pp67-mRNA在肾移植术后人巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的探讨pp67对。肾移植术后人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染及指导抗病毒治疗上的作用。方法采用NASBA测定32例肾移植术后患者外周血中的pp67,同时通过免疫荧光技术（IFA）对早期抗原pp65（CMV-Agpp6S）的检测来判断HCMV活动性,术后第3周,第7周分别用ED-TA管采血5-7rnl,每人每次两管做实验样本,立即送检并将二者结果相比较。其中检测结果有一项阳性的患者,选择更昔洛韦进行对症抗病毒治疗,对pp67-mRNA和pp65抗原检测双阳性患者,在选择更昔洛韦对症治疗时,并随访观察每周采血行pp67检测CMV活动情况,同时CMV抗原血症法检测,将二者结果比较,了解pp67与HCMV活动性感染及CMV病的关系。结果共采集样本128份,其中44份样本CMV-Agpp65阳性,19份样本pp67-mRNA阳性,8例CMV-Agpp65和pp67-mRNA均为阳性。临床诊断为HCMV病患者12例。CMV-Agpp65抗原检测灵敏度（91．7％）高于pp67-mRNA（66．7％）,pp67-mRNA特异性（95．O％）高于CMV．Agpp65（50．0％）抗原检测。而在HCM~临床症状出现感染并治疗后期,随访发现选择以pp67作为抗病毒治疗指标较CMV-Ag更早转阴,可以明显缩短用药时间（P〈0．05）。结论CMV-Agpp65、pp67-mRNA对器官移植术后HCMV感染均具有诊断意义,应用NASBA法能更加快捷准确检测巨细胞病毒,pp67较准确地反映了肾移植术后HCMV的活动性,能更好的指导临床抗病毒治疗并提供了较客观的依据。     

习惯性流产孕妇巨细胞病毒pp65抗原检测的临床意义

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染与习惯性流产(RPL)的关系。方法:采集习惯性流产孕妇和正常产前体检孕妇外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs)和血浆,分别用免疫荧光法和实时定量PCR检测HCMV pp65抗原和HCMV-DNA,并比较2种方法的一致性。结果:46例RPL患者HCMV pp65抗原有14例阳性,阳性率30.4%,50例正常体检孕妇HCMV pp65抗原有4例阳性,阳性率8%,2组孕妇HCMV活动性感染率有显著性差异(2χ=6.76,P<0.01)。孕妇HC-MV pp65抗原阳性率升高,孕妇流产几率增加(2χ=6.39,P<0.01)。免疫荧光法和实时定量PCR有较好的一致性(93.5%)。结论:习惯性流产孕妇HCMV活动性感染率显著高于正常孕妇,HCMV pp65抗原检测可作为RPL早期诊断指标之一。     

应用荧光定量PCR技术检测小儿尿液中人巨细胞病毒

目的：探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ—PCR)方法检测尿液中人巨细胞病毒(HCMV)对儿童HCMV活动性感染的检测价值。方法：对收集的175份临床标本分别用FQ—PCR方法及低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原血症检测方法进行平行检测比较。结果：71例临床患者尿液FQ—PCR检测阳性59例；血液pp65抗原检测阳性53例。尿液中HCMV DNA检测结果与HCMVpp65抗原血症的一致性为84．2％。结论：FQ—PCR检测敏感性要高于pp65抗原血症检测，可以有效提示体内病毒的活跃程度，具有良好的应用价值。     

糖尿病患者活动性人巨细胞病毒感染监测及临床意义

目的 临测糖尿病患者活动性人巨细胞病毒(HCMV)感染,并探讨其临床意义.方法 在HCMV pp65基因内自行设计一对引物,建立RT-PCR检测727例糖尿病患者及230名健康献血者外周血白细胞HCMVpp65 mRNA转录水平,同时应用抗体捕获酶联免疫法检测HCMV pp65-IgM.结果 糖尿病患者HCMV-IgM及mRNA阳性率分别为11.14%和16.64%,与对照组(0.87%、2.17%)相比均差异有统计学意义(P<0.01);比较不同年龄段HCMV感染率,结果发现发病年龄<30岁的患者中HCMV-mRNA阳性率明显高于其他年龄组,从病程来看,病程<1年的糖尿病患者HCMV-mRNA阳性检出率最高.结论 糖尿病患者易发生活动性的HCMV感染,RT-PCR检测HCMV pp65和抗体捕获HCMV pp65特异性IgM可快速有效地确诊HCMV活动性感染的发生.     

应用原位免疫聚合酶链反应检测活动性巨细胞病毒感染

目的建立一种新的诊断活动性巨细胞病毒感染的方法。方法应用原位免疫聚合酶链反应(PCR)技术检测早、中、晚期孕妇宫颈脱落细胞中巨细胞病毒抗原。结果119例受检标本中有16例出现人巨细胞病毒(HCMV)抗原阳性,孕早、中、晚期孕妇活动性HCMV感染率分别为：9.37%、11.90%、17.77%;检出的HCMV抗原阳性细胞数为2～38／5万宫颈脱落细胞,平均8.5／5万细胞。常规ABC法平行检测,原位免疫PCR法检测敏感性高于ABC法。结论原位免疫PCR方法敏感性高、特异性强,可检出微量HCMV抗原,为临床诊断活动性HCMV感染提供一种新方法。     

pp65和gB抗原检测在造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染中的临床价值

目的通过对患者人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)磷蛋白65(Phosphoprotein 65, pp65)和包膜糖蛋白B (Glycoprotein B,gB)的研究,评价其在造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后HCMV感染中的临床意义。方法回顾性分析2010年11月-2015年7月于浙江大学医学院附属第一医院行HSCT的17例血液病患者的临床资料,包括患者术后24个月内检测的HCMV pp65、gB抗原、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)抗体。选取患者三个时间段的检测数据,采用SPSS17.0软件分析这些指标在HCMV感染中的关系。结果患者移植后24个月内HCMV pp65与gB抗原呈正相关(P=0.001),HCMV gB抗原与HCMV IgG抗体呈正相关(P=0.016)。HCMV pp65、gB抗原、HCMV IgM和IgG抗体阳性率分别为64.71%、39.22%、11.76%、100.00%,其中,pp65抗原阳性率高于gB,IgG抗体阳性率高于IgM,均有统计学意义(P<0.05)。B时间段HCMV gB抗原阳性率高于A时间段,具有统计学意义(P=0.013)。期间,16例患者先后感染HCMV,占94.12%。不同原发病类型HCMV pp65抗原阳性率差异有统计学意义(P=0.039),急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)患者最高,为91.67%;骨髓增生异常综合症(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者最低,为33.33%。HSCT后未发生急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的患者HCMV pp65抗原阳性率高于发生aGVHD的患者(P=0.042)。HCMV pp65抗原阳性率在不同性别、不同年龄、不同供者来源、预处理是否应用抗胸腺细胞球蛋白(Anti-thymocyte globulin,ATG)及有无发生慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD)之间差异均无统计学意义。HCMV gB抗原阳性率在上述临床特征之间差异均无统计学意义。结论 HSCT后定期监测HCMV抗原和抗体可有效地指导临床合理地抗HCMV治疗和使用免疫抑制剂。     

脑胶质瘤人巨细胞病毒感染对TGF-β/Smads信号转导通路的影响

目的探究脑胶质瘤患者人巨细胞病毒(HCMV)感染对转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号转导通路的影响。方法选取承德医学院附属医院神经外科脑胶质瘤患者67例,其中WHOⅡ级26例、WHOⅢ～Ⅳ级41例,分别归为低级别瘤组、高级别瘤组,另选取无任何肿瘤性疾病的脑外伤患者行内减压手术切除的新鲜脑组织17例为对照组,采用巢氏聚合酶链反应(Nested PCR)、免疫组织化学法分别检测各组HCMV DNA序列、pp65抗原表达;采用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR(qPCR)检测TGF-β/Smads信号通路相关分子(TGF-β1、Smad7)蛋白、mRNA水平,并分析HCMV感染与TGF-β1、Smad7基因表达的相关性。结果高级别瘤组、低级别瘤组HCMV DNA、pp65抗原阳性率均高于对照组,且两组间差异有统计学意义(P0.05);高级别瘤组、低级别瘤组TGF-β1、Smad7蛋白及mRNA水平均高于对照组(P0.05),且两组间差异比较有统计学意义(P0.05);HCMV DNA、pp65抗原阳性组TGF-β1、Smad7蛋白及mRNA相对表达量均高于其对应阴性组,差异比较均具有统计学意义(P0.05)。结论 HCMV感染与脑胶质瘤患者发生、发展密切相关,肿瘤级别越高,HCMV感染越严重,HCMV感染可能通过上调TGF-β1、Smad7基因的表达发挥促癌作用。     

肾移植受者巨细胞病毒感染检测的临床意义

目的　比较肾移植受者采用不同方法检测巨细胞病毒 (CMV)感染的意义。方法　比较肾移植受者和健康供肾者外周血中的CMV -IgM ,CMV -IgG和CMV抗原 (CMV -Ag)的阳性率及其与CMV病的关系。结果　 167例肾移植受者CMV -IgM阳性率为 1 8% ,CMV -IgG阳性率为 98 8% ,CMV -Ag阳性率为47 2 % ,平均阳性抗原指数 3 2个 /5万白细胞 ;对照组 13例CMV -IgM均阴性 ,CMV -IgG均阳性。观察组3 6例CMV肺炎中CMV -IgG均阳性 ,CMV -IgM5 6%阳性 ,CMV -Ag91 7%阳性 ,平均阳性抗原指数 3 6个 /5万白细胞。结论　肾移植受者以CMV -Ag检测诊断CMV活动性感染及CMV病敏感性及特异性优于CMV -IgM及CMV -IgG。     

人巨细胞病毒感染母婴传播与母乳喂养

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)母婴传播中的母乳喂养与婴儿HCMV感染的关系,进而指导感染人巨细胞病毒母乳对婴儿的合理喂养. 方法 应用荧光定量聚合酶链反应( FQ - PCR)方法分别检测113对临床疑诊HCMV感染患儿及其母亲HCMV-DNA含量,用免疫荧光法检测患儿血HCMV - PP65抗原. 结果 母乳HCMV-DNA与配对患儿血HCMV - PP65抗原两者之间有关联(x2=6.48,0.01＜P＜0.025),但关系不是非常密切,阳性母乳配对患儿与阴性母乳配对患儿的血HCMV-DNA之间差异无统计学意义(t=1.432,P＞0.05). 结论 母乳HCMV感染是婴儿获得HCMV感染的重要途径,但是二者关联性不强,故对已感染HCMV的患儿建议母乳喂养,对母亲HCMV阳性,而婴儿HCMV阴性的可将乳汁处理后喂养,更加安全.     

应用原位免疫聚合酶链反应检测活性巨细胞病毒感染

目的 建立一种新的诊断活动性巨细胞病毒感染的方法。方法 应用原位免疫聚合酶链反应（PCR）技术检测早、中、晚期孕妇宫颈脱落细胞中巨细胞病毒抗原。结果 119例受检标本中16例出现人巨细胞病毒（HCMV）抗原阳性，孕早、中、晚期孕妇活动性HCMV感染率分别为：9．37％、11．90％、17．77％；检出的HCMV抗原阳性细胞数为2－38／5万宫颈脱落细胞，平均8．5／5万细胞。常规ABC法平行检测，原位免疫PCR法检测敏感性高于ABC法。结论 原位免疫PCR方法敏感性高、特异性强，可检出测量HCMV抗原，为临床诊断活动性HCMV感染提供一种新方法。