OPH对缺血-再灌注损伤心肌能量代谢的影响

目的 :ＯＰＨ是本研究所合成的创新化合物 ,对心血管系统有明显活性。以往的研究显示它对冠脉阻断 -再灌或全心停灌 -复灌所致心肌损伤有明显保护作用 ,为探讨其作用的生化机制 ,研究ＯＰＨ对再灌注心肌能量代谢的影响。方法 :大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ氏心脏 ,Ｋ -Ｈ液灌流 1 0 0ｍｉｎ作为正常对照组 ;平衡 30ｍｉｎ后 ,停灌 40ｍｉｎ -复灌 30ｍｉｎ作为再灌注损伤组 ;给药组于停灌前 5ｍｉｎ至停灌前及复灌期灌注含ＯＰＨ的Ｋ -Ｈ液。取复灌 30ｍｉｎ时的心脏 ,液氮保存 ,用酶学法测心室肌ＡＴＰ ,ＰＣｒ与Ｐｉ含量。结果 :停灌 -复灌…     

Captopril对缺血再灌心肌线粒体电子质子偶联和氧化磷酸化的影响

为研究ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对缺血／再灌注心肌的保护机制，本实验用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ无作功非循环式离体心脏灌流模型，琥珀酸为底物，分别用氧电极法和铁氢化钾脉冲法检测缺血再灌注中ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对心肌线粒体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ＋Ⅳ段氧化磷酸化和复合体Ⅱ＋Ⅲ段质子电子偶联的影响ｑ结果发现：缺血及再灌注时呼吸控制率（ＲＣＲ）、ＡＴＰ合成速度升高的现象在保护组不出现，说明ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对心肌线粒体呼吸功能有保护作用，ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对缺血时线粒体复合体Ⅱ＋Ⅲ质子泵出速度和电子传递速度升高有进一步的调节作用，使质子电子偶联更紧密，Ｈ＋／２ｅ－恢复至对照水平。再灌时质子泵出速度的降低可被ｃａｐｔｏｐｒｉｌ逆转。提示ｃａｐｔｏｐｒｉｌ可能具有清除自由基及膜保护作用     

缺血再灌引起大鼠心肌线粒体损伤的观察

结扎Langendorff大鼠心脏冠脉左前枝15min,再灌30min,立即从缺血区取材,做成电镜标本,观察线粒体等损伤情况,同时观察了血管紧张素转移酶抑制剂captopril,lisrnopril和cilazapri对缺血再灌损伤的保护     

镁对缺血再灌注心肌线粒体合成ATP能力的影响

我们曾经观察到心肌缺血再灌注过程中心肌线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性降低,Ca~(2+)大量沉积于线粒体内.含Mg~(2+)溶液灌流对此具有逆转作用。心肌线粒体是心肌细胞进行氧化磷酸化、合成ATP的场所,大量的钙盐沉积,有可能抑制ATP的合成,因此,我们进一步观察含Mg~(2+)溶液灌注对缺血再灌注心肌线粒体合成ATP的影响。实验采用Wistar大鼠离体等容收缩心脏,行Langendorff灌流,常规K-H液预灌流30分钟行低灌流缺血(0.2ml/min,60分钟后,常规K-H液再灌)注30分钟.根据缺血期准注K-H液中Mg~(2+)浓度不同,实验分为0、1.2及15μmol三组(n均为5)。灌流结束后差速离心分离心肌线粒体,加入含有底物ADP     

酸性复灌液对未成熟心肌间质保护作用的研究

目的观察不同 pH值HEPES-KH复灌液对未成熟心肌间质的影响。方法采用Langen dorff离体灌注模型 ,分为3组 :正常对照组(NC ,n=8) ,仅灌注pH7.4HEPES-KH液90min;缺血/再灌组(I/R ,n=8) ,灌流20min后缺血60min ,用 pH7.4HEPES -KH液恢复灌注30min ;酸性灌注组 (E ,n=8) ,缺血60min后 ,先用pH6.8HEPES-KH液灌注5min,然后换成 pH7.1灌注5min ,最后恢复pH7.4灌注20min。以心脏舒张功能指标、心肌羟脯氨酸 (HP)及血清内皮素 (ET)含量作为观察指标。结果E组在心功能恢复、HP含量方面高于I/R组 (P<0.05),ET含量低于I/R组(P<0.05)。结论 pH反常是I/R损伤的重要发病机制 ,复灌初期应用梯度酸性复灌液有助于未成熟心肌间质的保护。     

CGP37157对心肌线粒体超微结构的影响

目的:研究线粒体钠钙交换体特异性阻断剂CGP37157对心肌细胞线粒体超微结构的影响,明确CGP37157对心肌细胞线粒体的损伤.方法:雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,对照组用台氏液通过主动脉逆行性灌流心,实验组用CGP37157通过主动脉逆行性灌流心,取左心室心肌组织,透射电子显微镜制样及观察.结果:CGP37157引起心室肌细胞线粒体结构异常,表现为不同程度的线粒体嵴溶解.结论:CGP37157可以直接影响心肌细胞线粒体的超微结构,导致心肌细胞线粒体损伤.     

OPH对缺血-再灌注猫心脏血流动力学的影响

目的 :ＯＰＨ是本研究所合成的创新化合物 ,有强心扩血管作用。以往的研究显示它对于冠脉阻断 -再灌或全心停灌 -复灌所致心肌损伤有明显保护作用 ,它减少再灌时的ＶＦ发生率 ,增强心肌抗自由基的能力 ,并对抗心肌线粒体钙超载。为了解ＯＰＨ对再灌注损伤动物心脏功能的影响 ,本研究观察它对猫心脏血流动力学的影响。方法 :猫 1 2只 ,戊巴比妥钠麻醉 ,开胸 ,用多导生理记录仪监测心电图与血压 ,电磁流量计测升主动脉血流量 ,计算心脏血流动力学参数。于冠脉左前降支上 1 /3处穿线 ,以备阻断血流。用自制的多导电极片置于左室前壁 ,记录心外…     

牛磺酸对缺血—再灌注损伤大鼠心肌钙超载的影响

牛磺酸是体内含量最丰富的自由氨基酸,具有重要的细胞保护功能。它对心脏缺血—再灌注损伤具有非常有效的防治作用,但其作用机理尚不清楚。钙超载(calcium overload)是心肌缺血—再灌注损伤的主要发病环节之一,本工作在离体灌流的大鼠心脏缺血—再灌注损伤模型上观察了牛磺酸对再灌注心肌组织钙含量和~(45)Ca     

脂质胞壁酸延迟预适应对大鼠供心停搏/复灌性损伤的影响

目的：探讨脂质胞壁酸（LTA）诱导的延迟预适应对大鼠供体心脏停搏/复灌性损伤的影响。 方法： 采用心脏Langendorff灌流模型，腹腔注射LTA后24 h，观察心脏停搏保存4 h后再灌注30 min及60 min时心脏功能及再灌注末灌流液中心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮（NO）含量，并用dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测左室心肌细胞凋亡。 结果： LTA预适应组再灌注30 min和60 min时心脏的冠脉流量，左室发展压及压力最大上升和下降速率等参数值显著大于对照组（均P<0.01）。LTA预适应组灌流液中NO含量明显大于对照组（P<0.01），而CK-MB和LDH的水平和心肌凋亡指数小于对照组（均P<0.01）。一氧化氮合酶抑制剂L-NG-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）能取消LTA预适应的保护效应。 结论： LTA预适应能显著改善供体心脏停搏/再灌注后的心功能，减少心肌坏死和细胞凋亡，内源性NO在介导LTA预适应中发挥关键作用。     

磷酸肌酸对大鼠心肌缺氧、复氧心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基mRNA表达水平的影响

目的和方法：以离体心脏灌流法制备大鼠心肌缺氧、复氧模型,提取大鼠心矶ｍＲＮＡ并标记心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基基因探针,进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,观察不同缺氧、复氧时ｓＭｉＭｉＣＫｍＲＮＡ的变化及磷酸肌物保护作用。结果：随着缺氧时间的延长,ｓＭｉＭｉ－ＣＫ的ｍＲＮＡ逐渐减少,复氧后ｓＭｉＭｉ－ＣＫ进一步减少,ＰＣｒ能显著改善ｓＭｉＭｉ－ＣＫ的表达量。结论：ＰＣｒ对缺氧、复氧的心肌具有明显的保护作用     

L-肉碱对NAFLD脂肪肝大鼠肝脏线粒体能量代谢及抗氧化能力的影响

研究L-肉碱对NAFLD脂肪肝大鼠肝脏线粒体能量代谢及抗氧化能力的影响.脂肪肝大鼠48只,随机分为对照组、肉碱组、运训组和肉碱+运训组.运训组和肉碱+运训组进行6周运动,肉碱组和肉碱+运训组每日灌胃一次肉碱(500 mg/kg).6周后各组大鼠进行力竭运动,即刻麻醉取出肝脏提取线粒体,测定线粒体呼吸链酶RCCI~IV活性及自由基代谢相关指标.与对照组比,肉碱组大鼠肝脏线粒体呼吸链RCCII,运训组RCCI、RCCIII,肉碱+运训组RCCI、RCCII、RCCIII活性均显著提高.与肉碱组比,肉碱+运训组RCCI、RCCIII活性显著提高.与运训组比,肉碱+运训组RCCI活性显著提高.与对照组比,肉碱组、肉碱+运训组大鼠肝脏线粒体GSH-Px活性显著提高;与对照组比,三组SOD 活性显著提高,MDA含量降低.与肉碱组比,肉碱+运训组SOD活性显著提高;与运训组比,肉碱+运训组GSH-Px活性显著提高.补充L-肉碱、运动、L-肉碱+运动均可提高非酒精性脂肪肝大鼠肝脏线粒呼吸链酶活性,提高线粒体能量代谢速率及抗氧化损伤能力,补充L-肉碱结合运动训练组效果更加显著.     

Captopril对缺血再灌心肌线粒体电子质子偶联和氧化磷酸…

为研究ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对缺血／再灌注心肌的保护机制，本实验用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ无作功非循环式离体心脏灌流模型，琥珀酸为底物，分别用氧电极法和铁氢化钾脉冲法检测缺血再灌注中ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对心肌线粒体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ＋Ⅳ段氧化磷酸化和复合体Ⅱ＋Ⅲ段质了了电子偶联的影响。     

缺血对大鼠心肌线粒体CK活性的影响

近年来从各种动物及人的心肌线粒体中制备、纯化Ckmit的研究报道较多,但对探讨Ckmit活性与心肌缺血机理的研究报道却极罕见。本实验采用缺血不同时间的大鼠心肌,首先制备出线粒体,然后用磷酸盐缓冲     

多胺对大鼠缺氧-复氧心肌细胞内钙的影响

目的：观察外源性低浓度多胺对大鼠缺氧-复氧心肌细胞钙超载的影响。 方法: 酶解分离大鼠心室肌细胞，用正常氧合Tyrode液灌流8 min, 换为缺氧液灌流32 min, 再转换为正常氧合Tyrode液灌流8 min,复制心肌缺氧-复氧模型。分别在缺氧前给予精胺，缺氧-复氧后给予精胺、精脒、腐胺。应用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）连续观察细胞内钙荧光强度的动态变化。 结果: 精胺（1 mol/L）对正常静息状态下大鼠心室肌［Ca2+］i无影响。缺氧前给予精胺，可取消复氧引起的心肌［Ca2+］i增高；缺氧-复氧后给予精胺、精脒、腐胺对缺氧-复氧引起［Ca2+］i升高也有不同程度的降低作用，其中以精胺的作用最强。复氧后给予精胺降低缺氧-复氧［Ca2+］i 升高的作用小于缺氧前给予。 结论: 缺氧前给予精胺可拮抗缺氧-复氧心肌细胞钙超载发生；复氧后给予精胺可使缺氧-复氧心肌细胞钙超载减轻，但其作用力度不如缺氧前给药。多胺拮抗缺氧-复氧心肌细胞钙超载的作用以精胺＞精脒＞腐胺的顺序递减。     

硒缺乏对心肌谷胱甘肽抗氧化功能的影响

本文用离体心脏灌流法对硒缺乏鼠心的谷胱甘肽抗氧化功能失调作了直接测定,并对心肌细胞内谷胱甘肽代谢转运机理提出解释。 实验动物为喂缺硒和补0.5ppm硒的半合成饲料的雄性大白鼠,体重300～450克。     

败血症大鼠心肌线粒体钙转运能力的变化

为探讨心肌线粒体钙调节功能在休克大鼠心肌细胞钙超负荷发生中的作用。本文采用结扎大鼠盲肠加穿孔的腹膜炎败血症休克模型,观察到休克早期、晚期线粒体钙含量分别增加180%、330%,休克晚期线粒体钙转运能力明显降低(摄钙量减少34.6%,摄钙速率降低33%,P<0.01)。结果提示,心肌线粒体钙转运能力的降低可能是休克动物心肌钙超负荷,继而导致心功能障碍的重要原因之一。     

TMLR对缺血心肌乳酸代谢及线粒体的影响

目的:探讨激光心肌血运重建术(TMLR)对急性心肌缺血(AMI)的作用与机制。方法: 将18条犬随机等分为假手术组、AMI组和TMLR组,采用连续型Nd:YAG激光行TMLR术。测动脉和冠状窦血乳酸含量(A.Lat 和CS.Lat),心肌乳酸代谢速率(MLR)和心肌乳酸吸收分数(MLE);超微电镜结合生物体视学原理定量观察心肌细胞线粒体形态和数量。结果: 结扎左前降支冠状动脉(LAD)后60 min,AMI组和TMLR组CS.Lat分别为(7.63±4.27)mmol/L和(5.78±3.98)mmol/L,P<0.05;MLR分别为(0.03±0.01)mmol·100 g心肌^-1·min^-1和(0.06±0.02)mmol·100 g心肌^-1·min^-1,P<0.05;MLE分别为(12.04±3.04)% 和(21.84±8.49)%,P<0.05。LAD结扎后4 h,AMI组和TMLR组线粒体体密度分别为(27.51±7.93)% 和(31.26±3.85)%,P>0.05;面密度分别为(1.25±0.18)μm^-1和(1.64±0.28)μm^-1,P<0.01;数密度分别为(0.10±0.03)μm^-3和(0.18±0.05)μm^-3,P<0.01;平均体积分别为(5.27±2.85)μm³和(2.80±0.54)μm³,P<0.05;平均外径分别为(2.06±0.36)μm和(1.78±0.12)μm,P<0.05。结论: TMLR可纠正急性心肌缺血犬的心肌乳酸代谢障碍和减轻心肌细胞损伤。     

L-精氨酸对兔缺血-再灌注心肌线粒体功能及结构的影响

目的:探讨L-精氨酸对心肌缺血-再灌注(MIR)时心肌细胞线粒体功能及结构的影响。方法:实验兔30只,随机分为正常对照组(control组)、心肌缺血-再灌注组(MIR组)和心肌缺血-再灌注+L-精氨酸治疗组(MRI+L-Arg组);分别观察心肌线粒体呼吸功能、Ca²⁺浓度([Ca²⁺]m)、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及超微结构的改变和心肌组织三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量、总腺苷酸量(TAN)、能荷(EC)的变化。结果:MIR+L-Arg组线粒体呼吸控制率(RCR)、Ⅲ态呼吸速率(V₃)、SOD、面密度(Sv)、比表面(δ)明显高于MIR组,Ⅳ态呼吸速率(V₄)、[Ca²⁺]m、MDA、体密度(Vv)、横径(Hd)显著低于MIR组,心肌组织ATP、ADP、TAN及EC均明显高于MIR组;且与control组比较,V₃、V₄、SOD、MDA、Vv、Sv、δ、数密度(Nv)、纵径(Vd)及AMP、TAN无明显差异。结论:L-精氨酸可通过降低氧自由基水平和减轻钙超载,而改善缺血-再灌注心肌的线粒体功能及结构。     

川芎嗪对缺血-再灌注损伤兔心肌线粒体结构及功能的影响

为了探讨川芎嗪对心肌缺血一再灌注损伤(MIRI)时心肌细胞线粒体功能及结构的影响。本实验选用日本大耳白兔30只,随机分为正常对照组(A组)、心肌缺血一再灌注损伤组(B组)和心肌缺血-再灌注损伤 川芎嗪治疗组(C组)。复制MIRI模型,分别观察心肌线粒体呼吸功能、Ca^2 浓度([Ca^2 ]m)、丙二醛浓度(MDA)、超氧化物歧化酶活性(SOD)及超微结构的改变和心肌组织三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量、总腺苷酸量(TAN)、能荷(EC)的变化。结果发现,C组与B组比较,线粒体呼吸控制率(RCR)、Ⅲ态呼吸速率(ST3)、SOD、面密度(Sv)、比表面(δ)明显升高,Ⅳ态呼吸速率(ST4)、[Ca^2 ]m、MDA、体密度(Vv)、横径(Hd)显著降低,心肌组织ATP、ADP、TNA及EC均明显增高;且与A组比较,ST3、ST4、SOD、Vv、Sv、δ、数密度(Nv)、纵径(Vd)及ADP、AMP、TNA无明显差异。可见,川芎嗪可通过降低氧自由基水平和减轻钙超载,而改善缺血一再灌注损伤心肌的线粒体功能及结构。     

线粒体ATP敏感性钾通道参与超极化停搏的心肌保护作用

目的：探讨线粒体ATP敏感性钾通道（mitoKATP）开放在超极化停搏心肌保护中的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组（Control）、去极化停搏组（D）、超极化停搏组（H）、5-羟葵酸(5-HD) +去极化停搏组（5HD+D）、5-HD+超极化停搏组（5HD+H），每组8例。建立Langendorff灌注模型，平衡20 min，以不同方式停搏40 min，再灌注30 min，对比观察：(1)不同时间血流动力学变化；(2)再灌注末取心肌并分离、制备线粒体，电镜观察超微结构的变化。(3)平衡末、再灌注末线粒体活性氧的产生。结果: (1)各组再灌注末大鼠心脏功能明显低于平衡末, 心肌线粒体超微结构均遭受不同程度损伤，左室发展压（LVDP）、左室舒张末压（LVEDP）、率压双乘积（DP）、冠脉流量（CF）有显著差异（P<0.01）；（2）超极化停博组再灌注末心脏功能指标LVDP、LVEDP、DP、CF明显优于去极化停博组、5-HD+超极化停搏组、5-HD+去极化停搏组、对照组（P<0.01），电镜示：心肌、线粒体超微结构遭受的损伤较轻; (3)超极化停博组再灌注末心肌线粒体活性氧产生率低于对照组与其它3组（P<0.01）。结论:(1)超极化停搏能明显改善再灌注后心功能，保护心肌、线粒体超微结构，减少活性氧生成；(2)mitoKATP的早期开放参与超极化停搏，其作用可能通过保护再灌注后的线粒体呼吸功能，减轻线粒体的氧化损伤，为再灌注心肌提供较好的能量供应，从而使缺血再灌注后的心脏收缩功能得到一定恢复。