两种中药对哮喘大鼠气道壁重构的影响与机制

目的 观察黄芩苷、川芎嗪对哮喘大鼠气道壁重构和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 24只Wistar大鼠分为4组:正常对照组,哮喘模型组,黄芩苷组和川芎嗪组.用卵蛋白(OVA)致敏制备大鼠哮喘模型.HE染色测气道壁及平滑肌层厚度,免疫组化染色测定气道壁MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型胶原含量.结果 哮喘模型组大鼠气道壁及平滑肌增厚,MMP-9、TIMP-1表达增多,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);黄芩苷组和川芎嗪组大鼠气道壁及平滑肌变薄,MMP-9、TIMP-1表达减少,与哮喘模型组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 黄芩苷、川芎嗪可以通过调节MMP-9/TIMP1比例,减少气道壁胶原沉积和平滑肌增生而降低气道壁厚度.     

地塞米松对哮喘大鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的　探讨哮喘大鼠气道重塑与基质金属蛋白酶 9(MMP 9)表达的关系以及地塞米松的干预作用。方法　建立大鼠哮喘模型 ,采用免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统 ,测定 3组大鼠气道形态学参数及支气管上皮细胞MMP 9、基质金属蛋白酶组织抑制剂 1 (TIMP 1 )的相对含量。结果　哮喘组支气管总管壁厚度和平滑肌厚度明显高于对照组 (P <0 .0 1 )和地塞米松组 (P分别 <0 .0 5 ,<0 .0 1 ) ;哮喘组MMP 9、TIMP 1在气道黏膜上皮的表达量明显高于对照组 (P <0 .0 1 )和地塞米松组 (P分别 <0 .0 1 ,<0 .0 5 ) ;哮喘组MMP 9 TIMP 1比例失衡。结论　吸入地塞米松可抑制气道壁和平滑肌厚度的增加 ;MMP 9过度表达、MMP 9 TIMP 1比例失衡在哮喘气道重塑发生机制中发挥重要作用 ;地塞米松可能通过下调MMP 9的表达 ,调节MMP 9 TIMP 1之间的平衡 ,干预气道重塑     

地塞米松对哮喘小鼠气道重塑的影响

目的探讨糖皮质激素对哮喘气道重塑和肺内基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响。方法以卵蛋白致敏激发的慢性哮喘小鼠模型为对象，测定对照组、哮喘组、地塞米松组支气管基底膜周径（Pbm）、上皮黏膜层面积（WAmuc）、平滑肌面积（WAm）、气管内壁面积（WAi），并用Pbm标准化。天狼猩红染色测定气道I、Ⅲ型胶原的面积。免疫组化方法测定气道MMP-9及其抑制剂TIMP-1，行免疫组化图像分析。结果（1）地塞米松组的WAmuc／Pbm、WAm／Pbm、WAi／Pbm大于对照组而小于哮喘组，差异有显著性（P〈0．05）；（2）地塞米松组I、Ⅲ型胶原面积较对照组增加而明显低于哮喘组（P〈0．05）；（3）哮喘组MMP-9、TIMP-1表达明显高于地塞米松组，差异有显著性（P〈0．05）。结论慢性哮喘小鼠气道壁明显增厚，而早期行地塞米松干预则可能通过调节MMP-9／TIMP-1比值来减轻气道重塑。     

淫羊藿苷通过降低MMP-9抗自发性高血压大鼠心室重构

目的 观察淫羊藿苷对自发性高血压大鼠心室重构的干预作用,并探讨其对基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响.方法 21只14周龄雄性SHR大鼠随机分为模型组,Ica低剂量组（20mg/kg）、高剂量组（40mg/kg）,每组7只,灌胃给药每日2次至26周龄,14周龄雄性WKY大鼠7只为空白对照组,空白和模型组给予等体积的双蒸水,实验结束后处死全部动物.采用双抗体夹心法测定血清Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;HE染色观察左心室组织形态学变化;real-time RT-PCR检测MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达.结果 与空白对照组相比,模型组出现心室重构,血清Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显上升（P＜0.01）,MMP-9表达明显增加（P＜0.01）.与模型组相比,Ica低、高剂量组心肌细胞排列较整齐,心肌纤维化减少,血清Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显下降（P＜0.05或P＜0.01）,MMP-9 mRNA表达降低（P＜0.05或P＜0.01）,TIMP-1 mRNA表达升高（P＜0.05或P＜0.01）.结论 淫羊藿苷具有抗自发性高血压大鼠心室重构的作用,其机制可能与降低MMP-9和增加TIMP-1的表达有关.     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1的表达及与气道炎症、重塑的关系

目的：观察实验性哮喘豚鼠BALF中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1）的表达；观察哮喘豚鼠气道平滑肌MMP-9、TIMP-1的表达及气道平滑肌面积的变化。方法：用免疫组化方法结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度；BALF中细胞总数；MMP-9、TIMP-1阳性细胞百分比。结果：MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道平滑肌；哮喘组MMP-9平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组TIMP-1平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组气道平滑肌厚度明显高于对照组（P〈0．05）；BALF中哮喘组嗜酸粒细胞明显高于对照组（P〈0．05）；巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞MMP-9、，TIMP-1均呈阳性；且哮喘组MMP-9及TIMP-1阳性细胞百分比比对照组MMP-9及TIMP-1明显增高（P〈0．01）。结论：MMP-9、TIMP-1可能与哮喘气道炎症及气道重塑有关。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠气道重塑影响的研究

目的 通过观察哮喘大鼠吸入布地奈德后气道核转录因子(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,探讨布地奈德治疗哮喘的气道重塑的机制.方法 正常Wistar大鼠随机分为:对照组、模型组、治疗组,除对照组外,余两组予抗原液致敏,对照组用生理盐水致敏;哮喘组和治疗组予卵蛋白激发,连续7天,治疗组激发后,均采用布地奈德雾化吸入治疗.模型组激发后以生理盐水雾化,对照组雾化生理盐水作为对照,正常对照组用等量的生理盐水进行激发和治疗.结果 NF-κB和MMP-9在模型组、激素治疗组和正常对照组大鼠肺组织中均有阳性表达,且模型组明显高于治疗组及对照组,激素组较模型组明显下降.结论 布地奈德作为治疗哮喘的有效药物,可以抑制NF-κB活性,使MMP-9水平降低,改善气道重塑.     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1的表达及与气道炎症、重塑的关系

目的:观察实验性哮喘豚鼠BALF中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂(TIMP-1)的表达;观察哮喘豚鼠气道平滑肌MMP-9、TIMP-1的表达及气道平滑肌面积的变化。方法:用免疫组化方法结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度;BALF中细胞总数;MMP-9、TIMP-1阳性细胞百分比。结果:MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道平滑肌;哮喘组MMP-9平均灰度值明显低于对照组(P<0.01);哮喘组TIMP-1平均灰度值明显低于对照组(P<0.01);哮喘组气道平滑肌厚度明显高于对照组(P<0.05);BALF中哮喘组嗜酸粒细胞明显高于对照组(P<0.05);巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞MMP-9、TIMP-1均呈阳性;且哮喘组MMP-9及TIMP-1阳性细胞百分比比对照组MMP-9及TIMP-1明显增高(P<0.01)。结论:MMP-9、TIMP-1可能与哮喘气道炎症及气道重塑有关。     

阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响

目的探讨阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响及其作用机制。方法将32只Sprauge-Dawley大鼠随机分为空白对照组(C组)、哮喘模型组(M组)、阿奇霉素组(A组)、地塞米松组(D组),每组8只,各组动物于末次雾化激发后24 h内处死,留取右肺组织制成病理切片,行组织病理学检查观察肺组织病理学改变;医学图像分析系统测量气道重塑参数;免疫组织化学技术检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺组织中的表达情况。结果与C组相比,M组支气管、血管周围见大量炎性细胞浸润,气道壁增厚,胶原沉积增加,黏液分泌增多,A组和D组上述改变明显减轻;A组、D组总管壁厚度、平滑肌厚度较C组增高(P<0.01),较M组明显降低(P<0.01);A组、D组大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平较C组升高(P<0.01),较M组降低(P<0.01);大鼠气道平滑肌厚度与肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF的表达水平呈正相关(P<0.01),肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平两两相关(P<0.01)。结论阿奇霉素可改善哮喘大鼠气道重塑程度,其机制可能与下调TGF-β1、MMP-9、VEGF表达有关。     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的：观察卡维地洛（CAR）对大鼠颈动脉损伤血管组织MMP-9、TIMP-1表达的影响,探讨卡维地洛防治再狭窄的机制。方法：雄性Wistar大鼠90只,随机分为假手术组、损伤组和CAR组,后两组行颈动脉球囊损伤术。三组均于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d处死大鼠。光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化和RT-PCR法检测MMP-9、TIMP-1在各组术后不同时间点的表达情况。结果：与损伤组比较,术后14 d CAR组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大（P〈0.05）;与损伤组比较,CAR组术后3-14d MMP-9表达显著减少（P〈0.05）,而TIMP-1表达无显著变化。结论：卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后MMP-9表达,抑制了VSMCs迁移、增殖,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,从而减轻再狭窄。     

中药丹参对哮喘大鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-9的影响

目的：研究丹参对哮喘大鼠气道重塑和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量的影响。方法将SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组和7个小组。卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏激发大鼠复制哮喘气道重塑模型,分别持续2、4、8周。观察哮喘大鼠肺组织病理形态变化,采用ELISA检测大鼠肺组织MMP-9含量。结果丹参能改善哮喘大鼠气道炎症细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚。与正常对照组[(1.99±0.29)ng/mL]比较,哮喘4周组[(2.43±0.40)ng/mL]、哮喘8周组[(3.01±0.31)ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高(P<0.05、P<0.01);与哮喘2周组[(2.29±0.51) ng/mL]、哮喘4周组[(2.43±0.40) ng/mL]比较,哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]比较,丹参8周组[(2.10±0.20)ng/mL]肺组织中MMP-9含量显著降低(P<0.01)。结论丹参能够抑制哮喘大鼠肺组织MMP-9的分泌,改善哮喘大鼠气道重塑状态。     

咳喘方对支气管哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:探讨咳喘方对支气管哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用。方法:将30只SD雄性大鼠分为对照组、模型组、中药组,每组10只。除对照组外均行支气管哮喘造模;中药组予咳喘方灌胃,其余两组予0.9%Na Cl注射液灌胃,疗程3周。采用免疫组化法检测各组大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达;并取肺组织经HE染色进行病理观察,图像分析测定其气道壁总面积(Wat)、管壁平滑肌面积(Wam)、支气管底膜周径(Pbm)、支气管周围胶原纤维组织面积(Wac)的数值。结果:模型组TGF-β1表达较对照组明显升高(P0.01);中药组TGF-β1计数较模型组明显降低(P0.01)。模型组Wat、Wam、Wac水平较对照组明显升高(P0.01);中药组Wat、Wam、Wac水平较模型组明显降低(P0.01)。结论:咳喘方可抑制支气管哮喘大鼠肺组织TGF-β1表达和气管壁增厚。     

支气管哮喘模型大鼠气道重建的特征及机制

目的探讨哮喘大鼠气道重建的特征及蛋白激酶C（PKC—α）、核因子κB（NF-κB）在哮喘重建气道中的表达。方法延长卵清蛋白（OVA）激发时间制备慢性哮喘模型。36只Wistar大鼠分为6组：哮喘2、4、8周组和对照2、4、8周组，每组6只。用组织学结合图像分析系统观察各组大鼠气道炎性细胞浸润、胶原面积、平滑肌面积及杯状细胞数目等，免疫组化法观察PKC-α、NF-κB在气道的表达。结果①哮喘2、4、8周组气道壁均可见炎性细胞浸润、黏膜杯状细胞增多，与对照各组同时间点比较差异有显著性意义（P＜0．05）。哮喘4、8周组大气道胶原、平滑肌面积增多，与对照4、8周组比较差异有显著性意义（P＜0．05）。哮喘各组小气道胶原面积虽有增加，但无统计学意义，但哮喘8周组小气道平滑肌面积增加，与对照8周组比较差异有显著性意义（P＜0．05）。②哮喘各组气道上皮细胞PKC—α、NF-κB蛋白表达增加，与对照各组同时间点比较差异有显著性意义（P＜0．05）。结论通过延长OVA激发时间制备大鼠慢性哮喘模型，气道不仅存在慢性炎症，而且气道壁结构有改变，PKC—α、NF-κB可能参与哮喘的气道重建。     

气道平滑肌细胞在哮喘气道重构中的作用机制

慢性哮喘患者的气道随着病程的发展会出现平滑肌细胞增生、胶原沉积、基膜增厚等重构现象,其中气道平滑肌细胞在长期慢性炎症刺激下其收缩功能及生长迁移能力均明显增强,同时还可以发生表型转化,胞内具有合成功能的细胞器(如高尔基体等)含量增加,进而分泌各种生物因子参与气道重构。该文就气道平滑肌细胞在哮喘气道重构中的作用机制的研究进展予以综述。     

金水宝对哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平影响的研究

目的探讨金水宝对支气管哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平的影响。方法以卵蛋白为过敏原致敏和激发,建立大鼠慢性哮喘气道重塑的模型。将40只实验大鼠随机分为5组：对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、金水宝正常剂量组[D组,310mg/（kg.d）]、金水宝高剂量组[E组,620mg/（kg.d）],每组8只。造模5周后行药物干预。造模12周时观察指标：肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）的细胞计数与分类,②肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力测定,③肺组织病理观察：进行支气管周围炎细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值（IOD值）。结果A、C、D、E组的气道重塑指标与B组比较差异均有显著性（均P〈0.01或P〈0.05）,以E组改善最明显,且E组降低氧化应激水平、气道炎症指标亦最明显。相关性分析表明：SOD活性与MDA含量呈负相关（r=-0.869,P〈0.01）,支气管壁的胶原沉积面积与MDA含量、BALF的中性粒细胞计数均呈正相关（r=0.594,P〈0.01或r=0.414,P〈0.01）。结论氧化应激是哮喘气道重塑产生的机制之一。金水宝可能通过清除氧自由基,减少气道炎症（特别是中性粒细胞）及氧化应激水平,而改善或延缓气道重塑的发生。金水宝高剂量比布地奈德能更好地延缓哮喘气道重塑的发生。     

宣肺定喘汤对哮喘大鼠气道重构和炎症介质抑制作用的实验研究

目的观察宣肺定喘汤对哮喘大鼠气道重构和炎症介质的抑制作用。方法 6周龄清洁级SD雄性大鼠60只,随机分为空白对照组、宣肺定喘汤大剂量组、宣肺定喘汤中剂量组、宣肺定喘汤小剂量组、地塞米松组及病理模型组6组,建立大鼠哮喘模型,比较各组大鼠支气管和肺组织形态学的改变及肺组织中Eotaxin、ICAM-1表达水平;外周血液中炎性细胞、IgE表达水平;肺泡灌洗液中炎性细胞及Eotaxin、ICAM-1表达水平。结果与空白对照组相比,病理模型组支气管和肺组织形态学有显著的改变,炎性细胞、Eotaxin、ICAM-1、IgE的表达水平显著升高(均P0.01)。与病理模型组相比,各治疗组炎性细胞、Eotaxin、ICAM-1、IgE的表达水平有显著差异(P0.05,P0.01)。光镜观察宣肺定喘汤大剂量组支气管及肺组织结构基本正常。结论宣肺定喘汤能有效抑制气道重构和炎症介质的释放,以达到平喘的目的 。     

地塞米松调节基质金属蛋白酶-2对哮喘大鼠气道重建的影响

目的　观察地塞米松对气道重建的影响 ,并探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )与金属蛋白酶组织抑制物 - 1(TIMP- 1)间的平衡在其中的作用。方法　 30只雄性 Wistar大鼠随机分为哮喘组、地塞米松组和对照组 ,每组10只。动物处死后行支气管肺泡灌洗 ,收集灌洗液作细胞学检查。肺组织作病理切片 ,HE染色 ,采用计算机图象分析技术测定支气管基底膜周径 (Pbm ) ,总管壁面积 (WAt) ,内壁面积 (WAi) ,平滑肌面积 (WAm )等反映气道壁厚度的指标。半定量逆转录聚合酶连反应 (RT- PCR)技术分析肺组织中 MMP- 2与 TIMP- 1m RNA的表达。结果　 1哮喘组 WAt/ Pbm,WAi/ Pbm及 WAm / Pbm (分别为 2 5 .3± 2 .1μm2 /μm ,2 0 .4± 2 .3μm2 /μm ,4 .2± 2 .0μm2 /μm )与对照组 (2 0 .8± 1.3μm2 / μm,15 .3± 2 .1μm2 / μm,3.1± 1.1μm2 / μm)比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,对照组与地塞米松组 (2 1.3± 2 .4 μm2 / μm,14 .2± 2 .5 μm2 / μm,3.2± 1.0 μm2 / μm)比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。2哮喘组的MMP- 2及 TIMP- 1m RNA水平 (0 .6 8± 0 .14 ,0 .5 6± 0 .10 )与对照组 (0 .14± 0 .0 3,0 .11± 0 .0 5 )比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,哮喘组与地塞米松组 (0 .37± 0 .11,0 .31± 0 .10 )     

ERK活化对哮喘大鼠气道重塑及CyclinD1表达的影响

目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)对哮喘大鼠气道重塑及CyclinD1表达的作用。方法原代培养大鼠的平滑肌细胞(ASMCs),给予ERK激动剂表皮生长因子EGF和抑制剂PD98059干预ASMCs生长,依处理方式不同分为5组:(1)正常对照组(2)哮喘对照组;(3)E组:EGF20 ng/mL;(4)P+E组,PD98059 10μmol/L1 h后添加EGF 20 ng/mL;(5)PD组,PD98059 10μmol/L。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖能力,流式细胞术(FCM)测定细胞周期和cyclinD1的蛋白含量,RT-PCR方法检测cyclinD1mRNA表达水平。结果(1)与哮喘对照组比较,E组ASMCs S+G2/M期比例、吸光度A值、cyclinD1蛋白阳性表达率和cyclinD1 mRNA的A值均显著升高,PD组均显著降低(P0.05)。P+E组与哮喘对照在此4项指标上比较无明显差异。(2)哮喘(对照组、E组、PD组和P+E组)组与正常对照组,其S+G2/M期比例、吸光度A值、cyclinD1蛋白和cyclinD1 mRNA的表达均显著增高(P0.05)。结论ERK活性促进哮喘大鼠ASMCs的增殖,增加cyclinD1在哮喘平滑肌细胞中的表达,导致气道重塑的形成,提示ERK可能对CyclinD1的表达具有调节作用。     

地塞米松对RSV诱发哮喘大鼠气道重塑形态学及ICAM-1表达的影响

目的:探究地塞米松对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)诱发哮喘大鼠气道重塑形态学以及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响,论述地塞米松用于防治哮喘的潜在机制.方法:将60只SD雄性大鼠随机分为6组,...     

平喘宁调节PI3K/Akt信号通路干预寒性哮喘大鼠气道重塑的机制*

目的观察平喘宁对PI3K-Akt/PKB信号通路中的相关蛋白的干预探讨哮喘气道重塑的机制。方法 将105只雄性SD大鼠按随机数法分成正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组、桂龙咳喘宁组以及地塞米松组,每组15只。采用HE染色法观察大鼠肺组织的病理改变;采用RT-qPCR检测ASK1、TSC1的表达量。结果 HE染色后,相比于正常组,模型组大鼠支气管结构发生改变,可见多种炎性细胞浸润、粘液栓及气管平滑肌增生,而药物组均有不同程度的改善。RT-qPCR检测：相较于正常组,模型组ASK1上调的幅度最为显著（P＜0.01）;对比于模型组,平喘宁高剂量组对ASK1的表达量下调最为显著并且优于其余药物组（P＜0.01）。相较于正常组,模型组下调TSC1的幅度最为显著（P＜0.01）;与模型组相比,平喘宁高剂量组对TSC1的表达量的上调最为显著,（P＜0.01）,而此组对TSC1表达量上调又高于其余药物治疗组（P＜0.01）。结论 平喘宁可以通过对寒哮大鼠PI3K-Akt/PKB信号传导通路中的ASK1、TSC1调节进而减缓寒哮大鼠的气道炎症反应,减低气道的高反应性,并能够缓解气道重塑达到哮喘治疗的效果。