重构及交感神经重构之间的关系.方法 将成年SD大鼠30只,随机分为假手术组和心肌梗死组.假手术组仅开胸,不结扎冠状动脉.结果 与假手术组相比,心肌梗死组LVIDd、LVIDs均显著增大(P＜0.01),EF和FS缩短率显著降低(P＜0.01).与假手术组相比,心肌梗死组梗死周边区ERP显著缩短,差异有统计学意义(P＜0.01).心肌梗死组Cx43阳性蛋白表达低于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.01).与假手术组相比,心肌梗死组GAP43阳性神经密度明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).心肌梗死组TH阳性神经密度不均一明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 大鼠心肌梗死后心室不但发生结构重构,同时也会发生神经重构和电重构,以及三者之间相互影响和共同作用导致恶性心律失常和猝死的发生.     

强制性使用运动疗法对脑缺血大鼠生长相关蛋白43和突触素表达的影响

目的观察强制性使用运动疗法(CIMT)对脑缺血大鼠生长相关蛋白43(GAP-43)、突触素表达的影响。方法健康SD大鼠90只,将其随机分为假手术组、模型组和CIMT组,各30只,各组再随机分为缺血后2、4、8周时处死的3个亚组。假手术组大鼠不做任何处理,模型组和CIMT组大鼠进行左侧大脑中动脉闭塞局灶脑缺血模型处理,且CIMT组大鼠在模型成功7 d后进行CIMT干预。时间终点采用原位杂交技术及免疫组化技术分别检测脑梗死区周围皮质GAP-43、突触素mRNA及蛋白的表达。结果脑缺血模型术后2、4周时,CIMT组和模型组GAP-43 mRNA及蛋白表达高于假手术组,CIMT组高于模型组(P0.05)。脑缺血模型术后8周时,CIMT组GAP-43 mRNA及蛋白表达高于模型组和假手术组(P0.05);模型组和假手术组GAP-43 mRNA及蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P0.05)。CIMT组大鼠突触素mRNA及蛋白表达均高于模型组和假手术组,模型组在脑缺血模型术后2、4周时突触素mRNA及蛋白表达高于假手术组(P0.05);脑缺血模型术后8周时模型组突触素mRNA及蛋白表达与假手术组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 CIMT能促进梗死灶周围皮质GAP-43及突触素的表达,促进脑缺血后的突触发生与重建。     

心肌梗死大鼠心肌组织中AQP1、HIF-1α的表达变化及其与心肌水肿的关系

目的观察大鼠心肌梗死模型中心肌梗死组织中水通道蛋白1(AQP1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达水平,并探讨其与心肌水肿的相关性。方法将48只SD大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组,每组24只。采用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠心肌梗死模型,假手术组仅开胸不结扎。于造模后12、24、48、72 h分批处死大鼠,取左心室心肌组织,采用酶联免疫法检测AQP1、HIF-1α的蛋白表达水平,采用Real-time PCR检测AQP1、HIF-1αmRNA表达,采用干湿重法检测心肌组织含水量。结果心肌梗死组大鼠心肌组织中AQP1、HIF-1αmRNA以及蛋白水平较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P均0.05)。心肌梗死组大鼠心肌组织AQP1、HIF-1αmRNA以及蛋白水平在术后72 h内呈时间梯度升高,各时间点差异具有统计学意义(P均0.05)。心肌梗死组大鼠术后12、24、48、72 h心肌组织含水量逐渐升高,与假手术组比较也升高,差异有统计学意义(P均0.05)。心肌梗死大鼠心肌组织中AQP1 mRNA以及蛋白水平与心肌含水量呈正相关(r=0.507,P=0.010;r=0.585,P=0.008),HIF-1αmRNA以及蛋白水平与心肌含水量呈正相关(r=0.408,P=0.025;r=0.486,P=0.017)。结论心肌梗死大鼠心肌组织中AQP1、HIF-1α呈高表达,且与心肌水肿严重程度明显相关。     

益气活血药对心肌梗死大鼠心脏结构和Cx43表达的影响

目的探讨益气活血药对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心脏结构及心肌电偶联的关键结构缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的影响。方法结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立MI模型,将30只MI大鼠随机分为模型组、益气活血组(参芍片0.25 g/kg联合复方丹参片0.75 g/kg)和倍他乐克组(12 mg/kg),每组10只,于造模成功后24 h开始灌胃,1次/日,连续4周。另设假手术组10只,给予等量去离子水灌胃。4周后取材进行苏木素-伊红染色观察心肌组织病理,图像分析测量左室内径和心肌梗死百分比,免疫组织化学法检测心肌Cx43的表达。结果与假手术组比较,术后4周模型组大鼠左室内径明显增大,心肌Cx43表达的平均光密度值(average optical density,AOD)、阳性表达面积(Area)和积分光密度(integral optical density,IOD)明显降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组和倍他乐克组的左室内径和心肌梗死百分比均明显减少(P<0.05或P<0.01),在心肌Cx43的表达上,仅益气活血组心肌Cx43表达的AOD和IOD明显增加(P<0.05或P<0.01)。结论益气活血治疗能减少MI大鼠左室内径和心肌梗死百分比,增加心肌Cx43表达强度和部分好转Cx43弥散表达状态,对MI后缺血心肌有保护作用,可能是稳定MI后心肌细胞间电偶联的机制之一。     

Rho激酶信号通路与大鼠心肌细胞凋亡的关系

目的探讨Rho激酶信号通路在心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡组织中的表达变化及对心肌细胞凋亡的影响作用。方法选取健康雄性Wistar大鼠,通过结扎左前降支建立大鼠心肌梗死模型,将24 h后仍然存活的大鼠选取30只,随机分为模型组和治疗组(法舒地尔5 mg/kg,2次/d)各15只,并另外选取健康雄性大鼠15只作为假手术组,假手术组和模型组给予等量生理盐水处理,比较4 w后3组心肌梗死面积及Rho激酶mRNA、蛋白等指标的表达差异。结果 3组左心室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)差异均有统计学意义(P0.05),模型组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax显著低于治疗组和假手术组(P0.05),LVEDP显著高于治疗组和假手术组(P0.05),治疗组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax显著低于假手术组(P0.05),LVEDP显著高于假手术组(P0.05)。治疗组心肌缺血面积低于模型组但差异不显著(P0.05);治疗组心梗面积显著低于模型组(P0.05)。3组Rho激酶mRNA、Bax蛋白、Bcl-2蛋白表达差异有统计学意义(P0.05);组间差异均有统计学意义(P0.05)。结论心肌梗死大鼠心肌组织中的Rho激酶mRNA、Bax蛋白达显著增加,同时Bcl-2蛋白表达降低,法舒地尔能够降低Rho激酶mRNA表达,减少心肌细胞凋亡,减轻心肌梗死面积。     

白藜芦醇降低大鼠心肌梗死后室性心律失常的研究

目的:探讨白藜芦醇对大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后室性心律失常的影响及可能机制。方法:将成功建立心肌梗死模型的24只SD大鼠随机分为MI组(n=12)和白藜芦醇组(n=12),另设假手术组(n=12),其中白藜芦醇组给予白藜芦醇10 mg/(kg·d)灌胃,MI组和假手术组给予5%羧甲基纤维素钠灌胃。4周后,所有大鼠行电生理检查;ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;免疫组化和Western blot检测心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达水平。结果:与假手术组相比,MI组室性心律失常的诱发率明显增加,心室颤动阈值显著降低,血清IL-1β、TNF-α水平明显增加,Cx43表达水平显著降低(P0.05);与MI组相比,白藜芦醇组心律失常诱发率显著降低,心室颤动阈值增加,血清IL-1β、TNF-α水平明显降低,Cx43表达明显增加(P0.05),但白藜芦醇不能使上述指标恢复到假手术组水平(P0.05)。结论:白藜芦醇可有效降低大鼠心肌梗死后室性心律失常的发生,其机制可能与提高心肌Cx43表达,降低炎症反应有关。     

TNF-α诱导连接蛋白重构在心肌梗死后室性心律失常发生中的作用

目的:研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠心肌梗死后连接蛋白(Cx)43重构调节作用及其对室性心律失常发生的影响。方法:采用液氮冷冻法建立大鼠心肌梗死模型。将60只雄性大鼠随机分为3组:心肌梗死组(MI组,20只)、TNF-α螯合剂组(rhTNFR:Fc组,20只)和假手术组(Sham组,20只)。在心肌梗死模型建立30d后,运用程序电刺激方法,观察室性心律失常的诱发情况,应用Western Blot检测TNF-α、Cx43磷酸化和非磷酸化的表达水平。采用激光共聚焦显微镜方法,观察TNF-α的表达、Cx43的分布情况。结果:与假手术组比较,MI组大鼠心肌组织TNF-α表达明显增加(P0.05);Cx43磷酸化水平显著降低(P0.05),而Cx43非磷酸化水平增加(P0.05),Cx43分布呈现不均一分布;该组室性心律失常的诱发率明显增高(P0.05)。与MI组比较,rhTNFR:Fc组大鼠心肌组织TNF-α表达显著减少(P0.05);Cx43磷酸化水平表达增加(P0.05),Cx43非磷酸化水平下降(P0.05),而Cx43不均一分布有所减轻;室性心律失常的诱发率亦明显下降(P0.05)。结论:心肌梗死发生后,TNF-α可以诱导Cx43表达和分布重构,其在心肌梗死后室性心律失常发生中可能发挥重要作用。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体Cx43 mRNA的表达

目的探讨糖尿病性勃起功能障碍（DMED）大鼠阴茎海绵体缝隙连接蛋白43（Cx43）mRNA的表达。方法 W istar大鼠150只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组,每组分为糖尿病（DM）30只,非糖尿病（NDM）20只。DM大鼠腹腔注射链尿菌素（55 mg/kg）建立DM动物模型后,注射阿朴吗啡,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组分别于8、12及16周观察大鼠阴茎勃起情况,筛选DM性ED大鼠模型,测定其阴茎海绵体组织Cx43 mRNA表达。结果 DMED模型成功Ⅰ组23只、Ⅱ组21只、Ⅲ组20只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组NDM大鼠Cx43 mRNA表达量分别为0.845±0.176、0.836±0.120、0.845±0.136,DM大鼠分别为0.493±0.157、0.426±0.164、0.378±0.253,DM大鼠Cx43 mRNA表达与NDM相比差异有统计学意义（P〈0.05）;随DM病程延长,Cx43 mRNA表达明显下降（P〈0.05）。结论 Cx43 mRNA在DMED大鼠海绵体中表达降低,Cx43 mRNA水平下调可能是DMED的发病机制之一。     

银杏黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤及缝隙连接蛋白43的作用

目的研究银杏黄酮对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤(MIRI)及缝隙连接蛋白43(Cx43)的作用,并探讨其可能机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/R组、金纳多组、银杏内酯组,每组8只。建立在体心肌I/R损伤模型,HE染色法观察大鼠心肌组织形态学改变;黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)浓度;免疫组化法检测Cx 43的表达及分布特点;观察记录再灌注30 min内各组心律失常情况,进行评分比较。结果与I/R组比较,金纳多组心肌坏死减少,SOD增高、MDA降低,Cx43表达增多且多分布在端端连接处,心律失常发生次数减少;银杏内酯组SOD增高、MDA降低、心律失常评分降低(P0.05),心肌细胞坏死及Cx43表达无明显异常。结论银杏黄酮可对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤以及减少Cx43表达异常,进而改善MIRI性心律失常,其作用机制可能与抗细胞氧化应激及减少缝隙连接蛋白表达异常有关。     

线粒体缝隙连接蛋白43和活性氧及蛋白激酶C通路参与后处理心脏保护

目的探讨线粒体缝隙连接蛋白43(Cx43)和活性氧及蛋白激酶Cε(PKCε)信号通路在缺血后处理中的心脏保护作用。方法将40只雄性SD大鼠建立心脏缺血再灌注(IR)损伤模型,随机分为假手术组(Sham组)、IR组、IPC组和IPC+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(腹腔注射NAC 150mg/kg,15min后IPC处理),每组10只。应用伊文思蓝/TTC双染色检测心肌梗死面积,检测乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,TUNEL检测心肌细胞凋亡,荧光探针测定心肌线粒体活性氧水平,Western blot检测心肌线粒体总Cx43、磷酸化Cx43和PKCε蛋白表达。结果与IR组比较,IPC组心肌梗死面积显著降低[(27.97±4.26)%vs (46.78±3.32)%],心肌酶LDH及CK-MB、心肌细胞凋亡率及线粒体活性氧生成下降;上调线粒体总Cx43、磷酸化Cx43和PKCε蛋白表达。IPC+NAC组大鼠心肌梗死面积、LDH及CK-MB、心肌细胞凋亡较IPC组显著升高(P0.05),心肌线粒体PKCε蛋白表达较IPC组显著下调(P0.05)。结论活性氧信号介导IPC心脏保护,该保护作用与线粒体Cx43及PKCε密切相关,Cx43和活性氧及PKCε信号通路在IPC的心脏保护中发挥重要作用。     

雷米普利对大鼠AMI后心肌缝隙连接蛋白结构的影响

目的探讨雷米普利对大鼠急性心肌梗死（AMI）后心肌间缝隙连接蛋白43（Cx43）的影响。方法将24只大鼠随机分为3组,其中模型组（AMI组）开胸后结扎冠脉左前降支,对照组开胸后不结扎冠脉,治疗组开胸后结扎冠脉左前降支,同时用雷米普利灌胃（另两组用等量蒸馏水灌胃）。8周后,用免疫组化法及图像分析系统检测三组左室心肌梗死区及周边缺血区心肌Cx43表达,比较各组不同区域心肌Cx43表达。结果与对照组比较,AMI组心肌Cx43明显降低（P〈0.01）,并呈不均一分布;治疗组比AMI组显著升高（P〈0.05）。结论左室心肌梗死区心肌Cx43明显下降,周边缺血区Cx43表达增加,雷米普利可减轻心肌Cx43重构。     

庚醇后处理对兔缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的通过观察家兔心肌线粒体缝隙连接蛋白43(Cx43)基因及蛋白的表达,探讨庚醇后处理对缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法将50只新西兰大白兔随机分为5组,每组10只:对照组,缺血再灌注组,庚醇后处理组,5-羟葵酸干预组,庚醇后处理加5-羟葵酸干预组(联合处理组)。所有兔于心肌缺血再灌注4h后处死,取心肌组织,检测Cx43mRNA表达水平,提取心肌细胞线粒体蛋白并采用Western blot检测其含量。结果与对照组比较,缺血再灌注组、庚醇后处理组、5-羟葵酸干预组、联合处理组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少(P<0.05);与庚醇后处理组比较,缺血再灌注组、5-羟葵酸干预组和联合处理组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少(P<0.05);与联合处理组比较,缺血再灌注组和5-羟葵酸干预组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论庚醇后处理对心肌缺血再灌注损伤引起的Cx43表达降低有抑制作用,并且可能与线粒体敏感性钾离子通道的参与有关。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的研究扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,CX43)表达的影响。方法SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组以及扶正化瘀胶囊组和卡托普利组,每组各6只,采用结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死。术后10d开始灌胃给药,持续8周。用免疫组织化学方法观察心肌CX43表达的变化。结果在心肌梗死区域内,模型组与假手术组比较,CX43排列紊乱,阳性表达面积、平均光密度值和积分光密度均显著低于假手术组(P<0.01)。在梗死边缘区,扶正化瘀胶囊组CX43平均光密度值高于模型组(P<0.01),积分光密度高于模型组(P<0.05),CX43排列紊乱有所减轻,阳性表达面积与模型组无统计学意义。卡托普利组CX43平均光密度值高于模型组(P<0.01),积分光密度和阳性表达面积均高于模型组(P<0.05),CX43排列紊乱也有减轻。结论扶正化瘀胶囊能够部分改善心肌梗死大鼠心肌的CX43重构。