LC-MS-MS方法测定大鼠血浆中蝉翼素的 药代动力学及代谢物

目的:建立测定蝉翼素血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-MS-MS)联用的分析方法,探讨其在大鼠体内的药动学及其在体内的代谢产物。方法:大鼠灌胃蝉翼素后不同时间点采血,LC-MS-MS法测定血药浓度,拟合药动学模型并计算相关药动学参数。结果:蝉翼素在0.132 5～53.00μg.L-1线性关系良好(r=0.999 2),方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于蝉翼素的体内定量分析,蝉翼素在大鼠体内药动学过程属于二室模型,蝉翼素吸收后经过胃肠道转化为代谢产物2-甲基丁酸。     

UPLC法测定大鼠血浆中染料木素浓度及其药代动力学参数

目的 建立大鼠血浆中染料木素浓度的UPLC测定方法 ,探讨其在大鼠体内的药代动力学过程.方法 色谱柱为Acquity UPLCTM BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水(26:74),流速为0.4 mL·nin-1,检测波长为260 nm,柱温40℃.采用UPLC法测定给药后大鼠血浆中染料木素浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数.结果 血浆中染料木素在5～1000 ng·mL-1范围内线性关系良好,提取回收率均大于90%,日间和日内精密度小于10%,符合生物样品分析要求.染料木素主要药动学参数Tmax、Cmax、t1/2、AUG(0→∞)分别为120 min、106.7 μg.L-1、306.59 min、31543μg·L-1·min.结论 该方法 操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于染料木素大批量生物样本的定量分析及药代动力学研究.     

LC-MS-MS测定黄连解毒汤中3种生物碱在大鼠血清的含量及其药代动力学研究

目的:建立灵敏、特异、准确、可靠的药根碱、巴马汀、小檗碱在大鼠血清中液质联用(LC-MS-MS)分析方法,用于黄连解毒汤中3种生物碱在正常大鼠体内药代动力学研究.方法:优化药根碱、巴马汀、小檗碱及内标延胡索乙素质谱检测条件,确定相关条件并开展方法学考察.正常大鼠灌胃给予黄连解毒汤,经时取血,样品经处理后将该方法用于3种成分的测定.DAS药代动力学软件拟合房室模型,计算药动参数.结果:在ESI(+)离子化条件下采用MRM工作模式,用,m/z 338～322,351.9～308,336-319.8来分别检测药根碱、巴马汀、小檗碱,同时以m/z 356.1～192.1来检测内标延胡索乙素.药根碱在0.2～25μg·L~(-1)、巴马汀、小檗碱在O.4～50μg·L~(-1)呈良好线性关系.3种生物碱在高、中、低3个浓度的准确度、精密度、稳定性等均符合要求.药根碱、巴马汀、小檗碱在正常大鼠体内药动学过程符合一室开放模型.结论:应用LC-Ms-s技术建立了测定药根碱、巴马汀、小檗碱血药浓度的方法,并成功应用于黄连解毒汤正常大鼠体内这3个成分的药动学研究,为中药复方药动学研究提供了可以借鉴的分析方法.     

光谱法测定大鼠血浆中茯苓多糖硫酸酯及其药代动力学研究

目的:利用光谱探针天青A(AA)与硫酸化多糖之间产生变色反应的特性建立大鼠血浆中茯苓多糖硫酸酯(PS)的光谱测定方法,测定大鼠腹腔注射和尾静脉注射PS后的血药浓度,并对这2种注射方法的药代动力学进行评价。方法:通过扫描和系列实验确定最佳检测波长、反应体系血浆和AA浓度。大鼠腹腔和尾静脉分别注射60,20 mg.kg-1的PS后,测定血浆中不同时间点的PS质量浓度,并计算主要药动学参数。结果:最佳检测波长为620 nm,反应体系血浆加入量最大为1.25%,AA最佳工作浓度为8.24×10-5mol.L-1,血浆中PS质量浓度在0~10 mg.L-1线性关系良好(R2=0.995 9),平均回收率为100.55%,组内和组间差异RSD均小于5%。大鼠腹腔和尾静脉注射PS的消除相半衰期t1/2(ke)分别是319.09,204.85 min,血液PS的消除符合一房室、一级消除的开放模型,腹腔注射给药的生物利用度F为69.12%。结论:本光谱法灵敏度高,操作简便,重复性和稳定性好,尤其适合于药代动力学的分析研究。     

大鼠血浆中告达庭的LC-MS-MS测定方法学研究

 目的建立大鼠血浆中告达庭浓度的LC-MS-MS测定方法。方法取待测大鼠血浆0.2mL,加入炔诺酮(内标),乙酸乙酯提取、浓缩,取上清液20μL进样分析。流动相为乙腈-水(70∶30),色谱柱为江苏汉邦C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流速为1.0mL·min^-1,LC-MS-MS多反应离子检测,正离子模式,用于定量分析的离子分别是告达庭:m/z514.1→385.4[M+Na⁺]和炔诺酮:m/z299.7→108.9[M+H⁺]。结果告达庭的线性范围为2.5～1000μg·L^-1,方法的回收率大于80%,批内和批间的精密度均小于15%,稳定性符合生物样品测定要求。结论该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于血药浓度的测定和药动学研究。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中瑞香素、西瑞香素和瑞香新素及其药代动力学研究

建立同时测定大鼠灌胃祖师麻提取物后血浆中瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的HPLC-MS/MS分析方法,并用于计算3个成分在大鼠体内的药代动力学参数。试验采用6只SD大鼠,口服给予祖师麻提取物(瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的给药量分别是88.40,3.24,4.28 mg·kg~(-1)),以五味子醇甲为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中药物浓度,绘制血药浓度-时间曲线,并用Kinetica 4.4软件计算相关药代动力学参数。试验结果显示,瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的线性范围均为5~1 000μg·L~(-1),方法学考察符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于15%,精密度和准确度符合生物样品分析要求。瑞香素、西瑞香素和瑞香新素口服给药后的T_(max)分别为4,2.92,2 h;C_(max)分别为858.96,178.00,36.67μg·L~(-1);AUC_(0-t)分别为10 566.4,905.89,355.11μg·L~(-1)·h;半衰期t1/2分别为5.19,3.50,4.95 h;平均驻留时间MRT分别为9.43,6.95,8.27 h。因此,该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于对SD大鼠口服祖师麻提取物后的瑞香素、西瑞香素和瑞香新素的药代动力学研究。     

犬血浆中丹参素的高效液相色谱测定法及药代动力学

目的:建立测定犬血浆中丹参素浓度的高效液相色谱法,并研究丹参素在犬体内的药代动力学.方法:色谱柱为反相C18柱,流动相乙腈-1%的冰醋酸水溶液(8:92),流速为1.0 mL/min,检测波长280 nm;血浆样品用液相萃取法预处理.健康犬禁食12 h后,静脉注射丹参素溶液,测定不同时间血药浓度,血药浓度-时间数据采用BAPP2.3程序拟舍其药动学参数.结果:线性范围0.116～70.8 μg/mL.日内RSD<10%(n=5),日间RSD<10%(n=5),回收率77.80%～90.01%(n=5),最低定量浓度为0.116 μg/mL.口服给药1.917 h后血浆药物浓度达峰值,Cmax为25.61 μg/mL,丹参素消除半衰期T1/2β=2.258 h.结论:该方法快速简便,符合生物样品的测定要求,可用于丹参素血药浓度的测定和药动学研究,静脉注射丹参素的犬体内药动学呈二室模型,分布较快,代谢较慢.     

犬血浆中藤黄酸HPLC测定及其药代动力学

目的:建立HPLC法测定犬血浆中藤黄酸浓度,并用该法研究Beagle犬静注藤黄酸后的药代动力学。方法:取犬血浆0·3mL,1mol/LHCl酸化,加乙酸乙酯提取,取有机相空气吹干后,残留物溶解后进样。色谱柱LichrospherC18柱(200mm×4·6mmID,5μm)流动相为甲醇-0·05%磷酸水(94∶6,V∶V);流速1·0ml/min;柱温35℃;检测波长UV360nm;犬静注藤黄酸0·5,1,2mg/kg后,于不同时间点取血测定血浆中的药物浓度并估算其药动学参数。结果:该测定方法的最低检测浓度为0·067μg/ml,线性范围为0·067~33·3μg/mL,回收率大于90%,日内及日间变异均小于10%。犬静注三个剂量藤黄酸后其消除半衰期为57·95~60·95min,分布容积为0·66~0·71L/kg。在0·5,1,2mg/kg的剂量下AUC分别为58·95,130·46和266·37μg·h/mL,剂量和AUC呈线性相关。结论:建立的犬血浆中藤黄酸HPLC测定方法适合于药代动力学研究。藤黄酸给药剂量和AUC基本呈线性关系,提示藤黄酸在犬体内处置属于线性动力学。     

LC-MS/MS 测定大鼠血浆中香柑内酯及其药代动力学研究

目的:建立测定香柑内酯(berg)血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-ESI-MS)联用的分析方法,并探讨其在大鼠体内的药动学。方法:采用Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相甲醇-水(77.5∶2.5),流速0.8mL.min-1,柱温30℃,检测波长300 nm。结果:Berg在8.12～162.4μg.L-1(r=0.999 9)线性关系良好。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于berg的体内定量分析,berg在大鼠体内药动学过程属于一级吸收二室模型。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸及其药代动力学研究

该研究建立大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸的LC-MS/MS测定方法,并用于大鼠体内的药代动力学研究。6只SD大鼠,单剂量静脉注射(4 mL·kg^-1)灯盏细辛注射液,以替硝唑为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中的药物浓度,并用DAS 1.0软件计算药动学参数。咖啡酸、绿原酸的线性范围分别为2~128 μg·L^-1(r = 0.998 1),3~384 μg·L^-1(r = 0.998 7)。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中咖啡酸药代动力学参数:t_1/2β为(130.91±38.77) min,AUC_0-t为(4.89±0.96) mg·min·L^-1,CL为(0.12±0.02) L·min^-1·kg^-1;绿原酸药代动力学参数:t_1/2β为(49.38±8.85) min,AUC_0-t为(9.54±0.95) mg·min·L^-1,CL为(0.09±0.003) L·min^-1·kg^-1。该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于咖啡酸、绿原酸的药代动力学研究。     

UHPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中6种木脂素类成分及其药代动力学研究

目的建立利用UHPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中Gomisin D、Gomisin E、五味子醇甲、五味子甲素、Gomisin R和五味子乙素6种木脂素的分析方法,并研究大鼠灌胃给予五味子提取物后的药代动力学特征。方法采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果大鼠血浆中6种木脂素成分的校正曲线线性关系良好,日内、日间精密度和准确度符合要求,提取回收率75.76%⁸8.82%。结论该方法简便、快速、灵敏、稳定,适用于五味子提取物的体内分析,为其进一步研究奠定基础。     

秦皮甲素大鼠体内药代动力学研究

目的:建立并确证LC/MS/MS法测定人血浆中秦皮的方法,并用以研究大鼠口服痛风利灵胶囊后秦皮甲素的药代动力学过程。方法:采用HPLC/MS/MS的方法进行血浆样品的测定,色谱柱为Aglient Zobax C18(2.1mm×150mm),流动相为甲醇-0.1%甲酸(含5mmol/L甲酸铵)=30∶70,流量为0.25mL/min;柱温为30℃。电喷雾ESI源,多反应监测(MRM):秦皮甲素,[M H] ,m/z 341.27→179.1;替硝唑,[M H] ,m/z 248.3→120.9。8只大鼠,雌雄各半,分别灌胃给予50mg/kg痛风利灵胶囊内容物(含秦皮甲素43mg/kg),于给药前及给药后多点抽取静脉血进行检测。结果:秦皮甲素的线性范围为12.5～1800ng/mL,日内、日间变异系数均小于10%。大鼠口服痛风利灵胶囊后,秦皮甲素药时曲线均分别符合一房室开放模型,T1/2为1.21h。结论:本实验建立的血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中秦皮甲素浓度的测定及药动学研究。     

小鼠血浆中葛根素的含量测定及其药代动力学研究

目的：小鼠血浆中葛根素的含量测定及药代动力学研究。方法：采用高效液相色谱法，流动相为甲醇一水(23：77)，流速1．0mL．min^-1，检测波长2．50nm，柱温为室温。结果：葛根提取物口服后15min血液中即可检出葛根素，该药呈二室模型分布，其主要药动学参数为A=1121．105mg．L^-1；B=237．5469mg．L^-1；a=0．6825h^-1；β=0．0459h^-1；Ka=1．3693h^-1。；t1／2α=1．0156h；t1／2β=15．0984h；K10=0．13h^-1；K21=0．2305h^-1；K12=0．362h^-1；Cmax=456．6376mg．L^-1；Tmax=1．2427h；AUC=5824．7144mg．h．mL^-1。结论：葛根提取物口服后葛根素在小鼠体内吸收快、消除慢。     

京尼平苷酸的大鼠血浆药代动力学研究

目的:通过测定大鼠口服京尼平苷酸后血药浓度并计算药物代谢动力学参数,研究该药物的代谢情况。方法:使用SD大鼠,口服20mg/kg的京尼平苷酸药液后,在24小时内按规定时间点取血,血浆加乙腈除蛋白,使用UPLC-MS法测定京尼平苷酸的血药浓度。质谱参数为,ESI离子源,正负离子同时扫描模式,吹扫电压3000V,雾化温度350℃,毛细管温度120℃,氮气流速50L/h,监测离子对为京尼平苷酸372.8/149.1,柚皮苷(内标)579.0/300.6,碰撞电压分别为30V和25V,液相色谱条件为,使用Phenomenex Kinex C18色谱柱(4.6×50mm,5m),以0.1%甲酸(A)-乙睛(B)为流动相,梯度洗脱,梯度程序为,0-0.5min,5-5%B;0.5-1.0min,5-95%B;1.0-2.5min,95-95%B;2.5-3.0min,95-5%B;流速300L/min。结果:6只大鼠京尼平苷酸的药代动力学参数为:C_(max) 629.76ng/mL,T_(max)=1.50h,T_(1/2)=1.08h,MRT=3.13h,AUC_(0-)=1657.82h·ng/mL,AUC_(0-∞)=1677.35 h·ng/mL。结论:本研究所用方法快速、准确、高效,能够较好地评价京尼平苷酸在体内的运动过程。     

桔梗皂苷D的大鼠血浆药代动力学研究

目的:研究桔梗皂苷D在大鼠体内的运动过程。方法:动物实验选用SD大鼠,口服给以桔梗水提液,在24h内按时间点取血;药代动力学研究以桔梗皂苷D为检测指标,采用高效液相色谱法,使用PhenomenexC18色谱柱(100×4.6mm,5μm),乙腈:0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,进样量10μL,柱温30Ⅳ,检测波长203nm。结果:桔梗皂苷D的药代动力学参数为,T_(max)=0.69±0.44,C_(max)=21.819±1.16,AUC_((0-τ))=44.132±0.67,MRT=2.00±0.75,CL=228±0.80。结论:桔梗皂苷D的口服达峰时间较快,生物利用度较低,但已达到发挥提高其它药物疗效所需浓度。     

HPLC-荧光法测定大鼠血浆中4种蒽醌类成分及其药代动力学研究

建立大鼠灌服栀子大黄汤后血浆中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚的测定方法并考察4种蒽醌类成分在大鼠体内的药动学行为。采用HPLC-荧光法测定大鼠血浆中4种蒽醌的血药浓度,血浆样品通过液液萃取法进行处理。Phecda C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相0.2%乙酸-甲醇,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1。激发和发射波长分别为430,525 nm,采用DAS 2.0软件对所得的血药浓度进行拟合,求算相应的药动学参数。结果显示4种蒽醌类成分均可被吸收进入体内。大鼠血浆中芦荟大黄素,大黄酸,大黄酚,大黄素甲醚的Cmax分别为(0.085±0.058),(3.772±1.152),(0.464±0.267),(0.028±0.008)mg·L-1;tmax分别为(1.042±0.510),(0.805±0.307),(1.167±0.283),(0.616±0.162)h;t1/2分别为(3.557±1.250),(6.879±1.126),(5.196±2.032),(4.337±1.816)h;AUC0-t分别为(0.504±0.130),(9.558±1.106),(2.545±1.554),(0.052±0.018)mg·h·L-1。该研究建立了一种专属性强,准确度高,灵敏度好的HPLC-荧光法,可适用于4种蒽醌成分的体内浓度测定。     

HPLC测定血浆中荷叶碱的浓度及其在大鼠体内的药代动力学研究

目的: 建立血浆中荷叶碱的HPLC-UV测定方法,研究大鼠灌胃给予荷叶总生物碱提取物后荷叶碱的药代动力学特征。 方法: 采用液液萃取法处理血浆样品,采用HPLC-UV法测定,以盐酸巴马汀为内标,色谱柱为Agilent Zorbax-SB C₁₈(4.6 mm×150 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水-三乙胺-冰醋酸(27 ∶70.6 ∶1.6 ∶0.78),流速1.0 mL ·min^-1,检测波长270 nm,柱温25 ℃,采用WinNolin软件计算药代动力学参数。 结果: 血浆中荷叶碱在20~1 000 μg ·L^-1线性关系良好( r =0.998 5),方法的日内精密度(RSD)2.24%~3.20%,日间RSD为5.54%~6.95%,准确度(RE)为-7.00%~4.25%,提取回收率为87.2%~104%。大鼠灌胃荷叶总生物碱3个剂量(106,212,319 mg ·kg^-1)后, t _1/2分别为(4.18±2.50),(4.32±1.01),(6.05±3.72) h, t _max分别为(1.50±0.41),(2.25±1.19),(1.88±0.25) h, C _max分别为(278.75±38.98),(621.75±137.81),(1 146.50±249.44) μg ·L^-1,AUC_0→t分别为(1 796.10±680.87) h ·μg ^-1·L^-1,(4 463.49±1 892.42) h ·μg ^-1·L^-1和(7 452.08±3 594.24) h ·μg^-1 ·L^-1。 结论: 该法灵敏度高,专属性强,准确可靠,操作快速简便,已应用于荷叶碱在大鼠体内的药代动力学研究,阐明了荷叶碱在大鼠体内的药代动力学特征。     

延胡索提取物在大鼠血浆中的药代动力学研究

目的:考察延胡索提取物中主要成分延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)和延胡索甲素(corydaline,CDL)在大鼠体内的药代动力学过程。方法:采用血药浓度法,LC-MS/MS测定大鼠ig不同浓度(0.46,0.93,1.38 g.kg-1)延胡索提取物后不同时间点的血药浓度,Win Nonlin药动学数据处理软件计算药动学参数。结果:ESI(+)离子化条件下采用MRM工作模式用m/z 370～354,m/z 356～340分别检测CDL、THP,同时以m/z 306～140来检测内标盐酸山莨菪碱(anisodaminehydrochlo-ride,ADM)。CDL,THP分别在1.13～565,1.5～750 ng.mL-1表现出良好的线性关系,高、中、低3个剂量的回收率、日内和日间精密度均符合要求,不同剂量THP和CDL的Cmax分别为(84.3±9.2),(157.3±99.6),(497.1±71.3)ng.mL-1和(30.8±1.3),(54.4±22.7),(91.2±15.4)ng.mL-1,Tmax分别为(54.8±6.9),(119.2±5.7),(62.5±7.5)min和(31.5±0.07),(65.6±10.6),(111.5±4.2)min。结论:LC-MS/MS选择性好,灵敏度高,适用于血浆样品成分含量的测定,为进一步的复方药代动力学的研究奠定了基础。