结核杆菌对异烟肼药物的敏感性试验

目的研究结核分枝杆菌对异烟肼药物的敏感性状况，为结核病的防治提供理论依据。方法采用直接涂片检查法和培养法。对肺结核患者的痰液进行检查，阳性标本经抗酸染色镜检确认后，采用绝对浓度法的间接法进行耐药性测定。结果131例疑似肺结核患者痰标本中，直接涂片法检出阳性标本21例，阳性检出率为16．0％（21／131）；培养法共检出阳性标本56例，阳性检出率为42．7％（56／131）。比较2种检测方法的阳性检出率，差异有统计学意义（P〈0．05）。培养法高于直接涂片法。56株结核杆菌标本进行异烟肼的药物敏感性试验，其中有47株发生耐药，耐药率为83．9％，且都是高浓度耐药。结论结核分枝杆菌对异烟肼的初始耐药率处于较高水平，必须进一步加强对耐药结核杆菌的监控。     

肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌检查结果分析

目的 评价肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的直接涂片显微镜检和培养检查的临床效果。方法采用直接厚涂片萋-尼法抗酸染色显微镜检和BACTEC-TB960快速培养系统对1340例肺结核患者痰标本进行检测。结果快速培养法检测的阳性率为36．6％，直接涂片镜检的阳性率为24．6％，两种检测法的阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）；两种方法联合检测的阳性率为41，0％，高于培养法阳性率（P〈0．05）。痰标本的留取时间对培养法检出率有很大影响，晨痰检出率高于即时痰（P〈0．01）。结论提高肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌检出率的有效方法是采用直接涂片镜检与培养法联合进行检测，同时应重视痰标本留取时间对检出率的影响。     

肺结核患者的痰涂片检测及结核杆菌耐药性分析

目的:总结肺结核患者痰涂片检测和结核杆菌耐药性情况。方法:回顾性分析阜阳地区结核病患者资料100例,对其标本开展分枝杆菌分离,实施鉴定,通过绝对浓度法检验结核杆菌对于六种抗结核药物异烟肼、链霉素、丙硫异烟肼、利福平、氧氟沙星以及卡那霉素耐药性情况。结果:五种类型痰结核杆菌检出率分布情况:粘液痰占据5.0%,脓样痰占据12.0%,水样痰占据8.0%,干酪样痰占据24.0%,血痰占据51.0%,五种类型比较存在统计学差异;100例结核杆菌痰结核分枝杆菌阳性患者中初治组耐药率为20.0%,复治组耐药率80.0%,两组比较存在统计学差异。结论:结核杆菌存在极大耐药性,需要提高抗结核药物耐药性的检测工作,降低耐药菌株的出现,所留取痰标本质量直接影响到结核杆菌检出情况,所以需要保证痰标本的质量,从而提升结核杆菌阳性率。     

镇江地区结核分枝杆菌DNA指纹图谱分型及耐药性分析

目的：分析镇江地区结核分枝杆菌的DNA指纹图谱分型及耐药情况。方法收集174例疑似结核病患者痰液标本,通过鉴别培养基对硝基苯甲酸（ PNB）和噻吩－2－羟酸肼（ TCH）进行分枝杆菌菌型初筛,再通过本室建立的PCR－ELISA法明确鉴定结核杆菌菌种,用比例法进行药敏实验,用DNA随机扩增多态性（ RAPD）指纹分型法,对其中44株耐药人型结核分枝杆菌进行DNA指纹图谱分型。结果从174份标本中分离出人型结核分枝杆菌141株（81．03％）,牛型结核分枝杆菌20株（11．49％）,非结核分枝杆菌13株（7．47％）,总耐药率42．53％;耐药率由高到低依次为异烟肼（INH）＞氧氟沙星（OFX）＞利福平（RFP）＞链霉素（SM）＞乙胺丁醇（EMB）＞卡那霉素（KM）＞卷曲霉素（ CPM）＞阿米卡星（ AKM）;非结核分枝杆菌对EMB、RFP、SM、INH的耐药率显著高于结核分枝杆菌（ P＜0．01）。复治组对EMB、RFP、SM、INH的耐药率显著高于初治组的耐药率（P＜0．01）。中、老年患者耐药率明显高于青年患者（P＜0．05或P＜0．01）。将44株耐药人型结核杆菌,用RAPD－PCR分型,并用NTsys 2．10e软件作聚类分析,共分为5型（Ⅰ型-Ⅴ型）,其中以Ⅰ-Ⅲ型为主,占84．09％。各型的耐药率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论本地区肺结核以人型结核分枝杆菌为主,结核杆菌总体耐药率和耐多药率相对较高。 RAPD指纹分型结果显示,该地区结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,成簇类型是主要流行菌株。各型与耐药性无明显相关性。     

链霉素对结核杆菌的药物敏感性试验

目的分析结核分支杆菌对链霉素药物的敏感性状况,为结核病的防治提供理论依据。方法将标本经抗酸染色确认后,采用绝对浓度法的间接法进行耐药性测定。结果60株结核杆菌标本直接涂片,经抗酸染色确认,阳性率为100％,进行链霉素的药物敏感性试验,共有59株发生耐药,总耐药率为98．3％（59／60）。结论结核分枝杆菌对链霉素的初始耐约半处于较高水平,必须进一步加强对耐药结核杆菌的监控。     

PCR-SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG,ahpC基因突变的研究

目的：应用PCR－SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG及ahpC基因突变,评价此方法用于结核分杆菌利福平（RFP）及异烟肼（INH）耐药性试验的意义。方法：以结核分支杆菌H37Rv为对照,30例耐RFP（单耐或多耐）、21例耐INH（单耐和多耐）的结核分枝杆菌临床分离株及10例敏感菌株;39例菌阳肺结核患者及30例非结核 性肺部疾病患者痰标本,采用PCR－SS－CP技术检测痰标本和菌株中的结核杆菌rpoB,katG,ahpC基因突变,并与药敏试验对照。结果：PCR－SSCP检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG及ahpC基因突变的阳性率分别为79％（31／39）、46％（18／39）及5％（2／39）.结论：PCR－SSCP可望成为直接检测临床痰标本中结核分枝杆菌耐利福平及耐异烟肼的快速方法。     

绵阳市肺结核流行病学调查研究

目的了解绵阳市疑似肺结核患者的痰涂片和痰培养中结核分枝杆菌的阳性检出率情况。方法收集经胸片复查后疑似活动性肺结核患者的痰进行涂片和培养,并对检测出的结果进行比较分析。结果直接痰涂片样本星,男性和女性阳性率分别为0．68％和0．31％,阳性检出率为0．94％,差异无统计学意义（P〉0．05）;而罗氏培养样本里,男性和女性的阳性率分别为3．76％和0．43％,痰培养阳性检出率为4．19％,差异有统计学意义（P〈0．05）。两种方法进行抗酸检测的样本中,罗氏培养的阳性率是痰涂片阳性率的6．59倍,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论绵阳市肺结核患病率低于全国,男性患病率高于女性。     

衢州市2010-2011年初治涂阳肺结核患者分枝杆菌培养及耐药情况调查

目的了解衢州市初治肺结核患者的原发耐药情况,为结核病防治提供参考依据。方法对2010-2011年本地区的痰涂片阳性初治肺结核患者658例进行分枝杆菌培养,将培养阳性菌株进行菌种鉴定和药物敏感试验。结果①658例中结核分枝杆菌复合群646株（98．2％）,非结核分枝杆菌12株（1．8％）。②646株结核分枝杆菌复合群菌株中非耐药521株（80．7％）,耐药125株（19．3％）。③耐药125株中单耐药98株（78．4％）,多耐药18株（14．4％）,耐多药9株（7．2％）。④耐药顺序依次为：INH,SM,OFLX,RFP,KM,EMB。结论衢州地区结核分枝杆菌复合群菌株的耐药情况低于全国平均水平,与2004—2005年衢州地区耐药监测结果相当,但本次调查发现了初治涂阳患者耐多药情况,且出现了广泛耐药菌株。这说明衢州地区耐药情况较前严重,需要进一步改进结核病的防控工作。     

3种方法对痰液标本结核分枝杆菌检测结果的影响

目的比较3种方法检测痰液标本结核分枝杆菌的检测效果。方法50份拟诊为肺结核患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、结核分枝杆菌培养法和荧光定量PCR（RT-PCR）检测,分析3种方法的检出率及检测时间。结果3种方法中,RT-PCR检出率最高,染色法检出率最低;染色法检出时间最短,菌培养法检出时间最长,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论不同方法对痰液结核分枝杆菌的检测效果存在差异,应据临床实际情况加以选择,发挥不同检测手段的优势。     

痰标本结核分枝杆菌培养200份结果分析

目的通过对200份痰标本的结核杆菌培养结果进行分析,探讨影响结核分枝杆菌培养阳性率的因素以提高结核分枝杆菌培养阳性率。方法收集200例结核病患者的痰标本,对200份痰涂片阳性标本进行结核杆菌培养试验,在规定时间内检测结核杆菌菌株数。结果191份痰标本呈培养阳性,培养阳性率为95．5％;初治培养阳性157例,培养阳性率为96．3％;复治培养阳性34例,培养阳性率为91．9％;初治和复治培养阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。共培养结核杆菌812管,杂菌污染15管,培养污染率为1．8％。痰标本中结核杆菌菌落开始生长的时间大多为2—3周,占90％。从第6周开始基本没有菌落开始生长。结论痰标本的处理过程以及结核杆菌培养时的操作细节均可对痰标本培养阳性率产生影响,可以对影响因素加以控制以提高培养阳性率,降低培养污染率。     

结核分枝杆菌KatG基因突变与对异烟肼耐药的关系

目的探讨结核分杖杆菌KatG基因突变与对异烟肼耐药程度的关系。方法对临床分离的6I株结核分枝杆菌异烟肼耐药株（其中高浓度耐药株49株．低浓度耐药株12株）和42株结核分枝杆菌异烟肼敏感株进行DNA序列分析。结果61株异烟肼耐药株中，检测到50株存在KatG S315T（AGC→ACC）基因突变、1株存在Ser315Arg（AGC→AGA）的突变，1株发生Val319Asp（GTC→GAC）突变，突变率为185．2％（52／61）。其中高浓度耐药株中有46株检出发生S315T突变，1株发生Val319Asp突变，突变率为95．9％（47／49）；低浓度耐药株中有4株检出发生S315T突变，1株发生Sex315Arg（AGC→AGA）的突变，突变率为41．7％（5／12）；42株异烟肼敏感株DNA序列分析均没有检测到KatG基因突变。结论KatG基因突变是结核分枝杆菌耐异烟肼的主要分子机制，异烟肼高浓度耐药株的KatG基因突变率远高于低浓度耐药株的基因突变率。     

结核分枝杆菌耐药性不同检测方法的比较与评价

目的：探讨两种方法在结核分枝杆菌耐药性快速检测的应用可行性。方法：应用直接法与传统法进行耐药试验,比较两者的耐药结果。结果：与传统法耐药管培养结果比较,涂片≤2＋的痰标本的低浓度耐药试验直接法的结果RFP、INH、EMB耐药性符合率分别为28．6％、50．0％、12．5％,耐药性总符合率为30．4％,两者差异有统计学意义。结论：直接法应用于结核分枝杆菌耐药试验是可行的,对临床上肺结核病人耐药性的快速检测具有一定价值。     

研究GeneXpert检测在结核分支杆菌及其利福平耐药性检测中的应用

目的分析Gene Xpert检测在结核分枝杆菌及其利福平耐药性检测中的应用效果。方法选取2017年7月～2019年6月本院接收的涂片阳性肺结核患者80例痰液标本,利用Gene Xpert检测痰液标本中的结核分枝杆菌和利福平耐药性,并对比Gene Xpert检测与传统罗氏培养结果。结果液标本80份检测标本中,74份符合,符合率为92.50%。基因芯片实验未检出标本与传统培养的快速生长菌株相吻合,具有较高的准确率;74株结核分枝杆菌分离株,通过传统罗氏培养与Gene Xpert检测结核分枝杆菌对利福平耐药性,Gene Xpert检测5例耐药,传统罗氏培养检测4例,符合率为80.00%。结论 Gene Xpert检测在结核分枝杆菌及其利福平耐药性检测中应用效果明显,其不仅可以快速、准确检出疾病,同时也为临床结核疾病的诊治提供了重要数据参考,值得推广。     

噬菌体法检测结核分枝杆菌及其耐药性的研究

目的：利用噬菌体法进行结核分枝杆菌检测,对链霉素、异烟肼、利福平药物敏感性测定,来分析其实验方法的灵敏度、特异性及药物敏感性同比例法的符合率,指导临床诊断和合理用药治疗。方法利用噬菌体法进行结核分枝杆菌的检测,链霉素（S）、异烟肼（H）和利福平（R）药物敏感性测定,以比例法为对照,来分析噬菌体法的灵敏度、特异性及符合率。结果噬菌体法药物敏感测定结核分枝杆菌同比例法的符合率为90.2%,分别为S 92.6%、R 91.1%、H 88.6%;噬菌体法直接检测肺结核患者痰样本结核分枝杆菌,涂阳培阳、涂阴培阳、涂阴培阴样本检出率分别为96.2%、80.0%、26.2%。结论噬菌体法可快速检测肺结核患者痰样本中结核分枝杆菌,检出率明显高于涂片法,敏感性、特异性较高;噬菌体法对临床分离株进行药物敏感性测定,与比例法比较符合率较高,报告时间只需3 d,且无需特殊仪器、费用低,对临床早期诊断与治疗具有重要意义。     

实时定量PCR技术在肺结核诊断中的价值

目的评估实时定量PCR法在肺结核诊断中的价值。方法对412例可疑肺结核患者送检痰液,分别应用痰涂片抗酸染色法、结核杆菌培养法和实时荧光定量PCR法进行检测,并对检测结果进行比较分析。结果痰涂片抗酸染色法、结核杆菌培养法和实时荧光定量PCR法对最终确诊的326例肺结核患者痰样本的阳性检出率分别为24．23％、31．29％、78．22％。3种检测方法差异有统计学意义（P〈0．05）。结论实时定量PCR法具有检出率高,敏感性高,特异性高等优点,在结核病实验室辅助诊断方面有重要的应用价值。     

3种耐药结核分枝杆菌检测及临床应用

目的探讨耐链霉素(SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG3种基因突变情况及在耐药检测中临床应用的可行性。方法采用聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对221株临床分离株,100例涂片阳性肺结核病痰标本进行rpsL、rpoB、KatG3种基因突变分析。221株临床分离株中敏感株34株,单耐SM、RFP、INH分别为32株、37株、28株,耐SH、SR、HR、SHR分别为14株、30株、8株、52株,100例痰标本耐SM、RFP、INH分别为51例、54例、40例。结果以结核分枝杆菌H37RV为对照,34株敏感株rpsL、rpoB基因SSCP图谱正常,特异性为100%,KatG基因2株SSCP图谱异常,特异性为94.1%。单耐SM、RFP、INH结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG基因突变率分别为78.1%(25/32)、86.5%(32/37)、53.6%(15/28),耐多药(SM、RFP、INH)结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG基因突变率分别为78.1%(75/96)、88.9%(80/90)、55.4%(41/74)。100例涂片阳性肺结核患者痰标本经PCR扩增67例阳性,直接检测耐SM、RFP、INH结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG基因突变率分别为74.1%(25/35)、89.1%(33/37)、48.0%(12/25),阳性检出率分别为49.0%、61.1%、30.0%。结论耐单药和耐多药(SM、RFP、INH)结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG基因突变率分别经χ2分析差别无统计学意义(P>0.05),也就是耐单药和耐多药结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG基因突变率相同,耐多药结核分枝杆菌rpsL、rpoB、KatG3种基因突变相互之间无影响。PCR-SSC技术有望直接用于检测涂片阳性肺结核患者痰标本中rpsL、rpoB、KatG基因突变判定耐药,但还需在方法学上进一步改进以达到技术容易掌握、操作简便、影响因素少,结果检出率高等。     

绵阳市肺结核流行病学调查研究

目的了解绵阳市疑似肺结核患者的痰涂片和痰培养中结核分枝杆菌的阳性检出率情况。方法收集经胸片复查后疑似活动性肺结核患者的痰进行涂片和培养,并对检测出的结果进行比较分析。结果在747份痰直接涂片标本中,男性阳性率为0.67%,女性阳性率为0.27%,阳性检出率为0.94%,但差异无统计学意义(P0.05);而596份酸性罗氏培养基中,男性阳性率为3.85%,女性阳性率为0.34%,痰培养阳性检出率为4.19%,差异有统计学意义(P0.05)。结论绵阳市肺结核患病率低于全国,男性患病率高于女性。     

基因芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性

目的研究基因芯片在检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性中的应用。方法根据与利福平和异烟肼耐药相关的4条基因上的11个位点和30种单核苷酸多态性设计制作芯片,用芯片检测结核分枝杆菌的基因突变,从而判断其耐药性。结果用基因芯片在110株异烟肼耐药株中检测出85侏（73．3％）,在30株异烟肼敏感株中检测出22株（73．3％）,在94株利福平耐药株中检测出77株（81．9％）,在46株利福平敏感株中检测出40株（87．0％）。芯片检测结果与部分样本的测序结果完全相符。结论用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,该法快速、精确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

多种检测方法对提高结核杆菌阳性检出效果评价

目的评价痰涂片结核杆菌检查与血清结核抗体检测在结核病诊断中的应用价值。方法分别采用涂片法、蛋白芯片法和金标法,对40例肺结核患者、70例非结核肺部疾病患者和70例健康体检者进行结核杆菌和结核抗体检测,并对结果进行统计分析。结果涂片法、蛋白芯片法和金标法测定的敏感度分别为32．5％、52．5％、30％,特异度分别为100％、93．6％、85．7％;对于痰菌阳性肺结核患者,蛋白芯片法和金标法的阳性率分别为84．6％和61．5％,对于痰菌阴性患者,蛋白芯片法和金标法的的阳性率分别为37．0％和14．8％。结论蛋白芯片法比痰涂片有更高的检出率,比金标法有更高的特异性,可以作为临床对结核病的辅助诊断方法。     

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的药物敏感性应用价值

目的探讨噬菌体生物扩增法（PhaB）快速测定结核分枝杆菌对异烟肼（INH）和利福平（褂甲）的药物敏感性在临床应用价值。方法选择初治肺结核病患者留痰后培养获得的结核分枝杆菌菌株69株和复治患者留痰后培养获得的结核分枝杆菌菌株98株。均经改良罗氏培养基培养并进行菌型鉴定,证实为结核分枝杆菌（MTB）。分别采用PhaB法和改良罗氏比例法检测其对INH和RFP的耐药性,将2种方法的结果进行敏感度、特异度和符合率比较。结果（1）初治结核分枝杆菌69株中,与改良罗氏比例法比较,PhaB法检测INH的敏感度、特异度和符合率分别为80％（4／5）、90．6％（58／64）和89．9％（62／69）;PhaB法检测趾11P的敏感度、特异度和符合率分别为100％（3／3）、95．5％（63／66）和95．7％（66／69）。（2）复治结核分枝杆菌98株中,与改良罗氏比例法比较,PhaB法检测INH的敏感度、特异度和符合率分别为89．7％（35／39）、88．1％（52／59）和88．7％（87／98）;PhaB法检测肿的敏感度、特异度和符合率分别为97．1％（34／35）、93．7％（59／63）和94．9％（93／98）。结论噬菌体生物扩增法同改良罗氏比例法比较有较高的敏感度、特异度和符合率,可快速、准确地检测结核分枝杆菌对INH和RFP的耐药性。