组培条件对云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇的影响

目的 :寻找适合于云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇的培养条件。方法 :对在不同光照条件下和不同培养基上的愈伤组织进行生长分析和紫杉醇含量测定。结果与结论 :黑暗、0.1mg·L^-1BAP和 1.0mg·L^-1 2,4 D的激素组合 ,B5,DCR或 6,7V基本培养基有利于云南红豆杉愈伤组织生长和形成紫杉醇 ;培养基中NO₃ -浓度高有利于愈伤组织的生长 ,NH4⁺ 浓度高抑制愈伤组织的生长 ,但显著提高紫杉醇含量。     

培养基类型、植物生长物质浓度对王枣子愈伤组织诱导和继代的影响＊

目的 优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件，为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法 以王枣子无菌苗幼叶为外植体，采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响；采用L₉(3² )正交试验设计，研究2，4-D、KT不同浓度配比对王枣子疏松愈伤组织的增殖培养的影响。结果 愈伤组织的诱导率在MS、1/2MS和B₅培养基上呈上升趋势。MS的出愈时间最晚，1/2MS的出愈时间次之；在B₅培养基上出愈时间最早，且愈伤组织的质地和生长状态较好。正交试验的结果显示，愈伤组织的在B₅培养基上添加2，4-D 2.5 mg·L^-1 +KT 1.0 mg·L^-1增殖倍数最小为19.78倍，添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.2 mg·L^-1 达到最大增殖倍数27.34倍；王枣子疏松愈伤组织增殖试验中2，4-D(P<0.01)的影响效应比KT(P=0.091)大。结论 B₅培养基是最佳的王枣子愈伤组织诱导培养基，B₅培养基中添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.5 mg·L^-1 为疏松愈伤组织增殖的最佳配比。     

培养基中碳源和氮源对甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响

目的：研究碳源和氮源对甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物形成的影响。方法：在培养基中添加不同质量分数的蔗糖和果糖以及不同比例的NH⁺₄和NO^-₃,进行甘草愈伤组织的诱导和培养,并用HPLC检测愈伤组织中黄酮类化合物的含量。结果：2种碳源中,甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物合成均以果糖为碳源时高。在用2%果糖作为碳源时,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和是3%蔗糖作为碳源的2倍。果糖作为碳源,在2%～6%时,随着质量分数的增加,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和呈下降趋势,但其中甘草查尔酮的含量却增加5倍以上。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。当NH⁺₄/NO^-₃浓度比例为1/2时,甘草愈伤组织中5种黄酮类化合物含量的总和达最大值,为151.47 μg·g^-1。铵态氮抑制甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的形成。结论：果糖作为碳源最有利于甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物的生物合成。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。     

培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导及牛膝多糖含量的影响

目的:研究培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导形成及牛膝多糖含量的影响。方法:以怀牛膝无菌苗的叶片、茎段为材料,采用正交设计研究基本培养基,碳源,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)、N-苯基-N′-噻二唑-5-脲(TDZ)、水解酪蛋白(CH)对愈伤组织诱导和多糖含量的影响。结果:诱导叶片愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+1g·L^-1CH,诱导茎段愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+1mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+0.5g·L^-1CH;有利于叶片愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1蔗糖,有利于茎段愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg.L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1葡萄糖。结论:初步建立了怀牛膝叶片、茎段诱导愈伤组织的适宜培养条件,为通过植物组织细胞培养途径生产牛膝多糖提供了依据。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

三叶木通愈伤组织培养研究

目的：探讨影响三叶木通愈伤组织诱导因素,建立三叶木通愈伤组织培养方法。方法：采用组织培养方法,比较不同外植体、培养基、pH、温度、光照、植物生长物质种类及其配比对三叶木通愈伤组织诱导的影响。结果：叶片的诱导率最高,为87.5%；茎段次之,叶柄较差；培养基MS,B5愈伤组织诱导率较高,达到了80%以上,高于培养基H,SH和改良White的愈伤组织诱导率；偏低的pH对愈伤组织生长有利,出愈率高,但从愈伤组织生长质量方面看,不同pH差异不明显；愈伤组织诱导最适温度为25 ℃。结论：三叶木通愈伤组织的适宜培养基为MS+2,4-D 4.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+KT 1.0 mg·L^-1(pH 5.8),培养温度为25 ℃,暗培养。     

新疆紫草愈伤组织高效诱导及快速增殖研究

 目的 高效诱导新疆紫草愈伤组织,并实现愈伤组织的快速增长。方法 用不同的培养基及不同的激素组合诱导外植体形成愈伤组织;用不同的蔗糖浓度和激素浓度研究愈伤组织的生长。结果 快速诱导愈伤组织的条件为:直接将种子(去皮)消毒后接种于改良N6培养基,添加激素NAA 0.4mg·L^-1+2,4-D 0.2mg·L^-1+KT1.0 mg·L^-1,pH值5.6,温度25℃,暗培养。愈伤组织的快速增长培养基为:改良N6培养基,添加KT 1.0 mg·L^-1,蔗糖浓度3％,pH值5.6,25℃,暗培养。结论 以去皮种子为外植体是新疆紫草愈伤组织高效诱导的关键,KT的浓度对愈伤组织快速增长起决定性作用。     

安徽药菊花瓣组织培养技术的研究

目的 :研究安徽药菊花瓣组织培养技术 ,为安徽药菊新品种选育建立最佳条件。方法 :取安徽药菊(滁菊、亳菊、贡菊 )幼蕾花瓣及开放花瓣为外植体 ,按不同方式接种到同种培养基上和按同种方式接种到不同培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果与结论 :所有培养基均能诱导愈伤组织产生 ,但愈伤组织形成和再分化结果有明显差别。愈伤组织诱导花瓣正接优于反接 ,愈伤组织诱导培养基以MS +KT 2mg·L^-1+NAA 0 .2mg·L^-1为宜 ;愈伤分化均以培养基MS +KT 2mg·L^-1+NAA 0 .2mg·L^-1+AgNO3 5mg·L^-1为宜幼蕾花瓣诱导植株再生频率高于开放花瓣 ;所得植株在叶形、及株形等方面发生了变异。     

麻花秦艽组织培养及植株再生的研究

目的：研究药用植物麻花秦艽组织培养技术,为工厂化育苗提供科学依据。方法：以麻花秦艽根、茎育出的无菌苗为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验。结果：以MS培养基为基本培养基,附加BA 0.5～1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,适于丛生芽的诱导与增殖；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 3 mg·L^-1,适于愈伤组织的诱导；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 2.0～3.0 mg·L^-1适于愈伤组织继代培养,附加BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1适于愈伤组织的分化。结论：通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的。     

土贝母组织培养的研究

目的:研究土贝母茎段、叶片外植体愈伤组织的诱导和培养方法及其与土贝母皂苷积累的关系。方法:在MS或B₅培养基上,试验不同种类、不同含量的植物生长物质及其组合对土贝母茎段和叶片愈伤组织诱导和增殖的影响。结果:茎段愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS附加2,4-D 2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0mg.L^-1;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS附加2,4-D 0.5 mg.L^-1和NAA 2.0 mg.L^-1。愈伤组织在MS附加2,4-D 2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0 mg.L^-1的培养基上积累土贝母皂苷的含量最高;在B5附加2,4-D2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0 mg.L^-1的培养基上经多次继代培养后,可形成较为均一、稳定的愈伤组织系。结论:建立了土贝母茎段、叶片外植体愈伤组织的诱导和培养方法,为植物组织细胞培养生产土贝母皂苷提供实验依据。     

稀土对黄连愈伤组织生长及生物碱含量的影响

 目的：研究稀土元素对药用植物细胞组织培养的作用和意义。方法：以药用植物黄连为材料,研究不同浓度的稀土化合物对愈伤组织鲜重增加和生物碱含量的影响。结果：0.1mg·L^-1Yb^3＋和1mg·L^-1Eu^3＋促进愈伤组织的生长,高浓度稀土化合物抑制生长。在不含稀土化合物的培养基上的继代培养中,来源于稀土化合物处理的愈伤组织鲜重增加值均比对照低。稀土化合物影响愈伤组织小檗碱、药根碱和巴马汀含量。结论：低浓度的稀土化合物对黄连愈伤组织的生长具有促进作用,低浓度和高浓度的Yb^3＋和Eu^3＋对黄连愈伤组织后续的继代培养均有不利的影响。Yb^3＋抑制愈伤组织中三种生物碱的积累,0.1mg·L^-1Eu^3＋有利于药根碱和巴马汀的累积。     

抱茎苦荬菜的组织培养及植株再生

目的:探讨苦荬菜组织培养和植株再生条件。方法:以苦荬菜叶片为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行优化筛选。结果:最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.5 mg.L^-1+6-BA1.5 mg.L^-1+NAA1.0 mg.L^-1+IBA1.5 mg.L^-1+KT1.5 mg.L^-1,最佳的不定芽诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg.L^-1+6-BA0.5 mg.L^-1+NAA 0.5 mg.L^-1+IBA 0.5 mg.L^-1+KT0.5 mg.L^-1,不定芽经附加IBA0.1 mg.L-1的1/4 MS培养基生根后移栽成活,获得再生植株。结论:建立了一套有效的苦荬菜组织培养再生体系。     

安徽药菊叶片愈伤组织诱导及植株再生技术的研究

目的 :研究安徽药菊叶片组织培养技术 ,为药菊新品种选育建立最佳培养条件。方法 :取药菊叶片为外植体 ,按不同接种方式接种到同种培养基上和按同种接种方式接种到不同培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果与结论 :所用培养基均能诱导愈伤组织产生 ,但愈伤组织形成后的再分化结果却有明显差别。愈伤组织诱导叶片背接优于正接 ,培养基以MS +NAA 0.1mg·L^-1+6-BA 0.1～ 1.0mg·L^-1为宜 ;分化培养基以MS +6 BA 2.0mg·L^-1+NAA 0.5mg·L^-1较适宜 ;所得再生植株在叶形等方面发生了变异。     

茜草愈伤组织诱导与快速繁殖的研究

目的 :研究茜草的茎段培养技术 ,为茜草快繁建立最佳培养条件 ;建立诱导茜草愈伤组织的培养方法 ,为茜草所含次生代谢药用成分工业化生产 ,提供方便、快捷的途径。方法 :利用植物组织培养技术 ,将茜草茎段分别在不同的培养基中培养 ,诱导其成为完整植株 ;将茜草的茎、叶、根进行愈伤组织诱导。结果与结论 :MS +2,4D 2mg·L^-1+KT0 .1mg·L^-1培养基适于茜草的愈伤诱导 ;MS+6 BA 1.5mg·L^-1培养基上茜草茎段能迅速生长成苗 ;MS +2,4D 2mg·L^-1+KT0.1mg·L^-1培养基与MS +6BA1.5mg·L^-1培养基先后使用 ,可使茜草生根。     

北柴胡花药愈伤组织高效再生体系的建立

以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织,愈伤组织经多次继代培养后,置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21,49 d后,统计每种培养基中分化出苗数,同时观察再生植株生长状况,从中筛选出分化率高,分化速度快,且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗,分化率在3%~60%,大部分低于20%。在MS+KT 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1培养基上分化率最高,为60%,其次为MS+ ZT 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1,为58%。另外,针对在分化培养基中未能生根的再生芽,进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1和1/2 MS+ NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1中均可生根,生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。     

药用植物墨旱莲的组织培养研究

 目的研究利用组织培养技术对药用植物墨旱莲进行快速繁殖。方法以顶芽、茎、叶和幼苗(上部为绿体,下部为愈伤组织)为外植体,诱导愈伤组织及根和芽的分化。结果在顶芽、茎、叶和幼苗4种外植体中,顶芽的愈伤组织诱导率和芽分化率均高达100%,愈伤组织褐化少,生长良好,易被诱导出不定芽,是较为理想的快速繁殖材料;茎段的愈伤组织诱导率也达100%,但其中不带茎节的茎段不能直接诱导芽分化。在适宜的培养基中顶芽和带节的茎段能大量生根,生根率均达100%。结论较适宜诱导愈伤组织的激素组合是MS+6-BA2.0mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1,诱导芽分化适宜的激素组合为MS+6-BA3.0mg·L^-1+NAA0.3mg·L^-1,根的诱导则在MS+NAA0.2mg·L^-1上进行。     

长春花毛状根培养及抗癌生物碱产生的研究

目的:建立长春花毛状根转化体系,从毛状根中获得生物碱。方法:用发根农杆菌A₄和R₁₀₀₀菌株分别感染长春花的不同外植体获得毛状根,并对毛状根的培养条件进行优化。结果:采用A₄感染叶片,分别预、共培养2d及添加100mg·L^-1的乙酰丁香酮(A_s)可得到最佳转化效果,毛状根的诱导率达86.25%。以蔗糖为碳源及以水解乳蛋白为氮源的1/2MS培养基为毛状根的最佳生长条件。检测结果表明,毛状根中的总生物碱含量高于长春花的原植株和愈伤组织。结论:可通过毛状根的培养来获得抗癌生物碱长春碱和长春新碱等。     

植物生长物质对红景天愈伤组织诱导和培养的影响

目的:考察植物生长物质对四裂红景天愈伤组织诱导和培养的影响并分析愈伤组织中红景天苷含量。方法:运用正交设计实验,在MS固体培养基中添加不同种类、不同含量的植物生长物质,进行愈伤组织的诱导和培养,并用HPLC检测愈伤组织中红景天苷的含量。结果:培养基中含有2,4-D1mg·L^-1,NAA2mg·L^-1,6-BA0.5mg·L^-1,KT0.1mg·L^-1时,愈伤组织诱导效果最好,诱导率为83.3%。当生长物质配比为2,4-D1mg·L^-1,6-BA0.1mg·L^-1和KT0.5mg·L^-1时,最适于愈伤组织的培养,培养30d后干重达11.77g·L^-1,红景天苷的含量为干重的0.28%。结论:红景天愈伤组织在诱导和培养2个阶段所需的生长物质种类和含量有很大差异;诱导的愈伤组织能够合成红景天苷。     

桃仁的愈伤组织诱导及成分分析

目的：建立诱导桃仁愈伤组织的培养方法。方法：采用MS, B5,Nitsch, Blaydes, White等5种培养基分别进行桃仁愈伤组织诱导培养;采用二阶导数光谱扫描法,测定苦杏仁苷含量。结果：5种不同的培养基均可使无菌的桃仁子叶诱导出愈伤组织。以White培养基的诱导率最高(68.75%),生长最快(1.29 g．L^-1．d^-1),但未能测出苦杏仁苷含量;以Blaydes培养基诱导的愈伤组织苦杏仁苷含量为0.4326%,且愈伤组织诱导率为56.25%,生长率为0.77g．L^-1．d^-1。结论：Blaydes培养基可以作为研究桃仁中苦杏仁苷生物合成和愈伤组织诱导的基础培养基。     

白木香组织培养的初步研究

目的 :考察因素对诱导白木香愈伤组织产生的影响。方法 :用不同外植体、光照条件、激素进行实验。结果 :叶的诱导效果优于茎 ,暗培养优于光照培养 ,5号激素配比优于其他组合。结论 :以叶作外植体 ,在MS+6BA0.8mg·L^-1+NAA1.0mg·L^-1的培养基上进行黑暗培养对诱导白木香愈伤组织效果最好。