穴位电针刺激对周围性面神经损伤兔面神经核中脑源性神经营养因子和胆碱乙酰转移酶的调节

目的：观察穴位电刺激对面神经损伤兔面神经核中脑源性神经营养因子，胆碱乙酰转移酶的影响，揭示针刺促进损伤面神经再生修复的作用途径。 方法：实验于2005-03／2005-09在黑龙江中医药大学解剖教研室完成。①选用日本大耳白兔120只，雌雄各半，6-8月龄。随机将兔分为5组，每组24只：假手术组、模型组、西药组、传统针刺组、电针刺激组，每组再分为术后7，14，21，28d4个时间点进行观察。②应用神经卡压法造成周围性面神经损伤模型。假手术组：切开左侧面部皮肤后缝合。模型组：造模后不给任何处置。西药组：造模术后第1天每只给予维生素B1 10mg／d，维生素B12 50μg加地塞米松肌肉注射。地塞米松用量从每只2mg／d开始，以后每隔7d减为半量。传统针刺组：造模后第1天开始用0．25mm&;#215;40mm毫针针刺术侧穴位：翳风直刺1．0cm，颧骼直刺0．3cm，地仓直刺0．5cm，颊车直刺0．5cm，四白向下平刺0．5cm、阳白向下平刺0．5cm，每10min捻转1次，留针30min，每针刺治疗5d，休息2d。电针刺激组：从造模后第1天开始取术侧穴位电针刺激，穴位位景、进针角度及进针深度同传统针刺组，翳风（阴极）与颊车（阳极）、地仓（阴极）与四白（阳极）连接全能脉冲电疗仪，频率为1—100Hz，电压2V，疏密波刺激，治疗30min／d，每针刺治疗5d，休息2d。各组均干预28d。③手术后7，14，21，28d，取兔左侧脑于组织，固定，石蜡包埋，切片。采用内氏染色的方法，光镜下观察面神经核中神经元形态的改变。按SP试剂盒操作说明。用免疫组织化学方法对神经元进行染色，每张片显微镜下计数5个固定点高倍（10&;#215;40）视野下面神经核脑源性神经营养因子和胆碱乙酰转移酶表达阳性细胞数。组间计量资料差异比较采用方差分析。 结果：大耳白兔120只均进入结果分析。①面神经核中内氏体：随治疗时间延长，西药组、传统针刺组、电针刺激组均有不同程度增多，其中电针刺激组增多最明显，但这3组仍少于假手术组。②面神经核脑源性神经营养因子阳性神经元数：术后7，14，21，28d电针刺激组均明显多于茸他4组（P〈0．01）；西药组、传统针刺组、电针刺激组均有随治疗时间延长逐渐增多的趋势（P〈0．01）。③面神经核胆碱乙酰转移酶阳性神经元数：术后7。14，21，28d：电针刺激组均明显多于模型组、西药组、传统针刺组（P〈0．01）；西药组、传统针刺组、电针刺激组均有随治疗时间延长逐渐增多的趋势（P〈0．05）。 结论：穴位电针刺激可调节面神经核脑源性神经营养因子、胆碱乙酰转移酶，对面神经神经核神经元具有一定的保护作用，对损伤面神经修复起促进作用。     

穴位电针刺激对周围性面神经损伤兔面神经核中脑源性神经营养因子和胆碱乙酰转移酶的调节

目的:观察穴位电刺激对面神经损伤兔面神经核中脑源性神经营养因子、胆碱乙酰转移酶的影响,揭示针刺促进损伤面神经再生修复的作用途径。方法:实验于2005-03/2005-09在黑龙江中医药大学解剖教研室完成。①选用日本大耳白兔120只,雌雄各半,6～8月龄。随机将兔分为5组,每组24只:假手术组、模型组、西药组、传统针刺组、电针刺激组,每组再分为术后7,14,21,28d4个时间点进行观察。②应用神经卡压法造成周围性面神经损伤模型。假手术组:切开左侧面部皮肤后缝合。模型组:造模后不给任何处置。西药组:造模术后第1天每只给予维生素B110mg/d,维生素B1250μg加地塞米松肌肉注射。地塞米松用量从每只2mg/d开始,以后每隔7d减为半量。传统针刺组:造模后第1天开始用0.25mm×40mm毫针针刺术侧穴位:翳风直刺1.0cm,颧骨谬直刺0.3cm,地仓直刺0.5cm,颊车直刺0.5cm,四白向下平刺0.5cm、阳白向下平刺0.5cm,每10min捻转1次,留针30min,每针刺治疗5d,休息2d。电针刺激组:从造模后第1天开始取术侧穴位电针刺激,穴位位置、进针角度及进针深度同传统针刺组,翳风(阴极)与颊车(阳极)、地仓(阴极)与四白(阳极)连接全能脉冲电疗仪,频率为1～100Hz,电压2V,疏密波刺激,治疗30min/d,每针刺治疗5d,休息2d。各组均干预28d。③手术后7,14,21,28d,取兔左侧脑干组织,固定,石蜡包埋,切片。采用内氏染色的方法,光镜下观察面神经核中神经元形态的改变。按SP试剂盒操作说明,用免疫组织化学方法对神经元进行染色,每张片显微镜下计数5个固定点高倍(10×40)视野下面神经核脑源性神经营养因子和胆碱乙酰转移酶表达阳性细胞数。组间计量资料差异比较采用方差分析。结果:大耳白兔120只均进入结果分析。①面神经核中内氏体:随治疗时间延长,西药组、传统针刺组、电针刺激组均有不同程度增多,其中电针刺激组增多最明显,但这3组仍少于假手术组。②面神经核脑源性神经营养因子阳性神经元数:术后7,14,21,28d电针刺激组均明显多于其他4组(P<0.01);西药组、传统针刺组、电针刺激组均有随治疗时间延长逐渐增多的趋势(P<0.01)。③面神经核胆碱乙酰转移酶阳性神经元数:术后7,14,21,28d:电针刺激组均明显多于模型组、西药组、传统针刺组穴P<0.01雪鸦西药组、传统针刺组、电针刺激组均有随治疗时间延长逐渐增多的趋势穴P<0.05雪。结论:穴位电针刺激可调节面神经核脑源性神经营养因子、胆碱乙酰转移酶,对面神经神经核神经元具有一定的保护作用,对损伤面神经修复起促进作用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤对海马组织中学习记忆相关的胆碱乙酰基转移酶活力变化的影响

背景：海马组织中乙酰胆碱的代谢情况可在一定程度上反映与学习记忆相关的胆碱能系统的功能状况，并影响智能程度。目的：观察大鼠脑缺血再灌注后海马组织胆碱乙酰基转移酶活力的动态变化。设计：以实验动物为观察对象的随机对照实验研究。单位：承德医学院科研处。材料：实验于2002年在承德医学院中心实验室完成。Wistar大鼠24只，体质量260～280岛雌雄各半，清洁级。方法：24只大鼠随机分为3组：①模型组。高脂血症大鼠，阻断大鼠双侧颈总动脉进行脑缺血再灌注。②假手术组。高脂血症大鼠仅做双侧颈总动脉分离术，不进行缺血再灌注。③正常对照组。不加任何处理。各组大鼠分别于术后第1，7，15d断头取脑，用比色法测海马组织胆碱乙酰基转移酶活力。主要观察指标：大鼠脑海马组织胆碱乙酰基转移酶活力的测定。结果：24只大鼠进入结果分析，无脱失。①模型组大鼠第1天、第7天胆碱乙酰基转移酶活力较正常对照组明显降低[模型组：（0．037&;#177;0．006）μmol／g&;#183;s，（0．017&;#177;0．006）μmol／g&;#183;s；正常组对照组：（O．054&;#177;0．003）μmol／g&;#183;s，（0．058&;#177;0．006）μmol／g&;#183;s，P〈0．011。②模型组大鼠第7天胆碱乙酰基转移酶活力明显低于第1天，随着缺血再灌注损伤的修复，第15天胆碱乙酰基转移酶活力有所回升（0．039&;#177;0．007）μnmol／g&;#183;s。③假手术组胆碱乙酰基转移酶活力与正常组无明显差异（P〉0．05）。结论：单纯手术不会导致脑组织胆碱乙酰基转移酶的变化，脑缺血再灌注后可使海马胆碱乙酰基转移酶活力降低，使中枢胆碱能系统功能紊乱，可能是导致大鼠智能障碍的原因。     

大鼠脑缺血再灌注损伤对海马组织中学习记忆相关的胆碱乙酰基转移酶活力变化的影响

背景海马组织中乙酰胆碱的代谢情况可在一定程度上反映与学习记忆相关的胆碱能系统的功能状况,并影响智能程度.目的观察大鼠脑缺血再灌注后海马组织胆碱乙酰基转移酶活力的动态变化.设计以实验动物为观察对象的随机对照实验研究.单位承德医学院科研处.材料实验于2002年在承德医学院中心实验室完成.Wistar大鼠24只,体质量260～280 g,雌雄各半,清洁级.方法24只大鼠随机分为3组①模型组.高脂血症大鼠,阻断大鼠双侧颈总动脉进行脑缺血再灌注.②假手术组.高脂血症大鼠仅做双侧颈总动脉分离术,不进行缺血再灌注.③正常对照组.不加任何处理.各组大鼠分别于术后第1,7,15 d断头取脑,用比色法测海马组织胆碱乙酰基转移酶活力.主要观察指标大鼠脑海马组织胆碱乙酰基转移酶活力的测定.结果24只大鼠进入结果分析,无脱失.①模型组大鼠第1天、第7天胆碱乙酰基转移酶活力较正常对照组明显降低[模型组(0.037±0.006)μmol/g·s,(0.017±0.006)μmol/g·s;正常组对照组(0.054±0.003)μmol/g·s,(0.058±0.006))μmol/g·s,P＜0.01].②模型组大鼠第7天胆碱乙酰基转移酶活力明显低于第1天,随着缺血再灌注损伤的修复,第15天胆碱乙酰基转移酶活力有所回升(0.039±0.007)μnmol/g·s.③假手术组胆碱乙酰基转移酶活力与正常组无明显差异(P＞0.05).结论单纯手术不会导致脑组织胆碱乙酰基转移酶的变化,脑缺血再灌注后可使海马胆碱乙酰基转移酶活力降低,使中枢胆碱能系统功能紊乱,可能是导致大鼠智能障碍的原因.     

针刺对慢性脊髓损伤大鼠神经递质和营养因子表达的影响

目的 探讨针刺治疗慢性脊髓损伤的机理。方法 建立后路渐进性脊髓压迫大鼠模型,然后手术减压,进行电针治疗,观察联合行为评分(CBS)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB的免疫组化检测结果。结果 初次术后90 d,电针组大鼠CBS评分优于减压组( P <0.05),ChAT免疫组化染色阳性细胞数多于减压组 ( P <0.05),神经元和胶质细胞增强的BDNF和TrkB表达得到恢复。结论 电针治疗可能通过影响 BDNF及其受体的表达,促进 ChAT表达和增强其活性而对大鼠慢性脊髓损伤起治疗作用。     

神经营养因子-3转染的雪旺细胞抑制肌细胞凋亡的实验研究

目的:观察阳离子脂质体转染的神经营养因子-3 (neurotrophic factor-3,NT-3)基因修饰的雪旺细胞(SC)的表达和肌细胞凋亡情况,探讨移植复合体对坐骨神经缺损的作用机制.方法:通过阳离子脂质体将NT-3基因转染入体外培养的SC,检测转入前后SC的含量.Wister成年大鼠80只制成坐骨神经缺损模型,根据断端移植物的不同分为A、B、C、D4组.术后不同时间行肌横截面积光镜观察和肌细胞凋亡率检测.结果:NT-3转染SC前后比较差异有显著性(P＜0.05).术后肌横截面积、细胞凋亡D组均优于B、C组,B、C组均优于A组(P＜0.01),而B、C组肌横截面积相比差异无显著性(P＞0.05);而肌细胞凋亡检测B组多于C组.结论:NT-3基因经阳离子脂质体转染效率高,能促进SC的分泌,修复损伤神经和防止失神经肌萎缩细胞凋亡.     

脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用及其细胞内信号传递

目的：观察体外培养大鼠胚脑皮质神经元对缺氧耐受的时间窗，探讨外源性脑源性神经营养因子对缺氧神经元保护作用的时效-量效关系，及该保护作用可能的细胞内信号传递途径。方法：实验于2004-02／2005-02在四川大学华西医院移植工程及移植免疫实验室完成。体外培养孕17-19dSD大鼠皮质神经元，随机数字法分为基线对照组、单纯缺氧组及缺氧＋脑源性神经营养因子组，7d后作缺氧培养，采用四氮唑盐比色法检测0-10h段各时间点单纯缺氧组和缺氧＋脑源性神经营养因子组（分别在缺氧前24h及缺氧前即刻加入25-100μg/L脑源性神经营养因子）存活率的差别，并用Western blotting检测两组神经元在Akt／磷酸化Akt及CREB／磷酸化CREB表达的差别。结果：①脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用是相对的，该保护作用具有时效-量效关系，缺氧前24h加入大剂量脑源性神经营养因子组（100μg/L）优于缺氧即刻加入小剂量（25μg／L）组，缺氧损伤到一定程度后（〉10h）脑源性神经营养因子的保护作用将明显减弱【缺氧前24h加入100μg/L脑源性神经营养因子在1，2，4，8，10h细胞活性分别为基线对照组的（133．85&;#177;3．72）％，（109．83&;#177;5．43）％，（86．15&;#177;0．68）％，（53．78&;#177;1．71）％，（33．41&;#177;1．64）％，而缺氧前即刻加入25μg/L。脑源性神经营养因子组在以上时点细胞活性分别为基线对照组的（81．55&;#177;1．07）％，（92．10&;#177;4．89）％，（78．75&;#177;1．87）％，（43．58&;#177;2.42）％，（33．13&;#177;0．94）％，单纯缺氧组的细胞活性分别为基线对照组的（82．12&;#177;3．15）％，（81．79&;#177;2．61）％，（64．5&;#177;4．56）％，（45．9&;#177;1．74）％，（35．45&;#177;1．25）％】。②加入脑源性神经营养因子可使磷酸化Ah表达增加，磷酸化CREB表达提前并维持较长时间。结论：脑源性神经营养因子可减轻缺氧对神经元的损害，而Akt表达上调可能是脑源性神经营养因子发挥其对缺氧神经元保护作用的重要途径之一。     

复发性抑郁症患者血清脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子水平的研究

目的探讨复发性抑郁症患者血清中脑源性神经营养因子(BDNF)与胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)水平。方法采用酶联免疫吸附法测定49例治疗前的复发性抑郁症患者以及36例正常对照者血清BDNF和GDNF水平,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评定复发性抑郁症患者的抑郁症状。结果复发性抑郁症患者治疗前血清BDNF和GDNF水平显著低于对照组(P<0.01)。在复发性抑郁症患者组,血清BDNF水平与HAMD总分呈显著负相关(P<0.01)。结论复发性抑郁症患者可能存在神经营养因子水平低下,这种变化是否为抑郁发作的生物学指标尚不清楚。     

睫状神经营养因子和脑源性神经营养因子对动眼神经切断后猫动眼神经核神经丝蛋白表达的影响

目的：观察外源性睫状神经营养因子和脑源性神经营养因子对动眼神经切断后猫动眼神经核神经丝蛋白表达的影响。 方法：实验于2004-06／2005-06在中南大学湘雅医学院人体解剖学应用解剖研究室完成。选用健康成年猫30只，建立猫动眼神经切断后硅胶管再生室模型，将建模成功20只随机分为4组，分别为脑源性神经营养因子组、睫状神经营养因子组、脑源性神经营养因子＋睫状神经营养因子组和生理盐水组，每组5只。术后再生室内分别给予睫状神经营养因子、脑源性神经营养因子、脑源性神经营养因子＋睫状神经营养因子和生理盐水各15μL（因子浓度为33mg／L），存活12周后用免疫组织化学方法检测各组动物动眼神经核内神经丝蛋白免疫反应阳性细胞数及阳性细胞灰度值的变化。 结果：猫30只，造模失败10只，最终进入结果分析20只。①各组动物对照侧动眼神经核内神经丝蛋白免疫反应阳性神经元数目和灰度值差异无显著性（P〉0．05）。②生理盐水组手术侧动眼神经核内神经丝蛋白免疫反应阳性神经元数目低于对照侧，差别具有显著性（P〈0．05）。各营养因子组术侧动眼神经核的神经丝蛋白免疫反应阳性神经元数目和免疫染色强度均明显高于生理盐水组（P〈0．05）；③在各营养因子组中，脑源性神经营养因子＋睫状神经营养因子组明显高于脑源性神经营养因子组和睫状神经营养因子组（P〈0．05），脑源性神经营养因子组与睫状神经营养因子组之间无明显差别。脑源性神经营养因子＋睫状神经营养因子组与同组动物未手术侧相比差别均无显著性（P〉0．05），而脑源性神经营养因子组和睫状神经营养因子组与同组动物未手术侧相比差别均有显著性（P〈0．05）。 结论：外源性睫状神经营养因子和脑源性神经营养因子均可上调动眼神经切断后猫动眼神经核的神经丝蛋白表达，联合应用具有协同作用。     

脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用及其细胞内信号传递

目的:观察体外培养大鼠胚脑皮质神经元对缺氧耐受的时间窗,探讨外源性脑源性神经营养因子对缺氧神经元保护作用的时效-量效关系,及该保护作用可能的细胞内信号传递途径。方法:实验于2004-02/2005-02在四川大学华西医院移植工程及移植免疫实验室完成。体外培养孕17～19dSD大鼠皮质神经元,随机数字法分为基线对照组、单纯缺氧组及缺氧 脑源性神经营养因子组,7d后作缺氧培养,采用四氮唑盐比色法检测0～10h段各时间点单纯缺氧组和缺氧 脑源性神经营养因子组(分别在缺氧前24h及缺氧前即刻加入25～100μg/L脑源性神经营养因子)存活率的差别,并用Westernblotting检测两组神经元在Akt/磷酸化Akt及CREB/磷酸化CREB表达的差别。结果:①脑源性神经营养因子对缺氧神经元的保护作用是相对的,该保护作用具有时效-量效关系,缺氧前24h加入大剂量脑源性神经营养因子组(100μg/L)优于缺氧即刻加入小剂量(25μg/L)组,缺氧损伤到一定程度后(>10h)脑源性神经营养因子的保护作用将明显减弱犤缺氧前24h加入100μg/L脑源性神经营养因子在1,2,4,8,10h细胞活性分别为基线对照组的(133.85±3.72)%,(109.83±5.43)%,(86.15±0.68)%,(53.78±1.71)%,(33.41±1.64)%,而缺氧前即刻加入25μg/L脑源性神经营养因子组在以上时点细胞活性分别为基线对照组的(81.55±1.07)%,(92.10±4.89)%,(78.75±1.87)%,(43.58±2.42)%,(33.13±0.94)%,单纯缺氧组的细胞活性分别为基线对照组的(82.12±3.15)%,(81.79±2.61)%,(64.5±4.56)%,(45.9±1.74)%,(35.45±1.25)%犦。②加入脑源性神经营养因子可使磷酸化Akt表达增加,磷酸化CREB表达提前并维持较长时间。结论:脑源性神经营养因子可减轻缺氧对神经元的损害,而Akt表达上调可能是脑源性神经营养因子发挥其对缺氧神经元保护作用的重要途径之一。     

神经营养因子3纳米微球载体基因工程转染许旺细胞

背景：纳米微球基因转染技术携带或增强种植细胞可持续稳定延长其释放,保持其活性和作用时间。目的：观察纳米微球载体转染神经营养因子3基因修饰的许旺细胞对坐骨神经缺损的促进和修复作用。方法：采用纳米微球载体将神经营养因子3基因转染入体外培养的新生Wistar大鼠许旺细胞。取Wistar成年大鼠80只制作坐骨神经缺损模型,将4种不同的移植物注入细胞外基质凝胶一聚乳酸聚羟基乙酸共聚物管桥接管内：空白对照组未注入其他任何物质,细胞组注入许旺细胞,基因组注入神经营养因子3基因,实验组注入神经营养因子3基因修饰的许旺细胞。结果与结论：术后坐骨神经及肌纤维横截面积染色比较,实验组优于细胞组、基因组（P〈0．01）,细胞组、基因组均优于空白对照组（P〈0．01）,细胞组、基因组组间比较差异无显著性意义（P〉0．05）。表明神经营养因子3基因转染许旺细胞移植,可相互促进,再造神经再生的微环境,促进并修复缺损坐骨神经缺损。     

Effect of platelet‐rich plasma (PRP) concentration on proliferation,neurotrophic function and migration of Schwann cells in vitro

Platelet‐rich plasma (PRP) contains various growth factors and appears to have the potential to promote peripheral nerve regeneration, but evidence is lacking regarding its biological effect on Schwann cells (SCs). The present study was designed to investigate the effect of PRP concentration on SCs in order to determine the plausibility of using this plasma‐derived therapy for peripheral nerve injury. PRP was obtained from rats by double‐step centrifugation and was characterized by determining platelet numbers and growth factor concentrations. Primary cultures of rat SCs were exposed to various concentrations of PRP (40%, 20%, 10%, 5% and 2.5%). Cell proliferation assays and flow cytometry were performed to study to assess SC proliferation. Quantitative real‐time PCR and ELISA analysis were performed to determine the ability of PRP to induce SCs to produce nerve growth factor (NGF) and glial cell line‐derived neurotrophic factor (GDNF). Microchemotaxis assay was used to analyse the cell migration capacity. The results obtained indicated that the platelet concentration and growth factors in our PRP preparations were significantly higher than in whole blood. Cell culture experiments showed that 2.5–20% PRP significantly stimulated SC proliferation and migration compared to untreated controls in a dose‐dependent manner. In addition, the expression and secretion of NGF and GDNF were significantly increased. However, the above effects of SCs were suppressed by high PRP concentrations (40%). In conclusion, the appropriate concentration of PRP had the potency to stimulate cell proliferation, induced the synthesis of neurotrophic factors and significantly increased migration of SCs dose‐dependently. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

不同浓度的肌肉源神经生长因子对游离神经移植修复脊髓损伤的作用

目的探讨不同浓度的肌肉源神经生长因子(mNTF)对游离神经移植修复脊髓损伤作用及高浓度的mNTF是否会产生高效应。方法从3周龄Wistar大鼠腓骨肌中提取mNTF,用1mm×1mmPhast凝胶块运载后放入移植的游离神经与脊髓的连接处。并将30只成年Wistar大白鼠根据其浓度不同随机分成对照组(10只),低浓度组(10只)和高浓度mNTF实验组(10只)。结果单纯游离的周围神经移植后4周仅仅见到极其微弱的脊髓神经的再生。加入低浓度mNTF后脊髓神经的再生极显著地提高。高浓度mNTF组中虽然脊髓神经的再生能力较对照组明显提高,但是反而明显少于低浓度mNTF组。结论肌肉源神经生长因子(mNTF)对游离神经移植修复脊髓损伤有明显的促进作用,但是仅仅补充高浓度mNTF,而不补充其它营养因子,则会造成其“营养失衡”,所以结果反而不好。     

多发性骨髓瘤细胞脑源性神经营养因子对血管新生作用的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)细胞脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平及其与MM细胞诱导的血管新生的关系。方法采用RT-PCR法、Western blot法及ELISA法检测MM细胞系KM3、RPMI8226细胞BDNF的表达及分泌。采用MTT法观察MM细胞培养上清液对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的作用;用改良的Boyden小室法观察MM细胞培养上清液对HUVEC迁移的影响;采用体外小管形成实验,观察MM细胞培养上清液对HUVEC分化的影响。结果KM3、RPMI8226细胞不仅表达BDNF mRNA,也表达和分泌BDNF蛋白,BDNF的基础分泌水平在其生物学作用范围内。KM3、RPMI8226细胞培养上清液均可明显促进HUVEC增殖,含50.0%KM3细胞培养上清液组和完全KM3细胞培养上清液组HUVEC数分别为对照组的(1.85±0.23)倍和(2.16±0.29)倍(P<0.05),抗人类BDNF中和抗体可部分抑制其促增殖活性;含50.0%KM3细胞培养上清液组HUVEC迁移指数为1.85±0.23,完全KM3细胞培养上清液组HUVEC迁移指数为2.16±0.29,与对照组比较,差异有统计学意义(P值均<0.05),并可明显促进基质胶中网状毛细血管形成(P<0.01),抗BDNF中和抗体可明显抑制其作用。结论MM细胞表达和分泌BDNF,BDNF可能参与MM细胞诱导的血管新生。     

长程经颅磁刺激对脑梗死大鼠皮质脑源性神经营养因子表达及神经功能恢复的影响

目的探索长程经颅磁刺激（TMS）对脑梗死大鼠梗死灶周围皮质脑源性神经营养因子（BD-NF）表达和脑损伤体积、神经功能恢复的影响及作用机制，为经颅磁刺激在脑梗死治疗及康复中的应用提供理论依据。方法TMS组与假刺激组大鼠各48只，于大脑中动脉阻塞／再灌注（MCAO／R）90min后的3周内每日接受1次TMS（200脉冲）与假刺激治疗。检测2组大鼠神经功能恢复情况、梗死灶周围皮质BDNF免疫阳性细胞表达及脑损伤体积，对所得资料进行统计学分析。结果在治疗2周和3周时，TMS组神经功能缺损评分与假刺激组相比均明显降低（P〈0．01）。TMS组在治疗3d、7d、14d、21d时梗死灶周围皮质BDNF阳性细胞计数与假刺激组各对应时间点相比，差异均有统计学意义（P〈0．01），且2组治疗21d时梗死灶周围皮质BDNF阳性细胞计数与大鼠神经功能缺损评分呈显著负相关（r=-0．877，P〈0．01）。治疗3周后，TMS组脑损伤体积明显小于假刺激组（P〈0．05），2组脑损伤体积与最终神经功能缺损评分明显相关（r=0．859，P〈0．01）。结论长程TMS有促进脑梗死大鼠神经功能缺损恢复的作用，其作用通过持续上调梗死灶周围皮质BDNF阳性细胞表达、减小梗死后脑损伤体积等作用而实现。     

脑源性神经营养因子抗体对大脑中动脉阻塞大鼠缺血损伤的影响

AIM:To observe the effect of the antibody of brain derived neurotrophic factor(BDNF) by cortical microinjection on hippocampal ischemic injury rats.METHODS:Preparation of local cerebral ischemic reperfusion injury model: cortical stereostaxic approach, microinjection of BDNF antibody. Applied immunohistochemical method to observe distribution of BDNF in cortex after injection of the antibody,to observe the alteration of ischemic injury between control group and BDNF antibody group.RESULT: The volume of cerebral infarction in BDNF antibody group was larger than control group.CONCLUSION: BDNF has protection function for cerebral ischemia.     

Generation and characterization of highly purified canine Schwann cells from spinal nerve dorsal roots as potential new candidates for transplantation strategies

Schwann cells are promising candidates for transplantation strategies in the central nervous system by promoting axonal regeneration. The dog represents a translational model for human spinal cord injury (SCI) for studies with new repair strategies after intervertebral disk herniation (IVDH). To overcome the necessity for an additional surgical procedure, for the first time a protocol for the isolation and purification of canine Schwann cells from spinal nerve biopsies during standard hemilaminectomy in IVDH‐affected paraplegic dogs for potential transplantation has been developed. Purity was assessed by flow cytometry. The results were compared with biopsies from dogs without SCI. Within 26 ± 4 days, 90.2 ± 8.8% p75 neurotrophin receptor (p75^NTR)‐positive cells were achieved in IVDH dogs. The total cell count in acute/subacute and chronic IVDH (acute/subacute: 6.82 ± 6.36 × 10⁶; chronic: 2.29 ± 2.00 × 10⁶) differed significantly (p = 0.0120) at the potential time point of transplantation. No differences in culture period and purity were detected between dogs with and without IVDH. Despite the small sample size and the altered environment, the isolation of Schwann cells was successful. Negative influences on isolation and purification due to potential pathological changes at the biopsy site of IVDH‐diseased dogs were ruled out by comparison of Schwann cell pellets from diseased and control dogs. Finally, the functionality of Schwann cells from dogs with IVDH was outlined in co‐culture experiments with canine dorsal root ganglion neurons. In conclusion, nerve root biopsies provide a sufficient number of highly purified and functional Schwann cells within a useful time period for novel therapeutic strategies in dogs with SCI.