复方麝香草酚醇溶液对白兔皮肤急性毒性及豚鼠皮肤刺激性的实验研究

目的：观察自制复方麝香草酚醇溶液对白兔的皮肤急性毒性及豚鼠的皮肤刺激性,为临床应用提供理论依据。方法将12只白兔随机均分为3组,在其背部脱毛24 h后,A、B组分别涂抹复方麝香草酚醇溶液2、4 g/kg,C组涂抹基质2 g/kg,进行皮肤急性毒性实验,观察其皮肤、毛发、口腔黏膜、饮食、眼睛及体质量变化,以及四肢活动和中枢神经系统中毒情况。将12只豚鼠随机均分为观察1组、观察2组、对照组,分别在其左侧脱毛区涂抹复方麝香草酚醇溶液2、4 g/kg及基质2 g/kg,进行皮肤刺激实验,观察其局部皮肤有无红斑、水肿、出血点等病变。结果大、小剂量复方麝香草酚醇溶液外涂于白兔及豚鼠皮肤,均未见毒性和刺激性反应。结论复方麝香草酚醇溶液无毒性及刺激性,安全性较好。     

兔经皮肤给药防蚴灵防护剂长期毒性实验

目的 目的 观察防蚴灵防护剂对兔反复经皮给药1个月的毒性反应, 评价其安全性。 方法 方法 40只兔随机分为溶媒 对照组和防蚴灵防护剂低、 中、 高剂量组, 对照组给予葵花籽油, 各剂量组分别按50、 300、 2 000 mg/kg经皮肤给予防蚴灵 防护剂, 每天1次, 连续4周。观察兔的一般状况、 皮肤刺激性反应、 体重、 摄食量、 血液、 血液生化、 脏器系数及组织病理 学变化。 结果 结果 低、 中、 高剂量的防蚴灵防护剂对兔一般情况无明显影响; 对照组和防蚴灵防护剂低剂量组的所有兔皮 肤未见明显改变, 中剂量组有2只、 高剂量组有4只兔的皮肤可见轻度刺激性; 高剂量防蚴灵防护剂对兔体重和摄食量有 一定的抑制作用; 各剂量防蚴灵防护剂对兔血液、 血液生化和脏器均无明显影响。 结论 结论 防蚴灵防护剂50 mg/kg为无 毒性反应剂量。     

妊娠期肝内胆汁淤积症JNK信号通路的动物实验研究

目的建立妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)的动物模型,并分析其与c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的关系。方法纳入40只清洁级SD发情期雌性大鼠,按4∶1比例与10只雄性大鼠同笼喂养,确定妊娠后将40只孕鼠随机分为观察组和对照组,每组20只。对照组继续常规喂养,观察组在常规喂养基础上注射孕酮和17-α-乙炔雌二醇,构建ICP模型,在妊娠后第3周处死大鼠。分别采用免疫印迹法和免疫组化法检测大鼠肝脏组织中JNK含量和阳性细胞数。比较两组大鼠JNK含量和阳性细胞数,检测大鼠血清总胆红素(TBil)水平,并分析其与JNK信号通路的关系。结果观察组大鼠血清TBil和肝组织中JNK蛋白表达量均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。40只雌性大鼠TBil与JNK蛋白表达量呈显著正相关性(r=0.455,P=0.000)。观察组JNK阳性细胞数显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 JNK信号通路参与ICP过程,且与ICP可能存在相互作用。     

复方穿蛭透皮贴治疗骨关节病的毒理学实验研究

目的考察复方穿蛭透皮贴剂对实验动物皮肤的急性毒性、刺激性及过敏性。方法复方穿蛭透皮贴剂对健康家兔进行皮肤急性毒性试验、皮肤刺激性试验及对健康豚鼠皮肤过敏性试验。结果复方穿蛭透皮贴剂对破损皮肤组试药中、高剂量组表现为轻度刺激性,其余各组均无急性毒性和刺激性。对豚鼠完整皮肤无致敏作用。结论本实验所用复方穿蛭透皮贴剂经皮肤给药安全。     

磁压榨技术建立胃肠吻合的动物实验研究

目的 探讨利用磁压榨技术建立兔胃肠吻合的可行性。方法 以10只健康新西兰兔为实验动物,设计加工适合兔胃肠吻合的子、母磁体。设计手术操作路径,在胃体乏血管区做荷包造瘘,经造瘘口先置入子磁体于胃内,并将其沿肠道推送至十二指肠,然后经胃造瘘口再次置入母磁体,调整子、母磁体在合适位置后子、母磁体自动对位相吸并压榨胃壁和肠壁。荷包缝合关闭胃造瘘口。待子母磁体间压榨的组织缺血—坏死—脱落后,胃肠吻合口即建立,子母磁体及坏死组织一起经消化道排出体外。观察实验动物术后存活情况,术后1个月处死动物获取吻合口标本,测量吻合口爆破压,肉眼观察吻合口愈合情况。结果 按预先设计的手术操作路径,10只新西兰兔均顺利完成手术操作并存活至术后1个月。围手术期内未出现并发症。手术操作时间（35.80±4.71）min（28.00~43.00 min）,磁体排出时间（11.40±1.56）d（9.00~14.00 d）。术后1个月获取吻合口标本,肉眼观察可见胃肠旁路吻合口愈合良好,周围组织轻度粘连。吻合口爆破压（103.00±7.95）mmHg（94.00~113.00 mmHg）（1 mmHg=0.133 kPa）。结论 利用磁压榨技术建立兔胃肠吻合操作简单、效果确切。     

慢性脊髓压迫减压后脊髓缺血再灌注损伤的动物实验研究

目的探讨慢性脊髓压迫减压后是否存在再灌注损伤,以及脊髓压迫程度与再灌注损伤的关系。方法选择新西兰兔96只,随机分成A、B、C、D4组,每组又分为2个亚组,每个亚组12只。A组为假手术组,B组椎管内占位50%,C组为椎管内占位60%,D组为椎管内占位70%。B1、C1、D1组不取螺钉,B2、C2、D2组取出螺钉后6h分别进行改良Tarlov评分及MDA含量、GSH-px活性、SOD活性测定,TUNEL阳性细胞计数。结果 Tarlov评分A组显著高于B、C、D组（P均〈0.05）;B1、C1、D1组Tarlov评分依次减低（P均〈0.05）,B2、C2组Tarlov评分高于B1、C1组（P均〈0.05）。C1、D1组与A1组比较,D2组与D1组比较,MDA表达明显增高（P〈0.05或〈0.01）。C1组、D1组与A1组比较,D2组与D1组比较,SOD和GSH-px活性降低明显（P〈0.05或〈0.01）。结论慢性脊髓压迫减压后可以出现缺血再灌注损伤,且脊髓压迫程度越重,再灌注损伤越显著。     

吡喹酮透皮给药治疗动物血吸虫病的实验研究

本文介绍了应用吡喹酮透皮剂对动物进行治疗血吸虫病的系列实验,包括:透皮剂的筛选、应用高效液相色谱仪测定动物透皮给药后的最低有效剂量、大动物疗效实验以及透皮剂的急性、亚急性毒性实验.吡喹酮透皮用药200mg/kg治疗血吸虫病兔减雌率为93.4%,减虫率92.2%;小鼠LD_(50)为3.741g/kg;猪100mg/kg用药后减虫率为73.5%而低有效剂量为100mg/kg;血药浓度测定200mg/kg用药后0.25h达2.612μg/ml,是同剂量口服组的5.2倍.     

阻断JAK-STAT信号通路对大鼠类风湿关节炎治疗作用的实验研究

目的探讨阻断Janus激酶-信号转导子和转录活化子(JAK-STAT)信号通路对大鼠类风湿关节炎的治疗作用。方法2005年10月至2006年9月在中国医科大学实验动物中心将关节炎模型建立成功且关节炎指数大于2分的30只大鼠随机分为胶原诱导的关节炎(CIA)模型组,JAK-STAT信号通路特异性阻断剂(AG490)低、中、高剂量组及来氟米特组,另有6只大鼠为正常对照组。分别予以生理盐水1mL/d(对照组,CIA模型组)、AG4901、5、10mg/(kg.d)、来氟米特10mg/(kg.d)腹腔注射或灌胃,44d后处死。比较大鼠体重、关节炎指数、足趾容积、病理评分及p-STAT1、p-STAT3的变化情况。结果CIA模型组关节炎发展迅速,关节炎指数、足趾容积明显增高,p-STAT1、p-STAT3表达增多,体重减轻;AG490低剂量组大鼠体重较CIA模型组有所增加,关节肿胀减轻,在一定程度抑制了JAK-STAT的激活;AG490中剂量组在体重、关节炎指数、足趾容积、病理评分等方面均较CIA模型组有明显改善(P<0.05),其疗效与来氟米特相当,同时可明显抑制JAK-STAT通路的激活;AG490高剂量组病理评分改善程度优于来氟米特组。结论JAK激酶特异性阻断剂AG490可以明显抑制STAT的过度激活,有效地减轻大鼠关节炎症状及组织病理损害,其疗效存在剂量依赖性。     

Hedgehog通路抑制剂逆转人胰腺癌SW1990细胞获得性耐药的实验研究

目的 探讨人胰腺癌SW1990耐药细胞株中Hedgehog通路成员(Shh、SMO、Gli1、ABCB1、ABCG2)表达的变化及应用Hedgehog信号通路抑制剂对其耐药性的影响.方法 建立人胰腺癌SW1990耐吉西他滨细胞株(SW1990/GZ).采用Hedgehog信号通路抑制剂环巴明作用耐药细胞,应用实时PCR、蛋白质印迹法检测用药前后细胞Shh、SMO、Gli1、ABCB1、ABCG2 mRNA和蛋白的表达及CD44+ CD24+、CD133+细胞亚群比例.以100 μmol/L吉西他滨作用环巴明处理后的SW1990/GZ细胞,应用Annexin V加PI双染法检测细胞凋亡率.结果 SW1990/GZ细胞中CD44+ CD24+细胞比例从亲代的(29.45±1.99)％增加到(93.16±2.46)％、CD133+细胞比例从(59.37±1.69)％增加到(95.88±1.47)％(P＜0.01);ABCB1、ABCG2、Shh、Gli1 mRNA的表达分别增加(274.90±31.44)、(3.48±0.33)、(12.07±1.71)、(4.15±0.42)倍(P＜0.01),并检测出SMO mRNA表达.蛋白表达结果与mRNA表达一致.2μmol/L环巴明作用SW1990/GZ细胞1周后,CD44+CD24+比例下降到(36.68±2.44)％、CD133+细胞比例下降到(62.76±1.28)％(P＜0.05).2、5μmol/L环巴明处理SW1990/GZ细胞后再用100 μmol/L吉西他滨处理细胞,细胞的凋亡加死亡率分别为(53.68±5.24)％和(69.99±3.16)％,显著高于对照组的(4.55±0.87)％(P＜0.01).结论 人胰腺癌SW1990耐药细胞株中高富集肿瘤干细胞,高表达Hedgehog信号通路成员SMO及Gli1.抑制耐药株的Hedgehog通路,可以降低其肿瘤干细胞比例,下调SMO及Gli1表达,部分恢复对吉西他滨的敏感性.     

BET抑制剂(+)-JQ1通过调节NF-KB信号通路保护小鼠急性肝衰竭实验研究*

目的 探讨溴结构域和额外末端结构域(BET)抑制剂(+)-JQ1对脂多糖/D-氨基半乳糖(LPS/D-Gal)诱导的小鼠急性肝衰竭(ALF)的保护作用及其作用机制。方法 将47只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=17)和(+)-JQ1干预组(n=15),采用腹腔注射LPS/D-Gal联合诱导ALF模型,其中在干预组造模前2 h腹腔注射(+)-JQ1。在造模4 h后每组处死5只小鼠,其余小鼠继续喂养至72 h,观察存活率。采用ELISA法检测血清TNF-α,采用RT-qPCR法和Western bloting法分别检测mRNA和蛋白表达。结果 模型组72 h小鼠存活率为16.7%(2/12),(+)-JQ1干预组为60.0%(6/10,P>0.05);ALF组血清ALT水平为(2779.0±200.6)U/L,显著高于对照组【(44.9±2.5) U/L,P＜0.05】,血清AST水平为(2885.0±143.6)U/L,显著高于对照组【76.0±5.7) U/L,P＜0.05】,而(+)-JQ1干预组血清ALT和AST水平较模型组显著降低 【分别为(948.7±46.3)U/L和(1704.0±42.1)U/L,P＜0.05】;ALF组肝组织TNF-αmRNA水平为(103.7±23.0),显著高于对照组【(1.2±0.2),P＜0.05】,IL-6 mRNA水平为(73.4±15.8) ,显著高于对照组【(1.1±0.1),P＜0.05】,IL-1B mRNA水平为(13.5±2.7) ,显著高于对照组【(1.0±0.1),P＜0.05】,而经(+)-JQ1干预后,三种细胞因子mRNA水平均较模型组显著降低【分别为(12.8±1.2)、 ( 11.7±0.7) 和 (1.5±0.3),P＜0.05】;ALF组血清TNF-α水平(631.6±57.5)U/L,显著高于对照组【(2.5±0.5)U/L,P＜0.05】,而(+)-JQ1干预组血清TNF-α水平为(139.8±8.1)U/L,显著低于ALF组(P＜0.05);ALF组肝组织P65和IKB蛋白表达显著增强,而(+)-JQ1干预后显著减弱。结论 (+)-JQ1对ALI小鼠肝脏具有保护作用,可能通过调节NF-KB信号通路下调促炎细胞因子的表达,从而减轻肝组织炎症反应。     

通城虎镇痛抗炎作用及急性毒性的实验研究

目的 研究通城虎的镇痛抗炎作用并进行它的急性毒性试验.方法 采用醋酸致扭体反应、热板法测定痛阈,观察通城虎的镇痛作用;抗炎实验采用二甲苯致鼠耳肿胀法、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法和腹腔毛细血管通透性法;采用Bliss法测定了其半数致死量(LD50).结果 通城虎能减少醋酸所致小鼠扭体次数,明显提高小鼠的痛阈;抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶引起的大鼠足趾肿胀和醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加;其LD50为100.1 g/kg,LD50的95%可信限为87.2 ～115.1 g/kg.结论 通城虎对实验动物模型具有显著的镇痛抗炎作用,使用时一定要注意其不良反应.