金黄色葡萄球菌的基因芯片检测研究

目的用基因芯片对临床标本进行金黄色葡萄球菌快速检测。方法抽取180例临床标本,其中160例常规细菌培养鉴定疑似金黄色葡萄球菌感染和20例非金黄色葡萄球菌感染,金黄色葡萄球菌质控菌株(ATCC25923)、大肠埃希菌(ATCC25922)采用研究制备出金黄色葡萄球菌筛查的基因芯片进行测定,同时进行比对分析。结果金黄色葡萄球菌检出符合率为100%,基因芯片检测的标本需求量少,检验时间短,敏感性、特异性、准确性更高。结论针对细菌培养的临床标本特点,采用高效的基因芯片检测方法,具有现实的临床意义。     

泛耐药铜绿假单胞菌医院感染调查分析

目的 探讨花都区人民医院泛耐药铜绿假单胞菌感染情况.方法 对2008～2010年住院患者细菌培养鉴定药敏结果进行分析.结果 2008～2010年共检出铜绿假单胞菌感染732例,其中泛耐药铜绿假单胞菌感染98例(13.6%),2008年18例(12.3%),2009年48例(15.6%),2010年32例(11.5%),2009年感染达高峰.泛耐药铜绿假单胞菌感染主要以痰标本为主,高达96.9%;感染科室则主要分布在神经外科、重症监护病房、呼吸内科.结论 该院泛耐药铜绿假单胞菌感染严重,医院应高度重视,进一步加强对重点科室医院感染工作的管理,采取有效措施,控制院内感染铜绿假单胞菌泛耐药的发生.     

78株铜绿假单胞菌药敏结果的初步探讨

铜绿假单胞菌可引起败血症、菌血症、泌尿系统感染、脓肿、呼吸道感染、脑外伤致脑组织感染等人体多部位不同程度的病变。几年来，作者先后从临床各科送检标本中分离出78株铜绿假单胞菌，现将其药敏结果报告如下。1资料与方法从我院1995年1月～1998年10月临床患者的标本中检查出78例铜绿假单胞菌阳性者，其中男性47例，女性31例，年龄15—76岁;临床上多种疾病引起的败血症12例，菌血症14例，泌尿系统感染20例，呼吸道感染27例，脓肿5例。药敏试验采用K-B法[1]，用三种ATCC菌株做质检，判断按照叶应妖、王毓三主编的全国临床检验操作规程[…     

铜绿假单胞菌医院感染分布及耐药性分析

目的了解医院感染铜绿假单胞菌的分布及耐药情况。方法对2006～2009年医院感染患者临床各科标本中分离的189株铜绿假单胞菌标本类型、临床科室分布、药敏试验进行分析。结果呼吸道、外伤和手术伤口、泌尿道为铜绿假单胞菌医院感染的高发部位;重症监护病房(ICU)、呼吸内科、肾内科、神经外科为铜绿假单胞菌医院感染的高危科室。铜绿假单胞菌具有多重耐药性,复方新诺明、头孢曲松、庆大霉素、哌拉西林、头孢吡肟其耐药率均大于或接近50%。虽然对阿米卡星、亚胺培南、头孢噻肟、左氧氟沙星等耐药率较低(分别为25.9%、33.9%、39.2%、39.7%),临床用药也应注意。结论重视细菌培养,合理使用抗生素,减少耐药菌株,减少医院感染。     

重症监护室铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

目的了解台州市第一人民医院重症监护室(ICU)铜绿假单胞菌感染分布及耐药情况,为临床提供预防措施和合理使用抗菌药物的依据。方法对2010年1~12月,ICU送检的合格临床标本进行常规细菌培养与鉴定和药物敏感性测试,采用回顾性方法统计分析该院分离的铜绿假单胞菌的标本来源及对11种抗菌药物的耐药情况。结果感染部位主要为呼吸道,痰及咽拭子325株(88.8%),分泌物31株(8.5%)。铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、美洛培南、阿米卡星的耐药率分别为15.3%、27.1%、32.4%、37.1%,复方新诺明的耐药率达97.8%。结论 ICU铜绿假单胞菌感染现象严重,且多为耐药菌株;要加强对铜绿假单胞菌的耐药性检测并合理使用抗菌药物,以延缓耐药菌株增加。     

闽东地区铜绿假单胞菌感染的临床分布及耐药性分析

目的探讨闽东地区铜绿假单胞菌感染的标本来源,临床分布以及耐药情况,为临床预防铜绿假单胞菌感染及合理应用抗生素提供依据。方法收集2015年至2016年福建省宁德市医院住院患者送检的标本中分离培养的铜绿假单胞菌进行临床分布探讨以及耐药性分析。结果 40936例临床送检标本中分离出铜绿假单胞菌927株,其中分离于痰标本的有730株(78.75%),分泌物89株(9.60%);主要分布在神经外科重症病房(20.17%),呼吸内科(18.99%),神经外科(18.66%)以及重症医学科(18.66%)。氨苄西林/舒巴坦(99.62%)和头孢替坦(99.62%)耐药率最高,其次是复方新诺明(99.24%)。结论临床应根据铜绿假单胞菌的药敏结果合理使用抗生素,减低耐药率。     

铜绿假单胞菌医院感染现状及分子流行病学研究

目的总结本地区2010年1月-2011年12月共6400份临床细菌标本的培养及药敏结果,了解铜绿假单胞菌医院感染现状;建立随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法检测铜绿假单胞菌,调查铜绿假单胞菌医院感染流行病学的情况,为控制院内感染提供直接可靠的参考依据。方法对2010年至2011分离的240株铜绿假单胞菌进行统计分析及其临床分布;采用PAPD基因分型方法进行分析。结果 240株标本主要来自ICU,呼吸内科,普外科等;铜绿假单胞菌感染标本分布依次为:痰标本占72.5%,伤口分泌物标本占15.0%、中段尿占10.0%,其它类型标本占2.5%;240株铜绿假单胞菌的多重耐药情况非常严重,对亚胺培南/美罗培南耐药率分别为32.0%和35.0%,对其它大多数抗菌药物的耐药率为70%以上;240株PA用RAPD分型共分为7种类型:A-G。结论分离的铜绿假单胞菌多具有多重耐药性;本地区铜绿假单胞菌分为7个基因型,其中主要以A、B 2型为主,表明本地区医院感染铜绿假单胞菌可能存在院内的克隆传播。     

痰中培养出铜绿假单胞菌的临床意义

目的评价咳痰标本中分离出铜绿假单胞菌的临床意义。方法对生长了铜绿假单胞菌的咳痰标本,直接涂片革兰染色镜检:白细胞与上皮细胞的数量,是否存在白细胞吞噬或伴行G-杆菌现象,同时了解患者相关临床资料,最终以依据药敏用药的疗效判断铜绿假单胞菌是病原菌还是定植菌。结果共分离123株铜绿假单胞菌。病原菌53株(43%,53/123),共同特征为患者呼吸道感染症状明显,痰涂片镜检示合格标本,且见WBC吞噬或伴行大量G-杆菌现象。定植菌70例(57%,70/T23):其中病原菌导向错误报告21例(17%,21/123),患者针对铜绿假单胞菌治疗无效,真正的病原菌为镜检所见WBC吞噬或伴行的其它病原体;临床不认可的报告30例(24.4%,30/123),患者为感染基本治愈后的复查,所生长的铜绿假单胞菌临床认为是污染或是其它原因所致;难以确定的报告19例(15.6%,19/123),痰涂片证实标本合格,G-杆菌极少或未见,生长少量铜绿假单胞菌。结论痰中培养出的铜绿假单胞菌仅43%为病原菌。在合格标本中,93株铜绿假单胞菌有21株为病原菌导向错误报告,19株为难以确定的报告。     

痰中培养出铜绿假单胞菌的临床意义

目的 评价咳痰标本中分离出铜绿假单胞菌的临床意义.方法 对生长了铜绿假单胞菌的咳痰标本,直接涂片革兰染色镜检:白细胞与上皮细胞的数量,是否存在白细胞吞噬或伴行G-杆菌现象,同时了解患者相关临床资料,最终以依据药敏用药的疗效判断铜绿假单胞菌是病原菌还是定植菌.结果 共分离123株铜绿假单胞菌.病原菌53株(43%,53,123),共同特征为患者呼吸道感染症状明显,痰涂片镜检示合格标本,且见WBC吞噬或伴行大量G-杆菌现象.定植菌70例(57%,70/T23):其中病原菌导向错误报告21例(17%,21/123),患者针对铜绿假单胞菌治疗无效,真正的病原菌为镜检所见WBC吞噬或伴行的其它病原体;临床不认可的报告30例(24.4%,30/123),患者为感染基本治愈后的复查,所生长的铜绿假单胞菌临床认为是污染或是其它原因所致;难以确定的报告19例(15.6%,19/123),痰涂片证实标本合格.G-杆菌极少或未见,生长少量铜绿假单胞菌.结论 痰中培养出的铜绿假单胞菌仅43%为病原菌.在合格标本中,93株铜绿假单胞菌有21株为病原菌导向错误报告,19株为难以确定的报告.     

铜绿假单胞菌对血液常规分析主要检测指标的影响

目的 探讨在用血细胞分析仪分析血液标本时,铜绿假单胞菌对血细胞分析仪的分析结果的影响.方法 取不同浓度的铜绿假单胞菌悬液加入血液分析标本中在XE2100血细胞计数仪上进行检测,观察血细胞计数仪分析结果的变化,并对每份标本进行镜下复检.结果 加入铜绿假单胞菌的标本对红细胞计数值、血红蛋白值及自细胞分类计数较对照组无明显变化(P>0.05),而白细胞和血小板计数较对照组有明显变化(P<0.01).结论 铜绿假单胞菌能影响血细胞分析仪对白细胞和血小板计数,临床上在对疑似该菌感染的患者血常规标本应显微镜复检.     

铜绿假单胞菌医院感染的监测

目的调查住院患者铜绿假单胞菌医院感染情况及其耐药性,为制定控制措施提供依据。方法通过资料跟踪调查和药敏试验方法,对医院2008年度住院患者中铜绿假单胞菌感染病例资料进行了监测与分析。结果 1年内共监测到铜绿假单胞菌感染患者373例,其中72例次为医院感染,例次感染率为19.3%。感染部位主要是下呼吸道,感染患者主要分布于神经外科。铜绿假单胞菌对临床常用抗菌药物高度耐药,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低。结论临床感染标本检出的铜绿假单胞菌耐药率较高,多重耐药现象突出,应加强监测力度,合理使用抗菌药物。     

亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中oprD基因突变研究

目的 研究耐哑胺培南(IMP)铜绿假单胞菌(Pa)外膜孔蛋白oprD基因突变方式和突变意义.方法 对来自临床样本的34株耐IMP的Pa用PCR方法直接扩增oprD基因,扩增产物纯化后进行DNA双向序列分析,测得序列在www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST中的BLASTn(序列号:X63152.1 Pseudomonas aeruginosa PA01)和BLASTx(序列号:NF249649.1 Pseudomonas aeruginosa PA01)进行DNA序列和氨基酸序列分析,并与标准菌株ATCC27853和2株临床分离IMP敏感Pa比较,分析突变类型和可能影响的oprD外膜蛋白功能域.结果 oprD基因突变率高达92.3%(12/13),突变方式多样(包括点突变、缺失突变、插入突变),导致外膜蛋白oprD L2、L3茎环结构上103、115、127、154、158、170、185、186、189位氨基酸改变和(或)移码突变.发现新的碱基变异位点(1 079、1114、1196、1206、1288、1300、1301 bp)和新的氨基酸突变位点(115、127、154、158、185、189位氨基酸).以上突变在标准菌株ATCC27853和2株临床IMP敏感的Pa中均未检测到.结论 oprD基因发生广泛有意突变,导致L2、L3茎环结构氨基酸改变和(或)移码突变,可能影响oprD与IMP结合,导致本组Pa对IMP耐药.     

铜绿假单胞菌临床分离株gyrA基因突变与喹诺酮类耐药关系研究

目的：了解铜绿假单胞菌临床分离株gyrA基因突变与喹诺酮类药物耐药的关系。研究其临床意义。方法：通过PCR HinfⅠ酶切分析,PCR－单链构象多态性分析（SSCP）等方法检测铜绿假单胞菌ATCC27853及36株铜绿假单胞菌临床分离株的gyrA基因突变情况。结果HinfⅠ酶切结果显示,所有13株环丙沙星耐药株,3株环丙沙星中介株中的2株,20株环丙沙星敏感株中的1株存在gyrA基因HinfⅠ酶切酶点突;SSCP分析结果显示,所有耐药菌株和中介菌株的gyrA基因基因HinfⅠ酶切位点突变密切相关,但gyrA基因突变不局限于该位点,在常规药敏试验的基础上开展gyrA基因突变检测有重要的临床意义。     

铜绿假单胞菌临床分离株药敏试验结果分析

目的分析2010~2011年临床标本中分离出的铜绿假单胞菌药敏试验结果,为临床预防感染以及合理用药提供指导依据.方法严格按照《全国临床检验操作规程》和德灵细菌鉴定及药敏分析仪操作说明对送检的临床标本进行细菌学培养鉴定与药敏试验分析.结果两年间从各类临床标本中分离出247株铜绿假单胞菌,分离率为9.56%,主要来源于呼吸道标本(71.26%).铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、头孢替坦、头孢唑啉、复方新诺明呈高耐药性,耐药率在90%以上;而哌拉西林/他唑巴坦、美洛培南及亚胺培南对铜绿假单胞菌耐药率较低,分别为21.46%、21.46%、20.24%.此外,头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等耐药率在30%~40%.结论铜绿假单胞菌呈多重耐药性,根据药敏结果合理使用抗菌药物具有重要临床指导意义.     

嗜麦芽寡养单胞菌对念珠菌抑制作用观察

目的观察嗜麦芽寡养单胞菌(SMA)对常见念珠菌属,如白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌等的抑制作用。方法收集临床上20株SMA,通过革兰染色、氧化酶试验及API 20NE(法国梅里埃公司产品)进行鉴定;通过纸片法、十字交叉划线试验及共孵育试验检测SMA对念珠菌属的抑制作用。结果 20株SMA中部分菌株对常见念珠菌有显著抑制作用,但对质控菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)、铜绿假单胞菌(ATCC 27953)没有抑制作用。结论 SMA对常见念珠菌具有抑制作用,推测可能是与分泌一些代谢产物抑制真菌的菌丝形成有关。     

细菌性肺炎快速诊断基因芯片的初步构建

目的：根据细菌16 S rRNA基因特点设计常见病原菌的特异性探针,采用酶显色技术构建基因芯片,探讨其临床应用的可能性。方法选取肺炎链球菌、流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌等8种细菌性肺炎常见的病原菌的标准菌株作为研究对象,并选择12份患者的痰液标本进行检测。在16 S rRNA基因保守区设计 PCR反应的通用引物及革兰阳性菌、革兰阴性菌的通用探针,利用可变区的差异设计合成特异性探针,构建基因芯片。利用细菌16S rRNA基因设计的PCR通用引物进行扩增,所有8种细菌均获得350 bp的扩增产物。以地高辛标记特异性探针,构建完成可用于8种常见病原菌检测的基因芯片,结果8种标准菌株基因芯片检测均取得了预期效果,对12份痰标本中常规培养阳性7份,其对应芯片检测结果均成阳性,5份常规培养阴性的标本中,芯片结果提示阳性的有3份,其中1份为嗜肺军团菌,2份为使用抗生素后的患者标本。结论设计合成的 PCR通用引物对扩增细菌的16 S rRNA基因具有较高的特异性及灵敏度。构建的基因芯片可用于常见细菌性肺炎病原菌的检测鉴定,且对抗生素使用后的临床标本及苛养菌有一定的诊断价值。本研究所获得基因芯片对于细菌性肺炎的检测具有简单、快速、特异性及敏感性高的特点。     

50株铜绿假单胞菌的耐药性及耐药基因分析

目的分析铜绿假单胞菌的耐药性及其耐药基因类型,指导临床合理应用抗生素。方法收集广州中医药大学第一附属医院临床送检标本中分离的50株铜绿假单胞菌,用K-B纸片扩散法进行抗生素敏感性试验;筛选出20株多重耐药铜绿假单胞菌,采用聚合酶链反应检测β-内酰胺酶基因类型。结果铜绿假单胞菌对临床常用抗生素存在不同程度的耐药现象,其中最常用的亚胺培南耐药率达96%,20株多重耐药铜绿假单胞菌中检出TEM(40%)、OXA-2群(5%)、OXA-10群(5%)、CARB(30%)4种β-内酰胺酶基因,未检出质粒型AmpC酶和金属β-内酰胺酶基因。膜孔蛋白编码基因oprD2均为缺失型。结论铜绿假单胞菌的耐药现象严重,其原因可能与铜绿假单胞菌多耐药基因表达有关。     

不同的标准试验菌对有效氯抗力的比较

采用悬液定量杀菌试验,比较了消毒剂鉴定试验中规定采用的不同细菌繁殖体对有效氯的抗力．结果,革兰阳性菌对消毒剂二氯异氰尿酸钠溶液中有效氯的抗力比革兰阴性菌强;金黄色葡萄球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）与海氏肠球菌（ ＡＴＣＣ １０５４１）的抗力相近;大肠杆菌 ８０９９株的抗力,较该菌 ＡＴＣＣ１０５３６株强,与绿脓杆菌（ＡＴＣＣ １５４４２）较接近。对该消毒剂含有效氯２５ ｍｇ／Ｌ溶液抗力的大小,依次为海氏肠球菌、大肠杆菌（８０９９）、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆茵（ＡＴＣＣ １０５３６）,说明同一种菌的不同菌株抗力差距较大。     

Characterization of Pseudomonas aeruginosa isolated from clinical and environmental samples in Minia, Egypt: prevalence, antibiogram and resistance mechanisms

OBJECTIVES: To assess the prevalence, levels of antimicrobial susceptibility and resistance mechanisms of Pseudomonas. METHODS: A total of 445 clinical isolates and 200 environmental isolates were collected from three hospitals in Minia, Egypt. The MICs of different antibiotics were determined using the agar dilution method. The isolates were tested for beta-lactamase production and for the presence of efflux pumps. RESULTS: Out of the 445 clinical specimens, 107 Pseudomonas strains (24%) and 81 Pseudomonas aeruginosa strains were isolated (18.2%). Out of the 200 environmental specimens, 57 Pseudomonas strains (28.5%) and 39 P. aeruginosa strains were isolated (19.5%). Amikacin was the most active drug against P. aeruginosa followed by meropenem, cefepime and fluoroquinolones. P. aeruginosa was highly resistant to all other antibiotics tested. The environmental isolates of P. aeruginosa exhibited higher antibiotic resistance than clinical isolates. Mechanisms of resistance used by P. aeruginosa included beta-lactamase production and multiple drug resistance efflux pumps. Our results showed that 29 (36%) of the clinical P. aeruginosa isolates and 37 (95%) of the environmental P. aeruginosa isolates were beta-lactamase producers. In addition, P. aeruginosa isolates effectively used an efflux-mediated mechanism of resistance against ciprofloxacin and meropenem, but not gentamicin or cefotaxime. CONCLUSIONS: This study examined the prevalence of P. aeruginosa, and its susceptibility patterns to different antibiotics. The presence of antibiotic-resistant P. aeruginosa isolates could be attributed to beta-lactamase production and the use of multiple drug resistance efflux pumps.     

铜绿假单胞菌296株临床分布及耐药性分析

目的通过分析296株铜绿假单胞菌的分布和耐药情况,为医院感染控制及临床合理用药提供依据。方法应用回顾性调查方法分析沈阳医学院奉天医院2010-01-01-2010-12-01分离到的296株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性。结果 296株铜绿假单胞菌主要来源于痰液标本,主要集中于呼吸内科、ICU等科室;其耐药率最低的是头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦。结论铜绿假单胞菌是临床常见的病原菌,对哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦有较高的敏感性,但总的耐药率仍很高,可根据药敏结果合理选择用药。