黄芪甲苷对体外神经干细胞增殖作用影响的研究

目的探讨黄芪甲苷(astragaloside,AS)对神经干细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠胎鼠神经干细胞,Nestin免疫化学染色鉴定NSCs,BrdU标记鉴定NSCs增殖。BrdU标记免疫细胞化学染色检测神经干细胞增殖能力。实时定量PCR技术探讨黄芪甲苷促进NSCs增殖的作用机制。结果Nestin鉴定为阳性,Brdu标记亦呈阳性;BrdU标记结果表明,黄芪甲苷高、中、低剂量组NSCs的增殖率明显提高(P<0.05,P<0.01)。实时定量PCR结果表明在诱导NSCs增殖过程中,黄芪甲苷高剂量组Hes5基因表达增加(P<0.05)。结论黄芪甲苷对NSCs增殖具有明显的诱导作用,其可能通过上调与细胞增殖相关基因Hes1、Hes5、cyclinD1表达而起作用,但也可能调节与其它增殖通路有关。     

黄芪甲苷对大鼠海马源神经干细胞体外增殖的影响

目的观察黄芪甲苷对神经干细胞（NSC）体外增殖的影响,为神经干细胞应用于临床提供理论依据。方法利用无血清培养技术,从新生大鼠海马区分离培养NSC,并进行体外扩增、传代。取传至第3代的NSC,观察不同浓度黄芪甲苷（40、80、120mg／L）对其增殖的影响。对神经球形成数进行计数并进行噻唑蓝（MTT）比色分析。结果40mg／L和80mg／L黄芪甲苷实验组神经球形成数和细胞吸光度值均明显高于对照组（神经球形成数：8．1±1．4,8．8±1．3比7．2±1．2;细胞吸光度值：0．87±0．02、0．89±0．03比0．694-0．03,P〈0．05或P〈0．01）,而120mg／L黄芪甲苷组实验组神经球形成数和细胞吸光度值（分别为3．1±1．2、0．30±0．02）低于对照组（P〈0．01）。结论在一定浓度范围内,黄芪甲苷可促进体外培养NSC的增殖。     

黄芪甲苷促进脐带血干细胞向心肌细胞分化作用的研究

目的探讨黄芪甲苷对脐带血间充质干细胞向心肌细胞分化的作用。方法采用贴壁法分离人脐带血间充质干细胞,用流式细胞术对细胞表型进行鉴定。通过免疫组化方法观察黄芪甲苷对间充质干细胞向心肌细胞分化的促进作用。结果流式细胞仪检测结果表明,分离的脐带血间充质干细胞表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34和HLA-DR。黄芪甲苷（浓度200 mg/L）作用下,间充质干细胞表达特异性心肌细胞蛋白,包括结蛋白（desmin）、α横纹肌肌动蛋白（-αsarcomeric actin）和肌钙蛋白T（C-TnT）。结论黄芪甲苷对脐带血间充质干细胞分化的促进作用,分化的心肌细胞在心肌损伤性疾病的潜在的治疗价值值得进一步研究。     

黄芪甲苷和齐墩果酸对体外神经干细胞增殖和Jagged1 mRNA表达的影响

目的 观察黄芪甲苷和齐墩果酸对体外神经干细胞增殖和相关基因Jagged1表达的影响。方法 采用机械吹打法从胎鼠脑内获得神经干细胞,随机分组,分别给予不同浓度(10^-6,5×10^-7,10^-7,5×10^-8,10^-8,5×10^-9,10^-9 mol·L^-1)的黄芪甲苷、齐墩果酸进行干预,72 h后用WST法检测细胞的增殖情况,PCR检测Jagged1表达水平。结果 黄芪甲苷对体外神经干细胞增殖影响不显著,高剂量尚存在细胞毒性。齐墩果酸能促进神经干细胞增殖,且呈一定的剂量效应关系,与对照组和黄芪甲苷组比较均有显著差异(P<0.05)。细胞未分化状态下Jagged1基因存在一定的表达,增殖率越高Jagged1表达水平越高;与同浓度黄芪甲苷组比较,齐墩果酸显著上调Jagged1表达(P<0.05)。结论 不同浓度的黄芪甲苷和齐墩果酸对体外培养神经干细胞增殖和Jagged1表达的影响不同;齐墩果酸作用优于黄芪甲苷。     

黄芪甲苷的神经保护作用研究进展

黄芪是一种补中益气、利水消肿的传统中药。现代医学研究表明,黄芪甲苷是黄芪的主要活性成分,具有多种生物活性作用,在中枢神经系统发挥特殊的保护作用。星形胶质细胞及小胶质细胞的TLR4,NF-κB和NLRP3炎症小体过度活化是中枢神经系统最常见的病理变化,引起的神经炎症会导致神经元损伤、认知功能损伤等。黄芪甲苷显著抑制中枢神经系统炎症,缓解神经炎症导致的器质性损伤。同时黄芪甲苷也能够激活mTOR信号通路,降低胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9水平,提高Livin,LC3-Ⅱ,Beclin-1,Atg5和LAMP2的水平,从而起到保护神经元免于凋亡。线粒体功能紊乱是细胞氧化应激的重要原因,黄芪甲苷通过调节线粒体渗透性转变、膜电位下降及ROS生成,提高脑组织中SOD,GSH-Px和CAT活性,抑制NF-κB转位、Bcl-2水平的下调及胱天蛋白酶3活化,可起到抗氧化作用,对神经退行性疾病具有明显的缓解作用。黄芪甲苷还能提高NGF m RNA表达,促进海马区神经干细胞增殖及分化;上调视神经损伤大鼠视网膜组织NGF与TrkA的表达,提高NF-κB转录水平,促进视神经修复和神经再生。     

神经干细胞分化研究进展

20世纪90年代脑科学进入了飞速发展的时期。1992年Reynolds等[1]首先从成年鼠纹状体分离出神经干细胞(neuralstemcell,NSC),从而提出了被大家普遍认可的神经干细胞的概念,即指一类具有自我更新能力、高增殖潜能以及多种分化潜能的细胞。神经干细胞概念的提出打破了成年动物神经     

HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量

用ＨＰＬＣ法测定了黄芪甲苷含量．样品从东北黄芪中提取,用色谱纯甲醇溶解并稀释,采用ＹＷＧ Ｃ１８ 柱,流动相为甲醇,在２０５ ｎｍ 下检测,灵敏度为０－１ ＡＵＦＳ,测定了黄芪甲苷的含量．平均回收率为９６－１ ％ ,ＲＳＤ 为２－１５ ％ ,结果表明,样品浓度在０－０１ ～０－２ ｍｇ／ｍＬ 之间与峰面积成良好的线性关系．     

黄芪甲苷在黄芪主根侧根的分布

目的:测定黄芪中黄芪甲苷的含量分布.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定.结果:黄芪中黄芪甲苷在主根中含量M:0.0640% 侧根中含量M:0.0969% 结论:黄芪中黄芪甲苷含量侧根远高于主根,为黄芪药材的选择提供新的参考.     

HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

目的:建立HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。方法:采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定,Phenomenex公司LunaC18色谱柱(5μm,150mm×4.6mm),流动相为甲醇鄄水(75∶25);流速:1.0ml/min;ELSD参数:漂移管温度40℃;氮气压力:2.0Bar。结果:平均回收率为98.23%,RSD=1.87%。结论:该方法对黄芪甲苷的测定良好。     

HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

目的采用HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。方法HPLC-ELSD法,汉邦C18柱(4.6 mm×150 mm),流动相:乙腈-水(40∶60),流速:1.0 m l;ELSD参数:漂移管温度:105℃,载气流速为2.8 L.m in-1。结果黄芪甲苷在4.0~18.0μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999(n=6),平均回收率为98.0%。结论该方法分离度高,重现性好,简便,准确,可广泛用于黄芪药材的质量控制。研究发现,实验所用样品前处理过程中是否用氨试液洗涤,显著影响黄芪甲苷的含量测定。     

黄芪甲苷对肾脏保护作用机制的研究进展

黄芪甲苷是中药黄芪的主要活性成分之一,研究证实具有抗氧化应激、抗炎、抗纤维化等作用,能保护肾脏并延缓慢性肾病进展,有望开发成治疗肾脏疾病的新药。本文将对近年黄芪甲苷保护肾脏的作用机制作一综述。     

黄芪中黄芪甲苷提取条件的考察

目的考察黄芪的最佳提取工艺。方法通过正交试验,以黄芪甲苷的得率为指标,考察加水量、煎煮时间及次数对提取效果的影响。结果黄芪的最佳提取工艺为煎煮2次,每次加水12倍,煎煮2h。结论最佳提取工艺提净率高、简单、方便。     

黄芪甲苷生物活性研究进展

目的:综述黄芪甲苷生物活性的研究进展。方法:参阅国内、外文献,分别从对心脏、脑、肝、肾的保护作用,抗高糖作用、抗衰老作用、对血管影响、抗病毒等方面对黄芪甲苷的生物活性和研究进展进行较为详细的介绍和总结。结果与结论:黄芪甲苷具有保护受损脏器和组织等广泛生物活性,药理作用显著,有望成为疾病治疗和康复用药物,具有广阔的市场发展空间。黄芪甲苷在联合用药方面的研究是一个值得深入发掘区域和研究方向。黄芪甲苷药理活性的深入研究,将为临床应用提供理论依据,促使其在市场更广泛的应用,造福于人类的医药事业。     

黄芪甲苷体外抗腺病毒作用研究

目的研究黄芪甲苷体外抗腺病毒作用。方法采用细胞病变效应(CPE)抑制实验和噻唑蓝(MTT)比色法观察黄芪甲苷对人腺病毒3型(HAdV3)的抑制作用,激光共聚焦显微镜荧光分析检测黄芪甲苷在病毒生物合成阶段对HAdV3六邻体(hexon)蛋白表达的影响。结果 CPE及MTT结果表明黄芪甲苷对腺病毒有直接灭活作用,同时能够抑制腺病毒的复制和吸附,病毒抑制率与药物浓度呈正相关,但在细胞保护作用方式下黄芪甲苷不能阻断病毒进入细胞。在生物合成阶段黄芪甲苷组与病毒对照组比较hexon蛋白的表达明显降低。结论黄芪甲苷在体外具有抗腺病毒作用,黄芪甲苷抗腺病毒作用可能与其在生物合成阶段抑制hexon蛋白的表达有关。     

复方黄芪片中黄芪甲苷含量测定方法研究

目的 探讨黄芪甲苷含量测定方法。方法 采用薄层扫描法对复方黄芪片中黄芪甲苷进行含量测定。检测波长为530nm,展开剂为氯仿-甲醇-水(30：10：1);显色剂为10％硫酸乙醇液。结果 黄芪甲苷在1023．2～8185．6ng范围内线性关系良好(r=0．9994),平均回收率为97．41％,RSD为0．64％。结论 该方法简便,专属性强,稳定性好,可作为复方黄芪片黄芪甲苷含量测定的质量控制标准。     

HPLC-ELSD法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量

黄芪是豆科植物内蒙黄芪Astragalus m em branaceus（Fisch）Bge．vat．m onghoL icus（Bge）Hsiao和膜荚黄芪AstragaLus m em branaceus（Fisch）Bge的干燥根,有补益中气,养血活血,利水消肿,托脓生肌,固表止汗等功效。黄芪甲苷是参芪扶正注射液中的主要活性成分之一,其含量测定方法有薄层扫描法、比色法、HPLC法和HPLC—ELSD法等。     

正交法研究黄芪甲苷的提取工艺

黄芪中含有黄芪多糖、黄芪甲苷和数种氨基酸。中华人民共和国药典95版对黄芪的含量测定指标是黄芪甲苷不得少于0.04％。为保证黄芪中有效成分黄芪甲苷能够充分提取,我们在2000年7月通过正交设计对黄芪甲苷的提取工艺进行筛选,在实验设计范围内优化了最佳提取工艺条件。现将方法及结果分析报告如下。     

HPLC测定黄芪精中黄芪甲苷的含量

目的：测定黄芪精中黄芪甲苷的含量,方法：采用HPLC法。色谱柱Ultrasphere-ODS 5um 4.5mm*25cm;流动相乙腈0．1％磷酸（33：67）,;检测波长203nm,流速1ml.min^-1, 结果：平均回收率98．20％,RSD2．13％,结论：本方法可用于黄芪精中黄芪甲苷的含量测定。     

黄芪多糖与黄芪甲苷配伍对辐射损伤模型小鼠的保护作用

目的:研究黄芪多糖与黄芪甲苷配伍对辐射损伤模型小鼠的保护作用。方法:100只雌性ICR小鼠随机分为正常对照(等容生理盐水)组、黄芪多糖对照(80 mg/kg)组、黄芪甲苷对照(80 mg/kg)组、模型(等容生理盐水)组、黄芪多糖(80 mg/kg)组、黄芪甲苷(80 mg/kg)组与联合用药①、②、③、④(黄芪多糖80、40、20、80 mg/kg+黄芪甲苷20、40、80、80 mg/kg)组。灌胃给药,每天1次,连续14 d。末次给药后小鼠接受60Coγ射线(剂量:5 cy)一次性全身辐射以复制辐射损伤模型。测定小鼠30 d存活率和死亡小鼠平均存活时间;肝脏HE染色光镜下观察小鼠肝组织形态学;测定小鼠外周血白细胞数、骨髓细胞DNA含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠30 d存活率降低,死亡小鼠平均存活时间缩短;小鼠肝细胞广泛肿胀,出现大滴性脂肪变、气球样变,肝脏细胞点状坏死严重,炎性因子大面积浸润组织;外周白细胞计数减少;骨髓细胞DNA含量减少;血清SOD活性减弱,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,联合用药①、②、③、④组小鼠30 d存活率升高,死亡小鼠平均存活时间延长,外周白细胞计数增加,骨髓细胞DNA含量增加,小鼠肝细胞形态学明显改善;联合用药①、②、③组小鼠血清中SOD活性增强,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:黄芪多糖与黄芪甲苷配伍是通过多靶点发挥作用,其中黄芪多糖与黄芪甲苷质量比为4∶1时配伍效果最佳。