肠淋巴再灌注加重肠系膜上动脉闭塞性休克大鼠的脑损伤

目的:观察肠淋巴再灌注(MLR)对肠系膜上动脉闭塞性(SMAO)休克大鼠脑组织形态学以及神经递质的影响;从氧自由基、一氧化氮(NO)、中性粒细胞、膜泵、能量代谢等方面揭示其机制。方法:24只Wistar雄性大鼠均分为4组:sham组,仅麻醉与手术;MLR组,夹闭肠系膜淋巴管(ML)1h,再灌注2h;SMAO组,夹闭肠系膜上动脉(SMA)1h,再灌注2h;MLR+SMAO:夹闭ML和SMA1h,再灌注2h。再灌注2h后,选择固定位置留取脑组织,制备病理切片,观察形态学;同时制备脑组织匀浆,检测乙酰胆碱转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)以及乳酸(LA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、NO、一氧化氮合酶(NOS)、髓过氧化物酶(MPO)、细胞膜泵(ATPase)及三磷酸腺苷(ATP)水平或活性。结果:Sham与MLR组大鼠脑组织结构基本正常;SMAO组大鼠可见神经元有坏死、变性,偶见肿胀;MLR+SMAO组神经元损伤情况较SMAO组重。SMAO与MLR+SMAO组脑匀浆MDA、NO、LA含量、AChE、NOS与MPO活性均显著高于、ChAT活性与DA、NE含量显著低于MLR与sham组,且MLR+SMAO组脑匀浆MDA、NO含量、AChE、NOS与MPO活性均显著高于SMAO组;SMAO组脑匀浆SOD、Na+-K+-ATPase活性显著低于sham与MLR组、Mg2+-ATPase活性、ATP含量显著低于MLR组;MLR+SMAO组脑匀浆的SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性均显著低于sham与MLR组,且DA含量、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性、ATP含量均显著低于SMAO组。结论:MLR加重SMAO休克大鼠的脑损伤、降低脑组织DA水平、增高AChE活性,其机制可能与MLR加重或增加脑组织氧自由基损伤、NO合成与释放、中性粒细胞扣押、能量代谢障碍及降低脑组织细胞膜泵活性等因素有关。     

腺苷预处理培养大鼠心肌细胞后酶活性变化和超微结构观察

目的 :应用组化方法和透射电镜 ,观察腺苷预处理培养大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性细胞超微结构的变化。方法 :取SD大鼠乳鼠心室肌细胞在无菌状态下 ,用DMEM常规培养 5天后分四组 :正常对照组、拟缺血再灌注组、拟缺血预处理组、腺苷预处理组 ,用组化方法检测心肌酶活性 ;以透射电镜观察细胞形态结构变化。结果 :在缺血预处理组和腺苷预处理组琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性均高于拟缺血再灌注组 ,且细胞结构保存良好 ;缺血预处理组、腺苷预处理组与正常对照组无显著性差异。结论 :腺苷预处理对缺血再灌注心肌细胞具有类似缺血预处理的保护作用     

肝部分切除后再生期间肾上腺皮质的组织化学变化

本研究观察了成年大鼠肝大部切除后1、3、6天肾上腺皮质的组织化学变化。结果表明,MAO(单胺氧化酶)、SDH (琥珀酸脱氢酶)、G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、脂类、AlP (碱性磷酸酶)、ATPase (腺苷三磷酸酶) 均有不同程度的变化,而AcP (酸性磷酸酶)、5′-Nase(5′-核苷酸酶)、NsE(非特异性酯酶) 无明显变化。     

豚鼠胃肠壁内神经丛酶组织化学研究:Ⅰ.关于能量代谢的酶和基本物质的组织化学研究

应用光镜组织化学半定量方法,观察了40只正常成年豚鼠胃肠各段壁内神经丛神经元的Mg~( )-ATPase、Ca~( )-ATPase、CCO (细胞色素氧化酶)、SDH (琥珀酸脱氢酶)、LDH (乳酸脱氢酶)、G6PDH(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、G6Pase(葡萄糖6-磷酸酶)、碳水化合物、蛋白质、     

家兔发育过程中主动脉旁体和肾上腺髓质细胞的酶组织化学观察

为阐明主动脉旁体和肾上腺髓质细胞的功能特点,本实验应用组织化学方法,对胚胎21、28天及生后1、5、10、15天,1和2个月家兔主动脉旁体和肾上腺髓质细胞内9种酶的活性进行了比较观察。用四唑盐法显示琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和单胺氧化酶(MAO);用铅法显示酸性磷酸酶(AcP)、三磷酸腺苷酶(Mg~(2+)—ATP酶)、硫胺素焦磷酸酶(TPP酶)和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P);用亚铁氰化铜法显示乙酰胆碱酯酶(AchE);用偶氮色素法显示非特异性酯酶(NsE)。结果表明,胚胎21天时,两个器官的细胞除有较强的LDH活性外,其余各种酶活性均较弱。从胚胎期至生后早期,主动脉旁体细胞的SDH、LDH和Mg~(2+)-ATP酶,均较同期肾上腺髓质细胞活性强,尤以LDH     

癫痫持续状态大鼠脑组织化学与图像分析研究

马桑内酯致大鼠癫痫持续发作6小时，用组织化学与图像分析方法研究了大脑，小脑和海马的溶酶体性酸性磷酸酶和镁激活的三磷酸腺苷酶的变化，观察到在大部分脑区酶活性增强，阐明了在癫痫持续状态下分解代谢及能量代谢均较活跃。     

高血压大鼠视网膜酶组织化学的研究

为探讨糖和能量代谢酶在高血压视网膜病变发生过程中的作用，应用光镜定量酶组织化学方法对ＷＫＹ大鼠和自发性高血压大鼠视网膜的琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、葡萄糖－６－磷酸酶和三磷酸腺苷酶的分布和活性进行了定量观察。结果表明：琥珀酸脱氢酶和三磷酸腺苷酶在视网膜组织中主要分布杆锥层内节，而乳酸脱氢酶和葡萄糖－６－磷酸酶主要分布在视网膜的内核层、内网层、节细胞层和神经纤维层。在高血压大鼠视网膜组织内琥珀酸脱氢酶     

胃迷走神经切除术后豚鼠胃肠壁内神经丛酶组织化学变化的研究

正常成年豚鼠48只,分为胃迷走神经切除术组(简称神经切除组)、假手术组及正常对照组。分别于术后1、3、6、10天,取胃体、幽门和十二指肠。恒冷箱切片,作镁激活的三磷酸腺苷酶(Mg~(2+)-ATPase)、钙激活的三磷酸腺苷酶(Ca~(2+)-ATPase)、细胞色素氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和葡萄糖-6磷酸酶(G-6-Pase)7种酶的组织化学反应。在光镜下,对壁内神经节7种酶反应做了半定量观察,还对两种ATPase作了显微分光光度计测定,并作统计学处理。本文结果表明,与假手术组及正常对照组相比,神经切除组术后3～6天胃体、幽门及十二指肠3个部位神经元的Mg~(2+)-ATPasc、Ca~(2+)-ATPase及CCO反应出现强弱不等的改变。这种强弱不等的酶反应变化,可能同各神经元与迷走神经联系不同有关,表明神经元的性质和功能各异。但半定量及定量结果的统计学分析表明,神经切除组与假手术组和正常对照组相比,术后不同时间酶活性变化差异无显著性(P>0.05)。本研究的结果表明,壁内神经节不同于一般的自主神经节,其中的神经元可能具有较高程度的自主调节与代偿适应能力。此外,本文还对跨神经元变性提供了有意义的知识。     

非创伤性预处理对大鼠缺血心脏的保护效应

目的 :探讨三种非创伤性预处理对大鼠缺血心脏的保护效应。方法 :采用 2 5 0g～ 3 0 0 gSD雄性大鼠 48只 ,分成 6组 ,即假手术组(Ⅰ组 )、缺血 /再灌组 (Ⅱ组 )、经典缺血预处理组 (Ⅲ组 ) ,缺氧预处理组 (Ⅳa组 )、后肢缺血预处理组 (Ⅳb组 )、去甲肾上腺素预处理组 (Ⅳc组 ) ,观察各组左室梗塞范围、心肌琥珀酸脱氢酶 (SDH )、Ca2 + Mg2 + ATPase、细胞色素氧化酶 (CCO)活性的变化。结果 :Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc三组非创伤性预处理均可明显缩小左室梗塞范围、提高心肌SDH、Ca2 + Mg2 + ATPase、CCO酶活性。结论 :三种非创伤性预处理均能使大鼠显示和经典预处理相类似的心脏保护效应。     

腺相关病毒载体介导的PLB基因反义RNA对大鼠心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase活性和［Ca2+］i的作用

目的：探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白（PLB）反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度（［Ca2+］i）的作用。 方法： 构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体（rAAV-asPLB）和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体（rAAV-LacZ）。分别转染培养的大鼠心肌细胞，测定PLB mRNA和蛋白质表达，检测肌浆网Ca2+-ATPase活性和［Ca2+］i。 结果： RT-PCR和Western blotting显示，感染rAAV-asPLB的心肌细胞的PLB mRNA和蛋白质表达低于正常对照和感染rAAV-LacZ组；而Ca2+-ATPase活性大于正常对照和感染rAAV-LacZ组。激光共聚焦显微镜检测显示，静息状态时，rAAV-asPLB感染组［Ca2+］i降低；异丙肾上腺素刺激后，各组［Ca2+］i均升高，但是rAAV-asPLB感染组［Ca2+］i变化幅度大。 结论： 腺相关病毒介导的PLB反义RNA对大鼠心肌细胞PLB表达具有抑制作用，增强Ca2+-ATPase活性，降低静息状态的［Ca2+］i ，增加异丙肾上腺素刺激后［Ca2+］i 的变化幅度。     

糖尿病大鼠膈肌酶组织化学研究

目的:观察糖尿病早期膈肌酶组织化学变化,以了解糖尿病膈肌的损害。方法:应用酶组织化学方法观察糖尿病4周大鼠膈肌组织脱氢酶、水解酶和氧化酶活性变化。结果:糖尿病4周大鼠膈肌组织琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、辅酶Ⅰ黄递酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性磷酸酶和酸性-α-萘酸性酯酶活性强于对照组,乳酸脱氢酶和细胞色素氧化酶活性弱于对照组,辅酶Ⅱ黄递酶无明显改变,5'-核苷酸酶不着色。图像分析显示糖尿病大鼠膈肌组织琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、辅酶Ⅰ黄递酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性磷酸酶和酸性-α-萘酸性酯酶着色深度(A)明显高于对照组,而乳酸脱氢酶和细胞色素氧化酶明显低于对照组,辅酶Ⅱ黄递酶无明显差异。结论:糖尿病4周大鼠膈肌组织有氧氧化能力增强、糖酵解能力减弱、脂肪及能量代谢紊乱。     

50Hz磁场长期暴露对大龄大鼠学习记忆及脂质过氧化反应的影响

目的探讨长期0.1mT 50Hz磁场暴露对大龄大鼠学习记忆及海马组织的超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与丙二醛(MDA)水平的影响.方法应用Morris水迷宫方法测定动物的空间学习记忆能力;应用试剂盒分别测定SOD、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及MDA水平.结果 10d 0.1mT 50Hz磁场暴露对大龄大鼠的学习记忆功能无明显影响.长期(4个月或8个月)0.1 mT 50Hz磁场暴露能使大鼠的逃避潜伏期明显延长,穿环系数显著减少,表明人鼠的空间学习记忆能力受损.长期磁场暴露也使大龄人鼠海马组织及其线粒体的SOD活件降低,MDA水平升高,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低.结论长期0.1 mT 50Hz磁场暴露可损伤大龄大鼠的学习记忆能力,此作用可能与其增强海马组织的脂质过氧化反应有关.     

大鼠海马CA1区酶组织化学研究

本文用组织化学方法,选择能反映神经组织糖代谢三个途径的关键酸及碱性磷酸酶,对正常SD系大鼠海马酶活性进行半定量研究.结果CA1区锥体层琥珀酸脱氢酶(SDH)及细胞色素氧化酶(CCO)呈轻度反应,葡萄糖-6一磷酸脱氢酶(G—6—PD)及乳酸脱氢酶(LDH)呈强阳性.腔隙分子层LDH、G—6—PD呈轻度活性,CCO、SDH呈强阳性.CA1区锥体层碱性磷酸酶(AKP)活性最弱.讨论了酶活性不同与记忆的关系及临床意义.     

豚鼠胃肠壁内神经丛的能量代谢的酶和基本物质的组织化学观察

本文研究了正常成年豚鼠胃肠壁内神经丛神经元(简称肠神经元)的镁激活的三磷酸腺苷酶(Mg~(++)-ATPase)、钙激活的三磷酸腺芏酶(Ca~(++)-ATPase)、细胞色素氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6 PDH)和葡萄糖-6-磷酸酶(G 6Pase),并对糖类、蛋白质、脂类和核酸做了观察。除光镜的半定量观察外,并用显微光度计对两种ATPase做了定量测量。光镜的半定量结果和显微光度计测得的数据经计算机做了统计学处理。本文的结果表明,肠神经元具有上述各种酶活性,提示神经元与这些酶有关的代谢活跃。但粘膜下丛与肠肌丛酶活性差异显著,前者SDH活性较强,后者LDH、G6 PDH和两种ATPase活性较强。据此推测,两神经丛神经元的主要糖代谢方式、能量代谢以及机能活跃程度有明显的差别。此外,胃肠各段肠肌丛酶活性强度不一,十二指肠和近端结肠各种酶活性最强,盲肠最弱。本文的结果表明,肠神经元的代谢和功能确有相当的差别,但酶活性的差异同神经元类型的关系如何,有待继续研究。     

微血管研究新方法——腺苷三磷酸酶法

用组织化学方法进行血管形态研究,是一种较好的方法。有关碱性磷酸酶染色法研究血管形态,Bell(1981)及王有伟等(1986)分别用来研究人脑血管取得成功。用其他组织化学方法作为血管形态的研究至今尚未见到报道。最近我们发现利用钙激活的腺苷三磷酸酶(ATPase)法显示血管形态是一种较为理想的方法,它不仅同碱性磷酸酶钙钴法一样能清楚显示微血管形态,而且弥补了碱性磷酸酶法显示小静脉形态不足的缺点。特简介如下:钙激活的腺苷三磷酸酶法由Wachstein和Meisel二氏1959年创立,Niles1964年     

新农药川化018对连继染毒大鼠后代的毒性试验(摘要)

本试验以甲状腺组织学、酶活性组织化学及甲状腺功能等检查为主要指标,观察了新农药川化018[N、N′—甲撑一双—(2—氨基—5—巯基—13.4—噻二唑,]及其“中间体”(2—氨基—5—巯基1.34—噻二唑)对繁殖试验仔一代第二窝后代的慢性毒性。实验发现,川化018(500PPM)及其“中间体”(250PPM)可使甲状腺组织明显增生,所测酶组织化学指标,除酸性非特异性酯酶正常,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、单胺氧化酶、过氧化物酶、乙酰胆碱酯酶,葡萄糖—6—磷酸酶,酸性磷酸酶等都出现不同程度活性增高。而川化018低剂量组(5PPM)与正常对照组未见差异。     

海水浸泡失血性休克大鼠肝、心肌线粒体功能的改变

目的研究海水浸泡对失血性休克大鼠心、肝线粒体功能的影响.方法雄性Wistar大鼠30只,分为3组正常对照组(n=10);平原失血性休克组(n=10);海水浸泡失血性休克组(n=10).测定血流动力学及心肌和肝细胞线粒体H+-ATPase、琥珀酸脱氢酶、Ca2+-Mg2+-ATPase、质子转运及线粒体总钙的变化.取心室肌和肝脏各6g,制备线粒体和亚线粒体,线粒体及亚线粒体制备按差速离心法;H+-ATPase采用定磷法;SDH采用氯化三苯四唑法;MDA采用国产试剂盒;Ca2+-Mg2+-ATPase活性测定采用蒋纬莹法加以改进;亚线粒体质子跨膜转运的测定采用荧光探剂ACMA(9-氨基-6-氯-甲氧基吖啶)标记法;若测定ATP引起的跨膜[H+]转运,则先加入呼吸链阻断剂氰化钾(1mmol/L)以阻断细胞色素C到氧的电子传递,测定时先进行ACMA激发波长[EX]和发射波长[EM]的扫描,记录荧光强度和荧光淬灭时间;线粒体钙含量采用原子吸收法测定.结果海水浸泡失血性休克动物血液动力学,心肌和肝细胞线粒体H+-ATPase、琥珀酸脱氢酶、Ca2+-Mg2+-ATPase活性均显著低于正常对照组和平原休克组.海水浸泡失血性休克组心、肝线粒体H+-ATPase活性分别降为对照值的78%和76%;海水浸泡SDH值降为对照值的42%;Ca2+-Mg2+-ATPase活性分别为对照组的63%和70%;肝、心肌组织钙含量分别为对照组的2.97、1.70倍;肝细胞亚线粒体测定质子跨膜线粒体内膜转运能力,ACMA最大荧光淬灭幅度△Amax稍有减少,ATP激活的荧光淬灭时间显著延长(P＜0.01),以NADH诱导的荧光淬灭时间也显著延长.亚线粒体质子转运能力与平原休克组无显著差别.结论线粒体是机体能量代谢、ATP合成和水解的重要部位.海水浸泡失血性休克心肌、肝线粒体酶活性下降,线粒体总钙升高,伤情比平原显著加重.     

Balb/c小鼠附睾分段的光镜组织化学观察

本研究以Balb/c小鼠为对象,应用组织化学方法,观察了附睾近侧端的酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(AIP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷酶(ATPase)的反应活性和用PAS反应显示的附睾管糖蛋白。依组织学和酶学分析,附睾近侧端可分为七段,第1段为附睾的输出小管段,第2～5段组成附睾头,第6、7段形成附睾体。酶反应结果显示:附睾管的起始段(即第2段),上皮细胞AlP,SDH,LDH酶反应活性低,ATPase反应在上皮细胞核上区及游离缘处活性较强,AcP反应活性较强,其阳性颗粒分布于整个上皮     

烧伤合并吸人性肺炎后心肌细胞膜ATP酶的变化

目的探讨烧伤或烧伤合并感染后心肌功能损害的原因.方法制作30%Ⅲ烧伤,吸人性肺炎的动物(大白鼠)模型.分成S组(假伤)、P组(单纯肺炎)、B组(烧伤)、BP组(烧伤+肺炎)等四组.测定四组实验动物心肌细胞膜上Na+-K+-ATPase,Mg++-ATPase,Ca++-ATPase,Ca++-Mg++-ATPase4种ATP酶的活力,同时作血培养.结果B组、P组、BP组心肌细胞膜ATP酶活力较N组明显下降.同时血培养阳性率也明显增高,以BP组最高.结论烧伤后易发生感染,由于烧伤感染后心肌细胞ATP酶活力下降,导致伤后心肌功能的下降及心脏的损害.     

酪氨酸磷酸酯酶抑制剂对tau蛋白磷酸化作用的研究

目的:探讨受体酪氨酸磷酸酯酶对大鼠海马tau蛋白磷酸化的影响。方法: 大鼠海马直接注射酪氨酸磷酸酯酶(PTP)抑制剂钒酸钠(PVN)或糖原合酶激酶(GSK-3)抑制剂氯化锂(LiCl),24h后用免疫印迹和免疫组织化学方法检测大鼠海马tau蛋白磷酸化水平。结果: PVN可以明显降低大鼠海马tau蛋白PHF-1位点磷酸化水平,且比LiCl的作用强(P<0.01),与LiCl联用使非磷酸化位点tau-1明显增强(P<0.05),总tau蛋白(R111d)含量显著降低(P<0.05)。结论: PTP抑制剂明显降低大鼠海马tau蛋白磷酸化, 其机制可能与GSK-3失活有关。