逍遥散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴调控作用机制的初步研究

目的 观测逍遥散对慢性应激损伤大鼠海马对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴调控的变化,探讨逍遥散抗应激损伤的神经内分泌变化.方法 以慢性多相性应激大鼠为研究对象,动物分组采用随机数字表法;RU-38486为工具药;酶联免疫吸附法检测大鼠血清皮质酮(CORT);荧光免疫组化方法 检测大鼠海马神经元内糖皮质激素受体(GR).结果 与空白对照组(1.09±0.11;0.57±0.10)相比较,模型组大鼠海马神经元内GR表达明显减少(0.65±0.10;P＜0.01),促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达明显升高(1.12±0.11;P＜0.01),RU-38486组大鼠海马神经元内GR表达明显增加(1.59±0.11;P＜0.01),CRH mRNA表达明显减少(0.48±0.10;P＜0.05).而逍遥散组大鼠海马神经元内GR及下丘脑CRH mRNA表达均无统计学差异(0.62±0.08;0.97±0.13;P＞0.05);与模型组比较,RU-38486及逍遥散干预大鼠海马神经元内GR表达均明显增加(P＜0.01),下丘脑CRH mRNA表达均明显降低(P＜0.01).结论 慢性应激可导致大鼠海马神经元内GR表达减少,下丘脑CRH mRNA表达升高,而逍遥散能抑制这种因慢性应激所致的海马神经元内GR及下丘脑神经元内CRH mRNA的表达变化,这可能是逍遥散调控慢性应激状态下HPA轴的兴奋性以达到抗应激损伤的关键机制.     

注意缺陷多动障碍模型大鼠HPA轴功能的变化研究

目的:观察注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物自发性高血压大鼠(SHR)血清皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平及下丘脑糖皮质激素受体(GR)、糖皮质激素受体(MR)、CRH及海马GR、MR mRNA的表达情况,探讨SHR大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)功能及相关影响因素。方法:以幼年SHR大鼠为ADHD模型组、Wistar京都大鼠(WKY)为对照组,采用ELISA法检测血清CORT、ACTH、CRH水平,RT-PCR法检测大鼠下丘脑GR、MR、CRH及海马GR、MR mRNA的表达水平。结果:SHR大鼠血清CORT、ACTH水平明显低于WKY大鼠(P<0.01),血清CRH水平明显高于WKY大鼠(P<0.01),下丘脑及海马GR、MR mRNA的表达水平明显高于WKY大鼠(P<0.01),而下丘脑CRH mRNA表达则低于WKY大鼠(P<0.01)。结论:SHR大鼠HPA轴呈低反应性,可能与CRH启动障碍及下丘脑和海马GR、MR mRNA高表达相关。     

中药止喘胶囊对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的影响

目的 观察中药止喘胶囊对哮喘大鼠外周血白细胞和肺组织中糖皮质激素受体（ＧＣＲ）、血浆皮质酮、血浆及肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素－４,５（ＩＬ－４,５）的影响,以探讨补肾健脾固本法治疗哮喘的作用机制。方法 采用放射性配基结合法、放射免疫法、酶联免疫法测定各组大鼠外周血白细胞和肺组织中 ＧＣＲ、血浆皮质酮、血浆及 ＢＡＬＦ中 ＩＬ－４,５含量。结果 哮喘模型组血浆皮质酮含量、外周血白细胞ＧＣＲ结合位点和肺组织 ＧＣＲ的 ＲＴ值均明显低于正常组（均Ｐ＜０．０１）,中药止喘胶囊组血浆皮质酮含量、肺组织ＧＣＲ的ＲＴ值显著高于正常组（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０.０１）;哮喘模型组血浆和 ＢＡＬＦ中Ｌ－４,ＩＬ－５含量均明显高于正常组（均 Ｐ＜０．０１）,其余各治疗组均明显下降（均 Ｐ＜０．０１）,其中中西药结合组显著低于中药组、西药组（均Ｐ＜０．０１）,接近正常组（Ｐ＞０．０５）。结论 止喘胶囊以补肾健脾固本治法通过阻止哮喘大鼠外周血白细胞和肺组织ＧＣＲ结合位点的下降,上调内源性皮质酮水平,改善下丘脑－垂体－肾上腺功能,下调血浆和 ＢＡＬＦ中 ＩＬ－４,５,从而减轻哮喘气道炎症,止喘胶囊与吸入激素有一定程度的协同作用。     

白松片对大鼠慢性应激抑郁模型的抗抑郁实验研究

目的：探讨慢性应激抑郁模型大鼠神经生化、神经内分泌的变化及白松片对其的干预作用。方法：60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC组）、模型对照组（MC组）、氟西汀对照组（FC组）和白松片治疗组（BST）,每组15只。采用长期轻度不可预见性应激＋孤养复制大鼠抑郁模型,用高效液相色谱仪法检测海马5-羟色胺（5-HT）、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量;放射免疫方法测定大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）的水平;应用逆转录聚合酶联反应方法测定大鼠下丘脑和大脑皮质CRH mRNA表达水平;免疫组织化学法测定海马脑源性神经营养因子、酪氨酸羟化酶的表达。结果：与NC比较,模型大鼠海马5-HT,GABA含量显著降低;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量增加;脑内CRH mRNA表达显著升高（P〈0．01）;与MC组比,BST组和FC组大鼠海马5-HT,GABA含量升高（P〈0.01,或P〈0.05）;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量降低;脑内CRH mRNA表达下降（P〈0．01）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠神经内分泌、神经生化发生异常改变,白松片对此具有一定调节作用。     

PKA信号通路调控体外培养大鼠脑片的CRH mRNA表达的研究

目的探讨大鼠下丘脑神经元表达促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) mRNA的蛋白激酶A (PKA)信号调控机制.方法通过大鼠下丘脑脑片实验模型,运用Western blot及逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察CRH激活下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体(CRH1R)后PKA信号通路的活性变化,及其与CRH mRNA表达的关系.结果 CRH可引起下丘脑脑片磷酸化PKA、磷酸化环腺苷一磷酸反应元件结合蛋白(CREB)及CRH mRNA含量明显增加,而CP-154526、H89可显著抑制磷酸化PKA、磷酸化CREB及CRH mRNA含量的增加.结论在下丘脑离体脑片培养条件下,CRH可通过PKA途径实现对下丘脑神经元CRH mRNA的表达的超短正反馈调节.     

子痫前期宫内环境导致子代大鼠海马HPA轴相关基因表达改变

 目的 研究子痫前期宫内环境对子代SD大鼠海马下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal, HPA)轴相关基因表达的影响。方法 通过给妊娠第14天SD大鼠连续皮下注射亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)至分娩的方法建立子痫前期大鼠动物模型,对照组予生理盐水1 mL皮下注射。用酶联免疫检测(ELISA)方法检测新生子代大鼠血皮质酮(corticosterone, CORT)浓度。用Real-time PCR方法和Western bolt分别检测8周龄子代大鼠海马组织糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone, CRH)、CRH受体1 (CRH receptor 1, CRHR1)和IL-6的mRNA水平及其蛋白质水平。结果 与正常子代新生鼠相比,子痫前期子代新生鼠血CORT浓度升高(P＜0.05)。与正常子代鼠相比,子痫前期青少年子代鼠海马GR、CRH 和CRHR1 mRNA和蛋白质水平均增加(P＜0.05),炎性因子IL-6 mRNA和蛋白质水平均增加(P＜0.05)。结论 子痫前期宫内环境影响子代大鼠海马HPA轴相关基因的表达,在子代学习记忆能力受损中起作用。     

青藤碱对佐剂关节炎大鼠HPA轴及外周血单个核细胞皮质酮受体表达的影响

目的 探讨下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴在类风湿性关节炎发病机制中的作用以及青藤碱的治疗效果.方法 观察研究青藤碱时AA大鼠关节炎性反应程度,血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮,以及外周血单个核细胞糖皮质激素受体(GCR)表达的影响.结果 AA大鼠关节病理积分显著增高,血浆CRH及皮质酮浓度下降,ACTH浓度上升,外周血单个核细胞GcR表达下降.青藤碱具有治疗作用,高剂量起效最早,且效果最佳.结论 AA大鼠HPA轴存在功能缺陷,可能同时发生在下丘脑和肾上腺水平,GCR表达降低.     

心理性应激引起的大鼠行为,血浆皮质酮及脑区氨基酸水平的变化

目的：观察心理应激模型动物血浆皮质酮及视皮质、海马和下丘脑氨基酸和整体行为的变化。方法：以光－电击条件反射法建立心理应激动物模型，采用放射怀配体蛋白竞争结合法、氨基酸自动分析法及旷场试验分别测定大鼠心理应激时血浆皮质酮、脑区氨基酸水平和行为的变化。结果：在血浆皮质酮能够分化心理应激的实验参数条件下，电击刺激时，主要引起视皮质氨基酸水平的变化；而仅给予条件刺激（光）引起心理应激时，可在视皮质、海马和     

穹窿切断并摘除肾上腺后大鼠下丘脑CRH表达变化

目的:观察下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)与糖皮质激素的关系,探讨海马参与HPA轴调节的机制。方法:建立大鼠穹窿切断模型,采用ELISA方法检测穹窿切断0、4、7、10 d血中糖皮质激素的浓度;建立大鼠穹窿切断同时摘除肾上腺7 d的模型,采用免疫组织化学、免疫印迹方法检测CRH的表达变化。结果:穹窿切断7 d后血中糖皮质激素的浓度升高,穹窿切断同时摘除肾上腺7 d后,下丘脑CRH表达升高。结论:海马通过穹窿对HPA轴发挥负反馈调节作用,糖皮质激素负反馈调节下丘脑CRH。     

γ-氨基丁酸受体基因转染对癫痫大鼠海马缝隙连接蛋白43表达的影响

目的： 探讨下丘脑乳头体上核内转染γ-氨基丁酸(GABA)受体基因对海人藻酸(KA)致痫大鼠海马区缝隙连接蛋白43(CX43)表达的影响。 方法：将24只Wistar雄性大鼠分为4组：正常对照组（n=2）、手术对照组（n=2）、KA对照组（n=10）及GABA受体基因转染组（n=10），正常对照组未经任何处置，手术对照组在右侧杏仁核注射生理盐水1 μL，KA对照组在杏仁核注射KA 1 μL（1　μg），GABA受体基因转染组则在KA注射前48 h预先将GABA 受体mRNA 400 nL (40 ng)注射到下丘脑的乳头体上核。采用原位杂交法观察4组大鼠各个时程（3 h、6 h、24 h、3 d、7 d）海马区形态及CX43阳性细胞数变化。 结果：正常对照组和手术对照组大鼠海马神经元结构完整；KA对照组海马神经元肿胀变性，其程度随时间延长而加重；GABA受体基因转染组海马神经元变性坏死程度相对于KA对照组减轻。CX43表达阳性细胞数定量分析显示，正常及手术对照组CX43表达阳性细胞数较少，KA对照组随时间延长CX43阳性表达细胞数逐渐增多， GABA受体基因转染组大鼠CX43阳性表达细胞数在各个时程均比KA对照组减少。 结论: 下丘脑内转染GABA受体基因可以下调海马区CX43的表达。     

柴疏四君汤对肝郁脾虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴变化的调整作用

目的：观察肝郁脾虚证大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质（hypothatamic—pituitary—adrenocoritcal,HPA）轴的变化及疏肝健脾方的干预作用。方法：采用慢性束缚＋饮食失节＋过度疲劳的复合因素复制肝郁脾虚证大鼠模型,模型动物连续给予疏肝健脾方药（柴疏四君汤）2周,观测大鼠血浆皮质醇（cortisol,COR）、促肾上腺皮质激素（adrenocorticotrophic hormone,ACTH）、促肾上腺皮质激素释放激素（corticotrophin releasing hormone,CRH）及下丘脑CRH含量变化。结果：模型动物COR、CRH含量显著增加,血浆ACTH含量明显降低;柴疏四君汤能显著降低COR、CRH含量,明显增加ACTH含量。结论：肝郁脾虚证模型动物HPA轴功能出现明显异常,柴疏四君汤对HPA轴有显著的调节作用。     

甘麦大枣汤对慢性应激抑郁大鼠HPA轴及海马显微结构的影响

目的 研究甘麦大枣汤对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴及海马显微结构的影响,探讨其可能的抗抑郁机制.方法 将SD大鼠随机分为6组:空白组、模型组、氟西汀组(5.4 mg/kg)、甘麦大枣汤高、中、低剂量组(3.84、1.92、0.96 g/kg),采用慢性不可预见性温和应激建立抑郁模型,于造模同时给药,连续21 d.采用糖水消耗实验和旷场测试检测大鼠的抑郁样行为,ELISA法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)的变化,HE染色观察大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回(DG)区的病理结构变化.结果 与空白组比较,抑郁模型组大鼠蔗糖偏食度及自主活动次数显著下降(P<0.01),血浆CRH、ACTH、CORT含量显著上升(P<0.01),海马CA1区、CA3区以及DG区神经元均萎缩、缺失,损伤明显;与模型组比较,甘麦大枣汤高剂量组大鼠蔗糖偏食度及活动次数均显著提高(P<0.01),血浆ACTH、CORT含量下降(P<0.05),同时海马各区神经元损伤情况得到缓解.结论 甘麦大枣汤能显著改善模型大鼠的抑郁样行为,其作用可能与调节HPA轴高亢,保护海马的损伤有关.     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体水平的调节作用

目的：观察黄芪多糖（APS）对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马组织中糖皮质激素受体水平的调节作用。方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组、DM模型组、APS干预组组,采用小剂量链脲佐茵素加高脂饮食饲养的方法建立2型糖尿病肥胖大鼠模型。成模4周后,断头处死所有大鼠,检测各组大鼠血CRH、ACTH、CorT的含量,以及海马组织中糖皮质激素受体（GR）mRNA的表达。结果：DM模型组血ACTH、CorT含量较正常组显著升高,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠血ACTH、CorT含量显著降低（P〈0．05）;DM模型组海马GRmRNA含量较正常组极显著降低,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠海马GRmRNA含量明显上调（P〈0．01）。结论：APS保护高糖环境下的海马组织,改善HPA轴功能。对糖尿病以及合并症起到治疗作用。     

焦虑模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴高反应性与糖皮质激素受体蛋白表达降低相关

目的 研究焦虑模型大鼠在应激条件时下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamus-pituitaryadrenal,HPA)轴呈高反应性是与轴本身功能亢进还是与反馈调节中糖皮质激素受体(glucocorticoid steroid receptor,GR)蛋白表达改变相关.方法 SD健康雄性大鼠随机分为对照组(n=20)和焦虑模型组(n=26).对照组正常饲养.采用不可预知的情绪应激方法建立大鼠焦虑模型.所有大鼠每周称量体质量.造模结束后,通过行为学鉴定造模是否成功.旷场和高架作为应激源刺激大鼠,测定两组大鼠血清中促肾上腺激素和皮质酮水平.Western blot检测GR蛋白在大鼠海马、下丘脑、垂体和肾上腺组织中的表达.结果 焦虑模型大鼠体质量增长率与对照组相比明显降低(P＜0.01).高架十字迷宫实验和旷场实验显示:与对照组相比,模型组大鼠进入开臂次数、开臂停留时间、进入开臂次数百分比和进入开臂时间百分比均显著降低(P＜0.01);总路程、中央活动路程百分比和中央活动时间百分比均显著降低(P ＜0.05,P＜0.01).在基础条件下,两组大鼠分泌促肾上腺激素和皮质酮差异无统计学意义(P＞0.05);而应激条件下,模型组大鼠分泌两种激素显著高于对照组(P＜0.01).与对照组比较,模型组在大鼠海马、下丘脑和肾上腺组织中GR蛋白表达显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),而在垂体中表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 焦虑模型大鼠在应激条件下,HPA轴反应性增加与GR所介导的负反馈调节作用减弱有关.     

复方柴金解郁片对慢性应激抑郁大鼠HPA轴及海马单胺神经递质的影响

目的 研究复方柴金解郁片对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴及海马单胺神经递质的影响,探讨其可能的抗抑郁机制.方法 将SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、氟西汀组(5.4 mg/kg)、复方柴金解郁片高、中、低剂量组(2.74、1.37、0.68 g/kg),采用慢性不可预见性温和应激建立抑郁模型,于造模同时给药,连续28 d.采用蔗糖偏好实验和旷场测试检测大鼠的抑郁样行为,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马病理结果变化,ELISA法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT),以及海马5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)的含量.结果 与抑郁模型组比较,复方柴金解郁片组大鼠蔗糖偏嗜度及活动次数均显著提高,学习记忆能力提升,海马病理损伤情况得到缓解,血浆CRH、ACTH、CORT含量下降,海马组织内5-HT、NA、DA含量上升,5-HIAA含量下降(P<0.05).结论 复方柴金解郁片能显著改善模型大鼠情绪和学习记忆功能、缓解海马组织损伤,其作用可能与抑制HPA轴亢进、增加脑内单胺递质含量有关.     

Relationship between glutamate in the limbic system and hypothalamus-pituitary-adrenal axis after middle cerebral artery occlusion in rats

Glutamateisamajorexcitatoryaminoacid (EAA)inthemammaliancentralnervoussystem (CNS) IthasbeendemonstratedthatexcitotoxicitydamageduetoexcessivereleaseofEAA ,especially glutamateinneuron ,isthepivotalfactorinthepathogenesisoffocalor globalischemia 1　GlutamateisdistributedextensivelyintheCNS ,includingthe presynapticbuttonsofavarietyofimportanthypothalamicnucleuswithhighconcentration Themajorityoftheresearchworkinthisfieldhasbeenfocusedontheroleof glutamateinthemodulationofneuroendocrinese…     

肝气郁结证大鼠模型的建立及评价

目的运用慢性束缚应激结合孤养法建立肝气郁结证大鼠模型,通过行为学、宏观表征、客观指标及药物反证进行评价。方法 30只大鼠随机等分为3组：空白对照组、肝郁证模型组和柴胡疏肝散组。观察各组大鼠外部表征及体重变化,进行开野、蔗糖水实验,ELISA法检测血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质醇（CORT）,以柴胡疏肝散进行反证。结果模型组大鼠表现为低落倦怠、兴趣减退、毛发枯乱、便溏、体重增加缓慢;水平运动、垂直运动得分明显下降,粪便粒数增多;蔗糖水偏好程度下降;血浆ACTH、CORT含量升高;而柴胡疏肝散有显著的治疗作用。结论本实验用慢性束缚应激结合孤养法成功建立了肝气郁结证大鼠模型。