自制孕酮质控血清临床应用探讨

目的　探讨自制孕酮质控血清的可靠性、稳定性及临床应用的意义。方法　选择日常检测中发现孕酮浓度与原厂提供的质控品高、中、低值相应的均数在x± 1 .5ng mL范围内的临床血浆标本 ,代替原厂孕酮质控血清。结果　自制孕酮质控血清的可靠性、稳定性与原厂无差别。结论　自制孕酮质控血清完全可以满足室内质控要求 ,且来源方便 ,成本低。     

自制尿HCG定性临界值质控血清的应用效果分析

目的研究自制尿HCG定性质控血清的应用效果。方法使用注射用水对已知HCG浓度血清进行稀释,直到浓度为25.00mIU/mL为止,加入防腐剂后使用一次性EP管进行分装处理,分4℃、0℃、-20℃环境下保存。每天对其进行一次检测并持续一年,同时做好质控记录。结果自制尿HCG定性临界值控制血清,在-20℃环境保存下,质控血清稳定,控制效果好重复性高。从质控记录中监测到由于HCG试纸灵敏度下降,出现四次失控。结论自制尿HCG定性临界值质控血清在-20℃环境下保存,稳定可靠,能够对实际灵敏度进行有效监测,可以将其当成尿HCG定性室内质控物来应用。     

ELISA法检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质量控制

目的 制备以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质控物,并对其应用价值进行初步评价.方法 留取前S1蛋白阳性的人混合血清样本,并用正常人血清将上述收集的血清稀释至所需浓度,与日常标本一起检测,用酶标仪在450nm波长下测光密度值(OD值),计算s/co值的-x±s,CV值,并用Excel软件绘制质控图.结果 自制室内质控物的s/CO值-x=1.93,s=0.26,CV=13.6%.结论 临床实验室可以用前S1蛋白阳性的混合血清样本制备其定性检测的质控物,其制备简单,且可以用Excel软件绘制L-J质控图,有一定的临床实用价值.     

异常血红蛋白电泳室内质量控制的临床初探

目的:初步探讨异常血红蛋白电泳室内质量控制的可行性方案与临床实践。方法:选择临床检测中所得血红蛋白电泳包括Hb Bart's、Hb H、Hb E、Hb F及Hb CS五种临床常见异常血红蛋白,且经由PCR基因确诊的血液标本,自制成血红蛋白质控物,于不同贮存时间点对各异常血红蛋白组分进行检测,记录检测结果并统计分析,评估室内质量控制效果。结果:自制异常血红蛋白电泳质控物在-20℃至少可稳定12个月,各时间段检测数据与相应的全血标本比较,差异无统计学意义(P>0.05),质控结果稳定。结论:自制异常血红蛋白电泳质控物性质稳定,借此质控物可对临床血红蛋白电泳的异常血红蛋白进行室内质量控制。     

对检验质量管理的几点看法

十余年来 ,我院参加卫生部临床检验中心或省临检中心组织的室内室间质评活动并取得了很好的成绩。但通过多年观察也发现其中存在不少问题 ,深感只有搞好临床检验的全程质量控制工作 ,才能真正提高医院临床医学检验的整体水平。1　检验质控中存在的问题1.1　质控血清本身的问题　由于检测项目操作方法多种多样 ,所需血清量也有多有少 ,因而常遇到质控血清量不足的情况 ,临检中心要求检测的项目无法全部完成 ,得不到令人满意的成绩。1.2　标本到实验室之前存在的问题 [1 ]　检验科工作人员主要抓室内、室间质控管理虽然取得好的成绩 ,但检验结…     

自制质控品的应用

目的:探讨自制质控品在化学发光仪上应用的可行性。方法:收集阳性病人检测后的血清,与输血科配血剩余的血袋软管中的血清按比例混合,配制肿瘤标记物(AFP、CEA、TPSA Ca 125、Ca 153、Ca 199、β-HCG)激素类(FSH、LH、To、PRL、E 2、Pro)复合质控品,液体分装,-200C储存,作为质控品随样本每工作日检测一次,连续一年。观察其稳定性,统计12mo各项目的月均值、CV%值、累计均值、CV%值和失控次数,探讨其在室内质量控制中的应用价值。结果:(1)-200C保存的自制质控品复融后外观清澈透明,无浑浊和沉淀。(2)对自制质控品各项目12mo月均值累计均值进行方差分析,差异无统计学意义(P>0.05)各项目月CV%和累计CV%均在不精密度(CV A%)控制允许范围内(CV A%<0.5倍个体内生物学变异);月均值及累计均值未见均值漂移和趋势变化.(3)12mo室内质控活动中,失控报警36次:系统误差25次,随机误差11次。结论:自制质控品具有良好的稳定性,可替代进口产品;自制质控品应用于室内质控中,能及时发现检测系统的不稳定性因素,并加以纠正处理,确保化学发光仪检测结果的可靠性。     

乙肝五项自制外部对照质控血清的研究

目的探讨乙肝五项外部对照质控血清的自制方法,加强实验室工作精密度的监测。方法收集1年量乙肝五项检测全阴的混合血清,稀释试剂厂家提供的高浓度标准品,稀释比由卫生部临床检验中心免疫测定用室内质控血清测定值标定,以5 d量分装、-30℃保存,用全自动酶免疫分析仪连续检测。结果室温复溶自制质控血清后,96 h时24℃下S/CO值较即时测定结果偏低(P0.05),其余时间点及温度下S/CO值差异无统计学意义(P0.05)。连续6个月测定冰冻状态自制质控血清,各月S/CO间总体差异无统计学意义(P0.05)。结论自制外部对照质控血清稳定性较为理想,一定程度可以满足免疫室内质控的要求。     

ELISA监测HBsAg室内Youden质控图的制备及初步应用

目的建立室内Youden质控图，对HBsAg的测定进行室内质控，减少假阳性、假阴性的发生。方法用自制的阴、阳性质控血清同病人标本一起检测，按试剂盒说明书操作，测各孔吸光度值，连续测定20次计算，又、SD、CV值，并绘制Youden质控图。结果1个月内随每日标本加测自制的阴性、阳性质控血清各一份进行室内质控。结论质控结果落在Youden图的方框内，表示此次“在控”，测定结果有效；若落在方框外，表示结果“失控”，按照“失控”程序查明原因后重新测定。     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的室内质控研究

目的研究HBV-DNA荧光定量PCR检测室内质控管理体系。方法自制HBV-DNA阳性质控血清,连续测量20次,计算均值、标准差和变异系数,从第3次开始利用即刻法进行质控,20次以后利用质控图法进行质控。结果自制阳性质控血清均一性和准确度均达到实验要求,用即刻法检测3～20次质控结果均小于N2S数值,在控制范围内,用质控图法检测HBV-DNA室内质控对数值的均值为5.54,标准差为0.22,CV为3.9%,稳定性好,有临床应用价值,质控图利用EXCEL表格标示出警告限和失控限,有利于动态监控质控结果。结论联合即刻法和质控图法对于应用荧光定量PCR的方法进行HBV-DNA检测的室内控制切实可行。     

ALT检测室内质控方法的探讨

血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性测定是献血者血液检测指标之一,也是患者输血前检查指标之一,开展ALT检测室内质控对临床用血安全具有重要意义。目前获得ALT室内质控品的途径主要有两个,一是购买商品化的质控品,问题是存在批间差,更换批号必须重新绘制室内质控图;二是自制质控品,问题是存在技术和生物安全问题。本文对使用标本检测数据进行质量控制的方法进行了探讨,并在我市部分县级供血库试用,取得了较好的质控效果。     

灭活法研制乙肝表面抗原室内质控血清

目的：用灭活法研制乙肝表面抗原（HBsAg）室内质控血清。方法：筛选HBsAg阳性血清,60℃加热1h进行灭活,同时与卫生部临床检验中心提供的HBsAg质控品比较,选取合适浓度的阳性血清作为ELISA法检测HBsAg的室内质控品。结果：该质控品定值为2 IU/ml和10 IU/ml。其稳定性实验表明：2-8℃3个月及-20℃保存6个月的含量无明显变化。均一性检测结果：瓶间不精密度为7.15%和8.97%。结论：60℃加热1h灭活法制备的质控品可以作为用于ELISA法检测HBsAg的室内质控。     

血标本存放时间对血细胞检测结果的影响

目的:探讨室温下正常及病理水平血标本存放时间对全自动血细胞分析检测结果的影响。方法:选取40名体检健康人员(对照组)以及20例血液疾病患者(血液病组)血标本,在20 min内检测,然后分别测定室温(25±0.5)℃放置8、9、10、11、12和24 h血细胞参数值。以20 min内测定结果为对照,所有时间点测定结果与之比较。结果:血小板(PLT)、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞变化差异有统计学意义(P<0.05);各测定值与对照组相比,PLT呈下降趋势,11 h后差异有统计学意义(P<0.05),24 h时降低明显;对照组血标本检测结果中,WBC分类变化显著,表现为中性粒细胞比例降低,淋巴细胞比例及单核细胞比例升高(P<0.05);血液病组血液标本检测结果中,RBC、PLT均出现明显降低(P<0.05)。结论:应用全自动血细胞分析仪检测室温放置10 h内标本,重复性较好,结果可靠,可为临床样本检测、复查核对,提高分析前质量控制提供科学依据。     

HBV DNA聚合酶链反应测定质评血清盘的研制及其应用

目的 研制乙型肝炎病毒（HBV）DNA聚合酶链反应（PCR）测定室间质评用血清盘。方法 从血站献血员收集HBVDNA阴、阳性血浆。经处理后,组成血甭盘,血清盘由22份样本组成。包括5份强阳性、2份弱阳性、5份阴性及2个强阳性的10倍稀释系列（各5份）。并在全国91个实验室进行应用。结果 稳定性试验表明,在室温、4℃及37℃下贮存至少分别可稳定5天、7天和3天,反复冻融至6次,HBVDNA量无明显变化。使用该血清盘对全国HBVDNAPCR测定的室间质评表明,对5份阴性样本测定的假阳性率在1.1%-9.9%之间。对强阳性样本测定假阴性率在6.6%-14.3%之间;对2份弱阳性样本测定的假阴性率分别为47.3%和41.8%。结论 目前全国HBVＤＮＡ ＰＣＲ临床测定大部分实验室存在有不同程度的假阳性和/或阴性问题,有必要建立全国室间质评网络以提高检测质量和水平。     

自制混合血浆建立血凝仪室内质控的可行性探讨

目的:探讨自制混合血浆建立血凝仪室内质控的方法。方法:收集凝血功能正常的病人新鲜混合血浆,分装于EP离心管后放置-20℃低温冰箱保存备用,每天从冰箱中取出2管,放置室温让其自然解冻,1管作为正常值血浆,另1管使用生理盐水准确稀释3倍作为异常值血浆,每天同时检测自制正常值与异常值血浆、配套质控品和临床标本的PT、APTT、Fib。结果:保存3个月内的自制混合血浆,PT、APTT、Fib检测结果与其靶值差异无统计学意义(P>0.05),保存第3个月的自制混合血浆与配套质控品的PT、APTT、Fib检测结果在L-J质控图上的走势一致,相关性良好(r>0.95)。结论:自制混合血浆低温保存,每天取出2管,1管可作为正常值质控血浆,另1管使用生理盐水准确稀释3倍可作为异常值质控血浆进行血凝仪室内质控。     

实验室血样保存条件对降钙素原浓度测定的影响

目的:探讨实验室血样保存类型、温度、时间、密封状态对降钙素原(procalcitonin,PCT)浓度测定的影响。方法:采用高敏免疫化学发光法检测10位脓毒血症患者的血样PCT浓度,分析比较保存不同时间血清与全血、4℃与25℃、密封与非密封PCT值的变化。结果:密封组与非密封组PCT值差异无统计学意义(P>0.05);全血4℃保存4h、25℃保存2h、血清25℃保存4h后,PCT值均较基线值下降,下降具有统计学意义(P<0.05);而血清4℃保存2h时其PCT值较基线值升高,有统计学意义(P<0.05),保存4～8h较基线值升高,但无统计学意义(P>0.05),保存24h后PCT较基线值下降有统计学意义(P<0.05);四组保存24h时PCT值较基线值下降了4.3%～16.8%。结论:检测PCT的血样标本以血清室温下保存最好,全血标本宜于冷藏保存,为提高检测的准确性和稳定性,建议采血后2h内完成检测,或制定规范的检测流程,确保采血与检测的时间间隔相对恒定,以利于PCT值的动态稳定性。     

标本保存方法和时间对血清总二氧化碳结果的影响

目的研究不同的标本保存方法和时间对血清总二氧化碳（total carbon dioxide,TCO2）检测结果的影响。方法保证TCO2检测系统稳定性符合实验室质量目标的前提下,利用高值QC（quality control）、低值QC、混合血清3种样本,分别检测室温敞口、室温封口、4℃敞口、4℃封口时不同时间点TCO2的浓度,计算TCO2浓度随时间的变化率。结果高值QC、低值QC、混合血清在室温敞口保存75 min时,TCO2结果分别下降了9.65%、13.42%、7.74%;4℃敞口保存75 min时,TCO2结果分别下降了8.96%、8.60%、3.94%;在室温封口保存90 min时,TCO2结果分别下降了4.53%、9.43%、3.94%;在4℃封口保存2 h,TCO2结果仅分别下降了3.44%、3.56%、2.19%。结论随着标本保存时间的延长血清TCO2浓度不断下降,并且不同的保存方法下降的速率不同。封口保存TCO2结果下降低于敞口状态,保存温度越低TCO2结果下降越慢。     

血浆标本的保存温度与保存时间对胰岛素浓度的影响

目的探讨血浆标本的保存温度与保存时间对胰岛素浓度的影响程度。方法取18位患者的血液,分离血浆并分成25份,保存于由不同温度和时间组合的25种环境条件下,分析其血浆胰岛素浓度与血浆标本的保存温度、保存时间的关系。结果①血浆的保存温度（F=4．0,P=0．023）与保存时间（F=27．3,P=0．000）对胰岛素浓度的影响均具有统计学意义,且二者对胰岛素浓度的交互影响具有统计学意义（F=7．3,P=0．001）。②4℃时,不同时间的胰岛素浓度差异无统计学意义（P〉0．05）,20℃和37℃时,不同时间的胰岛素浓度差异均具有统计学意义（P〈0．05）。③4℃时,不同保存时间的血浆相对于即时冷冻血浆胰岛素浓度的偏离度呈小范围水平波动趋势;20℃和37℃时,随着时间增加,各标本胰岛素浓度的偏离度大都呈迅速下降趋势。结论血浆标本的保存温度与保存时间均是影响血浆胰岛素浓度的因素,低温是保持血浆胰岛素稳定性的最重要措施。     

不同产地珍珠母药材HPLC特征图谱的建立

目的?建立珍珠母药材HPLC特征图谱,提高其质量控制水平。方法?采用HPLC法测定,Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱（4.6?mm×250?mm,5?μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速0.5?mL/min,检测波长254?nm,柱温为30?℃;以苯丙氨酸为参照物,运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对测定的10批珍珠母药材数据进行处理分析。结果?建立了以5个特征峰为指标成分的珍珠母药材HPLC特征图谱,以苯丙氨酸色谱峰为参照,其他4个特征峰的相对保留时间分别为0.703±0.006、0.814±0.005、0.881±0.001、1.403±0.008。结论?该方法经过方法学验证,可用于珍珠母药材的质量控制。      

血液标本灭活处理对液相串联质谱法伏立康唑治疗药物监测的 影响及其在COVID-19疫情期间的应用

目的 研究新型冠状病毒56 ℃ 30 min灭活方法引起的改变对TDM液质联用优化检测伏立康唑的影响并探讨该方法在疫情防控期间的应用。方法 将临床送检抗凝采血管以75%乙醇表面消毒后,混匀全血,分为非灭活分离血浆组,全血灭活分离血浆组,分离血浆后灭活组。灭活方法采用56 ℃ 30 min水浴,再以1∶3比例的乙腈或乙醇沉淀血浆蛋白处理样品。血浆标准曲线样品及质控样品分别采用同等条件灭活与非灭活处理。结果 应用优化的串联质谱检测方法,伏立康唑在不同浓度下灭活样品平均准确率为97.37%,日间精密度为3.59%,日内精密度为2.81%。以乙腈或乙醇为沉淀蛋白提取溶剂均能获得较高的提取回收率,均值分别为100.56%及95.90%,并且基质效应影响较小,均值分别为102.85%及93.62%。临床标本中,全血及血浆灭活的伏立康唑浓度与非灭活检测结果均呈现良好的线性相关性关系,各组间相关系统均大于0.99。结论 血液标本以采血管内56 ℃ 30 min灭活结合乙醇处理血浆样品对串联质谱法伏立康唑血浆浓度检测影响较小,可用于疫情防控期间伏立康唑液相串联质谱法治疗药物监测的开展。     

高海拔地区中重度乳糜全血制备洗涤红细胞效果分析

目的探讨高海拔地区中、重度乳糜全血制备洗涤红细胞的质量、输注效果及输血不良反应发生情况。方法将采集的中、重度乳糜全血制备的洗涤红细胞作研究组,另将同期以正常血制备的洗涤红细胞作为对照组。检验血液质量,观察临床输注效果及输血不良反应。结果两组均无临床不良输血反应发生,血液质量达到了国家标准要求。结论中、重度乳糜全血制备洗涤红细胞与正常血洗涤红细胞的质量标准一致。