膀胱移行细胞癌VEGFR-2表达与血管生成的研究

目的探讨血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth receptor 2,VEGFR-2)表达与血管新生在膀胱移行细胞癌(bladdertransitional cell carcinoma,BTCC)中的意义.方法应用免疫组化技术检测72例BTCC标本VEGFR-2的表达,并标记CD31阳性细胞计算微血管密度(microvessel density,MVD).结果 72例BTCC中VEGFR-2表达阳性率为56.94%,不同分级、分期、体积的肿瘤之间表达无明显差异.G3级肿瘤MVD高于G1、G2级(P=0.002 91、0.007 37),浸润型肿瘤高于浅表型(P=0.010 13),直径3 cm以上肿瘤高于较小肿瘤(d≤1 cm:P=0.030 76;1 cm<<3 cm,P=0.047 69).多发与单发、初发与复发肿瘤之间VEGFR-2表达和MVD均未见显著差异;VEGFR-2表达阴性和阳性患者MVD无明显差异.结论不同生物学特征BTCC中VEGFR-2表达差异不明显,而血管新生存在差异,可能与肿瘤细胞异质性及血管新生途径的多样化有关.VEGF-VEGFR-2相互作用在刺激膀胱肿瘤细胞增殖中作用可能有限,而MVD对判断膀胱肿瘤恶性程度和预后有一定价值.     

肿瘤血管生成评估研究进展

1　肿瘤血管生成的意义血管的生成存在于很多病理生理过程 ,血管增殖的过程是受机体严格调控的[1] 。 1 945年Ａｌｇｉｒｅ先提出了”肿瘤血管形成”的概念 ,肿瘤血管生成是指肿瘤细胞诱导的微血管生长以及肿瘤中血液循环建立的过程。肿瘤的血管生成对于肿瘤的生长十分重要 ,是肿瘤代谢的关键途径 ,是一种病理过程 ,是一种无控制的血管形成 ,包括血管前期和血管期两个阶段。肿瘤的微血管形成与肿瘤的生长、浸润、转移及预后均有密切的关系。在血管前期 ,由于肿瘤的血管新生能力缺失或不足 ,肿瘤仅有几个立方毫米 ,由一个或少数几个癌变细胞…     

血管内皮生长因子和血管生成与胃癌发展的关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)和血管生成与胃癌发展的关系 .方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测 10 2例人胃癌组织VEGF蛋白表达和微血管密度 (MVD) .分析VEGF和MVD及其与胃癌组织学分级、浸润深度、生长方式、淋巴结转移和预后的关系 .结果 :VEGF阳性表达率为4 9.1% ,VEGF阳性者MVD值显著高于阴性者 (P <0 .0 5 ) ,VEGF表达和MVD与胃癌淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,而与组织学分级无关 ;VEGF表达还与胃癌浸润深度和生长方式密切相关 (P <0 .0 5 ) ;VEGF表达阳性或MVD≥ 5 0的胃癌患者 5a生存率较低 (P <0 .0 5 ) .结论 :VEGF与胃癌的血管生成密切相关 ,对胃癌的生长和浸润转移有促进作用 ,VEGF和MVD可作为反映胃癌生物学行为的指标之一     

重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子对S-180肉瘤生长的抑制作用

目的　研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)对小鼠异体种植 S- 180肉瘤生长的抑制作用。　方法　用不同剂量 VEGI分别治疗皮下和腹腔种植 S- 180肉瘤的小鼠 ,连续 7天。 30天后处死小鼠 ,剥离肿瘤并称重 ,计算每组平均瘤重和抑瘤率 ;记录腹腔种植组小鼠的死亡时间 ,观察治疗制剂对小鼠寿命的影响。采用免疫组织化学 Envision二步法对肿瘤组织进行分析。　结果　 VEGI治疗组 (5 .0 ,10 .0 ,2 0 .0μg/ kg)的平均瘤重分别为 2 .92± 2 .0 5 g,1.92± 0 .31g和 1.0 6± 0 .0 5 g,明显小于 PBS对照组 (10 .33± 2 .15 g,P<0 .0 1) ,抑瘤率分别为 71.73% ,81.41%和 89.74% ;并可明显延长腹腔荷 S- 180肉瘤小鼠的生存时间 (P<0 .0 1)。每 mm2 肿瘤组织切片中 ,VEGI治疗组 (10 .0μg/ kg)的阳性血管内皮细胞数为 117± 10个 ,PBS对照组 2 41± 34个 (P<0 .0 5 )。　结论　 VEGI通过抑制体内肿瘤组织中血管的生成抑制了恶性肿瘤的生长 ,显示出显著的抗肿瘤活性。     

早期宫颈鳞癌血管生成免疫组化研究

目的　探讨血管生成在宫颈癌发生、发展中的意义。方法　采用免疫组织化学方法检测 4 6例早期宫颈癌、5 8例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)Ⅲ及对照组宫颈 30例组织中微血管密度情况及血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。结果　组织中微血管密度及血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及在对照组宫颈组织、CINⅢ及早期宫颈癌组织中呈逐渐增高趋势 ,差异有显著性。在早期癌组织中 ,分化愈低 ,微血管密度值及VEGF的表达愈高 ,差异有显著性。结论　血管生成在宫颈鳞癌的发生和发展中起重要作用。     

心钠素对小鼠肿瘤生长和血管新生的抑制作用

目的研究心钠素（ANP）的抗肿瘤作用及其在血管新生中的作用。方法通过微量泵将ANP输入带瘤小鼠，测量肿瘤体积，并用苏木素和靛红染色检验肿瘤中的血管新生。在基膜基质Matrigel上加入人脐静脉内皮细胞（HUVEC），使之形成毛细血管样结构，检测ANP对血管内皮细胞生长因子（VEGF165）刺激的HUVEC生长的影响。结果与对照组相比，ANP能抑制小鼠体内的黑色素瘤和肥大细胞瘤生长和血管新生（P〈0．01，P〈0．001），并抑制VEGF165诱导的HUVEC在基膜基质上形成毛细血管样结构（P〈0．001）。结论ANP可能作为一种内源性血管抑制剂，抑制肿瘤生长及血管形成。     

乳腺癌3p染色体微卫星杂合性缺失与血管生成

目的探讨乳腺癌染色体3p区域微卫星杂合性缺失(LOH)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及临床病理特征之间的关系。方法选取乳腺浸润性导管癌病例石蜡组织切块40例。运用激光显微切割技术留取组织中导管癌及正常乳腺细胞,应用毛细管电泳测序技术进行4个微卫星位点的LOH检测。应用免疫组织化学技术SP法检测CD34、VEGF和Her2的表达,分析LOH与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 40例乳腺癌患者中D3S1038的LOH发生率为20%(8/40),D3S1295的LOH发生率为37.5%(15/40),D3S1581的LOH发生率为17.5%(7/40),D3S3118的LOH发生率为5%(2/40)。LOH与VEGF的表达呈正相关(r=0.658 0,P<0.01),LOH和MVD也呈正相关(r=0.804 9,P<0.01)。LOH发生率与Her2表达(r=0.539 4)、组织学分级(r=0.497 2)、淋巴结转移(r=0.506 4)、TNM分期(r=0.596 0)均有相关性(均P<0.01)。结论乳腺癌染色体3p微卫星位点LOH与血管生成具有相关性,抑癌基因失活并通过对血管生成的影响可能为肿瘤生长与转移提供了条件;同时检测染色体3p微卫星位点LOH与血管生成情况,可能有助于更全面地了解乳腺癌的生物学特性。     

心钠素对小鼠肿瘤生长和血管新生的抑制作用

目的 研究心钠素(ANP)的抗肿瘤作用及其在血管新生中的作用.方法 通过微最泵将ANP输入带瘤小鼠,测量肿瘤体积,并用苏木素和靛红染色检验肿瘤中的血管新生.在基膜基质Matrigel上加入人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使之形成毛细血管样结构,检测ANP对血管内皮细胞生长因子(VEGF165)刺激的HUVEC生长的影响.结果 与对照组相比,ANP能抑制小鼠体内的黑色素瘤和肥大细胞瘤生长和血管新生(P<0.01,P<0.001),并抑制VEGF<,165>诱导的HUVEC在基膜基质上形成毛细血管样结构(P<0.001).结论 ANP可能作为一种内源性血管抑制剂,抑制肿瘤生长及血管形成.     

鼻咽癌内血管内皮生长因子的表达及微血管密度的病理意义

目的 :探讨鼻咽癌内血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及微血管密度 (MVD)的病理意义。方法 :应用免疫组织化学S P法对鼻咽癌内VEGF的表达及MVD进行检测。结果 :鼻咽癌内VEGF的阳性表达率为 83%(5 3/ 6 4 ) ,VEGF的表达及MVD均与患者的 5年生存率及淋巴结转移相关 (P <0 0 5 ) ,同时VEGF的表达与MVD呈正相关关系 (P <0 0 1)。结论 :鼻咽癌内VEGF的高表达及高MVD与患者的不良预后及淋巴结转移有关     

血管新生与卵巢浆液性上皮性肿瘤

目的探讨血管新生与卵巢浆液性上皮性肿瘤的进展与预后的关系。方法采用SP免疫组织化学染色法检测19例卵巢浆液性囊腺癌、15例交界性浆液性囊腺瘤和13例浆液性囊腺瘤中VEGF表达、MVD计数和PCNA的表达情况。结果浆液性囊腺癌中VEGF、MVD、PCNA的表达显著高于交界性浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺瘤,交界性囊腺瘤中的MVD、PCNA显著高于浆液性囊腺瘤（均P〈0.01）;Ⅲ级浆液性囊腺癌中的VEGF、MVD、PCNA表达显著高于Ⅰ～Ⅱ级浆液性囊腺癌（均P〈0.05）;不同的临床分期之间VEGF、MVD、PCNA的表达没有显著性差异;VEGF、MVD、PCNA表达与临床预后之间没有显著性差异;VEGF、MVD表达与PCNA呈显著正相关（P〈0.01）;VEGF、MVD呈正相关（P〈0.01）。结论VEGF、MVD和PCNA参与在卵巢浆液性上皮性肿瘤的发生、发展且与肿瘤的组织学分级相关,显示其可能成为评估卵巢浆液性上皮性肿瘤良、恶性的一个辅助指标。VEGF、MVD和PCNA与临床分期及预后无关。     

靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体裸鼠成瘤抑制作用

目的 探讨靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体对人肝癌细胞株裸鼠成瘤的抑制作用.方法 将设计并合成构建好的靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的psuper.retro.neo-VEGF-siRNA表达载体转入HepG2细胞,通过G418抗性筛选出稳定株(HepG2/psuper.retro.neo-VEGF-siRNA,实验组),同时设对照组(HepG2/psuper.retro.neo组)和空白组(HepG2组).分别移植BALA/c裸鼠成瘤,计算各组鼠成瘤潜伏期和接种20 d后瘤重,Western-blotting检测肿瘤组织中VEGF的表达变化,免疫组织化学SP法检测瘤组织内微血管密度(MVD).结果 实验组、对照组和空白组裸鼠成瘤潜伏期分别为(9.2±1.2)、(3.9±0.7)和(3.8±0.9)d;接种20 d后3组平均瘤重分别为(194±57)、(566±86)和(626±96)g;瘤组织VEGF蛋白表达水平分别为(0.075±0.012)、(0.198±0.009)和(0.205±0.008);MVD分别为(13.6±2.8)、(34.3±2.9)和(35.3±3.5),实验组与对照组和空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 合成和构建的靶向人肝癌HepG2VEGF基因干扰质粒具有抑制人肝癌细胞裸鼠成瘤和血管生成的作用.     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.     

不同浓度三氧化二砷对肝癌细胞生长及血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究不同浓度三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞株HepG2的影响及三氧化二砷(As2O3)对其表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:体外培养HepG2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度As2O3对HepG2生存的影响,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测As2O3对肝癌细胞VEGF基因表达的影响.结果:0.1～1.0 μmol/l三氧化二砷可以诱导HepG2细胞的分化,2.0～7.0 μmol/l三氧化二砷主要起细胞毒性作用,促进细胞凋亡;三氧化二砷可以诱导肝癌细胞VEGFmRNA表达,其中在5.0 μmol/l最明显.结论:低剂量三氧化二砷可以诱导细胞的分化,高剂量则主要起细胞毒性作用,促进细胞凋亡;三氧化二砷可诱导VEGFmRNA的表达,其机制可能与信号转导通路相关.     

POFUT1对人胃腺癌裸鼠移植瘤微血管生成的抑制作用

目的探讨POFUT1对人胃腺癌裸鼠移植瘤微血管生成的影响及其作用机制。方法制备人胃腺癌BGC823的POFUT1慢病毒低表达及对照组、过表达及对照组细胞模型,分别命名为shRNA-POFUT1-BGC82组、shRNA control-BGC823组、PLV-POFUT1-BGC823组及PLV control-BGC823组。采用皮下成瘤的方法,分别用这4组细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型（每组5只）,观察和测算肿瘤体积。30d后处死裸鼠并取瘤,采用免疫组化方法检测裸鼠瘤组织中VEGF和CD31的表达;Western印迹法检测裸鼠瘤组织中POFUT1和VEGF的表达。结果20只裸鼠全部成瘤,实验过程无死亡。与PLV control组相比,PLV-POFUT1组裸鼠肿瘤体积显著增加（P<0.05）;shRNA-POFUT1较shRNA control组裸鼠肿瘤体积明显偏小（P<0.05）。免疫组化结果显示,与PLV contro1组相比,PLV-POFUT1组瘤组织中VEGF和CD31表达显著增高（P<0.05）;与shRNA control组相比,shRNA-POFUT1组则明显降低(P<0.05)。与shRNA control组相比,shRNA-POFUT1组POFUT1和VEGF蛋白表达水平均显著下调;PLV-POFUT1组较PLV contro1组,其POFUT1和VEGF蛋白水平均显著增强（P<0.05）。结论过表达POFUT1可以显著促进裸鼠移植瘤的增殖和肿瘤微血管形成,低表达POFUT1可抑制裸鼠移植瘤的增殖和肿瘤微血管形成,表明POFUT1在人胃 腺癌裸鼠移植瘤的微血管形成中起着重要的作用,其机制可能与VEGF密切相关。     

三氧化二砷对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA—MB-435s在裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法建立乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的裸鼠体内移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠随机分成4组,即生理盐水（Ns）组、顺铂（DDP）组、低剂量三氧化二砷组（1．5mg／kg）、高剂量三氧化二砷组（3．0mg／kg）。比较各组的抑瘤作用及应用免疫组化技术分别检测PCNA、Caspase-3在各组之间表达情况。结果用药后不同剂量三氧化二砷组和顺铂组均能显著抑制人乳腺癌移植瘤在裸鼠体内的生长,移植瘤的大小和重量显著低于生理盐水组（P〈0．05）。免疫组化结果表明：生理盐水组移植瘤组织中PCNA蛋白大量表达,Caspase-3蛋白少量表达。经不同剂量三氧化二砷或顺铂处理后PCNA蛋白的表达下降,而Caspase3蛋白的表达上调,与生理盐水比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷可以通过抑制PCNA的增殖及增加Caspase-3的凋亡作用来抑制肿瘤生长,且呈剂量依赖性。     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法：以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定As2O3对SKOV3生长的抑制作用，并绘制剂量－效应曲线；通过透射电镜观察细胞超微结构的变化；应用流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase-3的活性变化。结果：0．5－4．0μmol/L三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性；透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变；细胞核固缩，染色质凝集，呈新月状紧贴于核膜周边，凋亡小体形成等；流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰，同时出现G2／M期阻滞；SKOV3在As2O3作用下，caspase-3是实现凋亡的效应因子，它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论：As2O3对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用，诱导凋亡是其主要作用机制之一。     

三氧化二砷影响肝癌细胞血管内皮生长因子表达信号转导机制的初步探讨

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）影响人肝癌细胞株HepG2表达血管内皮生长因子（VEGF）的信号转导机制。方法：体外培养肝癌细胞系HepG2,实验分为：①空白组、②对照（As2O3）组、③As2O3＋PKC阻断剂（H7）组、④As2O3＋P38阻断剂（SB203580）组、⑤As2O3＋H7＋SB203580组;半定量RT—PCR技术检测HepG2细胞VEG-FmRNA相对表达量。结果：②、③、④、⑤纽均有VEGF的表达,与①组相比差异有统计学意义（P〈0．01）,③、④组与②组相比无差异;⑤组与②组相比VEGF的表达明显降低,P〈0．05;结论：三氧化二砷可诱导HepG2细胞表达VEGFmRNA,并可能通过PKC和／或P38信号通路影响VEGFmRNA的表达。     

卵巢交界性肿瘤血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的：检测卵巢交界性肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，研究它与VEF、微血管密度的关系，方法：应用免疫组化SP法，检测53例卵巢交界性肿瘤，18例良性卵巢肿瘤，27例卵巢癌组织中VEGF的表达，用FⅧ因子单克隆抗体标记新生血管内皮、计数微血管密度（MVD）。结果：VEGF在卵巢交界性肿瘤组织中的表达介于卵巢良性肿瘤与卵巢恶性肿瘤之间，其结果均有显著差异（P＜0．05），且其与卵巢交界性肿瘤的临床分期，MVD值密切相关（P＜0．05），其与卵巢交界性肿瘤的组织分型，有无腹腔种植无关（P＜0．05），结论：VEGF是卵巢肿瘤重要的血管生成因子，它与卵巢肿瘤的生长，侵袭与转移密切相关，检测VEGF有助于判断肿瘤的恶性程度，为交界性肿瘤的判断预后提供依据。     

米诺环素抑制小鼠肺癌生长、转移及抗血管生成的研究

目的: 观察米诺环素(MC)对小鼠肺癌生长和转移及肿瘤血管生成的影响。方法: 用T739小鼠肺癌模型,分别腹腔注射(ip)MC、环磷酰胺(CTX)、生理盐水(NS)并分成3组,检测小鼠肺癌移植瘤体积达500mm3所需时间(肿瘤生长延迟时间)、瘤重、肺转移灶数,并用免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果: 与NS组相比,MC组小鼠肺癌移植瘤的肺转移灶数和VEGF的表达均显著降低,肿瘤生长延迟(P<0.01);MC与CTX合用作用更为显著(P<0.01)。结论: MC可抑制小鼠肺癌移植瘤的生长和转移,其作用机制与抑制VEGF的表达、抑制血管生成有关。     

血管内皮生长因子165b抑制肿瘤血管生成的研究进展

研究认为血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因差异剪接后能够产生促进血管生成的VEGFxxx和抑制血管生成的VEGFxxxb。在VEGFxxxb家族中,VEGF165b在功能上具有代表性地位,表现出明显的抑制VEGF165所介导的血管生成作用。由于VEGF165b具有机体自然产生、不具有免疫原性的优势,有望通过强制高表达、外源性给予重组蛋白或促进VEGF外显子8b选择性剪接抑制肿瘤血管生成,从而用于肿瘤的治疗。