CD56抗原表达在急性髓细胞性白血病并发中枢神经系统浸润中的意义

目的 探讨CD56抗原表达在急性髓细胞性白血病(AML)并发中枢神经系统浸润(CNSL)中的意义及髓外浸润的机制。方法 回顾性分析2012-01—2018-12郑州市第一人民医院收治的86例连续接受全身化疗的AML患者CD56表达的临床特征,将CD56⁺ AML患者的分类数据与CD56-AML患者的分类数据进行比较。结果 86例患者中26.7%的患者表达CD56抗原,其表达与CD13⁺、CD34⁺、CD38^-和CD11b⁺免疫表型显著相关。全身化疗后,11.6%的患者中枢神经系统受累,多集中发生在AML完全缓解(CR)后6～12个月,发生率达76.9%。CD56抗原阳性患者的3 a无病生存期(DFS)明显低于抗原阴性患者(21.7%对47.6%,P=0.04)。结论 CD56抗原表达是AML并发中枢神经系统浸润的重要危险因素。CD56抗原阳性患者DFS与OS短于阴性患者。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。 方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2~4 mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。 结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P < 0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P < 0.05)。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

脑梗死患者外周血单个核细胞SOCS-3动态变化及临床意义

目的探讨脑梗死患者外周血单个核细胞（PBMC）中细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）表达规律及其临床意义。方法实时荧光定量PCR法检测脑梗死患者PBMC中SOCS-3mRNA表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测脑梗死患者血样中血浆白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。记录所有患者发病3d内影像学（CT／MRI）脑梗死体积。观察并记录患者入院48h内及发病三月时的神经功能缺损评分。结果（1）脑梗死患者发病后1-6dPBMC中SOCS-3mRNA表达显著高于对照组（P〈0．05），其表达随时间延长呈下降趋势，至第7、14天时与对照组无显著差异。（2）进展型脑梗死患者发病后第1天PBMC中SOCS-3mRNA表达显著低于完全型脑梗死患者，但较对照组高（P〈0．05）；其血浆中IL-6及TNF-α水平则显著高于完全型脑梗死患者。（3）梗死体积大小不同组患者发病后第1天PBMC中SOCS-3mRNA表达无显著差异（P〈0．05）；血浆中IL-6及TNF-α水平含量高低与梗死体积呈正相关。（4）脑梗死患者发病三月时改良Rankin量表（mRS）评分与发病第l天SOCS．3mRNA表达呈负相关。与血浆IL-6、TNF-α呈正相关。结论脑梗死患者急性期PBMC中SOCS-3参与脑梗死发生、发展的病理生理过程。提示JAK／STAT／SOCS-3这条信号通路可能通过抑制炎症细胞因子的表达从而减轻脑缺血后炎症反应．改善神经功能缺损．成为内源性的神经保护机制之一。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞CD40配体的表达

ＣＤ4 0配体 (ＣＤ4 0Ｌ)与ＣＤ4 0交联结合是Ｔ细胞激活必需的共刺激信号 ,为探讨ＣＤ4 0Ｌ ＣＤ4 0共刺激信号通路在ＭＧ发病中的作用 ,我们分析ＭＧ患者外周血ＣＤ4 0Ｌ的表达。研究对象 :ＭＧ组 :18例 ,9例作血清ＡＣｈＲａｂ测定 ,阳性5例 ,阴性 4例 ;6例正用免疫抑制剂 ,1例施行了胸腺切除术(胸腺增生 )。对照组 :健康志愿者和献血员 16名。方法 :(1)取ＭＧ患者和对照者外周血 ,用Ｆｉｃｏｌｌ密度梯度法分离ＰＢＭＣ ,并调制成 1× 10 6/ｍｌ的细胞悬液 ;每毫升细胞悬液加入 5ｎｇ/ｍｌＰＭＡ +5 0 0ｎｇ/ｍｌｉｏｎｏｍｙｃｉｎ共同…     

急性髓系白血病患者外周血单个核细胞Toll样受体9以及血清肿瘤坏死因子和凋亡基因FAS的表达

背景：Toll样受体9(TLR9)、肿瘤坏死因子a、Fas可能共同参与白血病的发生发展过程。目的：测定TLR9在急性髓系白血病患者外周血单个核细胞中的表达及血清肿瘤坏死因子α、Fas水平。方法：从急性髓系白血病患者与正常对照组中分离出外周血单个核细胞,采用反转录-聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞中TLR9 mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附试验法检测血清肿瘤坏死因子α、Fas水平。结果与结论：在急性髓系白血病患者初治组和难治复发组中,外周血单个核细胞中TLR9 mRNA表达高于正常对照组(P < 0.01),化疗后完全缓解组与正常对照组差异无显著性意义(P > 0.05);各病例组血清肿瘤坏死因子α、Fas水平显著高于正常对照组(P < 0.01)。TLR9 mRNA的表达与血清肿瘤坏死因子α、Fas水平均呈正相关。     

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD137的表达特点及其临床意义

目的探讨急性动脉粥样硬化性脑梗死(atherosclerotic cerebral infarction,ACI)患者外周血肿瘤坏死因子受体超家族(tumor necrosis factor receptor super family,TNFRSF)成员CD137的表达特点及其临床意义。方法入选发病72h以内住院患者共46例,其中ACI组27例,无症状性颈动脉狭窄(asymptomatic carotid stenosis,ACS)组19例,另选择同期健康体检者20名为正常对照组(normal control,NC)。采用流式细胞术和流式细胞磁珠微阵列法(CBA)检测各组观察对象外周血CD4~+T细胞及其CD4~+CD28-T细胞亚群表面CD137的表达和血浆可溶性CD137水平。结果 ACI组外周血CD4~+CD28-T细胞比例[(14.13±4.42)%]、CD4~+CD28-T细胞CD137的表达[(2.60±2.14)%]、血浆sCD137[(3.43±2.48)pg/mL]水平显著高于ACS组[(9.03±4.60)%、(0.70±0.66)%、(2.07±0.814)pg/mL]和NC组[(8.08±3.30)%、(0.45±0.31)%、(1.26±0.70)pg/mL](P0.01),且ACI组CD4~+T细胞的CD137表达及血浆sCD137水平与NIHSS评分(P0.05)和梗死体积(P0.01)呈正相关。结论 ACI患者发病早期CD4~+CD28-T细胞、CD4~+T细胞及其CD4~+CD28-T细胞表面CD137、血浆sCD137水平升高,且CD4~+T细胞的CD137表达及血浆sCD137水平与NIHSS评分呈正相关,提示其可能作为评估脑梗死临床严重程度的外周生物学标志。     

急性髓细胞性白血病M2患者形态学及免疫学分型与融合基因染色体检查的价值

背景：传统的形态学分型法仅能使70%左右的急性白血病得以准确分型,单纯的FAB分型已远远不能满足临床需要。目的：评价形态学、免疫分型、融合基因、染色体检查在急性髓细胞性白血病(M2)中的诊断价值及预后意义。方法：选择新疆医科大学第一附属医院收治的急性髓细胞性白血病患者M2型76例,男40例,女36例。用反转录-聚合酶链反应技术检测AML1/ETO融合基因的表达、R带法进行染色体核型分析、流式细胞仪免疫分型检测,应用形态学和免疫分型、融合基因、染色体检查,并持续观察,定期检查血象等相关检查,由是否能明确诊断或协助诊断,对复发有无相关检查预测性来分析其诊断价值及预后影响因素。结果与结论：76例患者中有形态学不易分类的6例患者,结合免疫分型、融合基因及染色体检查可明确,单纯髓系抗原表达较伴有干祖系抗原表达缓解率高,CD19抗原可与部分急性髓系白血病有交叉表达,且有交叉表达的有较好的预后,伴有CD7抗原表达7例均完全缓解,可能更倾向于分化成熟的细胞,具有单纯t(8,21)、融合基因阳性者预后较佳,完全缓解率高。提示形态学、免疫学分型结合融合基因、染色体检查可提高急性白血病M2的诊断准确性、判断预后。     

不同级别胶质瘤患者CD8+CD28-抑制性T细胞的表达与临床意义

目的探讨不同级别胶质瘤患者CD8+CD28-调节性T细胞的水平变化。方法良性及恶性胶质瘤患者各15例,并选择同年龄段15例正常人作为对照。采用流式细胞术检测其外周血CD8+CD28-调节性T细胞,及其胞内细胞因子白介素10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1)的百分含量。结果胶质瘤患者的CD8+CD28-调节性T细胞含量明显高于健康人,且高级别患者明显高于低级别者(P<0.05);高级别胶质瘤患者的IL-10及TGF-β1同样明显高于健康组及低级别组(P<0.05)。结论 CD8+CD28-调节性T细胞数量的增多及功能的增强,可能是胶质瘤的一个重要免疫学机制,具有重要临床意义。     

应用流式细胞术测定CD24表达鉴定人髓核细胞

背景：CD24是成熟髓核细胞表面表达的特异性分子,测定CD24的表达是否可以作为鉴定髓核细胞的一种方法？目的：验证流式细胞仪测定髓核细胞CD24表达鉴定髓核细胞的方法。方法：采用酶消化法分离培养人髓核细胞,取生长旺盛的第2代人髓核细胞爬片进行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,RT-PCR测定Ⅱ型胶原及SOX9的表达,流式细胞仪检测其CD24阳性表达率,分析来自同一批细胞的免疫组织化学染色、RT-PCR结果与CD24阳性率的相关性。结果与结论：体外分离培养的7例第2代髓核细胞爬片Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性,RT-PCR结果阳性,流式细胞仪测定CD24其阳性率均为50%以上,髓核细胞分泌胞外基质Ⅱ型胶原与SOX9的表达与CD24阳性率结果有相关性。提示采用流式细胞仪测定CD24表达可以快速、简便地鉴定髓核细胞。     

体外联合应用CD80和CD28/CpG ODN共刺激活化人外周血单个核细胞

背景：启动维持并调节活化级联反应,决定了T细胞是活化增殖或转变为无反应状态甚至凋亡。B7分子与CD28的结合能有效协同T细胞受体途径活化T细胞,增强T细胞的增殖活性。 目的：初步分析CD80和CD28/含CpG的寡脱氧核苷酸(CpG containing oligodeoxynucleotides,CpG ODN)共刺激活化的人外周血单个核细胞对胃癌细胞株MKN45的杀伤作用。方法：Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入白细胞介素2及CD28,CpG ODN共刺激活化培养1~5 d。取MKN45细胞,设立4组：CD28/CpG ODN共刺激组、CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组、单纯CD80组、空白对照组。以MTT法检测细胞杀伤率,电镜观察凋亡的MKN45细胞超微结构,流式细胞仪检测MKN45细胞凋亡率。结果与结论：单纯CD80组对MKN45细胞无明显杀伤作用;与CD28/CpG ODN共刺激组比较,CD80联合CD28/CpG ODN共刺激组对MKN45细胞的杀伤作用显著增强(P < 0.05),效应细胞与靶细胞之比达15︰1时即可达到半数杀伤率。电镜下效应细胞作用24 h,MKN45细胞就部分发生坏死,部分细胞可见凋亡。与空白对照组比较,单纯CD80组MKN45细胞凋亡率显著升高(P < 0.01)。提示CD80与共刺激活化的外周血单个核细胞合用,可提高活化的外周血单个核细胞对MKN45细胞的靶向性杀伤作用。     

帕金森病患者外周血单核细胞CD14和TLR4中mRNA的表达水平

目的研究帕金森病患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)脂多糖受体(cluster of differentiation 14,CD14)和toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)中m RNA的表达并探讨其在疾病发生发展中的临床意义。方法本实验共入组44例帕金森病患者和37例性别、年龄相匹配的健康对照者,并详细记录入组的44例帕金森病患者发病年龄、病程、性别,在关期时对帕金森病患者进行H-Y分期、UPDRSⅡ、UPDRSⅢ、NMSS评分,利用RT-PCR技术检测各研究对象PBMC中CD14和TLR4中m RNA的表达。结果帕金森病患者外周血CD14 m RNA表达水平(1.459±0.658)2~(-△△CT)、TLR4 m RNA(1.408±0.698)2~(-△△CT)表达较健康对照者((1.162±0.631)2~(-△△CT)、(1.122±0.557)2~(-△△CT))均显著增加(P均0.05)。相关性分析显示帕金森病组CD14 m RNA的表达水平与反应帕金森病疾病严重程度的H-Y分期呈显著正相关(P0.05)。结论帕金森病患者外周血CD14 m RNA表达与其H-Y分期正相关,提示CD14/TLR4的单核细胞所介导的固有免疫反应可能是帕金森病发生、发展的一个重要因素。     

Altered cannabinoid receptor mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells from marijuana smokers

We studied, using RT-PCR, the relative expression of cannabinoid receptor (CBR) mRNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from different donor groups. Cells from normal donors expressed a CB2 mRNA level threefold higher than CB1 across all age, gender or ethnicity groups, and amplicons were of the same size in all donors. However, cells from marijuana users expressed higher levels of CBR mRNA, but with a preserved CB1/CB2 ratio of 1:3. CBR gene products were also studied following short-term mitogen activation in vitro. CB1 expression decreased following mitogen stimulation when compared to the time-matched medium only cells while the expression of CB2 mRNA remained unchanged. These studies suggest that marijuana smoking and immune activation can alter the basal levels of CB1 and CB2 in PBMCs.     

阿尔茨海默病患者外周血OSTM1表达的变化

目的观察阿尔茨海默病(AD)患者与健康对照组外周血单核粒细胞中骨硬化症相关蛋白1(OSTM1)表达的差异并探讨其意义。方法 AD患者与对照组各30例,采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单核粒细胞,培养24h收集细胞。细胞爬片后,采用免疫荧光细胞化学技术,观察OSTM1在单核粒细胞中分布并比较两组荧光信号强弱;蛋白印迹法(Western blotting)检测OSTM1蛋白表达水平;实时定量多聚链式反应(RT-PCR)法检测OSTM1mRNA表达水平。结果 1OSTM1表达情况:人外周血中表达OSTM1主要集中在胞浆,与对照组比较,AD组细胞荧光信号明显增强且分布范围扩大;2两组OSTM1在蛋白表达水上的平差异:AD组OSTM1表达(0.53!0.04)较对照组(0.36!0.03)比较差异有统计学意义(P<0.05);3两组在OSTM1基因水平表达情况:AD组与对照组OSTM1 mRNA分别为0.75!0.13和0.32!0.11,AD组OSTM1 mRNA表达水平与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AD组OSTM1在蛋白、基因水平较对照组均明显升高,推测OSTM1在AD发病机制中具有关键作用。     

大肠癌患者外周血细胞CD133的表达***

背景：近期有报道称在肿瘤患者外周血中检测出了高于正常值的CD133阳性细胞。 目的：观察CD133 mRNA和蛋白在大肠癌患者外周血中的表达并探讨其临床意义。 方法：应用流式细胞技术与RT-PCR反应检测29例大肠癌患者和20例正常对照外周血中CD133 抗原与mRNA的表达。 结果与结论：发生转移的大肠癌患者外周血中CD133阳性细胞比例显著高于正常对照及无转移的大肠癌患者(P < 0.01)。正常健康人群和无转移大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达为阴性,发生转移的部分大肠癌患者外周血中CD133mRNA表达阳性,阳性率为35.7%(5/14),在超过38个以上循环时表达为弱阳性。结果表明,无转移大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白表达与正常对照无区别,发生转移的大肠癌患者外周血中CD133 mRNA和蛋白高于正常对照和未发生转移者。     

Increased pro-inflammatory cytokine gene expression in peripheral blood mononuclear cells of patients with polyneuropathies

Background

Distinct cytokine expression patterns have been reported in biomaterial of patients with polyneuropathies (PNP). We investigated gene expression profiles of pro- and anti-inflammatory cytokines in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of patients with neuropathies of different etiologies.

Methods

We prospectively studied 97 patients with neuropathies and compared data between diagnostic subgroups and healthy controls. Gene expression of a panel of pro- and anti-inflammatory cytokines was analyzed (interleukin-1 [IL-1], IL-2, IL-6, IL-8, tumor necrosis factor alpha [TNF], IL-4, and IL-10) in PBMC samples. Furthermore, protein levels of IL-6, IL-8, and TNF were measured in supernatant of PBMC stimulated with lipopolysaccharide (LPS).

Results

PNP were associated with higher PBMC gene expression of IL-1 (p < 0.05), IL-2 (p < 0.05), IL-8 (p < 0.001), and TNF (p < 0.01) compared to healthy controls. Inflammatory neuropathies were associated with higher gene expression of IL-8 (p < 0.001) and TNF (p < 0.05) and lower gene expression of IL-10 (p < 0.05) compared to healthy controls. More pro-inflammatory cytokines were elevated in painful neuropathy (IL-1, IL-2 [p < 0.05], IL-8 [p < 0.001] and TNF [p < 0.05]) than in painless neuropathy (IL-8 [p < 0.01] and TNF [p < 0.01]) compared to healthy controls, while IL-10 expression was higher in treatment naïve patients with painless neuropathy compared to patients with painful neuropathy (p < 0.05). Disease duration positively correlated with IL-6 gene expression (p < 0.01). Supernatant protein levels of IL-6, IL-8, and TNF did not differ between groups.

Conclusion

Systemic gene expression of pro-inflammatory cytokines is increased in patients with neuropathies and may be influenced by the presence of neuropathic pain.

     

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血单核细胞4-1BB配体表达水平的变化

目的 研究急性动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)患者外周血单核细胞(PBMC)4-1BB配体(4-1BBL)表达水平的变化.方法 通过流式细胞术和酶联免疫吸附分析(ELISA)测定20例ACI患者PBMC4-1BBL的表达和血浆可溶性4-1BBL(s4-lBBL)的浓度,并与19例动脉粥样硬化患者及23名健康对照者进行比较...