Notch信号通路与肝纤维化发生发展的关系

Notch信号通路主要由Notch受体和配体、转录因子以及DNA结合蛋白共同组成,其决定机体细胞的增殖、分化和凋亡。近年研究表明,Notch信号通路在肝纤维化发生发展过程中起重要作用,阻断或激活该信号通路可以影响肝纤维化的进展。对Notch信号通路的构成、活化机制及其与肝纤维化关系的研究进展进行了综述。     

NOTCH3信号通路与肝癌研究进展

Notch3是细胞Notch家族重要成员之一,其在进化上高度保守,可与相邻细胞的配体结合而被激活,通过调控下游基因,维持着细胞增殖、分化、凋亡之间的平衡,对细胞的命运起着决定性作用.近年研究表明Notch3信号通路与肝癌的发生发展关系密切.本文就Notch3信号通路与肝癌关系作一综述. 一、NOTCH信号通路的组成及调控 Notch基因于1917年由Morgan等在果蝇体内发现,之后研究发现Notch还广泛分布和表达于无脊椎动物及哺乳动物体内,它属于跨膜受体蛋白家族.     

Notch信号通路在胃肠道肿瘤发生中的作用

Notch信号通路是影响细胞命运的重要通路之一,相邻细胞之间通过Notch受体与配体的相互作用传递信号,可调节包括干细胞在内的多种细胞的分化、增殖和凋亡。除在正常组织、细胞的分化、发育中发挥重要作用外．Notch信号通路还参与了肿瘤的发生、发展,并在不同肿瘤中呈现促癌或抑癌作用。深入研究Notch信号通路可能为胃肠道肿瘤的基因治疗提供新的靶点。     

Notch信号转导通路在缺血性心脏病中的作用

Notch是一种结构及功能在进化上高度保守的跨膜受体蛋白家族,广泛表达于果蝇、脊椎动物、哺乳动物等多个物种.目前在哺乳动物中发现4种受体Notch 1～4,以及Jagged 1、Jagged 2、Delta-like 1(Dll 1)、Delta-like 3(Dll 3)和Delta-like 4(Dll4)五种配体.Notch信号通路受细胞间多种网络信号的调控,由两个邻近细胞的Notch受体与配体结合而激活,介导下游信号元件、靶基因及各种辅助蛋白相互作用,从而调节细胞的增殖、分化、迁移及凋亡[1].在胚胎发育及出生早期,Notch受体和配体均有不同程度的表达,Notch信号参与了心肌细胞的分化、房室管和瓣膜的发育、心室小梁的形成以及心室流出道的重塑[2].研究发现[3],心脏缺血改变激活了许多胚胎基因程序.在梗死初期,Notch信号活化,其下游基因表达量升高,这为心肌梗死的研究提供了新的方向.本文就Notch信号通路及其介导的细胞间通讯对缺血性心脏病的影响做以综述.     

Notch信号通路和心血管疾病研究进展

<正>Notch信号传导途径首先是1900年早期在Otto L.Mohr的黑腹果蝇中观察到的。而Notch基因首次被克隆出来是在1983年。Notch可调节细胞分化、凋亡、增殖和形态发生,并且对细胞生物的生长发育至关重要~([1])。Notch介导的信号传递在心血管发育和心血管疾病的发生发展过程中起着关键性作用。但是Notch信号传导是复杂的、多方面的,因为其受体、配体类型较多,功能也不十分清楚,且其下游靶基因没有被完全发现     

Notch信号通路在肝脏发育中的研究进展

Notch是一类高度保守的受体蛋白,广泛存在于各种细胞表面,介导细胞间信号传递。Notch信号通路通过细胞间Notch受体与配体的相互作用,转导细胞信号调控多种细胞增殖、分化、凋亡,从而影响胚胎发育和器官发生发展,是影响细胞命运决定的重要通路之一。近期的研究发现,在哺乳类动物的肝脏发育过程中,Notch信号通路作用尤为巨大,其正常表达对于肝芽的形成、肝祖细胞的分化、胆管细胞和肝细胞的形成、各种肝细胞的增殖和凋亡、肝再生以及发育异常等均有十分重要作用。本文就肝胚胎发育、成熟及肝再生、肝发育异常中Notch信号通路所发挥的作用作一综述。     

Notch细胞信号通路在神经干细胞增殖分化中的作用

<正>Notch是相邻细胞之间互相通讯的典型信号通路,其作用具有多样性,在调控细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期等方面都发挥了重要作用。神经干细胞(NSCs)的增殖分化受诸多因素影响,越来越多的证据表明Notch细胞信号通路在此过程中具有重要作用。本文主要就Notch信号通路及其对NSCs增殖分化的作用进行综述。1 Notch细胞信号通路的组成Notch细胞信号通路主要由Notch受体、配体(DSL)、CSL     

β3肾上腺素受体与心血管疾病相关性的研究进展

心血管疾病如心肌梗死、慢性心力衰竭等是人类死亡的主要原因。现已明确脂代谢功能障碍、糖尿病等是心血管疾病发生和发展的重要危险因素。心肌结构的变化、Ca~(2+)信号传导、细胞代谢、氧化应激、肾素-血管紧张素系统的激活和线粒体功能障碍都与心血管疾病的发生发展有关。自1989年发现β_3肾上腺素受体(β_3-AR)以来,研究者又陆续发现β_3-AR与心血管疾病存在相关性,并且激动β_3-AR可以调节脂代谢,改善心脏功能及重塑,预防和治疗心血管疾病。     

Notch信号与心脏发育

<正> Notch信号是一条保守的信号传导途径,它广泛表达于从无脊椎动物到哺乳动物等各种生物体内。Notch信号决定着一些胚胎发育过程中的关键进程,例如:决定细胞分化命运,影响胚胎的形成,以及促进细胞的增殖与分化。在成人体内Notch信号通过对干细胞库的维持,以及激活和促进祖细胞增殖并控制其最终分化在组织重建和更新中发挥重要作用。在心血管系统中,Notch信号中的受体或配体的突变或失活可引起多种先天性心脏畸形。     

miRNAs对心肌重塑和心力衰竭调控作用的研究进展

心力衰竭是绝大多数心血管疾病的共同终末阶段,而心肌重塑是心力衰竭发生及发展的重要过程。引发心肌重塑与心力衰竭的调控机制极其复杂,目前尚不十分清楚。近年来,越来越多的研究表明,miRNAs通过调控相关靶基因的表达参与了心肌重塑和心力衰竭的发生发展。本文重点阐述miRNAs在心肌重塑及心力衰竭发生发展过程中的调控作用的新研究进展,并对其临床应用的前景予以展望。     

晚期糖基化终产物对人内皮细胞表达MCP-1和VCAM-1的影响及阿托伐他汀的干预

目的观察晚期糖基化终产物对体外培养人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1和血管细胞黏附分子1的影响及阿托伐他汀的干预作用,探讨晚期糖基化终产物诱发动脉粥样硬化形成的机制和阿托伐他汀治疗的机制。方法胶原酶消化法分离获取人脐静脉内皮细胞;倒置相差显微镜形态观察法及免疫细胞化学染色法鉴定人脐静脉内皮细胞;逆转录聚合酶链反应法对单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1及晚期糖基化终产物受体基因表达进行分析;活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧产生量,倒置荧光显微镜下观察细胞内活性氧荧光强度。结果倒置相差显微镜下可见培养的细胞呈卵圆形或多角形,典型的铺路石样排列,经CD31、CD34染色,细胞浆内有棕黄色颗粒沉着(CD31、CD34阳性)。与空白对照组相比,晚期糖基化终产物(10-4~10-1g/L)呈浓度依赖性增强人内皮细胞单核细胞趋化蛋白1和血管细胞黏附分子1基因表达,10-4g/L晚期糖基化终产物组人内皮细胞单核细胞趋化蛋1和血管细胞黏附分子1基因表达水平开始显著增高(0.26±0.02比0.17±0.04;0.22±0.02比0.08±0.01,P<0.01);与晚期糖基化终产物组相比,阿托伐他汀(0.1、1、10μ...     

晚期糖基化终产物诱导血管内皮细胞骨架形态改变的机制

目的研究晚期糖基化终产物修饰蛋白对内皮细胞细胞骨架肌动蛋白的形态学影响及特异的糖基化终产物受体和氧化应激在此病理过程中的作用。方法用不同浓度的糖基化终产物修饰人血清白蛋白与人脐静脉内皮细胞株ECV304在体外共同培养不同时间，并设立对照组进行比较，采用免疫荧光染色法显示细胞骨架的形态学改变。结果与对照组相比，糖基化终产物修饰人血清白蛋白以时间和剂量依赖的方式影响内皮细胞骨架肌动蛋白聚合丝状和可溶性单体（或球状）形态的改变。随着糖基化终产物修饰人血清白蛋白作用浓度和时间的增加，丝状肌动蛋白所形成的外周致密带边缘出现锯齿样断裂，趋于变细崩解消散，最终形成由非极性单行排列的肌动蛋白丝组成的应力纤维。可溶性单体表现为向细胞浆和胞膜移位，胞浆区出现点状和丝状染色，细胞间距离明显增大。可溶性糖基化终产物受体的抗体和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐氧化酶抑制剂均可阻断糖基化终产物对细胞骨架的影响。结论糖基化终产物修饰蛋白对细胞骨架的影响是通过与内皮细胞上的糖基化终产物受体结合并引起细胞内的氧化应激所介导的，这一作用可能与糖基化终产物所致血管通透性升高有关。     

晚期糖基化终产物诱导血管内皮细胞环氧合酶2表达

目的探讨晚期糖基化终产物对人血管内皮细胞环氧合酶2表达的影响。方法取人脐静脉内皮细胞ECV304与人血清白蛋白修饰的晚期糖基化终产物体外共同培养,然后用Western blot检测环氧合酶2的表达水平。结果内皮细胞环氧合酶2基础表达水平极低,人血清白蛋白修饰的晚期糖基化终产物可诱导环氧合酶2的表达,呈时间与剂量依赖关系;抑制核因子κB的活性可抑制环氧合酶2的表达。结论人血清白蛋白修饰的晚期糖基化终产物可通过激活核因子κB,而引起环氧合酶2的表达。这一作用机制可能参与血管损伤反应。     

晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧的变化及来源分析

目的探讨晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧的变化及来源。方法培养人脐静脉内皮细胞,观察不同浓度和不同作用时间晚期糖基化终末产物刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧的生成情况,进而分别应用线粒体呼吸链酶复合体、黄嘌呤氧化酶、一氧化氮合酶及NADPH氧化酶抑制剂,观察抑制相应氧化酶后细胞内活性氧的变化,分析各种氧化酶作用大小。结果晚期糖基化终末产物刺激后,内皮细胞内活性氧明显增加,并且随晚期糖基化终末产物浓度和孵育时间的增加而增加,NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘几乎完全抑制了晚期糖基化终末产物刺激下细胞内活性氧的生成,线粒体呼吸链酶复合体I抑制剂鱼藤酮、线粒体呼吸链酶复合体Ⅱ抑制剂噻吩甲酰三氟丙酮、线粒体呼吸链酶复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌醇对活性氧生成无明显影响,而一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯反而引起细胞内活性氧的轻度增加。结论NADPH氧化酶是晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧生成的主要来源,可能是晚期糖基化终末产物启动和加重动脉粥样硬化病理生理过程中的重要防治靶点。     

糖基化终产物对凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的 研究长期高血糖所致糖基化终产物对巨噬细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响.方法 U937细胞经佛波酯诱导分化,并将不同浓度或同一浓度糖基化终产物与诱导分化48 h后的U937细胞共同孵育,用Western Blotting法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白的表达.同时应用ELISA法测定24例2型糖尿病患者及22例正常对照者血清可溶性氧化型低密度脂蛋白受体1的含量.结果 100、200和400 mg/L 糖基化终产物刺激后细胞表面凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白表达量分别是对照组的1.85、3.22和4.65倍(P<0.05);400 mg/L的糖基化终产物作用12、24、48 h后,U937巨噬细胞该受体蛋白表达量分别为0 h的2.85、3.89和4.3倍(P<0.05).糖尿病患者血清氧化型低密度脂蛋白受体1及糖基化终产物含量较正常对照者显著升高(P<0.01),两者呈正相关(P<0.001). 结论糖基化终产物可增加U937巨噬细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白表达且呈浓度和时间依赖性.这可能与糖尿病患者加速泡沫细胞形成而易致动脉粥样硬化有关.     

糖基化终末产物对体外诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞血管形成的影响

目的 应用Matrigel建立大鼠视网膜微血管内皮细胞血管形成的体外培养体系,研究糖基化终末产物对诱导视网膜微血管内皮细胞血管形成的影响,从而探讨糖基化终末产物在糖尿病微血管病血管新生中的作用.方法 体外培养视网膜微血管内皮细胞,制备糖基化白蛋白.在Matrigel上建立血管形成的体外培养体系,实验分浓度效应组和时间效应组,并进行CD34免疫细胞化学染色.采用光镜下计数管腔数及计算机图像分析对结果进行测定和分析.结果 经分离培养的视网膜微血管内皮细胞在Matrigel上培养形成管腔样结构.糖基化白蛋白(糖基化终末产物)作用于培养的视网膜微血管内皮细胞后,可见管腔形成数目增加,且在一定范围内呈时间和剂量依赖效应(P<0.01).结论 糖基化终末产物可以促进Matrigel体外诱导视网膜微血管内皮细胞的血管形成.     

晚期糖基化终产物诱导内皮细胞紧密连接改变及其机制

目的探讨晚期糖基化终产物修饰蛋白对内皮细胞紧密连接带状闭合蛋白1的形态学影响,并对其机制作初步研究。方法培养人脐静脉内皮细胞,用免疫荧光染色方法显示带状闭合蛋白1在内皮细胞分布的形态和部位。观察不同浓度和不同时间晚期糖基化终产物修饰蛋白作用下内皮细胞带状闭合蛋白1的形态学变化。研究了细胞外信号调节激酶、p38丝裂原活化蛋白激酶通路抑制剂及相关特异蛋白突变体重组腺病毒转染对晚期糖基化终产物介导的内皮细胞闭合蛋白1形态学变化的影响。结果正常对照组的内皮细胞闭合蛋白1存在于细胞周边呈环状,线条清晰连续,边缘光滑流畅,晚期糖基化终产物以时间和剂量依赖的方式引起内皮细胞紧密连接带状闭合蛋白1结构形态的改变;细胞外信号调节激酶通路抑制剂或p38丝裂原活化蛋白激酶通路抑制剂均可减轻晚期糖基化终产物对闭合蛋白1的影响;转染显性失活的细胞外信号调节激酶上游激酶MEK1和p38丝裂原活化蛋白激酶上游激酶MEK6b的重组腺病毒,均可减轻晚期糖基化终产物对带状闭合蛋白1形态的影响,而转染组成性激活的MEK1和MEK6b的重组腺病毒本身即可引起内皮细胞带状闭合蛋白1形态的变化。结论晚期糖基化终产物刺激可以引起内皮细胞紧密连接蛋白带状闭合蛋白1分布和形态的变化,这一作用可能是由细胞外信号调节激酶及p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路介导的。     

糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性和表达的影响及二甲双胍的保护作用

目的 探讨糖基化终产物及二甲双胍对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性和表达的影响.方法 用胶原酶法分离人脐静脉内皮细胞并加以培养.将内皮细胞与不同浓度的糖基化终产物和二甲双胍分别孵育3、6、12、24 h,CCK-8法测定人脐静脉内皮细胞增殖活性.硝酸还原酶法测定一氧化氮含量,分光光度法测定一氧化氮合酶活性,蛋白免疫印迹法检测内皮型一氧化氮合酶蛋白表达水平.结果 糖基化终产物抑制人脐静脉内皮细胞增殖,二甲双胍促进人脐静脉内皮细胞增殖.糖基化终产物抑制人脐静脉内皮细胞的一氧化氮生成和一氧化氮合酶活性(P<0.01),呈剂量、时间依赖关系.二甲双胍(与对照组相比)或与糖基化终产物共同干预(与糖基化终产物组相比)均增加人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成和一氧化氮合酶活性(P<0.01).糖基化终产物与人脐静脉内皮细胞共同孵育24 h后,内皮型一氧化氮合酶表达水平明显下降;二甲双胍上调内皮型一氧化氮合酶的表达;与糖基化终产物组相比,糖基化终产物与二甲双胍共同干预组内皮型一氧化氮合酶表达上调(P<0.01).结论 二甲双胍能够改善糖基化终产物导致的人脐静脉内皮细胞损伤.     

晚期糖基化终末产物、臂-踝脉搏波传导速度与冠状动脉狭窄程度的相关性

目的 探讨晚期糖基化终末产物（AGE）、动脉硬化与冠状动脉病变狭窄程度间的关系。方法 采用VP1000动脉硬化检测仪测定105例冠状动脉轻中度狭窄患者、130例冠状动脉重度狭窄患者和150例年龄相当的健康对照者的臂-踝动脉脉搏波传导速度（baPWV），同时检测受试者外周血清中AGE含量。结果 与健康对照者相比，冠状动脉轻中度狭窄患者血清AGE、baPWV均显著升高（P<0.001），且在冠状动脉重度狭窄患者中增高更明显（P<0.001）；Logistic回归分析显示AGE、baPWV均为冠状动脉病变严重程度的一项重要危险因素（P<0.001）；相关分析显示血清AGE水平与baPWV呈显著正相关（r＝0.692，P<0.001）。结论 血清AGE为冠状动脉病变狭窄程度的一项独立危险因素，可能在冠状动脉病变狭窄程度的发生发展过程中起一定作用。     

糖基化终末产物促进大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的 观察糖基化终末产物对体外培养的血管平滑肌细胞钙化的影响.方法 在含10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠培养液中加入不同浓度(0、50、100、200 mg/L和400 mg/L)的糖基化终末产物与大鼠血管平滑肌细胞孵育不同时间.采用磷酸苯二钠法检测碱性磷酸酶活性,甲-酚酞络合酮方法测定钙含量,实时定量逆转录聚合酶链反应检测成骨细胞特异性核心结合因子、碱性磷酸酶以及骨桥蛋白基因表达,蛋白免疫印迹检测成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白蛋白表达.结果 与对照组相比,糖基化终末产物随作用时间延长和浓度增加,细胞钙含量增加(P<0.05),升高碱性磷酸酶活性和基因表达(P<0.05),促进成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白基因及蛋白表达(P<0.01).结论 糖基化终末产物可促进体外培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化.