不同雌激素水平对大鼠血管内皮细胞功能及血管内皮细胞粘附分子1表达的作用

目的研究雌激素对雌鼠肺血管内皮细胞功能及血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达的调节。方法（1）雌性SD大鼠24只分为假手术组、去势组、治疗组,采用放射免疫法检测血清中内皮素、前列环素的含量,铜-镉还原法测定血清中一氧化氮的产量。放射配体结合法检测肺血管内皮细胞中雌激素受体含量。（2）正常雌鼠肺培养的第2代血管内皮细胞,按不同浓度17-β雌二醇(17-βE2)分为A组（对照）、B组（3×10-8mol/L17-βE2）、C组（3×10-7mol/L17-βE2）;D组（3×10-6mol/L17-βE2）、E组（3×10-6mol/L17-βE2+3×10-6mol/L他莫西芬）处理48h,白细胞介素-1β作用后流式细胞仪分别检测各组VCAM-1表达量。结果(1)去势组雌鼠血中一氧化氮（18μmol/L±8μmol/L）、前列环素（8.5pg/ml±2.5pg/ml）均降低,治疗组二者水平明显升高（31μmol/L±7μmol/L,P<0.05;10.9pg/ml±3.4pg/ml）,而内皮素含量变化则相反（170pg/ml±39pg/ml;100pg/ml±32pg/ml,P<0.05）。(2)去势组雌鼠血管内皮细胞中雌激素受体含量(fmol/106cell）显著降低（6.7±0.5),治疗组雌激素受体含量维持在高水平（17.6±1.2,P<0.01）。(3)白细胞介素-1β作用后A组表达VCAM-1细胞百分率明显增高（17.5%±1.5%）,B、C、D组表达VCAM-1细胞百分率显著降低（15.4%±1.42%、12.4%±0.34%、8.7%±0.27%,P<0.01）。结论雌激素水平可明显影响雌鼠血管内皮细胞内皮素、一氧化氮、前列环素的分泌,并可影响雌鼠血管内皮细胞中雌激素受体含量。雌二醇均可降低白细胞介素-1β诱发的雌鼠血管内皮细胞VCAM-1表达增高。     

雌激素的抗衰老作用及其机制研究

目的探讨雌激素抗人脐静脉内皮细胞（HUVEC）衰老的作用及其机制。方法用60μmoL／L过氧化氢（H2O2）作用HUVEC 72h产生诱导型细胞衰老模型，观察17β-雌二醇（E2）对内皮细胞衰老的干预作用。实验分空白组、H2O2刺激组、H2O2＋E2组及H2O2＋E2＋ICI 182780组。用β-半乳糖苷酶染色检测细胞的衰老，同时检测细胞线粒体细胞色素C氧化酶的活性，检测细胞内ATP水平及活性氧（ROS）水平，透射电镜观察线粒体结构变化。结果H2O2刺激组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例增加，细胞衰老明显，同时线粒体细胞色素C氧化酶的活性下降，ATP水平下降，ROS水平增加，线粒体结构受损；而H2O2＋E2组能明显减轻上述各种变化；H2O2＋E2＋ICI 182780组能明显阻断E2的各种保护作用。结论E2具有抗血管内皮细胞衰老的作用，其作用机制是通过保护线粒体而实现的。     

合贝爽减轻缺氧所致血管内皮细胞线粒体膜电位变化

目的 观察缺氧对人大血管内皮细胞线粒体膜电位的影响以及合贝爽的保护作用. 方法 将培养的血管内皮细胞分为3组:对照组,单纯缺氧组和缺氧加合贝爽组.应用激光扫描共聚焦显微镜定量测量各组血管内皮细胞线粒体膜电位值. 结果 3组血管内皮细胞线粒体膜电位(荧光强度)分别为36.578±1.147,28.142±1.124,33.756±1.124.①与对照组相比,单纯缺氧组的线粒体膜电位水平显著降低(P<0.01).②与单纯缺氧组相比,合贝爽加缺氧组内皮细胞线粒体膜电位水平有显著升高(P<0.01),接近对照组测定值(P>0.05). 结论 缺氧引起血管内皮细胞线粒体膜电位降低;合贝爽可减轻缺氧损伤所致的线粒体膜电位的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用.     

前列腺增生雌激素受体与血管内皮细胞生长因子表达的研究

为了探讨雌激素致BPH的机理。用单克隆免疫组化方法测定前列腺增生石蜡切片 30例、膀胱颈纤维化 8例中ER和VEGF。BPH组ER阳性率 86 6 7% (2 6 / 30 )、VEGF阳性率 40 % (12 / 30 ) ,对照组ER 6 2 5 % (5 / 8)、VEGF 2 5 % (2 / 8) ,其中纤维肌腺瘤型ER 87%、VEGF 5 3%。纤维肌腺瘤 ,纤维肌型的ER均显著高于对照组 ,纤维肌腺瘤的腺上皮细胞浆VEGF显著高于对照组。雌激素致BPH是通过ER所引起雌激素效应 ,加上VEGF增加 ,提供营养 ,进一步促进前列腺增生。     

缺氧对血管内皮细胞内线粒体膜电位的影响及金钠多的保护作用

目的 观察缺氧对血管内皮细胞胞浆内线粒体膜电位(MMP)的影响,并探讨金钠多的保护作用.方法 建立人大动脉血管内皮细胞缺氧损伤模型,实验分为对照组、单纯缺氧组、缺氧+金钠多组3组,应用激光共聚焦显微镜测量各组血管内皮细胞内MMP.结果 单纯缺氧组与对照组比较MMP明显下降(P<0.01);单纯缺氧+金钠多组与单纯缺氧组比较MMP明显升高(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.05).结论 缺氧可以导致人大动脉血管内皮细胞内MMP降低,金钠多对缺氧所致的MMP的降低具有保护作用.     

葡萄糖对内皮细胞内皮抑素表达的影响(英文)

目的研究不同浓度葡萄糖作用下人内皮细胞内皮抑素（ endostatin, ES） 的代谢特点, 探索内皮抑素与糖尿病血管病变的关系。方法培养人脐静脉内皮细胞（ HUVECs） , 随机加入不同浓度的葡萄糖液中培养,分为正糖对照组（ 5.6 mmol/L Glu） , 高糖组（ 11.2 mmol/L Glu、22.4 mmol/L Glu 组） 。培养 24、48、72 和 96h后, 收集各组不同作用时间点的 HUVECs, 采用 RT- PCR 法检测 ES mRNA 的表达, Western- blot 法检测 ES蛋白水平的表达。结果 11.2 mmol/L Glu 组, ES mRNA 和蛋白的表达随着时间的延长而增强, 第 72、96 小时表达水平显著高于对照组（ P 72h〈0.05, P 96h〈0.01） ; 22.4 mmol/L Glu 组, ES mRNA 和 ES 蛋白的表达在 24、48、72h随着时间的延长而增强, 72 h 表达水平显著高于对照组（ P 〈0.05） , 而 96 h 表达水平明显低于对照组（ P 〈0.05） ; 对照组中 ES mRNA 的表达水平不随时间的延长而改变, ES 蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐降低,96h 的表达水平明显低于 24 h 的（ P 〈0.05） 。结论高糖对 HUVECs中 ES mRNA 和蛋白表达水平的影响是双向的： 短时间内起促进作用, 具有时间依赖性; 随着作用时间的延长, 高糖对 ES mRNA 和蛋白的表达转为抑制; 在 DM 慢性长期病程中, ES 表达的降低可能与 DM 血管病变的发生有关。     

VIP促进人脐静脉血管内皮细胞增殖及合成VEGF的初步研究

目的 通过观察血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)促进人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein vessel endothelial cells,HUVECs)的增殖以及刺激VEGF的合成情况,探讨VIP在创伤组织修复过程中的生物学效应.方法 体外培养HUVECs细胞系,分为有血清培养组和无血清培养组,这两组分别加入VIP和PBS进行干预,应用MTT法测定HUVECs的增殖情况,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血管内皮细胞生长因子(VEGF165)在HUVECs的合成.结果 VIP能促进血管内皮细胞的增殖,且两组都有VEGF生成,但VIP组VEGF的量显著高于PBS组.结论 VIP能促进HUVECs的增殖以及增强血管内皮细胞内VEGF的合成和分泌,在创伤组织修复过程中可能发挥促新生血管形成的作用.     

辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达影响的初步研究

目的:观察辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体表达的影响.方法:将人脐静脉内皮细胞分为辛伐他汀组、TNF-α组、辛伐他汀+TNF-α组、IL-1β组、辛伐他汀+IL-1β组和空白对照组.采用免疫细胞化学方法,观察TNF-α和IL-1β对细胞中VEGF及其受体表达的影响,并观察辛伐他汀的干预作用.结果:TNF-α组和IL-1β组的VEGF及其受体表达明显高于空白对照组(P＜0.05),辛伐他汀十TNF-α组和辛伐他汀+IL-1β组表达分别明显低于TNF-α组和IL-1β组(P＜0.05).结论:辛伐他汀可以抑制炎性刺激导致的人脐静脉内皮细胞VEGF及其受体的表达.     

芪丹通脉片对大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：观察芪丹通脉片(QDTMT)对大鼠损伤的血管内皮细胞(VEC)的保护作用,进一步探讨血瘀证及活血化瘀机制及QDTMT的保护作用．方法：用注射肾上腺素的方法复制血管内皮损伤的血瘀模型,检测血循环内皮细胞(CEC)数量和血液流变学变化,透射电镜观察大鼠降主动脉内皮细胞超微结构变化,以及QDTMT的保护作用．结果：血瘀大鼠的CEC数量明显增加,全血比黏度增高、血液黏度增高、红细胞压积增大、红细胞变形能力下降、聚集能力增高．电镜下大部分VEC水肿、坏死、脱落、基底膜裸露、有些区域甚至断裂,小部分VEC较完整,病变轻,仅细胞质线粒体略肿胀;QDTMT能减少血瘀大鼠的CEC数量,并能明显改善血管内皮损伤大鼠的VEC结构．结论：该血瘀模型有明显的血管内皮损伤,QDTMT对血管内皮细胞具有保护作用．     

黄芪与当归对人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF表达的影响

目的: 探讨黄芪与当归对内皮细胞(ECs)增殖周期及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法: 以体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,HUVEC经分离、原代和传代培养与鉴定,选择第4 或第5代细胞进行实验;MTT法检测不同剂量黄芪与当归对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测黄芪与当归对HUVEC增殖周期的影响;半定量RT PCR检测黄芪与当归对HUVEC的VEGF mRNA表达的影响。结果:细胞周期检测显示黄芪及当归组S期细胞数显著增多(P<0.01)。黄芪+当归组G0 G1 期细胞数明显减少(P<0.05),S期和G2 M期细胞数明显增多(P<0.05)。RT PCR结果表明,黄芪与当归使HUVEC的VEGF mRNA表达明显增强,黄芪+当归(200μg/ml)组是对照组的1.82倍;当归(200μg/ml)组是对照组的1.88倍;黄芪(200μg/ml)组是对照组的1.51倍。结论:黄芪与当归及其复方具有促进内皮细胞增殖作用,黄芪+当归可明显促进HUVEC的DNA合成及有丝分裂。黄芪与当归可促进HUVEC的VEGF mRNA表达,提示黄芪与当归通过刺激VEGF表达而促血管新生。     

丙氨酰谷氨酰胺二肽对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用

目的 观察丙氨酰谷氨酰胺二肽（丙谷二肽）对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 在以低氧低糖培养人脐静脉内皮细胞ECV304为细胞损伤模型的基础上,以噻唑蓝（MTT）比色法优化丙谷二肽的最佳作用浓度,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测线粒体膜电位。自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶（LDH）活性,比色法检测谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的浓度,RT-PCR方法检测细胞内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 (IL-6)、热休克蛋白70 (HSP70)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78) 和缺氧诱导因子-1α (HIF-1α) mRNA的表达。结果 丙谷二肽能够使细胞在缺氧缺糖应激下存活率增加,线粒体损伤减轻,LDH分泌降低,GSH产生增加,HSP70和HIF-1α mRNA的表达增加。结论 丙谷二肽对细胞缺氧缺糖损伤有明显的保护作用,这种保护作用可能与保护线粒体、维持细胞膜结构完整、上调细胞中应激基因HSP70和HIF-1α的表达有关。     

人脐静脉内皮细胞的体外培养及微重力对其增殖的影响

目的探讨微重力环境对人脐静脉血管内皮细胞增殖的作用。方法取健康产妇剖宫产术后脐带，用胶原酶Ⅰ消化血管内皮细胞，进行原代培养，在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作用下细胞长期传代；将内皮细胞置于回转器内模拟太空微重力培养，同时设地面静止培养对照，测定72h内血管内皮细胞增殖水平。结果模拟微重力下细胞增殖高于对照组。结论培养的脐静脉血管内皮细胞对微重力环境敏感。     

缺氧条件下血管紧张素Ⅱ对血管内皮细胞线粒体膜电位的影响及金钠多的保护作用研究

目的：观察缺氧及血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）对人大动脉血管内皮细胞（VEC）的线粒体膜电位（MMP）的影响及金钠多的保护作用。方法：建立VEC缺氧损伤模型;实验分为空白对照组、单纯缺氧组、缺氧加金钠多保护组、单纯Ang-Ⅱ作用组、Ang-Ⅱ加金钠多保护组、缺氧加Ang-Ⅱ作用组、缺氧加Ang-Ⅱ加金钠多保护组共7个组。各组细胞经过Rhodamine 123的负载后,用激光共聚焦显微镜测定VEC内Rhodamine 123的荧光强度代表MMP。结果：VEC分别经过缺氧及Ang-Ⅱ作用后,MMP显著降低（P〈0.01）;缺氧条件下Ang-Ⅱ引起VEC的MMP变化较单纯缺氧或单纯Ang-Ⅱ作用进一步降低（P〈0.01）;金钠多可抑制MMP降低,但各金钠多保护组的MMP仍显著低于空白对照组（P〈0.01）。结论：缺氧及Ang-Ⅱ均可引起VEC的MMP降低,金钠多明显减轻上述影响因素的损伤、提高MMP,从而发挥对VEC的保护作用。     

齐墩果酸对损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制探讨

目的:探讨齐墩果酸(oleanic acid,OA)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导人血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其机制?方法:培养HUVECs,分为正常组?H2O2模型组?H2O2+OA (0.25 ?滋mol/L)组?H2O2+OA (0.50 ?滋mol/L)组?H2O2+OA (1.00 ?滋mol/L)组?H2O2+维生素C(1.50 mmol/L)组?各组培养24 h后,通过MTT法检测细胞增殖能力,酶生化法测定上清液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,酶生化法测定细胞裂解液中的丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量?谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,流式细胞仪测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞凋亡率?结果:OA能够恢复H2O2损伤的细胞活力,减轻H2O2诱导的LDH释放,减少H2O2诱导的MDA生成,恢复H2O2损伤的GSH-Px和SOD活力,清除H2O2诱导的ROS,减轻H2O2诱导的细胞凋亡,提高HUVECs细胞NO的生成?结论:OA对损伤血管内皮细胞有保护作用,这与OA能够启动HUVECs细胞内抗氧化防御机制,清除细胞内的ROS,提高HUVECs细胞NO的生成,抑制H2O2诱导的HUVECs细胞凋亡有关?     

LPS对血管内皮细胞的直接损伤作用的初步研究

目的 探讨烧伤后早期内毒素对血管内皮细胞(Vasculancndothelial cells，VEC)的直接损伤作用。方法 采用RF／6A135猴血管内皮细胞株和ECV—304人脐静脉内皮细胞株为模型，将细胞分为正常对照组和细菌脂多糖(Lipopolysacoharide，LPS)浓度梯度组。观察不同时相点LPS对内皮细胞形态、脱氢酶活性的影响、VEGF表达、VE—cadherine的表达和LPS与VEC结合能力及对VEC中MAPK信号传导系统磷酸化的影响。结果 LPS对VEC的形态影响明显。2．0μg／ml LPS可明显激活内皮细胞的线粒体脱氢酶活性，并有时间依赖性；刺激内皮细胞2～12h，可诱导VEGF的表达；刺激内皮细胞6～48h，VE—cadherine表达进行性下降。激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析显示LPS能与内皮细胞结合。免疫细胞化学和Western blotting分析显示LPS可诱导ERK1／ERK2和P38MAPK磷酸化。结论 LPS能与VEC结合并损伤VEC的功能和形态。LPS对VEC的作用还伴有MAPK系统信号ERK1／ERK2和P38的磷酸化，说明LPs可以诱导VEC的跨膜信号传导。     

哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

目的探讨哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢（H2O2）损伤人血管内皮细胞的保护作用及其机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVECS）,将生长良好的3代～5代细胞用于实验。实验分四组：对照组、H2O2组、哈巴苷干预组及哈巴俄苷干预组,光镜观察细胞形态,用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）检测细胞活力;取细胞上清液,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）含量。结果哈巴苷及哈巴俄苷干预均使H2O2损伤的HUVECS形态趋于正常,活力增强,细胞膜损伤减轻,减少细胞LDH及MDA产生。结论哈巴苷及哈巴俄苷能对抗H2O2引起的损伤,保护血管内皮细胞。