一步酶裂解法生产7-氨基头孢烷酸的工艺改进

目的研究一步酶裂解法生产7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的合成工艺。方法依据生物催化7-ACA法的反应机制,在7-ACA一步酶法裂解反应中,分别以氨水和碳酸钠作为反应体系的p H值调节剂,对所得的实验数据进行比较分析。结果与结论以碳酸钠代替氨水作p H值调节剂,反应后7-ACA浓度、反应物残留浓度、杂质及收率等指标均无差别,但是用碳酸钠代替氨水裂解时氨氮值平均降低了80.33%,该方法绿色环保,对环境污染小,适合工业化生产。     

药物中间体7-氨基头孢烷酸的制备

药物中间体7-氨基头孢烷酸（7-ACA）的工业化生产国内多局限于化学裂解法，由于该法有某些缺点，因此，本文介绍了环保型的酶法催化生产7-ACA的制备方法。该制备方法以头孢菌素C为起始原料，经固定化D-AOD氧化酶和GL-脱酰酶的作用，酶法裂解制得7-ACA，得到7-ACA的总收率达到74％。实验结果说明该方法是可行的，并且具有重要的现实意义。本文还对影响反应的因素做了进一步的讨论。     

低温酰化工艺在7-氨基头孢烷酸生产中的应用

目的 将低温酰化工艺应用于7-氨基头孢烷酸的生产,提高7-氨基头孢烷酸质量。方法 降低7-氨基头孢烷酸生产过程中,酰化步骤的反应温度,由(13±1)℃改为(10±1)℃。结果 D-7-ACA和单杂两项杂质,分别由0.30%和0.15%降低至0.25%和0.10%。结论 该工艺改进简单可行,可有效提高7-氨基头孢烷酸质量,适用于产业化生产。     

毛细管电泳分析7-氨基头孢霉烷酸生产过程

建立了高效毛细管电泳分析法检测7-氨基头孢霉烷酸生产过程.采用未涂层石英毛细管柱,缓冲液为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH 8.0),运行电压30kV,检测波长254nm.7-氨基头孢霉烷酸、头孢菌素C和戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸的线性范围(mg/ml)分别为0.05～3(r=0.998)、0.1～3.5 (r=0.992)和0.1～5 (r=0.996),迁移时间和峰面积的RSD分别为0.5%、1.0%、0.6%和2.2%、3.0%、2.4%.     

7-氨基-3-乙烯基头孢烷酸的酶解制备

头孢克肟是第三代口服头孢菌素 ,具有高效 ,长效 ,耐酶 ,剂量小等优点。其母核的合成 ,文献 [1]报道一般采用 7-氨基头孢烷酸 (7- ACA)或去乙酰头孢菌素 C钠盐 (DCCNa)为原料。我们初步探索了 C3位引入乙烯基的反应 ,发现难度较大。本文采用 7-苯乙酰胺基 - 3-氯甲基头孢烷酸对甲氧基苄酯(GCLE,2 )为原料 [2 ] ,经 3位 Wittig反应 ,4位脱甲氧苄基及 7位水解等 3步反应制得 7-氨基 - 3-乙烯基头孢烷酸 (7- AVC,1 )。收稿日期 :1999-0 8-16基金项目 :1999年度广州市重点科技攻关计划 (99-Z-119-0 1)作者简介 :许淑文 (196 8) ,女 ,工…     

7-氨基头孢霉烷酸工艺研制

实验在头孢锌盐硅烷化过程中，加入了促溶剂N，N-二甲基甲酰胺，使反应周期缩短，两相反应更加充分，脱色过程采用混合炭法，增强了脱色效果。降低了7-ACA色级，从而使7-ACA质量得到了较大幅度的提高。     

加校正因子的RP-HPLC法测定不同方法生产的7-氨基头孢烷酸中有关物质

目的建立一种能够准确测定7-氨基头孢烷酸中有关物质的方法,同时进行不同方法生产的产品的含量测定及有关物质检查。方法采用高效液相色谱法。使用C18色谱柱(SB-C18,5μm,4.6mm×250mm);以磷酸盐缓冲液(取5g磷酸氢二钾和5g磷酸二氢钾溶解于1000m L水中,用磷酸调节流动相p H值至6.0)—乙腈(92:8)为流动相;检测波长为254nm;柱温为35℃;进样量20μL。结果 7-氨基头孢烷酸在504~0.02534μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9991;去乙酰7-氨基头孢烷酸在10.52~0.0263μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9996;去乙酰氧7-氨基头孢烷酸在9.66~0.02415μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9998;头孢菌素C在10.5~0.02625μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9998。溶液的稳定性及进样精密度、日内精密度、重复性、专属性良好。去乙酰7-氨基头孢烷酸、去乙酰氧7-氨基头孢烷酸和头孢菌素C的校正因子分别为0.80、0.82、1.67。结论此方法可以准确测定7-氨基头孢烷酸中的含量,并采用校正因子法计算有关物质的含量。不同方法生产的7-氨基头孢烷酸的含量及有关物质无明显差异。     

酶法制备7-氨基-3-乙烯基头孢烷酸

目的：用7-苯乙酰胺基-3-乙烯基头孢烷酸在固定化青霉素酰化酶IPA-750催化下裂解制备7-氨基-3-乙烯基头孢烷酸（7-AVCA）,并获取其最优反应条件。方法：利用正交实验法实验。结论：利用酶法制备7-AV-CA避免了有机溶媒的使用,割除了五氯化磷,同时青霉素酰化酶还能循环使用,具有相当好的社会和经济效益。     

离子对反相高效液相色谱法测定头孢三嗪、7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量

用四丁基溴化铵离子对试剂，在Ｃ１８色谱柱上同时测定头孢三嗪产品，７氨基头孢菌烷酸原料及７氨基头孢烯三嗪酸中间体的含量。流动相为乙腈—四丁基溴化铵—ｐＨ７０磷酸盐缓冲液—水（３２∶０３２∶４４∶６３６），检测波长２７０ｎｍ。结果表明：７氨基头孢菌烷酸浓度在９３６～２３４μｇ／ｍＬ，７氨基头孢烯三嗪酸浓度在１０４～２６０μｇ／ｍＬ，头孢三嗪浓度在１２９２～３２３μｇ／ｍＬ的范围均存在良好的线性关系，回收率分别在９９７％～９９９％，９９５％～９８％，１０００％～１００４％。     

头孢菌素C锌盐化学裂解制备7—氨基头孢霉烷酸

头孢菌素是一类广谱抗菌药物。头孢菌素C(Cephalosporin C)化学裂解制备7—氨基头孢霉烷酸(7—Amino—Cephalosporanic acid,7—ACA)是生产这类药物的关键的一步。我们主要考察了用亚胺衍生物法裂解头     

HPLC法测定7-氨基头孢菌烷酸的含量

目的:用离子对反相高效液相色谱法测定7-氨基头孢茵烷酸的含量.方法:用磷酸氢二钠试剂,在C18色谱柱上测定7-氨基头孢茵烷酸原料的含量.流劝相为乙腈-PH5.5磷酸盐缓冲液(3:22),检测波长263mm.结果:7-氨基头孢茵烷酸浓度在9.36~234μg/mL,存在的线性良好关系,回收率在99.7%~99.9%.结论:本方法测定速度快,用样量少,结果准确,重现性好.     

离子对反相高效液相色谱法测定7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量

目的：用离子对反相高效液相色谱法测定7-氨基头孢菌烷酸及7-氨基头孢烯三嗪酸的含量。方法：用磷酸氢二钠试剂，在C18色谱柱上测定7-氨基头孢菌烷酸原料及7-氨基头孢烯三嗪酸中间体的含量。流动相为乙腈一蹦5．5磷酸盐缓冲液(3：22)，检测波长263nm。结果：7-氨基头孢菌烷酸浓度在9．36-2．34μg／mL，7-氨基头孢烯三嗪酸浓度在10．4-260μh／mL的范围均存在的线性良好关系，回收率分别在99．7％～99．9％，99．5％～99．8％。结论：本方法测定速度快，用样量少，结栗准确，重现性好。     

利用基因组改组技术改良7-ACA产生菌

将含假单胞菌(Pseudomonas)头孢菌素C(CPC)酰基转移酶基因ecs的pYG233质粒转入CPC产生菌顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)中,构建可发酵7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的基因工程菌(该菌株含有腐草霉素抗性标记phleo),为第一亲本.同时,构建含有潮霉素抗性标记(hgh)和ecs基因的重组质粒pYG236转化顶头孢霉菌株,以顶头孢霉(含有pYG236)作为第二亲本与第一亲本进行基因组改组,利用双重抗性标记作为融合子筛选条件,筛出一株7-ACA产量提高6.5倍的融合子工程菌.     

头孢类抗生素的新型中间体D-7-ACA

目的:研究新型头孢中间体D-7-ACA的特点、性质和应用.方法:查阅现有文献和专利,研究、分析并总结出D-7-ACA在头孢抗生素合成中的应用.结果:D-7-ACA作为合成头孢类抗生素的中间体,可替代7-ACA,简化操作步骤.结论:新型头孢中间体D-7-ACA可用于多种头孢类抗生素的合成.     

溴乙酰-7-ACA合成过程中杂质的分析

目的 剖析溴乙酰-7-ACA合成过程中主杂质的结构,解决产品质量问题.方法 利用红外、核磁、质谱、元素分析等技术对未知物进行结构确证.结果 该杂质为二溴乙酰-7-ACA.结论 该杂质是原料质量控制不好而引起,并非是在实际生产过程中引入.     

应用固定化D-氨基酸氧化酶转化头孢菌素C为7-ACA

D-氨基酸氧化酶（DAAO）是两步酶法催化头孢菌素C（CPC）生成7-氨基头孢霉烷酸（7-ACA）的重要酶之一。利用固定化DAAO催化CPC的转化液中，酮酸中间体随批次的增加逐渐减少，反应至第13批时，转化基本完全。当转化液pH由7．2升至7．6时，终止反应，转化率和收率分别达99．6％和93％。分次补加固定化DAAO，可连续转化132批。     

酶法提取海狗肾多肽的工艺研究

目的对酶法提取海狗肾多肽的工艺条件进行研究。方法以多肽含量为指标,考察了4种蛋白酶对海狗肾蛋白的酶解能力,选取A.S1398中性蛋白酶为试验用酶,利用单因素试验和正交试验,分别对海狗肾多肽提取工艺中加水量、加酶量、酶解温度、酶解时间进行优化。结果最佳酶解工艺条件为：加水量为9倍,加酶量为1.5%,温度50℃,时间4 h,pH 7.0。结论在此条件下,海狗肾多肽得率为48.75%,工艺重复性好,适合规模化生产。     

利用粘红酵母静息细胞高效转化7-ACA成7-ADCA

采用粘红酵母静息细胞将7-ACA转化为7-ADAC。发酵72h后收集菌体,在底物浓度为6%的pH8.25硼酸盐缓冲液中反应,温度25℃,底物1h内转化完全。分离提取后获得纯度98%的7-ADAC,总收率为88%。     

利用粘红酵母静息细胞高效转化7-ACA成7-ADAC

采用粘红酵母静息细胞将7-ACA转化为7-ADAC。发酵72h后收集菌体，在底物浓度为6％的pH8．25硼酸盐缓冲液中反应，温度25℃，底物1h内转化完全。分离提取后获得纯度98％的7-ADAC，总收率为88％。