应用纯化抗原检测尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较

目的 :对幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染患者尿液和血清抗Hp抗体进行比较研究 ,探讨尿液抗Hp抗体检测的临床意义。方法 :分别以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位 (rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶B亚单位 (rUreB)纯品混合物为抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 12 6例患者的尿液抗HpIgG和血清抗HpIgG、抗HpIgA同时进行检测。结果 :使用rHspA和rUreB混合纯品进行检测 ,其特异性和敏感性明显优于Hp超声上清。诊断Hp感染的优劣顺序为 :血清IgG、尿液IgG、血清IgA。结论 :尿液的抗体检测可用于Hp感染诊断 ,尤其是尿液抗HpIgG是一个诊断Hp感染的敏感、特异指标。     

幽门螺杆菌内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对实验感染小鼠的免疫保护作用

目的:了解内置重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)佐剂、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(rUreB)和黏附素(rHpaA)双价基因工程疫苗对Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保护作用及其机制.方法:采用NTA-Ni亲和层析法分别收集rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、重组大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位突变体(rLTKA63)、rLTB和霍乱肠毒素B亚单位(rCTB).用Western blot检测各重组蛋白抗原的免疫反应性.用GM1-ELISA检测rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA的佐剂活性.建立Hp SS1株感染BALB/c小鼠模型,检测不同组合抗原和佐剂的免疫保护效果.采用分离培养和镀银染色法检查感染小鼠胃窦组织中的Hp.建立ELISA,检测免疫小鼠特异性胃液S-IgA和血清IgA.结果:rUreB、rHpaA和rLTB-rUreB-rHpaA可被兔抗Hp全菌抗体识别,并与牛GM1结合.单用rUreB或rHpaA 免疫小鼠,其保护率低于70%;若与rLTB或rCTB合用,其保护率可增至75.0%～83.3%.在不同抗原及佐剂组合中,rLTB-rUreB-rHpaA保护率达100%,其次为rHpaA rUreB rCTB rLTKA63(91.7%)和rUreB rHpaA rLTB(90.9%).rLTB和rCTB均有明显的诱生免疫小鼠特异性血清IgA和胃液S-IgA作用,但前者诱生S-IgA的能力强于后者.特异性血清IgA,尤其是胃液S-IgA的阳性率与小鼠免疫保护率基本吻合,rLTB-rUreB-rHpaA免疫小鼠rUreB 和rHpaA 特异性S-IgA阳性率分别高达100%和91.7%.结论:rUreB和rHpaA有良好的免疫反应性和抗原性,rLTB和rCTB有黏膜免疫佐剂活性.内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对小鼠高保护率与使用高剂量rLTB、抗原分子量增大和局部高水平特异性S-IgA抗体有关.     

BalB/c小鼠口服重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的免疫应答

目的：评价重组尿酶B亚单位（rUreB）作为幽门螺杆菌（Hp)口服疫苗成份的效果、探讨Hp的免疫保护机制。方法：采用重组Hp保护性抗原UreB与粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位（CTB）共口服免疫BalB/c小鼠，ELISA分析血清、唾液和粪便、胃粘液中IgG、IgA抗体水平，体外培养脾淋巴细胞在Hp刺激下的增殖情况及IL－4、IFN－γ的变化。结果：BalB/c小鼠口服rHreB和CTB混合制剂能有效激发机体产生全身和局部特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答。结论：rUreB可以作为Hp疫苗成分用于Hp感染的预防和治疗。     

日本血吸虫与HBV合并感染对幽门螺杆菌感染的影响

目的 :探讨HBV与日本血吸虫合并感染对幽门螺杆菌 (Hp)感染的影响。 方法 :利用Hp全菌抗原检测HBV、日本血吸虫单独或合并感染者血清抗HpIgG抗体。 结果 :HBV与血吸虫合并感染时 ,血清HpIgG抗体检出率 ( 85.7% )明显高于HBV或血吸虫单独感染 (阳性率分别为 4 5.5%和 72 .9% ) ,合并感染时血清抗体水平 ( 0 .87± 0 .1 0 )亦高于单独感染 ( 0 .77± 0 .2 0 ,0 .70± 0 .1 7) ,差异有显著性意义。HBV阳性者与HBV阴性者之间Hp 感染率和抗体水平相近。结论 :HBV和血吸虫合并感染对Hp感染具有协同作用     

中国幽门螺杆菌感染者血清抗Hp IgG亚型的变化及其临床意义

目的:探讨中国幽门螺杆菌(Hp)感染者血清抗Hp IgG亚型的变化及其与Hp相关疾病的关系.方法:采用ELISA法检测中国广西和上海地区证实为Hp感染者血清抗Hp IgG亚型的水平.其中上海患者55例,广西患者74例.结果:129例感染Hp的患者血清中IgG亚型以IgG1和IgG2为主,其水平分别为(10.5±4.0)和(9.0±3.4),IgG3和IgG4的水平非常低,但IgG各亚型之间无显著差异.在上海地区十二指肠溃疡患者血清中IgG2水平显著高于非溃疡性消化不良患者(P＜0.05),IgG1、IgG3和IgG4水平在消化性溃疡患者和非溃疡性消化不良患者之间无显著差异;广西地区也如此.结论:抗HpIgG2水平可能是Hp感染致十二指肠溃疡的预测因子.     

日本血吸虫病患者幽门螺杆菌感染分析

目的：探讨日本血吸虫病患者中Hp的感染状况。方法：利用Hp全菌抗原ELISA定量检测不同类型日本血吸虫病患者血清抗HpIgG。结果：日本血吸虫病患者组血清抗HpIgG检出率（75％）明显高于对照组（46％），平均抗体水平（2.30±0.42）亦高于对照组（2.02±0.38），抗HpIgG的检出率和平均抗体水平随病程的发展而升高，血清抗HpIgG水平与血清抗AWA抗体水平高度相关（r＝0.92）。结论：日本血吸虫病患者的Hp感染率明显高于其他人，早期诊断并及时治疗Hp感染，对于控制晚期血吸虫病病变的发展和改善其预后具有重要意义。     

BALB/c小鼠口服重组幽门螺杆菌热休克蛋白A疫苗的免疫应答

目的评价重组热休克蛋白A(rHspA)作为幽门螺杆菌(Hp)口服疫苗成分的效果.方法采用重组Hp保护性抗原HspA与粘膜免疫佐剂(霍乱毒素,CT;大肠不耐热肠毒素B亚单位,LTB)共口服免疫BALB/c小鼠,ELISA分析小鼠血清、胃肠粘液中IgA、IgA抗体水平,体外培养脾淋巴细胞在Hp刺激下的增殖情况以及IL4、IFN-γ的变化.结果单纯口服rHspA组产生的抗体水平与对照组(PBS)相差不显著,而rHspA 佐剂组与对照组相差非常显著.rHspA 佐剂组小鼠脾淋巴细胞体外培养,在Hp抗原刺激作用下出现明显的增殖反应;不加佐剂免疫组分泌IFN-γ水平增加,IL-4水平未发现增加;而加佐剂免疫组除IFN-γ水平增加外,IL-4水平也发现显著增加.结论BALB/c小鼠口服rHspA和CT以及LTB混合制剂能有效激发机体产生全身和局部特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答.     

唾液抗幽门螺杆菌IgG的检测

[目的]了解唾液抗幽门螺杆菌(Hp)抗体诊断Hp感染的价值.[方法]对93例病人同时进行唾液抗HpIgG测定、快速尿素酶试验(RUT)、组织涂片HE染色及病理WS银染色.[结果]唾液抗HpIgG检测阳性率近似于RUT法(P＞0.05),高于组织涂片HE染色及病理WS银染色法(P＜0.01).其诊断Hp感染的敏感性为97.0%,特异性为88.2%,准确性为95.2%,阳性预期值97.0%,阴性预期值88.2%.[结论]本方法与组织学方法比较具有更高的敏感性,且简便、快速、可靠.     

尿液抗幽门螺杆菌抗体检测的临床意义

目的:评估尿液抗幽门螺杆菌(Hp)抗体检测对Hp感染的诊断及根治后疗效判断的应用价值.方法:应用ELISA法检测215例消化内科门诊患者的尿液抗Hp抗体,并以13C呼气试验(13C-UBT)为"金标准"进行双盲对比.结果:215例患者尿Hp抗体阳性99例,总阳性率为46.0%;13C-UBT阳性96例,阳性率为44.7%.尿Hp抗体结果与13C-UBT相符180例,符合率83.7%;不符35例,其中19例尿Hp抗体阳性而13C-UBT阴性,16例尿Hp抗体阴性而13C-UBT阳性.以13CUBT为标准,尿液抗体检测的敏感性为85.7%,特异性为93.6%,阳性预测率78.5%,阴性预测率89.3%,准确性为84.5%.Hp根治后1个月13C-UBT转阴率为76.7%,尿液抗Hp抗体转阴率为50.0%.结论:尿液抗Hp抗体检测是一种方便、价格低廉、非侵入性诊断Hp感染的方法,适合对Hp感染患者的筛选、普查和儿童患者,在一定程度上可监测疗效.     

血清幽门螺旋菌抗体定量ELISA检测的实验研究

幽门螺旋菌(Hp)的检测目前主要采用培养法、组织切片染色法、快速尿素酶试验法等.本文建立酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测Hp抗体,以Hp抗体滴度来反映血清Hp抗体水平,该方法敏感性93.9%、特异性100%,可为临床诊断Hp感染、判断Hp感染严重程度以及指导临床抗Hp治疗提供实验依据.该方法也可用于Hp感染的流行病学调查.