膀胱癌端粒酶活笥表达及其意义探讨

目的 探讨膀胱癌的粒酶活性表达及其在膀胱癌中的诊断价值。方法 采用端粒重复序列扩增程序－酶标法（定量）和银染法（定性）对２８例膀胱癌、１１例癌旁膀;胱、６例正常膀胱的组织标本进行端粒酶活 检测。结果 膀胱癌组织的粒酶活性阳性检出率为８９．３％（２５／２８）,癌旁膀胱组织为２７．３％（３／１１）,正常膀胱组织为０％（０／６）。膀胱癌组与癌旁组、下沉组端 粒酶阳性活性阳性检出率为８９．３％（２５／２８     

端粒酶PCR SCE检测对诊断膀胱癌的价值及应用

目的 探明膀胱癌患者端粒酶阳性率及姊妹染色单体互换（SCE）率，以确定其诊断及应用价值。方法 采用膀胱癌及对照正常膀胱的组织进行端粒酶活性检测（TRAP-银染法）、外周血淋巴细胞SCE检测，然后进行比较分析。结果 （1）组织标本的端粒酶阳性率：膀胱癌93．75％（30／32），正常膀胱组织0％（0／30），表明膀胱癌端粒酶高度表达，其与正常对照组比较差异有显著性（P〈0．001）。（2）外周血淋巴细胞SCE率（X）：膀胱癌32例（10．06），膀胱癌的SCE率均显著高于正常对照组（P〈0．001）；（3）膀胱癌患者的端粒酶活性与SCE率的关系：阳性组32例SCE率10．06；膀胱癌患者端粒酶阴性组30例SCE率9．17（P〈0．05）。结论 端粒酶PER及SCE检测对于膀胱癌诊断及鉴别良恶性均具有重要的价值，可作为辅助诊断及攀别诊断指标．SCE率可作为膀胱肿瘤的疗效评价指标。     

ABC免疫电泳对膀胱癌P21蛋白表达的观察

用ＡＢＣ免疫电泳检测了２９例膀胱移行细胞癌、６例癌旁粘膜、３例膀胱炎和３例正常膀胱粘膜的Ｐ２１蛋白表达，发现２５例（８６．２％）膀胱癌、３例癌旁组织、１例正常膀胱膜、２例胶胱炎组织有Ｐ２１蛋白表达。随肿瘤分级增高，Ｐ２１蛋白条带的光密度积分增加；肿瘤组织Ｐ２１蛋白光密度积分高于癌旁组织，癌旁组织又高于正常膀胱粘膜。     

尿脱落癌细胞中端粒酶活性测定及其应用

目的检测膀胱癌组织及尿脱落癌细胞中的端粒酶活性并探讨其在膀胱肿瘤诊断中的应用价值。方法采用改良端粒重复片段扩增(TRAP)法一端粒酶PCRELISA法对膀胱癌组织、正常膀胱壁、膀胱癌患者及非肿瘤患者的尿脱落细胞、膀胱冲洗液的端粒酶活性进行半定量测定。结果37例膀胱癌组织中有31例(83.8％)端粒酶阳性。非肿瘤膀胱组织标本中端粒酶活性均未检出。膀胱癌患者的尿脱落癌细胞中端粒酶活性为：膀胱冲洗液82.8％(24／29)，新鲜自排尿55．2％(16／29)。27例非肿瘤患者中仅1例(前列腺增生)膀胱冲洗液检出端粒酶活性弱阳性，余均为阴性。结论尿脱落细胞中端粒酶活性测定能高度灵敏、特异性地检测出的少数癌细胞，对膀胱癌的早期诊断具有较高价值。     

乳腺癌的端粒酶活性检测

目的探讨端粒酶活性与乳腺癌的相关性、端粒酶活性检测在乳腺肿瘤诊断和判断预后中的意义。方法运用端粒重复扩增法（ＴｅｌｏｍｅｒｉｃＲｅｐｅａｔＡｍｐｌｉｆｉｅａｔｉｏｎＰｒｏｔｏｃｏｌ,ＴＲＡＰ）检测了３０树新鲜冰冻乳腺癌标本,以及２０例良性乳腺肿瘤组织和３０例癌旁正常乳腺组织。结果在新鲜乳腺癌标本３０例中２７例阳性,阳性率９０％,其中伴有淋巴结转移的１９例,阳性率１００％;３０例癌旁正常乳腺组织中有１例阳性,阳性率为３％;２０例良性乳腺肿瘤组织中均未检测出端粒酶活性。结论乳腺癌发生与端粒酶活性相关。提示在乳腺癌发生发展中可能存在着端粒酶活性的再激活,使乳腺癌细胞获得永生,端粒酶活性检测对于乳腺肿瘤的良、恶性鉴别具有十分重要的意义。端粒酶活性的抑制剂可能对乳腺癌的治疗有一定的作用。     

消化道恶性肿瘤端粒酶检测及其临床意义研究

目的：探讨端粒酶活性在消化道恶肿瘤中的表达意义。方法：采用改良ＴＲＡＰ－银染法,检测１００例消化道恶性肿瘤术前内镜活检标本及２０例正常消化道组织中端粒酶活性,并同时与病理检查结果对照分析。结果：１００例消化道恶性肿活检标本有８７例端粒酶阳性,阳性率８７％,其中食道癌端粒酶阳性率８６．１％（３１／３６）,胃癌为８５．４％（３５／４１）,大肠癌为９１．３％（２１／２３）;２０例正常消化道组织均为阴性。     

端粒酶活性与肿瘤相关性研究

本研究采用TRAP－银染色法和（或）PR－ELISA技术进行端粒酶活性研究。1997－1999年对肝癌、胃癌、急性淋巴细胞白血病、子宫颈癌、鼻窦部浆细胞肉瘤、恶性甲状腺瘤、精原细胞癌、阴茎癌等22种肿瘤共115份肿瘤组织标本检测，端粒酶阳性率为80％（92／115），同时检测这些肿瘤的临近正常组织共96份，端粒酶阳性率为5．2％（5／96）；34份子宫平滑肌瘤和8份非肿瘤病变组织端粒酶阳性率为7．1％（3／42），它们的临近正常组织阳性率为2．4％（1／42）；肿瘤细胞克隆株3例均为阳性。结果表明，恶性肿瘤组织细胞中端粒酶活性明显高于良性肿瘤和正常细胞（P＜0．01）；1999－2000年对胃癌组织进行研究，得出同样结果，因此端粒酶活性的检测有望成为一种新的肿瘤标志物用于临床诊断研究。端粒酶活性的增高与恶性肿瘤高度相关，对试图通过调控端粒酶活性来达到对恶性肿瘤的治疗研究提供了一个新的靶点和可靠依据。     

尿液中膀胱癌脱落细胞端粒酶活性检测的临床意义

为探讨尿液中膀胱癌脱落细胞端粒酶活性检测对膀胱癌诊断和术后随访的意义。以ＴＲＡＰ－银染法检测膀胱癌组织和自然排尿中膀胱癌脱落细胞端粒酶活性，以巴氏染色法对脱落细胞进行细胞学检查。４５例膀胱癌患者中，４４例肿瘤组织表达端粒酶活性（９７．８％）；２９例尿脱落细胞表达端粒酶活性（６４．４％），１４例尿脱落细胞中发现癌细胞（３１．１％），脱落细胞的端粒酶活性检测明显优于细胞学检查（Ｐ〈０．００５），且随着     

大肠癌和大肠腺瘤组织中端粒酶活性表达及意义

目的：研究大肠癌组织及大肠腺瘤组织中端粒酶活性表达的差异，探讨端粒酶激活在大肠癌发生、发展中的意义。方法：采用端粒重复片段扩增方法研究了37例大肠癌、50例大肠腺瘤、20例正常大肠组织中的端粒酶活性表达。结果：（1）端粒酶活性检出率在大肠癌组织、大肠腺瘤组织分别为86．5％、20．0％，而正常大肠组织中无表达，癌组织中检出率明显高于其他组织（P〈0．001）。（2）端粒酶活性与大肠癌的病理分化程度、病理分期、肿瘤大小、部位无显著相关性（P〉0．05）。结论：大肠癌组织中端粒酶活性呈高表达，端粒酶在大肠癌发生发展过程中起着重要作用，有希望成为大肠癌诊断和治疗的理想标志。     

胃癌组织中CA15-3表达及其临床意义

目的：探讨肿瘤相关抗原ＣＡ１５－３在胃癌中的表达和意义。方法：应用免疫组织化学ＳＰ法检测５５例胃癌,癌旁组织,正常胃粘膜和３０例胃溃疡组织中ＣＡ１５－３的表达情况。结果：５５例胃癌阳性表达者４３例（７８．２％）。其中胞浆胞膜均阳性者３０例（６９．８％）,而胞膜阳性１３例（３０．２％）。５５例癌旁组织阳性表达者２例（３．６％）,仅为胞膜阳性,溃疡及正常胃粘膜均为阴性。ＣＡ１５－３阳性表达及胞浆阳性定位与组织学分型有关（Ｐ＜０．０１）,与胃癌进展,浸润深度,淋巴结转移无关（Ｐ＞０．０５）,结论：ＣＡ１５－３阳性表达可能是胃癌变细胞的标志之一。     

端粒酶蛋白hTRT基因表达在小肝癌诊断中的价值

目的 :探讨端粒酶蛋白hTRT基因表达在小肝癌诊断中的价值。方法 :选择具有完整病理资料的 2 0例小肝癌 ,用原位杂交、免疫组化技术检测端粒酶蛋白hTRT基因、P5 3蛋白和PCNA的表达 ,然后将hTRT的表达与小肝癌病理表现对照。结果 :2 0例小肝癌中hTRT阳性率为 80 % (16 / 2 0 )、P5 3阳性率为 35 % (7/ 2 0 )、PCNA强阳性率为 5 5 % (11/ 2 0 ) ,3种指标在癌中表达强度显著高于癌旁组织中表达 (P <0 .0 5 ) ,癌旁相对正常组织中未检出阳性。hTRT阳性率与病理表现无显著关系 (P<0 .0 5 )。结论 :在小肝癌发生发展的多基因作用中 ,端粒酶对肝细胞的增生和恶变起重要作用 ,端粒酶蛋白hTRT基因检测有助于小肝癌的早期诊断     

Possible role of telomerase and sFas in pathogenesis of various bladder lesions associated with schistosomiasis

Objectives

To find the role of telomerase and sFas in the pathogenesis of various bladder lesions associated with schistosomiasis and to correlate the results with clinicopathological parameters.

Design and methods

One hundred bladder samples were taken, including 65 cases with bladder cancer, 25 cases with chronic cystitis and 10 samples from normal bladder tissue as control. Telomerase activity was measured using TRAP and hTERT techniques. Also, sFas was detected by ELISA technique in serum of all patients.

Results

TRAP activity was detected in 78.5%; there was a significant increase in the number of positive cases in schistosomal urothelial carcinoma (TCC) and squamous cell carcinoma (SCC) compared to control and non-schistosomal urothelial carcinoma at (p < 0.01 for each). TRAP activity was positive in 100% of high grade urothelial carcinoma compared to low grade and 92% positive in invasive tumors compared to non invasive tumors. hTERT protein was detected in 75.4% of bladder cancer cases; there was a significant increase in the number of positive cases in schistosomal urothelial carcinoma and SCC compared to control and non schistosomal urothelial carcinoma (p < 0.01 for each). hTERT was positive in 100% of high grade and invasive TCC. sFas was detected in 64.6% in bladder cancer cases; there was a significant increase in the number of positive cases in SCC compared to control and non-schistosomal urothelial carcinoma.

Conclusion

There is an increase in telomerase activity and over-expression of hTERT proteins in schistosomal associated bladder cancer (SABC) in comparison to non schistosomal associated bladder cancer (non SABC). Also, there is an increase in sFas level in SCC compared to other the groups. Both, telomerase activity by TRAP and hTERT and sFas may be of significance in the development of SABC. They may also be useful markers to identify bladder carcinoma through telomerase inhibition.     

Effects of telomerase activity on carcinogenesis and survival in laryngeal carcinoma

This study aimed to look at whether a correlation exists between telomerase activity and survival of laryngeal carcinoma patients. Telomerase activity was measured by telomerase repeat amplification protocol in 31 laryngeal carcinomas and adjacent normal tissues, and in 21 vocal cord polyps (controls). Follow-up was for at least 60 months. Telomerase activity in tissues adjacent to laryngeal carcinomas was significantly higher than in the carcinomas which was, in turn, significantly higher than in vocal cord polyps. There was no significant difference between telomerase activity in carcinomas or adjacent tissues and clinicopathological characteristics. Patients with high telomerase activity in carcinoma tissue had significantly shorter survival times than those with low activity, but no significance difference was observed between survival time and telomerase status in adjacent tissues. Linear regression showed significant association between telomerase activity levels in carcinoma tissues and survival time, but this was not observed in adjacent tissues. This study suggests that telomerase activation probably takes place before the cancer phenotype develops and has prognostic significance for survival of patients with laryngeal carcinoma.     

PRR11和SKA2在食管鳞癌中的表达及与临床预后的关系

目的:观察脯氨酸蛋白11(proline-richprotein11,PRR11)和动粒相关蛋白2(spindleand kinetochore associated 2,SKA2)在食管鳞癌组织中的表达,并分析与食管鳞癌临床病理参数、预后间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测PRR11和SKA2在100例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织标本中的表达,统计学分析二者与食管鳞癌临床病理参数、预后间的关系。结果:PRR11在食管鳞癌组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为60.00%(60/100)和17.00%(17/100),SKA2在食管鳞癌组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为70.00%(70/100)和37.00%(37/100),食管鳞癌组织中PRR11和SKA2阳性表达率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);PRR11和SKA2蛋白在不同TNM分期、组织分化程度及淋巴结是否转移中的表达差异均有统计学意义(P<0.05);在不同性别、年龄、肿瘤直径、不同肌层浸润、脉管浸润中表达差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析结果显示PRR11和SKA2蛋白在食管鳞癌组织中呈明显正相关(r=0.725,P<0.001);患者的无进展生存期(progression-freesur v ival,PFS)和总生存期(overallsur vival,OS)在PRR11和SKA2阳性表达与阴性表达之间差异均具有统计学意义(P<0.05);Cox多因素回归分析结果显示TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移、PRR11和SKA2表达是影响食管鳞癌预后的风险因素(均P<0.05)。结论:PRR11和SKA2过表达可促进食管鳞癌的发生发展,降低食管鳞癌患者的生存期,联合监测PRR11和SKA2的表达对食管鳞癌预后的判断具有一定的临床价值。     

肾细胞癌端粒酶活性测定的研究

目的研究端粒酶活性与肾细胞癌之间的关系。方法采用改良的TRAP法对肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中端粒酶活性进行检测,结果肾癌组织中和癌旁正常肾组织中端粒酶活性阳性率差异有显著性(P<0．01);高分化组与低分化组端粒酶活性差异无显著性(P>0．05);早期肾癌组与中晚期肾癌组端粒酶活性差异无显著性(P>0．05)。结论肾细胞癌组织中端粒酶活性较正常组织高,肾癌端粒酶活性与其恶性程度无相关性,端粒酶活性测定可能作为肾癌诊断的分子水平标志物。     

膀胱癌和肾癌中RASSF1A和BLU的甲基化状态

目的探讨RASSF1A和BLU在膀胱癌和肾癌中启动子甲基化状态及其意义。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）技术分别在45例膀胱癌组织和相应癌周正常组织、12例肾癌组织及其相应癌周正常组织和3例非肿瘤患者正常膀胱组织中检测RASSF1A和BLU启动子区域的甲基化状态。结果膀胱癌组织中,RASSF1A和BLU甲基化率分别为55.6%和31.5%;肾癌组织中,两基因甲基化率为66.7%和33.3%。RASSF1A和BLU启动子甲基化状态与膀胱癌临床病理参数无明显相关性（P〉0.05）。在膀胱癌或肾癌中,RASSF1A和BLU启动子甲基化状态之间均无明显相关性（P〉0.05）。结论膀胱癌和肾癌中,RASSF1A和BLU频繁发生高甲基化,高甲基化可能参与膀胱癌和肾癌两类肿瘤的发生。     

膀胱肿瘤中端粒酶逆转录酶和c-myc的表达研究

目的检测膀胱肿瘤组织、尿脱落细胞和外周血中的端粒酶逆转录酶(hTERT)和c-myc mRNA表达,探讨二者的临床意义及关系.方法采用RT-PCR法同时检测28例膀胱移行细胞癌(TCCB)患者和15例对照的组织、尿脱落细胞和血细胞中的hTERT和c-myc mRNA表达.结果肿瘤组织hTERT和 c-myc的mRNA阳性表达率分别为100%(28/28) 和 67.8%(19/28),对照组为0(0/15)和26.7%(4/15);两指标在尿脱落细胞中的阳性率分别为85.7%(24/28)和71.4%(20/28),对照组为13.3%(2/15)和26.7%(4/15);血细胞中为78.6%(22/28)和57.1%(16/28),对照组为6.7%(1/15)和33.3%(5/15);肿瘤组与对照组比较具有显著性差异(P＜ 0.01),两指标不同组间比较具有相关性(P＜ 0.01).结论 hTERT和c-myc mRNA在TCCB中的表达具有相关性,在TCCB不同标本中表达具有一致性,可作为膀胱肿瘤的良好诊断指标,hTERT较c-myc优;以尿脱落细胞对TCCB的诊断更准确和方便.     

膀胱移性细胞癌尿脱落细胞端粒酶催化亚基检测及临床意义

目的　检测尿脱落细胞端粒酶催化亚基 (hTERT)并探讨其临床意义。方法　用RT PCR法分别对膀胱癌组织、正常膀胱组织以及膀胱移性细胞癌和泌尿系良性疾病患者尿脱落细胞进行hTERT检测。结果　 2 7例膀胱癌组织hTERT表达呈10 0 %阳性 ,正常膀胱粘膜 16例均无阳性表达。 3 2例膀胱移行性细胞癌 (transitionalcellcarcinomaofbladder,TCC)患者尿脱落细胞hTERT表达阳性率为 87 5 % ( 2 8/ 3 2 ) ,非肿瘤组表达阳性率为 13 3 % ( 2 / 15 ) ,与TCC病理分级、分期无相关性。结论　检测脱落细胞hTERT是一种无创伤性的、敏感度高、特异性强的方法 ,是TCC早期诊断的一个有价值的辅助指标。