放射治疗对直肠癌细胞凋亡及相关调控蛋白的影响

目的 探讨直肠癌术前放射治疗对癌细胞凋亡及及相关调控蛋白的影响.方法 分析56例接受术前放射治疗的直肠癌患者的临床资料.采用TUNEL法观察放疗前活检标本及放疗后手术切除标本的细胞凋亡情况.免疫组织化学方法检测放疗前后所取标本的Bcl-2和Bax蛋白的表达情况.结果 56例直肠癌患者放疗前和放疗后,肿瘤细胞凋亡指数(AI)及凋亡阳性率均显著增加(均P＜0.001).放疗后Bcl-2蛋白的阳性表达率较放疗前显著升高(P=0.02),且与放疗后肿瘤细胞凋亡率成负相关(r=-0.68,P=0.016);而放疗后Bax蛋白的表达阳性率显著上升(P=0.01),且与放疗后肿瘤细胞凋亡率成正相关(r=0.89,P＜0.001).结论 直肠癌术前放射治疗对癌组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达有显著影响,促进肿瘤细胞凋亡.     

槲皮素诱导人肺癌GLC-82细胞凋亡及机制

目的：探讨黄酮类中药成分槲皮素（Quercetin）对人肺癌GLC-82细胞生长抑制和凋亡的影响.方法：采用细胞培养技术,用不同浓度的槲皮素作用GLC-82细胞48 h,用Hoechst33258染细胞核,在荧光显微镜下观察凋亡细胞核形态变化,用QWin图像分析软件测量细胞核面积和凋亡率.采用MTT法测定细胞的生长能力.采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法检测Mdm2、p53、Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达,用QWin图象分析软件测定Mdm2、p53、Bax、Bcl-2和caspase-3荧光强度值.结果：槲皮素剂量依赖性的抑制GLC-82细胞生长,呈现典型的凋亡形态学特征,胞核缩小,核质浓集,呈斑块状,有凋亡小体.上调凋亡抑制因子Mdm2和Bcl-2蛋白表达,下调凋亡促进因子Bax和Caspase-3的蛋白表达,对p53蛋白表达量没有明显影响.增加Mdm2、p53、Bax、Bcl-2的阳性表达率,降低caspase-3阳性表达率.结论：槲皮素能够抑制肺癌GLC-82细胞生长并诱导细胞凋亡,而Mdm2的蛋白表达增加,可能抑制了p53发挥促凋亡作用,使部分GLC-82肺癌细胞逃避死亡.     

食管癌组织中癌细胞凋亡和相关基因表达的临床研究

目的　探索食管癌组织中癌细胞凋亡和相关基因p2 1、p5 3、Bcl- 2表达的关系。方法　采用免疫组化法检测 4 0例食管癌手术切除标本中p2 1、p5 3、Bcl- 2的表达及细胞凋亡的变化。结果　 4 0例食管癌组织中p2 1、p5 3和Bcl- 2的阳性表达率分别为 5 2 .5 % (2 1 4 0 )、80 % (32 4 0 )和 6 0 % (2 4 4 0 ) ,癌细胞凋亡指数 (AI)为 (2 0 35±1 30 2 ) % ,p2 1阳性表达时凋亡指数高于其阴性表达 ,p5 3阳性表达时凋亡指数低于其阴性表达。结论　p2 1和p5 3的阳性表达与癌细胞凋亡有密切关系 ,检测p2 1和p5 3的表达水平可以协助判断食管癌的分化程度及预后     

慢性胃炎脾胃虚实证候胃粘膜细胞凋亡及相关蛋白的研究

为探讨脾胃虚实证候与胃粘膜细胞凋亡的相关性，采用辨证分型，以胃粘膜细胞凋亡指数（AI）、凋亡基因相关蛋白p53、Bcl-2、Fas等为指标进行研究，结果：①脾胃虚证和实证均表现为胃粘膜Al增加（P〈0．05），虚证组高于实证组（P〈0．05）；②脾胃虚证组和实证组p53、Bcl-2表达高于对照组（P〈0．01～0．05）；③脾胃实证组Fas表达高于对照组（P〈0．05）。说明慢性胃炎从正常到实证到虚证的发展过程中，细胞凋亡逐步增多；p53、Bcl-2、Fas的表达参与细胞凋亡的调控，与证候形成的复杂性有关。     

红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响

目的 观察红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响,并探讨其造血调控作用机制。方法 用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法和流式细胞术（FCM）分别检测红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞以及骨髓细胞周期的影响,同时用免疫组织化学方法检测各组骨髓细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果 低剂量和高剂量红景天苷能明显升高外周血白细胞（WBC）和骨髓有核细胞（BMC）数,低剂量红景天苷能明显升高外周血血小板（PLT）数,促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化,而高剂量红景天苷具有明显促进S期细胞向G2／M期细胞转化的能力,从而导致高、低剂量组G2／M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。另外,高、低剂量红景天苷都能促进骨髓细胞中Bcl-2的表达。其中低剂量红景天苷的促进作用更为明显。同时,高、低剂量红景天苷也都能明显降低骨髓细胞中Bax的表达。结论 红景天苷可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞解除G0／G1期阻滞,加速骨髓G0／G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2／M期细胞的转化以及升高骨髓细胞Bcl-2的表达、降低Bax的表达来抑制骨髓细胞凋亡,促进骨髓造血功能的恢复。     

瘢痕疙瘩不同部位成纤维细胞的增殖-凋亡调控及相关蛋白的表达

目的 观察Fas介导下瘢痕疙瘩不同部位成纤维细胞增殖与凋亡的特点,探讨瘢痕疙瘩周边和中央部生长差异的细胞生物学机制。方法 应用透射电镜及流式细胞仪技术,观察了FasMcAb诱导下瘢痕疙瘩不同部位成纤维细胞的凋亡情况,并检测了不同来源成纤维细胞Fas受体、Bcl-2蛋白及p53蛋白的表达情况。结果 (1) 瘢痕疙瘩不同部位成纤维细胞在各种浓度梯度的FasMcAb作用下均未见明显的凋亡现象,Fas受体均呈高表达;(2)Bcl-2蛋白在瘢痕疙瘩不同部位成纤维细胞内均呈低表达,但中央部表达强度显著高于周边部(P<0.05);(3) p53蛋白在瘢痕疙瘩周边呈低表达,而在中央部呈高表达。结论 p53蛋白可能是导致瘢痕疙瘩不同部位呈现不同生长特性的最重要的增殖调控蛋白。     

垂体腺瘤的细胞凋亡及其相关基因产物的研究

目的 :研究人类垂体腺瘤中的细胞凋亡及其相关基因p5 3、Bcl 2、Bax产物。　方法 :采用TUNEL法检测14例患者垂体腺瘤的细胞凋亡 ,同时应用免疫组化技术检测 17例垂体腺瘤的细胞增殖相关抗原 (PCNA)和凋亡相关基因p5 3、Bcl 2、Bax表达的蛋白产物。　结果 :14例垂体腺瘤中 12例检测到凋亡细胞 (85 .71% ) ,其凋亡细胞比例仅占 0 .1%～ 8.0 % ,与肿瘤体积呈负相关 ,与腺瘤细胞增殖活性关系不密切。凋亡相关基因中Bax阳性率高 (92 .31% ) ,表达强 ,p5 3有 2例阳性 ,Bcl 2仅 1例弱阳性。腺瘤细胞Bax表达和细胞增殖活性呈正相关。结论 :人类垂体腺瘤中存在细胞凋亡。垂体腺瘤中Bax高表达 ,Bcl 2 /Bax比值 <1.0 ,这一细胞内的微环境有利于细胞凋亡的发生。人垂体腺瘤细胞Bax表达和细胞增殖活性呈正相关。垂体腺瘤的凋亡活性和其他临床特征(如增殖活性、侵袭性等 )无明显相关性。     

醋酸铅对小鼠胸腺细胞凋亡及Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的探讨醋酸铅诱导小鼠胸腺细胞凋亡及对Bax和Bc l-2基因表达的影响。方法以3种不同浓度的醋酸铅灌胃饲养小鼠46 d后,取胸腺组织,用琼脂糖凝胶电泳法检测胸腺细胞凋亡情况,Western blot法检测胸腺组织中Bax和Bc l-2的表达情况。结果铅处理组小鼠胸腺细胞有被降解的凋亡带,并且降解条带的量随着染铅剂量的增加而增加;小鼠胸腺细胞Bax表达量均高于对照组,并且表达量随着染铅剂量增加而升高(P<0.05);而Bc l-2表达量均低于对照组,且表达量随着染铅剂量的增加而递减(P<0.05),Bc l-2/Bax表达比明显降低(P<0.01)。结论醋酸铅可诱发小鼠胸腺细胞凋亡,,促进胸腺细胞中Bax基因的表达,抑制Bc l-2基因的表达,降低Bc l-2/Bax表达比。     

龙葵正丁醇提取物对Lewis肺癌移植瘤生长的影响

目的:观察龙葵正丁醇提取物对Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用。方法:建立Lewis肺癌模型,将40只C57BL/6J荷瘤小鼠随机分成荷瘤空白对照组、环磷酰胺组、龙葵正丁醇提取物高、中、低剂量组5组,每组8只。给药15 d后处死小鼠,剥离肿瘤组织,称重,计算肿瘤生长抑制率;解剖其胸腺、脾脏组织,称重,计算胸腺和脾脏指数。结果:龙葵正丁醇提取物高、中、低剂量对Lewis肺癌移植瘤的抑瘤率分别为32.14%、13.93%和15.36%。龙葵正丁醇提取物高剂量组胸腺指数增长率为134.31%,龙葵正丁醇提取物中剂量组脾指数增长率为128.73%。结论:龙葵正丁醇提取物对Lewis肺癌移植瘤生长具有一定程度的抑制作用,并能提高荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数。     

糖尿病模型鼠肾脏细胞增殖和凋亡关系的研究

目的通过观察糖尿病模型鼠肾脏细胞增殖和凋亡关系的研究，探讨糖尿病肾病的发生机制。方法雄性Balb/c小鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型，电镜观察肾脏早期的形态学改变；应用免疫组织化学检测肾脏细胞PCNA、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果形态学变化：建立模型后第2周、3周、4周，电镜下可见脏层上皮细胞足突融合，肾小球系膜增宽，肾小管上皮细胞空泡样变性等变化。免疫组织化学染色结果：建立模型后第3天，肾脏PCNA阳性细胞数最多，之后逐渐减少，第4周最少；第3天，实验组Bax表达最强，Bcl-2的表达最弱，第1—4周，Bax表达逐渐减弱，第4周最弱，Bcl-2的表达逐渐增强，第4周表达最强。第3天，实验组Bax／Bcl-2的比值明显大于对照组，第1～4周，比值逐渐减小，尤以第4周最小。结论在糖尿病肾病发生的早期阶段，肾脏细胞的PCNA表达减弱，Bax／Bcl-2的比值减小，是糖尿病肾病发生的机制之一。     

槐耳清膏对荷瘤小鼠瘤细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨槐耳清膏治疗肿瘤的作用机制。方法将雄性昆明小鼠分为对照组、5-Fu组、槐耳清膏组和槐耳清膏＋5-Fu组。用H22细胞给小鼠皮下注射,复制皮下瘤模型。观察各组移植瘤质量和抑瘤率,采用免疫组织化学法检测各组瘤组织Bcl-2、Bax蛋白表达。结果3个用药组小鼠的移植瘤质量和瘤组织Bcl-2阳性率显著低于对照组（P〈0．05）;与5-Fu组和槐耳清膏组比较,槐耳清膏＋5-Fu组小鼠瘤质量和瘤组织Bcl-2阳性率显著降低,Bax阳性率显著升高（P〈0．05）。结论槐耳清膏有明显的抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过下调Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡。     

双歧杆菌脂磷壁酸对衰老小鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的研究双歧杆菌表面分子脂磷壁酸(LTA)对衰老小鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨双歧杆菌抗衰老的分子机制。方法选择30只小鼠,将其随机分为衰老模型组、LTA治疗组和青年对照组,前两组用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,LTA治疗组用双歧杆菌LTA治疗。用原位末端标记法检测胸腺细胞凋亡,用免疫组化法检测胸腺Bcl-2、Bax的表达,并计算Bax/Bcl-2的比值。结果与青年对照组相比,衰老模型组胸腺细胞凋亡指数显著升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低,Bax蛋白表达量显著升高,Bcl-2/Bax比值显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。LTA治疗组上述指标与青年对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌LTA能延缓胸腺细胞凋亡,使Bcl-2/Bax比值优化,具有抗衰老作用。     

组织微阵列技术在地塞米松诱导SAP大鼠胰腺细胞凋亡中的应用

目的 应用组织微阵列技术研究地塞米松对SAP细胞凋亡及其调控基因的影响。方法 用改良Aho法制备SAP大鼠模型,模型组、地塞米松治疗组、假手术组各45只。术后3、6、12h观察各组存活率、胰腺病理变化、Bax、Bcl-2表达,凋亡细胞种类及凋亡指数。结果 模型组、治疗组存活率无差异（P〈0．05）;治疗组胰腺病理改变较模型组轻;治疗组Bax各时点阳性率高于模型组（P〈0．01）;模型组12h胰头部Bcl-2高于治疗组（P〈0．01）;治疗组6h凋亡指数高于模型组（P〈0．01）。结论 地塞米松治疗SAP可能与凋亡调控基因Bax、Bcl-2诱导的胰腺细胞凋亡有关;组织微阵列技术在胰腺炎病理检测中优势明显。     

针刺对脑挫伤大鼠脑组织P53、Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察针刺对脑挫伤模型大鼠脑组织凋亡相关基因P53、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 参照Feeney自由落体冲击造模法建立脑挫伤大鼠模型,将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、纳络酮组、针刺组,每组10只.针刺组、纳络酮组分别给予针刺、腹腔注射纳络酮治疗,每天1次,共治疗7 d.处理结束后,采用免疫组织化学方法检测损伤脑组织P53、Bcl-2/Bax表达.结果 模型组大鼠P53、Bax表达较假手术组明显升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值下降;针刺组、纳络酮组与模型组比较:Bcl-2 表达明显升高(P<0.01),P53、Bax表达明显下降(P<0.01),Bcl-2/Bax比值升高. 针刺组与纳络酮组P53、Bcl-2、Bax表达无明显差异(P>0.05).结论 针刺可减少脑挫伤大鼠脑组织促凋亡基因P53和Bax表达、增加凋亡抑制基因Bcl-2的表达,升高Bcl-2/Bax比率,这可能是针刺减少脑细胞凋亡、防治继发性脑损害的机制之一.     

MIF抑制剂HA对胃癌BGC-823细胞Bcl-2与p53蛋白表达的影响

目的 体外观察透明质酸(HA)抑制巨噬细胞移动抑制因子(MIF)后对人胃癌细胞株BGC-823表达Bcl-2、p53蛋白的影响.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HA对BGC-823细胞MIF mRNA表达的影响;Western blot法检测HA对BGC-823细胞MIF、Bcl-2及p53蛋白表达的影响.结果 RT-PCR法显示细胞内MIF mRNA表达水平随HA浓度的增高和时间的延长而降低,具有浓度-时间效应性.Western blot法显示细胞内MIF、Bcl-2蛋白表达水平随HA浓度的增高和时间的延长而降低,细胞内p53蛋白表达水平随HA浓度的增高和时间的延长而增高,具有浓度-时间效应性.结论 MIF抑制剂HA可以调节胃癌细胞凋亡相关基因p53、Bcl-2蛋白的表达.     

依达拉奉对脑出血大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的研究依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响，探讨其对脑出血后脑组织损害的保护作用。方法36只SD大鼠随机分为依达拉奉组、脑出血组和假手术组，每组12只。用尾状核注射自体血法建立脑出血模型；检测丙二醛（MDA）含量，以TUNEL法及免疫组化法检测神经细胞凋亡数及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果出血组脑组织MDA含量、细胞凋亡数和Bcl-2、Bax蛋白表达水平均明显高于假手术组；与出血组相比，依达拉奉组MDA含量、细胞凋亡数与Bax蛋白表达水平均下降，而Bcl-2蛋白表达水平显著增高。结论依达拉奉可抑制出血后神经细胞凋亡，此作用可能与其减轻氧化应激、上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达水平有关。     

健脾解毒方治疗裸鼠胃癌及其诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究健脾解毒方诱导胃癌细胞凋亡的作用并探讨其部分机制。方法:建立裸鼠人胃癌MKN-45细胞皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、替加氟组、健脾解毒方组、联合用药组4组,每组12只;给药14 d后观察各组对裸鼠胃癌的治疗作用及其对荷瘤裸鼠生存期的影响;TUNEL法检测各组胃癌细胞凋亡情况;分别采用实时荧光定量PCR方法和免疫组化S-P法检测健脾解毒方干预后Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,健脾解毒方组凋亡指数显著升高、Bcl-2 mRNA水平及Bcl-2蛋白表达显著降低、Bax的mRNA和蛋白表达明显上调、Bcl-2/Bax显著下降,健脾解毒方组和联合用药组均能明显抑制瘤体生长(P0.01),延长荷瘤鼠的生存期(P0.01)。联合用药组在抑制胃癌细胞生长和诱导胃癌细胞凋亡方面的作用均优于单纯化疗药组和单纯健脾解毒方组(P0.05或P0.01)。结论:健脾解毒方能抑制裸鼠胃癌细胞生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

槲皮素对脑出血大鼠神经细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白表达的作用研究

目的通过观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白表达的动态变化及槲皮素的干预作用,探讨槲皮素可能的神经保护作用及机制。方法以雄性健康SD大鼠通过自体血注入法制备大鼠脑出血模型,并随机分为假手术组、脑出血模型组、槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组,共4组,每组30只;槲皮素低剂量组和槲皮素高剂量组分别给予槲皮素10、50 mg/(kg·d)腹腔内注射,假手术组和脑出血模型组给予同等体积生理盐水腹腔内注射,每日1次,连续7 d;各组大鼠分别在术后第6小时、1天、2天、3天、7天通过前肢放置试验评分法评估神经功能缺损,采用TUNEL法检测血肿周围神经细胞凋亡,采用Western blot法检测血肿周围Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果与模型组比较,槲皮素低剂量组在脑出血后第3天、7天及槲皮素高剂量组在第2天、3天、7天的前肢放置试验评分和Bcl-2蛋白表达均明显增加(P<0.01);与模型组比较,槲皮素低剂量组在第3天、7天及槲皮素高剂量组在第1天、2天、3天、7天的神经细胞凋亡率和Bax蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论槲皮素能减轻脑出血后神经功能损伤,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,从而减少神经细胞凋亡有关。