NCCLS评价方案在肌红蛋白免疫比浊法的方法学评价中的应用

[目的]应用NCCLS评价方案对人血浆肌红蛋白免疫比浊检测法进行评价，进而探讨该方法在早期诊断急性冠脉综合征的临床检测价值。[方法]对肌红蛋白免疫比浊法的精密度、灵敏度、干扰、线性、标本储存条件进行评价。其中精密度、干扰、线性的评价按照NCCLS评价方案进行。[结果]免疫比浊法的精密度良好，MYO高、中、低（420、102、45ng,／ml）3个水平的批内变异、批间及总变异均小于5％。灵敏度为1ng／ml，在0—750ng／ml有良好的线性（Y=0．198＋0．994X）。脂血、黄疽、溶血对实验结果基本无影响。在避免反复冻溶的情况下标本保存温度和时间对实验结果无影响。[结论]免疫比浊法检测人血浆中的肌红蛋白准确、灵敏、可靠，可以很好的应用于急性冠脉综合征的早期诊断和溶栓疗效的监测。     

尿RBP胶乳增强免疫比浊检测方法的建立及性能评价

目的根据胶乳增强免疫比浊原理,建立一种尿视黄醇结合蛋白(RBP)检测方法。方法将RBP多克隆抗体标记到胶乳微球表面,利用抗原抗体凝集反应原理,建立了尿RBP免疫检测方法,并对本方法进行了精密度、准确度、线性、稳定性试验和相关性试验。结果本检测方法的灵敏度为0.2 mg/L,对浓度为1.07 mg/L的低值质控品重复测定20次,其精密度为2.28%;线性范围为0.5~10.0 mg/L,对高、低浓度质控品的相对偏差为-6.03%和-2.95%,与RBP酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒的决定系数R2为0.998 6。结论该研究建立了尿RBP胶乳增强免疫比浊检测方法,各项性能指标均达到临床检测要求,可用于临床尿RBP浓度的检测。     

2种肌红蛋白检测试剂的比较

目的比较2种肌红蛋白检测试剂盒的敏感性和相关性。方法收集冠心病患者和健康体检者的血液标本,分别用肌红蛋白免疫比浊法检测试剂盒（北京九强生物技术股份有限公司）和肌红蛋白酶联荧光法检测试剂盒（法国生物梅里埃公司）进行肌红蛋白定量检测,对检测结果进行X2检验和关联性分析。结果120例冠心病患者标本中,九强试剂盒检出93例阳性（77．5％）,梅里埃试剂盒检出62例阳性（51．7％）,经X2检验,2种试剂盒测定的阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）。60例健康体检者标本中,九强试剂盒检出1例阳性,梅里埃试剂盒未检出阳性,经X2检验,2种试剂盒测定的阴性率差异无统计学意义（P〉0．05）。经关联性分析,2种试剂盒的相关系数（r）＝0．94。结论两种检测试剂盒检测结果关联性好,都具有很好的稳定性和特异性,但是九强试剂盒的敏感性明显优于梅里埃试剂盒,能够为医生提供更可靠的结果,有效降低临床漏诊率。     

两管法处理免疫比浊中抗原过剩

2在免疫比浊法测定中，抗原抗体反应是按一定分子比例结合的；（1）当比例适合时，免疫反应最完全，当抗原或抗体过剩特别是抗原过剩时，免疫反应将减弱。对处理抗原过剩的问题，国内曾有过报道，但由于基层医院设备限制，本文仅以IgA测定为例，进行两管法探讨。1．材料与方法1．1试剂：抗IgA抗体及参考血清，上海精细化学研究所提供，效期内使用。1．2仪器：BT224半自动生化分析仪37℃普通水温箱1．3方法：免疫比浊测定。自编程序，参数有：TEMP37℃FILTER1：340nmMODE（N）：ABS样品与试剂比1：50，测定管采用常量测定和半量测…     

免疫比浊实验中多点定标模式的探讨

免疫比浊实验的标准曲线制作一般是采用多点定标，胶乳增强免疫比浊的有些实验项目却可以采用单点定标，这是与传统的认识相违背的。我们从理论上分析了这两种不同的定标方式的理论依据。     

测定CystatinC和β2-微球蛋白的颗粒增强透射免疫比浊试剂盒抗干扰性能评价

目的对测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C,Cys C)和β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)的颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)试剂盒的抗干扰性能进行评价。方法根据CLSI EP7-A2文件,对PETIA法Cys C和β2-MG试剂盒进行干扰评价试验。结果配对差异实验结果显示:1 000 U/L类风湿因子(RF)、1 450浊度乳糜微粒、342μmol/L游离胆红素(F-Bil)、342μmol/L结合胆红素(C-Bil)、30 mg/L维生素C(Vit C)对Cys C和β2-MG测定无干扰,5 g/L血红蛋白(Hb)对高浓度Cys C和低浓度β2-MG测定均有干扰;5个浓度系列的剂量效应实验结果显示,Hb对Cys C和β2-MG测定可产生非线性干扰。结论 PETIA法测定Cys C和β2-MG试剂盒具有较强的抗干扰能力,基本能满足临床需求。     

透射免疫比浊法定量测定血清中D—二聚体的实验评价

目的 对透射免疫比浊法定量测定血清D—二聚体的方法进行临床实验评价。方法 实验评价包括精密度、线性测定、回收实验以及干扰实验。结果 该D—二聚体定量测定试剂在精密度测定CV％小于5％。回收率在95～99％。线性测定良好，可达16μg／ml，回归方程为Y=1．0133X—0．0076，相关系数r=0．9997。对胆红素、血红蛋白、甘油三酯均具有很好的抗干扰能力。结论 该试剂符合临床使用的要求。     

全自动生化分析仪精密度评价表格的设计

目的为保证结果判断的一致性和提高统计效率,设计能自动计算精密度各项指标和进行最终结论判读的评价表格。方法利用EXCEL2007强大的计算统计功能和开放的VBA编程功能,主要涉及的函数有OFFSET函数,SQRT函数,SUMXMY2函数,POWER函数、LOOKUP函数和IF函数。结果在实验数据录入的基础上,自动计算精密度评价的各项指标(批内精密度、批间精密度、日间精密度和室内精密度),并根据各项指标计算结果进行结论判断,得出精密度评价的最终结论。结论精密度评价表格保证了结果判读的一致性和提高了统计效率,减轻了课题参与人员的计算工作量,提高了对课题的依从性,保证了课题的顺利进行,也可以在检验科的日常工作中借鉴使用。     

免疫透射比浊法与免疫散射比浊法检测特定蛋白的比较研究

目的 对免疫透射比浊法测定血清特定蛋白的方法学性能进行初步评价,并与免疫散射比浊法进行比较.方法 应用Roche Modular P全自动生化分析仪与Dade Behring BN ProSpec(现为SIEMENS西门子)特定蛋白测定仪对IgG,IgA,IgM,C3,C4,CRP和hs-CRP 7种血清蛋白进行初步的方法学评价,包括透射比浊法与散射比浊法的精密度分析,相关性及线性回归试验.结果 ①免疫透射比浊法无论是批内精密度还是批间精密度都非常好,CV均＜5%.免疫透射比浊法的精密度要优于免疫散射比浊法.②免疫透射比浊法与免疫散射比浊法从低检测范围到高检测范围,均有着良好的线性回归,斜率均接近于1,截距均接近于0.两法的r均＞0.975.③全自动生化分析仪上的线性检测功能可发现特殊样本的抗原过剩问题.④免疫透射比浊法还具有成本低,收费低,速度快等优点.结论 免疫透射比浊法具有优良的精密度及分析灵敏度和检测范围,与免疫散射比浊法相关良好,系统误差较小,且更加实用和便利.     

不同肌红蛋白检测系统的性能评估

目的评估四种肌红蛋白（Myoglobin,Mb）检测系统的分析性能。方法评价的性能指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关性及偏倚。结果肌红蛋白浓度在37．3—330．4ng／mL时,各家试剂的总CV均〈6％。各家试剂在各自的线性范围内线性良好,其理论值与实测值存在偏倚小。血红蛋白≤384mg／dl,胆红素≤24．8mg／dl,甘油三酯≤19．2mmol／L时对各厂家试剂检测均无显著性影响（干扰〈10％）。相关性分析结果表明,各系统间相关性良好,但存在一定的偏倚。系统预期偏倚在100—500ng／mL范围内,随肌红蛋白浓度的增高而降低。结论各厂家试剂的精密度、线性范围、抗干扰性符合临床使用要求,但系统间测定结果存在一定偏差。     

CLSI EP7-A2文件在临床化学分析干扰试验中的应用评价

目的探讨美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP7-A2文件在临床化学分析干扰评价试验中的应用价值。方法根据CLSI EP7-A2文件,利用已开发上市的干扰试剂盒对前白蛋白（PA）进行干扰评价试验。结果配对差异实验结果显示0.2 g/L游离胆红素（FBil）、0.4 g/L结合胆红素（CBil）和2.41 g/L血红蛋白（Hb）对PA测定无干扰,835浊度的乳糜对PA测定有负干扰。5个浓度系列的剂量效应实验结果显示乳糜浊度对PA测定可产生线性负干扰。结论依据EP7-A2文件,利用已开发上市的干扰试剂盒,应用医学统计软件统计分析,是一个具有一定应用价值的分析干扰评价方法。     

CLSI EP7-A2文件在临床化学分析干扰试验中的应用评价

目的探讨美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP7-A2文件在临床化学分析干扰评价试验中的应用价值。方法根据CLSI EP7-A2文件,利用已开发上市的干扰试剂盒对前白蛋白(PA)进行干扰评价试验。结果配对差异实验结果显示0.2 g/L游离胆红素(FBil)、0.4 g/L结合胆红素(CBil)和2.41 g/L血红蛋白(Hb)对PA测定无干扰,835浊度的乳糜对PA测定有负干扰。5个浓度系列的剂量效应实验结果显示乳糜浊度对PA测定可产生线性负干扰。结论依据EP7-A2文件,利用已开发上市的干扰试剂盒,应用医学统计软件统计分析,是一个具有一定应用价值的分析干扰评价方法。     

磁珠分离酶联免疫测定法在检测人血清肌红蛋白中的应用

目的　建立一种宽范围的定量检测人血清肌红蛋白(Mb)的磁珠分离酶联免疫测定法。方法　使用 国产聚苯乙烯磁珠,经碳化二亚胺活化表面自由羧基,得以与抗Mb单抗偶联,用此抗体包被磁珠作为固相,另 一Mb单抗标记辣根过氧化物酶,做双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清Mb,共检测临床血清标 本50份,并与常规板式ELISA作对比。结果　磁珠酶免疫定量检测方法用于人血清Mb定量检测范围可从常 规板式ELISA的5～200μg/L扩展到5～1000μg/L。结论　利用国产磁珠建立的磁珠分离酶免疫定量检测 Mb方法优于常规板式ELISA。     

肌红蛋白在急性冠状动脉综合征诊断和治疗中的应用价值

目的探讨肌红蛋白(MYO)检测在急性冠状动脉综合征(ACS)发病早期诊断和溶栓再通效果监测的应用价值。方法应用免疫比浊法检测胸痛患者入院即刻血浆中的MYO、肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量并比较其在不同时点的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。对实施冠状动脉造影的病例观察其冠状动脉病变的严重程度与MYO的相关性。观察MYO在溶栓前后的变化。结果入院即刻心梗组的MYO、cTnT、CK、CK-MB分别为(56±34)μg/L,(0．05±0．03)μg／L,(94±84)U／L,(17±13)U／L,均高于健康对照组(P<0．05),并且Q波心梗组(263±182)μg／L明显高于非Q波心梗组(165±102)μg／L,P<0．01。不稳定性心绞痛组的MYO(56．48±33．59)μg／L高于健康对照组(P<0．01),不稳定性心绞痛组CK、CK-MB与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)。MYO在胸痛发作8 h时敏感度最高,特异度在发病24 h内高于cTnT(P<0．01),与CK-MB差异无统计学意义(P>0．05)。MYO和CK-MB的阳性预测值在发病24 h内均高于cTnT,阴性预测值在4 h MYO高于cTnT和CK-MB(P<0．01)。冠状动脉造影多支病变组的MYO含量(167±72)μg／L高于单支和早期病变组(P<0．01),早期病变组与单支组差异无统计学意义(P>0．05)。MYO在溶栓术后在血浆中含量明显升高,酶峰出现在5．26 h,比CK、CK-MB明显提前(P<0．01)。结论MYO是一个灵敏、可靠的早期诊断ACS和监测溶栓疗效的指标,联合CK、CK-MB、cTnT测定更有意义。     

Determination of myoglobin: comparative evaluation of the new automated VIDAS assay with two other immunoassays

OBJECTIVES: Myoglobin provides the earliest indication of acute myocardial infarction. In this study, the new myoglobin assay for the VIDAS system (bioMérieux) was evaluated. DESIGN AND METHODS: This assay, using an enzyme-linked fluorescent immunoassay (ELFIA) method, was compared with the Olympus immunoturbidimetric method and with another immunometric method (Immulite turbo) using an enzyme-linked chemiluminescent immunoassay (CLIA). RESULTS: The CVs for within-and between-run reproducibility are very similar for the tested methods and acceptable linearity ranges were obtained. No significant interference of hemolysis, turbidity and icteria was observed. In the whole cohort, we obtained decreased values over the entire range of the assay with VIDAS and Immulite turbo methods compared to the Olympus assay; this is probably mainly linked to differences in standards used due to the absence of international standardization of the myoglobin determination. CONCLUSIONS: The new VIDAS myoglobin automated assay provides biologists with a rapid, accurate and reliable determination of myoglobin in plasma samples collected during cardiac workup.     

Rapid fall in blood myoglobin in massive rhabdomyolysis and acute renal failure

Objective Myoglobin kinetics of removal from the circulation were studied in patients following massive rhabdomyolysis, to see if myoglobin remains for long in the circulation in the anuric state and if myoglobin elimination was affected by therapeutic manipulation such as haemofiltration or haemodialysis.Design Randomised and controlled study.Setting Intensive care unit of a tertiary care teaching hospital.Patients 26 patients of rhabdomyolysis whose serum myoglobin exceeded more than 500 nmol/l. Thirteen patients developed acute renal failure and underwent treatment with blood purification (Group HD). The remaining 13 patients did not require treatment with blood purification (control subjects, Group non-HD).Interventions In patients of group HD, twelve were treated with haemofiltration and/or haemodialysis. One was treated with peritoneal dialysis. The patient of group non-HD were treated with fluid infusion alone.Measurements and results The serum concentrations of myoglobin were serially determined. The highest levels of myoglobin was 1641±484 nmol/l (mean±SEM) in the group non-HD and were 8957±2300 in the group HD. In the group non-HD, the blood myoglobin fell exponentially once myoglobin release into the circulation ceased. This was also noted in the group HD. The exponential decrease was observed even on the days when the patient passed little urine or treatment with blood purification was not performed.Conclusion In patients with massive myoglobinaemia, the blood myoglobin rapidly fell independent of renal function or any therapeutic manipulation. The results indicate that extrarenal factors played a major role in disposing circulating myoglobin in such patients.     

Mb和cTn对AMI诊断的价值及文献评价

目的运用循证医学（EBM）理论,研究和评价有关肌红蛋白（Mb）和肌钙蛋白（cTn）对急性心肌梗死（AMI）诊断的文献,探讨Mb和cTn对AMI诊断的价值。方法按照EBM标准,对1994—2005年间《中国学术期刊检索数据库》、《中国生物医学期刊数据库》、《外文生物医学期刊文献数据库》中以Mb、肌钙蛋白I（cTnI）或肌钙蛋白T（cTnT）作为检测指标诊断AMI的全部文献（包括论文、综述、摘要）进行回顾性检索并作出评价。结果1994—2005年间共检索到目标文献中文93篇,英文30篇,多数文献设有临床对照试验（中文占94．5％,英文占53．3％）、盲法研究（中文占19．8％,英文占10．0％）及随机对照组（中文占9．9％,英文占16．7％）;42篇文章未提供基线资料。结论通过分析、研究和评价目前国内外应用Mb和cTn对AMI诊断的文献,表明Mb和cTnI联合检测能体现最佳的灵敏度和特异性,对AMI的早期诊断具有非常重要的临床意义。     

SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪计数有核红细胞的准确性评价

目的探讨SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪(简称XN-1000)计数有核红细胞(NRBC)的准确性。方法应用XN-1000对66例外周血标本进行NRBC检测,同时用流式细胞仪(FCM)和显微镜(镜检法)对同一份外周血的NRBC百分率进行计数。以镜检法为金标准,比较不同方法的计数结果。结果 XN-1000与镜检法检测NRBC有较好的相关性(r=0.927),但低于FCM与镜检法NRBC的相关性(r=0.956),XN-1000与FCM检测NRBC的相关性较高(r=0.994)。XN-1000、FCM计数结果与镜检法的结果间差异均无统计学意义(P0.05)。XN-1000检测NRBC%较FCM法有更高的诊断特异性(95.7%)。结论 XN-1000能快速、准确、有效地自动计数外周血NRBC。