siRNA靶向沉默MALAT-1基因对人食管癌EC9706细胞体外侵袭迁移的影响

目的:研究长链非编码RNA MALAT-1对食管癌EC9706细胞系迁移、侵袭能力的影响。方法:化学合成针对MALAT-1的siRNA,脂质体法转染EC9706细胞,转染48h后RT-PCR和Western blot检测各细胞MALAT-1在mRNA和蛋白质水平的表达。Transwell实验检测迁移、侵袭能力改变。结果:小干扰RNA下调MALAT-1表达后,RT-PCR和Western blot证实食管癌EC9706细胞中MALAT-1的表达在mRNA水平和蛋白质水平均明显下调,Transwell实验证实食管癌EC9706细胞迁移、侵袭能力下降。结论:抑制MALAT-1表达能够使食管鳞癌细胞的侵袭转移能力明显降低。     

钠尿肽受体A在食管鳞状细胞癌中的表达及对食管癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨钠尿肽受体A(NPRA)在食管鳞状细胞癌中的表达及其对食管癌细胞迁移和侵袭的影响.方法 采用免疫组织化学染色法检测119例食管鳞状细胞癌组织和91例癌旁组织中NPRA的表达情况,并分析食管鳞状细胞癌组织中NPRA表达情况与患者临床特征及预后的关系.采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测食管癌细胞株Ec...     

CircHIPK3通过调控p53-Akt-Mdm2通路影响食管鳞癌的恶性表型

目的 研究食管鳞癌组织中CircHIPK3的表达差异,以寻找食管鳞癌诊断和靶向治疗的新思路。方法 qRT-PCR、CCK-8法、Transwell法和流式细胞术检测CircHIPK3在食管鳞癌和癌旁组织中的表达差异以及其对细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响;生物信息数据分析确定CircHIPK3的可能作用通路,Western blot对其通路相关功能蛋白加以验证。结果 11例患者的癌组织和对应的7例癌旁组织中CircHIPK3表达异常（P=0.027）;CircHIPK3高表达的细胞增殖（P<0.001）、迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.001）能力增强;CircHIPK3过表达的EC9706细胞凋亡受到抑制,抑癌基因p53被明显抑制,而Akt-Mdm2信号通路处于激活状态,p53-Akt-Mdm2通路蛋白的表达量随之增加,最终导致癌细胞增殖、迁移、侵袭以及相关癌症蛋白的表达增加。结论 CircHIPK3可能通过调节p53-Akt-Mdm2信号通路促进人食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡,其可能是食管鳞癌诊断和治疗的潜在靶点。     

EphB1通过PI3K/AKT信号通路促进食管鳞状细胞癌EC-9706细胞增殖、迁移、侵袭并抑制其凋亡

目的:研究促红细胞生成素产肝细胞受体B1(erythropoietin-producing human hepatocellular receptor B1,EphB1)对食管鳞状细胞癌EC-9706细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探索其可能的作用机制。方法:qRT-PCR法分析40对食管鳞状细胞癌手术患者的癌组织及邻近正常组织中EphB1表达情况,并分析其临床特征。在EC-9706细胞中分别转染si-EphB1 RNA和oe-EphB1 RNA及其阴性对照。通过qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验检测转染效率;CCK-8实验分析EphB1对细胞活力的影响;Hoechst 33258染色和流式细胞学实验检测细胞凋亡;划痕愈合实验及Transwell侵袭实验明确细胞迁移及侵袭能力;蛋白免疫印迹实验检测EphB1蛋白、增殖相关蛋白［增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）］、凋亡相关蛋白［Bad、Bcl-2、Caspase 3 及剪切型-Caspase 3（cleaved-Caspase 3）］、侵袭转移相关蛋白［基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2）、Snail、波形蛋白(Vimentin)、N-cadherin、E-cadherin］以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白（PI3K、AKT、p-AKT）的表达水平。结果:EphB1在食管鳞状细胞癌组织及细胞系中高表达(P均＜0.05),EphB1的表达水平与食管鳞状细胞癌患者的TNM分期、有无淋巴结转移和远处转移具有显著相关性(P均＜0.05)。与对照组相比,通过细胞转染技术沉默EphB1和过表达EphB1使EC-9706细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显降低或增强,并诱导或抑制细胞凋亡(P均＜0.05)。在蛋白水平上,si-EphB1和oe-EphB1处理EC-9706细胞48 h后,增殖相关蛋白PCNA蛋白表达水平分别显著降低或增加（P均＜0.05）,并分别增加或降低促凋亡相关蛋白Bad、cleaved-Caspase 3的表达水平（P均＜0.05）,下调或上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Caspase 3的蛋白表达（P均＜0.05）,抑制或促进侵袭转移相关蛋白MMP-9、MMP-2、Snail、Vimentin、N-cadherin的蛋白活性,但却上调或下调 E-cadherin的表达水平（P均＜0.05）。同时,Western blotting实验结果还证实EphB1可诱导食管鳞状细胞癌EC-9706细胞中通路蛋白PI3K、p-AKT的活性增强（P均＜0.05）。结论:EphB1可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进食管鳞状细胞癌EC-9706细胞的增殖、迁移及侵袭,并抑制其凋亡。     

MiR-429 up-regulation induces apoptosis and suppresses invasion by targeting Bcl-2 and SP-1 in esophageal carcinoma

Purpose

MicroRNAs (miRNAs) may act as oncogenes or tumor suppressor genes and, as such, they may play a role in cancer development. We investigated miR-429 expression levels in a cohort of esophageal carcinomas (EC) to assess its impact on EC cell growth, apoptosis and invasion.

Methods

qRT-PCR assays were used to quantify miR-429 expression levels in 32 paired EC samples and adjacent non-neoplastic tissues. Assays for cell growth, apoptosis, caspase activity and trans-well invasion were used to evaluate the effects of miR-429 expression on EC cells. Luciferase reporter and Western blotting assays were used to test whether the Bcl-2 and specificity protein 1 (SP1) mRNAs serve as major targets of miR-429.

Results

The expression levels of miR-429 in EC tissues were found to be lower than those in adjacent non-neoplastic tissues (P?<?0.05). This relatively low expression was found to be significantly associated with the occurrence of lymph node metastases (P?<?0.05). Apoptosis and migration rates were found to be significantly higher in two EC-derived cell lines (EC9706 and KYSE30) transfected with a miR-429 agomir (P?<?0.05). Subsequent Western blotting and luciferase reporter assays showed that miR-429 can bind to putative binding sites within the Bcl-2 and SP1 mRNA 3′ untranslated regions (UTRs) to reduce their expression.

Conclusions

In primary EC tissues miR-429 is expressed at low levels. Up-regulation of miR-429 inhibits invasion and promotes apoptosis in EC cells by targeting Bcl-2 and SP1. Our findings suggest that Bcl-2 and SP1 may serve as major targets of miR-429. This study paves the way for a better understanding of the mechanism underlying EC pathogenesis and the development of novel, targeted therapies.     

LETM2在食管鳞癌中的表达及其作用

  目的  探讨LETM2在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的表达,研究LETM2对ESCC细胞系KYSE150和ECA109增殖和侵袭迁移的影响。  方法  免疫组化（immunohistochemistry,IHC）检测90例ESCC及癌旁组织LETM2蛋白表达差异,RT-PCR和Western blot检测ESCC细胞系LETM2表达情况,慢病毒敲低KYSE150和ECA109细胞中LETM2表达。MTT和克隆形成技术检测LETM2对ESCC细胞增殖和克隆形成能力的影响,流式细胞术检测细胞周期变化,Transwell法分析LETM2敲低后细胞迁移侵袭能力的差异。  结果  在ESCC组织中LETM2的表达显著高于癌旁组织,LETM2通过抑制ESCC细胞G₁期向S期转化进而抑制细胞增殖,但对侵袭和迁移能力影响不大。  结论  LETM2可能作为驱动基因促进ESCC的发生发展,是ESCC的关键遗传变异,可能作为ESCC早诊早治的分子标志物。      

下调ERp57抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:分析内质网驻留蛋白57(ERp57)在食管鳞癌组织中的表达情况以及下调ERp57对食管癌细胞TE-1生物学功能的影响。方法:GEPIA数据库分析食管癌中ERp57的表达;通过荧光定量PCR和Western blot检测临床食管癌标本及细胞株中ERp57的表达;利用shRNA沉默TE-1细胞内ERp57后,通过CCK8检测细胞增殖、TUNEL检测细胞凋亡、划痕检测细胞迁移、Transwell检测细胞侵袭。结果:食管癌组织中ERp57的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织(P<0.05),食管癌细胞中ERp57的mRNA及蛋白的表达高于食管上皮细胞(P<0.05)。沉默ERp57使TE-1细胞的增殖能力减弱、凋亡比例增加,并减弱了TE-1细胞的迁移及侵袭能力。结论:沉默ERp57表达能够抑制食管癌细胞TE-1的增殖、迁移、侵袭,可为食管癌研究提供理论依据。     

长链非编码RNA SPRY4-IT1在食管鳞癌中的表达及对细胞生长的影响

  目的  探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后的相关性,以及对细胞生长的影响。   方法  收集2008年1月至2009年12月南京医科大学附属南京医院肿瘤外科50例ESCC手术切除标本（包括癌组织和癌旁组织）,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测50例ESCC中SPRY4-IT1的表达情况,分析其与临床病理及预后的关系,用小干扰RNA（siRNA）干扰SPRY4-IT1后MTT法检测其对细胞生长的影响,流式细胞检测对细胞凋亡和周期的影响。  结果  45例（90%）标本中SPRY4-IT1呈阳性表达,SPRY4-IT1在癌组织中的表达量显著高于癌旁组织（t=5.377,P < 0.01）。SPRY4-IT1的相对表达水平与肿瘤大小、临床分期相关（P均 < 0.05）。SPRY4-IT1在ESCC细胞株中表达量高于正常食管上皮细胞。KYSE30细胞中干扰SPRY4-IT1的表达后可明显减慢细胞生长,阻滞细胞周期并促进细胞凋亡（P < 0.01）。  结论   SPRY4-IT1在ESCC组织中显著高表达,并且能促进ESCC细胞生长,可能成为ESCC诊断和判断预后的重要分子标记物。      

ALC1蛋白在食管鳞癌中的表达及其对细胞增殖?侵袭?迁移的影响

  目的  探讨ALC1（amplified in liver cancer 1）在食管鳞癌组织中的表达及与临床病理特征及总生存率关系,检测过表达ALC1基因对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。  方法  采用免疫组织化学方法检测245例食管鳞癌组织及癌旁组织中ALC1蛋白的表达,并探讨其与食管鳞癌患者性别、年龄、分化程度、浸润深度、TNM分期、远处淋巴结转移关系及总生存率关系;采用MTT法、克隆形成实验、Transwell实验及细胞划痕实验等观察高表达ALC1基因在食管癌细胞中的增殖、侵袭及迁移作用。  结果  ALC1蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（41.6% vs. 21.2%,P < 0.05）;ALC1的高表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关（P < 0.05）。ALC1高表达的食管鳞癌患者总生存率低。ALC1基因能够促进KYSE30食管癌细胞过度增殖、侵袭和迁移。  结论  ALC1表达升高可能与食管鳞癌的发生、发展相关,导致总生存率下降,高表达的ALC1基因增强KYSE30食管癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,检测ALC1可能为食管癌预后判断提供依据。      

抑制酰基-辅酶A去饱和酶1表达对食管鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制探讨

目的:检测酰基-辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase-1,SCD-1)在食管鳞癌组织和细胞中的表达,分析其表达下调对食管鳞癌EC1细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关的分子机制.方法:采用免疫组织化学和原位杂交法检测60例食管鳞癌组织及其相应癌旁正常食管黏膜组织中SCD-1 mRNA和蛋白的表达,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测正常食管组织(作为阴性对照)和食管鳞癌细胞株中SCD-1 mRNA和蛋白的表达.不同浓度SCD-1小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)转染食管鳞癌EC1细胞后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SCD-1 mRNA和蛋白的表达,应用CCK-8法检测转染前后EC1细胞增殖的变化,FCM检测转染前后EC1细胞凋亡的改变,蛋白质印迹法检测总Akt、p-Akt、bcl-2和bax蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中SCD-1 mRNA和蛋白表达的阳性率显著高于正常食管黏膜组织(P＜0.05),其表达上调与肿瘤组织分级、TNM分期和淋巴结转移密切相关(P＜0.05).此外,与正常食管组织相比,食管鳞癌EC9706、Eca109和EC1细胞中SCD-1 mRNA和蛋白表达均显著上调(P＜0.05),其中EC1细胞中SCD-1的表达水平最高.50 nmol/L SCD-1 siRNA能显著下调EC1细胞中SCD-1 mRNA和蛋白的表达.SCD-1表达下调可显著抑制EC1细胞的增殖,诱导细胞凋亡;同时,显著上调bax蛋白的表达,并下调p-Akt和bcl-2蛋白的表达,但不改变总Akt的表达水平.结论:SCD-1可能在食管鳞癌的发生和发展中具有重要作用,抑制SCD-1的表达有望成为食管鳞癌重要的分子治疗策略之一.     

BNC1调控食管鳞状细胞癌细胞的恶性生物学行为及其可能的作用机制

目的：探讨碱性核蛋白1(BNC1)对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法：通过q PCR法检测ESCC细胞和正常食管上皮细胞中BNC1 m RNA的表达水平,免疫组织化学染色法检测10例ESCC患者癌及癌旁组织中BNC1的蛋白表达水平。利用si RNA敲低BNC1在KYSE-150和KYSE-30细胞中的表达,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术检测BNC1对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡等的影响。通过CHIP-seq实验和GEPIA在线网站数据分析并结合敲低BNC1后的转录组测序数据分析筛选BNC1调控的下游靶基因,q PCR法验证BNC1敲低后靶基因的表达变化,并用双荧光素酶报告基因实验验证BNC1对靶基因的调控作用。结果：BNC1 m RNA和蛋白水平在ESCC组织中较癌旁组织高表达（均P<0.01）。敲低BNC1可明显抑制KYSE-150、KYSE-30细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）,将细胞阻滞于G1期并促进细胞的凋亡（均P<0.01）。CHIP-...     

磷酸化小窝蛋白-1在食管鳞癌中的表达及意义

目的:检测磷酸化小窝蛋白-1（PY14caveolin-1,PY14cav-1）在不同食管组织中的表达,探讨PY14cav-1与食管癌发生、发展的关系。方法:收集60例食管鳞状细胞癌患者手术标本,采用免疫组织化学方法分析和检测PY14cav-1在食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达情况,分析PY14cav-1表达水平与食管癌发生、发展的关系。结果:PY14cav-1在食管鳞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织与食管正常组织中的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。PY14cav-1与食管癌的临床分期呈正相关性,随着肿瘤临床分期的升高表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移组中PY14cav-1的表达明显高于无淋巴结转移组,差异具有统计学意义(P<0.05)。PY14cav-1的表达与肿瘤的分化程度呈负相关性（P=0.034）。结论:PY14cav-1的表达与食管癌分化程度、临床分期和淋巴结转移有关,可能参与了食管癌的侵袭和转移,在食管癌的发生和发展过程中起着重要的作用,很可能成为潜在的治疗靶点及判断食管癌预后有价值的肿瘤标记物。     

FOXK1对肝癌高转移细胞系Huh7侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨叉头框转录因子1(FOXK1)对肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力的影响。方法 采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及其癌旁正常组织FOXK1 mRNA的表达,qRT-PCR和Western blot检测正常肝细胞HL7702、肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白的表达。小RNA干扰技术下调FOXK1表达后,qRT-PCR和Western blot检测肝癌高转移细胞Huh7 FOXK1 mRNA和蛋白的表达,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力。 结果 qRT-PCR检测结果显示,肝癌组织中FOXK1 mRNA的表达高于癌旁正常组织(2.87±0.21 vs 1.35±0.11,P=0.004);qRT-PCR和Western blot检测结果显示,相比正常肝细胞HL7702,肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001)。下调FOXK1表达后,肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),侵袭和迁移细胞数目明显减少(P<0.01)。结论 下调FOXK1表达能抑制肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力。     

miR-1246通过靶向GSK3β促进食管癌转移的机制

目的:探讨miRNA-1246(miR-1246)促进食管癌细胞转移的作用及其机制.方法:Realtime-PCR法检测miR-1246在癌旁组织、食管癌组织、正常食管上皮和食管癌细胞系中的表达差异.Transwell侵袭实验观察转染miR-1246 mimics或inhibitors对食管癌细胞EC109转移能力的影响;裸鼠尾静脉转移实验观察稳定表达miR-1246对食管癌转移能力的影响;生物信息学分析miR-1246的候选靶基因为GSK3β,荧光素酶报告基因实验检测过表达miR-1246后EC109细胞中野生型和突变型GSK3β的荧光素酶活性.Westernblot检测miR-1246对GSK3β蛋白表达的影响.结果:食管癌组织中的miR-1246表达显著高于癌旁组织（P<0.05);多个食管癌细胞中miR-1246的表达比正常食管上皮细胞Het-1A明显增高（P<0.05).与阴性对照相比,miR-1246 mimics显著促进EC109细胞的侵袭能力（P<0.05).反之,miR-1246 inhibitors明显抑制EC109细胞的侵袭能力（P<0.05);体内实验发现稳定过表达miR-1246明显升高EC109细胞的肺转移能力.荧光素酶报告基因结果证实miR-1246能够抑制GSK3β的3'-UTR区荧光素酶活性;转染miR-1246后,EC109细胞中的GSK3β蛋白水平明显低于对照组;miR-1246过表达显著抑制GSK3β-wt,而不能抑制GSK3β-mut的蛋白表达.结论:miR-1246能够通过靶向GSK3β促进食管癌转移,抑制miR-1246的表达或增加GSK3β的表达可能是抑制食管癌转移的有效手段.     

长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌患者临床病理参数之间的关系,分析HAGLROS对食管鳞癌细胞增殖及转移的影响.方法 运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HAGLROS在42对食管鳞癌组织与癌旁食管正常组织及食管上皮细胞Het1A及食管鳞癌细胞EC109和KYSE30...     

肝癌中Tiam-1和HPA-1的表达及其与侵袭转移的关系

  目的   探讨Tiam-1和HPA-1基因在肝癌中的定量表达及其与肝癌侵袭转移的关系。   方法   选取2009年5月至2012年1月行手术治疗的肝癌患者65例。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测Tiam-1 mRNA及HPA-1 mRNA在原发性肝细胞肝癌、配对癌旁组织（距癌2 cm）及正常肝脏组织中（距癌>5 cm）的表达水平,并分析两者与肝癌临床病理参数的关系。   结果   肝癌组织中Tiam-1 mRNA的表达水平（43.83±11.62）显著高于癌旁组织（14.82±8.16）和正常肝脏组织（6.02± 5.36）（均P < 0.05）,癌旁组织中Tiam-1 mRNA的表达水平高于正常肝脏组织（P < 0.05）。肝癌组织中HPA-1 mRNA的表达水平（35.28±11.81）显著高于癌旁组织（12.94±6.25）和正常肝脏组织（4.17±3.49）（均P < 0.05）,癌旁组织中HPA-1 mRNA的表达水平高于正常肝脏组织（P < 0.05）。Tiam-1及HPA-1的表达增强与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、血行转移及TNM分期显著相关（均P < 0.05）。Spearman等级相关分析证明了Tiam-1和HPA-1的表达呈明显正相关（OR=0.523,P < 0.05）。   结论   Tiam-1 mRNA和HPA-1 mRNA在肝癌组织中呈高表达,且两者的表达增强可促进肝癌的侵袭转移。联合检测Tiam-1及HPA-1对于指导肝癌临床治疗及判断预后有重要价值。      

RNAi干扰食管癌EC9706细胞MTA1基因表达对侵袭和迁移的影响

Objective  To observe the effect of MTA1 gene silencing by RNA interference on invasion and migration of esophageal carcinoma 9706 cells. Methods  siRNA expression vector targeting MTA1 gene was transfected into EC9706 cells by Lipofectamine method. MTA1 mRNA and protein expressions were detected through quantitative RT-PCR and Western Blot, respectively. The invasion and migration of EC9706 cells were evaluated by scrape wound healing assay and cell invasion assay in vitro. Results  MTA1 gene expression decreased significantly. The scrape wound of EC9706 cells healed more slowly and the cell population that cut through Matrigel were less in the EC9706 cells transfected with siRNA expression vector than non-transfected EC9706 cells and EC9706 cells transfected with blank vector (P < 0.05). Conclusion  MTA1 gene silencing by RNAi can inhibit the invasion and migration of esophageal carcinoma effectively. It is supposed that MTA1 gene may be a prospective molecule target in tumor therapy. Supported by a grant from the “Tenth Five-Year Plan” Research Foundation for the Key Construction Project (211 Projects) by Ministry of Education of China (2002).     

MRP和P—gp与食管鳞癌发生发展的关系研究

目的探讨MRP、P-gP在食管鳞癌中的表达情况及与食管鳞癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学sP法研究了49例食管鳞癌组织中MRP和P-gp的表达情况,探讨二者与肿瘤发生发展的关系。结果49例食管鳞癌癌组织、癌旁非典型增生组织、正常食管黏膜组织MRP阳性表达率分别为63．3％（31／49）、40．0％（12／30）和20．4％（10／49）。癌组织中MRP阳性表达率与相应的癌旁组织、正常食管黏膜组织比较,差异有显著性（P〈0．05）。49例食管鳞癌癌组织、癌旁非典型增生组织、正常食管黏膜组织中P-gP阳性表达率分别为61．2％（30／49）、36．7％（11／30）和18．4％（9／49）。癌组织中P-gp阳性表达率与相应的癌旁组织、正常食管黏膜组织比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中MRP和P—gP阳性表达率均依次降低,并且癌组织与癌旁不典型增生组织和正常黏膜组织中MRP和P—gP阳性表达间相比,差异有显著性,表明MRP和P-gP参与食管鳞癌的发生发展过程,可作为食管上皮细胞恶性转化的标志。     

Intensive expression of UNC-51-like kinase 1 is a novel biomarker of poor prognosis in patients with esophageal squamous cell carcinoma

The serine/threonine kinase UNC-51-like kinase 1 (ULK1) plays an essential role in autophagosome formation, although the exact molecular mechanism is unknown. The present study was first to investigate the clinical and prognostic significance of ULK1 in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Protein and mRNA levels of ULK1 in normal esophageal epithelial cells, ESCC cell lines, paired ESCC lesions and the adjacent noncancerous tissues were examined using western blot and real-time RT-PCR. The results showed that only the ULK1 protein level was upregulated in ESCC samples compared with normal esophageal cells and tissues. Also, we found that protein stabilization of ULK1 was higher in ESCC cell lines. Furthermore, immunohistochemical staining of ULK1 was performed on the tissue microarray containing 248 ESCC and 51 normal esophageal tissues. A total of 70.2% ESCC specimens showed intensive expression of ULK1 in contrast to the undetectable expression of ULK1 in normal esophageal tissues. Statistical analysis revealed that ULK1 expression was significantly correlated with T status (P = 0.048). Moreover, patients with higher ULK1 expression were associated with shorter overall survival time. Multivariate analysis suggested that ULK1 expression and N status (P < 0.001) were independent prognostic indicators for the survival of patients. Functional studies showed that suppression of ULK1 expression in ESCC cell lines by specific small interfering RNA resulted in inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis under starvation conditions. These findings provide evidence that ULK1 represents a novel and clinically useful biomarker for ESCC patients and plays an important role during the progression of ESCC.