人类DYS240基因与精子发生的相关性研究

目的　人类Yq11.2 3上的DYS 2 40基因是无精子因子AZF(azoospermicfactor ,AZF)的重要候选成分 ,它的缺失可能导致无精子症或严重少精子症。本文着重探讨其在人类精子发生过程中的作用。方法　采用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测了 2 6例核型正常的无精子症或严重少精子症患者的DYS 2 40基因。结果　有 2例患者DYS 2 40基因缺失 ,占全部被检测 2 6例患者的 7.6 9%。结论　提示DYS 2 40基因的存在与否与精子发生具有相关性。本结果丰富了精子发生的基础理论 ,为男性避孕寻求新的方法拓宽了思路。     

人类Y染色体畸变与精子发生的相关性研究进展

众所周知 ,精子发生 (Ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓ)是指生精上皮的干细胞发育为成熟精子的一系列变化过程。在正常情况下 ,人类男性细胞中Ｙ染色体处于半合子状态 ,行父系遗传。广义的Ｙ染色体畸变包括了细胞生物学的改变和分子生物学的改变。前者通常表现为染色体数目畸变和结构畸变 ,后者通常表现为影响精子发生而又位于Ｙ染色体上的基因成分的改变。如果Ｙ染色体发生上述过程中的任何一种变化 ,就可能影响精子的正常发生 ,导致生育功能障碍 ,出现男性不育。1　Ｙ染色体畸变与精子发生Ｙ染色体畸变包括染色体数目畸变和结构畸变。在Ｙ…     

泛素特异性蛋白酶USP48在乳腺癌中表达的初步研究

目的 泛素特异性蛋白酶48(Ubiquitin-Specific Protease 48,USP48)是泛素特异性蛋白酶(USP)家族的成员,在特定癌症类型中下调。然而,USP48在乳腺癌患者中的表达模式和临床病理意义尚不清楚。本研究目的是初步探讨USP48在乳腺癌中的表达情况。方法 挖掘 oncomine 数据库,提取 USP48 在乳腺癌与正常组织转录水平表达情况;采用实时定量 PCR、Western blot 检测10 例分子分型为 Luminal A型的乳腺癌及正常乳腺癌旁组织中USP48 mRNA及蛋白水平加以验证。结果 Oncomine 数据库预测USP48 mRNA在侵袭性乳腺癌中表达水平降低;新鲜乳腺癌标本中,USP48 mRNA和蛋白水平明显低于相对应的癌旁正常乳腺组织。结论 初步研究显示,USP48 mRNA和蛋白水平在乳腺癌中下调,USP48可能在乳腺癌中发挥抑癌基因发挥作用,为探索USP48在乳腺中的致病机制研究和生物学作用奠定初步研究基础。     

SLC26A4基因与前庭导水管扩大综合征相关性研究

近十年来的国内外研究证实,由SLC26A4基因突变引起的前庭导水管扩大是常见的致聋的先天性疾病。随着基因诊断技术的发展,越来越多的前庭导水管扩大病例被证实与SLC26A4基因突变有关。现就SLC26A4基因与前庭导水管扩大综合征相关性研究现状及其基因筛查的意义予以综述。     

CD26与造血干细胞归巢的相关性研究

白细胞分化抗原CD26,即二肽酶IV（dipeptidyl—peptidaseⅣ,DPPⅣ）,是一种糖蛋白分子,分布于多种细胞表面或游离于胞浆中,具有高度保守的蛋白水解酶活性,其天然底物在体内执行多种重要功能。另外,CD26还是一种细胞膜受体、共刺激分子,参与机体免疫调节、细胞迁移、细胞黏附和细胞凋亡,     

连接蛋白26与神经内分泌特异蛋白的羧基端相互作用

目的：应用酵母双杂交技术筛选和鉴定连接蛋白26（connexin 26, Cx26）的相互作用蛋白质。方法：以正常人DNA为模板,PCR扩增Cx26（GJB2）全长编码区作为诱饵,基因重组法定向克隆到第3代MatchMaker Gal4双杂交系统的pGBKT7质粒,用构建的pGBKT7-Cx26质粒筛选人胎脑cDNA文库,获得的阳性克隆的插入子为Cx26的相互作用蛋白质（猎物）,将Cx26和筛选到的相互作用蛋白再一对一回复进行酵母双杂交实验,去除假阳性。对阳性克隆插入子的DNA序列进行测序,在GenBank中作匹配及生物信息学分析。结果：1个阳性克隆的插入子与神经内分泌特异蛋白（neuroendocrine specific protein, NSP）羧基端的145个氨基酸残基序列一致,阅读框无移位。结论：Cx26与NSP的羧基端具有相互作用,NSP可能在Cx26蛋白的转运、装配成间隙连接或间隙连接功能等生理活动过程中起一定作用。     

AZF基因缺失与男性精子缺陷的相关性

目的 了解AZF基因与男性精子缺陷发生的关系.方法 采用多重聚合酶链反应-琼脂糖电泳检测技术,利用挑选的AZFa、AZFb、AZFc共3个区域的6个序列标签位点(STS),对80例精子正常男性、142例特发性无精子症和113例重度少精子症病人进行AZF微缺失分析.结果 正常男性组未检出AZF基因缺失;特发性无精子症组检出AZF缺失21例(14.79%),其中AZFa缺失1例,AZFb缺失3例,AZFc缺失14例,AZFb AZFc缺失3例;重度少精子症组检出AZF缺失14例(12.39%),其中AZFc缺失12例,AZFb AZFc缺失2例.特发性无精子症组、重度少精子症组AZF缺失率与正常男性组比较,差异有显著性(χ2=11.39、8.92,P<0.01);而特发性无精子症组与重度少精子症组间差异无显著性(P>0.05).结论 AZF微缺失是引起特发性无精子症和重度少精子症的原因之一,与男性精子缺陷发生密切相关.     

青少年儿童特发性耳聋与Connexin26突变的相关性

目的:对无耳聋家族史及无噪声暴露史,排除病毒感染后致聋的青少年及儿童是否存在connexin26突变。方法:2004年7月至2007年1月就诊的30岁以下的不明原因的神经性耳聋患者,共44例,行听力学检查包括电测听、声阻抗、脑干诱发电位及保留外周血2ml做是否有connexin26突变的pcr扩增及扩增目的片段直接测序分子生物学实验室检测。采用正常标准对照及阳性对照,阳性对照组系一近亲婚配后耳聋家族。结果:对于connexin26突变的结果,在26例患者中未发现有该基因突变,在18例语前聋患者中有5例该基因突变,突变均位于第二编码基因的235号位置缺失c的突变。在正常对照组和阳性对照组的耳聋患者中未发现该基因突变(fisher’s精确概率P=0.01)。结论:connexin26突变主要累及语前耳聋患者。     

尤文肉瘤EWS—FLI1与特异序列结合并调节表达的研究

95％的尤文肉瘤家族（Ewing family of tumor，EFT）具有特异的EWS—FLI1融合基因。EWS—FLI1是一个比正常的FLI1强多许多倍的转录因子，并且可以与特异ACCGGAAGT基因序列结合。把该特异性结合序列插入到荧光素酶报告基因载体（pGL3-Promoter，promega公司）中，构建了新表达载体pS2。我们用脂质体法转染pS2到尤文肉瘤细胞系（RD—ES、SK—ES）及对照细胞系（NIH3T3、Hela），然后进行荧光定量检测，检测各组细胞系相对荧光强度。结果证实尤文肉瘤的EWS—FLI1确实能够与该特异序列结合并促进下游虫荧光素酶基因的高表达。     

泛素特异性蛋白酶7的表达与男性不育的相关性

目的 探讨弱精子症(asthenozoospermia)和少弱精子症(oligoasthenozoospermia)患者精子中泛素特异性蛋白酶7(ubiquitin specific peptidase 7,USP7)的表达及其与男性不育的相关性.方法 随机选取就诊于重庆医科大学附属第二医院妇产科生殖医学中心的不育症患者120例,根据2010年世界卫生组织标准进行精液参数常规分析,包括精子浓度和运动能力,分为弱精子症组(A组)37例、少弱精子症组(OA组)26例和正常精子(normozoospcrmia)组(N组)57例.采用免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测USP7在人精子中的定位与表达变化,并进行相关性分析.结果 USP7定位于精子尾部中段和主段,与N组(1.63±0.76)相比,在A组(0.86±0.53)或OA组(0.62±0.43)精子中USP7蛋白的表达下降(P＜0.01).经相关分析,USP7蛋白水平与精子浓度(r=0.455 0,P=0.005 3)、前向运动精子百分率(r=0.431 2,P=0.008 7)和总活动率(r=0.443 8,P=0.006 7)呈正相关.结论 USP7表达下降与人精子活力和浓度降低有关,其可作为评估男性生育力的指标之一.     

TOMM7 遗传变异及基因- 环境交互作用与我国侗族人群2 型糖尿病的关联研究

目的：探讨全基因组关联研究(genome-wide association studies,GWAS)中识别的7个遗传位点与我国侗 族人群2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法：在我国侗族人群中采用病例对照研究方法, 利用多重PCR-SNaPshot法对PARD3B(rs849230),LOC729993(rs149228),EPHA4(rs16862811),HNT(rs3099797), PTPRD(rs17584499与rs649891),TOMM7 (rs2240727)6个基因的7个位点进行基因分型。采用非条件二分类logistic回 归方法分析每个多态位点与T2DM的相关性,利用边缘结构线性优势比模型进行基因与环境因素的交互作用分析。 结果：本研究共包括209例T2DM患者与209例健康对照。TOMM7基因的rs2240727位点多态性与T2DM相关(对于每 个拷贝的风险等位基因T,OR=1.50,P=0.004),且CT和TT基因型是T2DM的风险基因型,OR分别为2.07(95% CI： 1.14~3.76)和2.75(95% CI：1.46~5.17),经Bonferroni多重比较校正后,上述结果仍然有意义(均P<0.05)。经调整年龄、 性别、体质量指数(body mass index,BMI)后,rs2240727位点与T2DM仍有相关性(P<0.01)。交互作用分析结果表明： rs2240727位点与BMI、腰臀比(waist-hip ratio,WHR)、高血压、糖尿病家族史之间存在正交互作用,调整性别、年 龄后,交互作用超额相对危险度(relative excess risk of interaction,RERI)分别为1.5430 (95% CI：0.5797~2.5062),2.6520 (95% CI：1.7516~3.5524),2.9131 (95% CI：1.7959~4.0303),4.2062 (95% CI：1.1686~8.2439),差异有统计学意义(均 P<0.05)。结论：TOMM7基因的rs2240727位点遗传变异与我国侗族人群的T2DM相关,且与BMI、WHR、高血压和糖 尿病家族史之间存在正交互作用。     

The study of spermatogenesis impairment of contralateral testicle following unilateral testicular torsion and immune response

Objective To investigate the mechanism of contralateral testicle spermatogenesis impairment following unilateral testicular torsion in rats. Methods Healthy male Sprague-Dawley rats （ n = 24） were randomly divided into 3 groups： group 1 （sham-operation） ,2 and 3, each comprising 8 rats. Under surgical conditions, the left testes of the rats in groups 2 and 3 were rotated through clockwise 720＊ torsion, then detorsion after 12 h or 24 h, respectively. The contralateral testes were harvested after 1 monthand the relative proportions of germ cells were measured by the flow cytometry （FCM）. Anti-rat irnmunoglobulin G （IgG） antibodies against spermatozoa antigens were detected in contralateral testicular tissue by immunohistochemical method. Results In groups 1,2 and 3,     

Association of apelin genetic variants with type 2 diabetes and related clinical features in Chinese Hans

Background Apelin is an adipokine that contributes to the pathogenesis of type 2 diabetes. The plasma levels of apelin increased in obese patients and diabetic subjects. This study aimed to investigate the effects of apelin genetic variants on type 2 diabetes and related quantitative traits. Methods We selected three single nucleotide polymorphisms （SNPs） that could capture all common variants in APLN gene region and genotyped them in 1892 type 2 diabetic patients and 1808 normal glucose regulation controls. The clinical features related to glucose metabolism were measured in the controls. The comparison of allele and genotype distribution in the cases and controls were performed by using X2 tests. The association between SNPs and quantitative traits were analyzed using Wilcoxon＇s rank-sum test. Results None of the SNPs or haplotypes showed evidence of association to type 2 diabetes. However, rs2235306 was nominally associated with fasting plasma glucose levels in the male subjects with normal glucose regulation （（4.93±0.03） vs （5.01±0.03） mmol/L, P=0.04）. No significant difference was observed between all three SNPs and other variables. Conclusions APLN SNP rs2235306 was associated with fasting plasma glucose levels in males. It suggests that APLN genetic variants may contribute to clinical features related to glucose metabolism in Chinese population.     

血管紧张素转换酶基因多态性与肺癌的相关性分析

目的 探讨我国北方地区汉族人群血管紧张素转换酶（ACE）插入、缺失基因多态性与肺癌的相关性。方法 选择首都医科大学附属北京胸科医院收治的肺癌确诊患者120例为病例组,按照病理结果 分为小细胞癌（SCLC）组31例和非小细胞癌（NSCLC）组（鳞癌、腺癌、鳞腺癌）89例。对照组为健康体检者62例。采用聚合酶链反应-序列特异性引物法（PCR—SSP）进行ACE插入（I）、缺失（D）基因分型分析及多态性分布情况。结果 病例组D／D基因型频率明显高于对照组,差异有统计学意义（χ^2=4．347,P=0．037,OR=2．85）。小细胞肺癌组（SCLC）的D／D基因型频率明显高于非小细胞肺癌组（NSCLC）,差异有统计学意义（χ^2=4．602,P=0．032,OR=2．900）;SCLC组D等位基因频率明显高于NSCLC组（χ^2=5．185,P=0．023,OR=1．967）;SCLC组I等位基因频率明显低于NSCLC组（χ^2=5．185,P=0．023,OR=0．508）。ACE插入、缺失基因多态性在肺癌各期和NSCLC患者中的频率分布差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 中国北方地区汉族人群ACE基因多态性与肺癌具有相关性,D／D基因型和D等位基因可能是小细胞肺癌的易感因素。     

宁波地区汉族人群冠心病候选基因变异及其临床的关联性

目的:探讨CETP-Taq1B,LPL-HindⅢ及LPL-PvuⅡ基因变异对宁波地区汉族人群血脂代谢及冠心病临床表型的影响.方法:入选宁波地区行冠状动脉造影(CAG)检查的汉族人群186例,男性75.1%,平均年龄(61±10)岁.其中冠心病组111例,对照组75例.采用苯酚-氯仿-异丙醇抽提外周血白细胞全基因组DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)及限制性片段长度多态性(RFLP)结合测序方法确定候选基因AB-CA1-G596A单核苷酸多态性(SNPs).结果:宁波地区汉族人群CETP-Taq1B基因型B1B1,B1B2及B2B2分布频率依次为0.39,0.49及0.11;LPL-HindⅢ基因型H H ,H H-及H-H-频率分别为0.58,0.39及0.03;LPL-PvuⅡ基因型P P ,P P-及P-P-频率分别为0.38,0.55及0.07.宁波地区CETP-Taq1B变异升高HDL水平(P=0.01),同时对TG亦有降低趋势(P=0.06);LPL-Hindln及PvuⅡ对HDL-C均无显著影响,而LPL-HindⅢ及PvuⅡ基因变异均显著降低血浆TG水平(P=0.001,P=0.04);3种SNT对血浆总胆固醇及LDL均无显著影响.冠心病与对照组之间上述3种变异基因型频率分布均无显著性差异(P>0.05).结论:冠心病候选基因CETP-Taq1B,LPL-HindⅢ及LPL-Pvu Ⅱ变异对血脂代谢产生一定的影响,但与冠心病临床表型之间缺乏显著性关联.     

白细胞介素-27的基因多态性与大肠癌的遗传易感性之间的相关性研究

目的 探讨白细胞介素-27(IL-27)基因单核苷酸多态性及其单倍型与大肠癌易感性之间的关系.方法 以170例大肠癌患者和160例健康对照者为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对IL-27基因-964 A/G、2905 T/G单核苷酸多态性进行基因分型,同时用SHEsis软件分析IL-27基因的连锁不平衡及单倍型频率.结果 IL-27基因2905 T/G多态性在大肠癌组和对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-27基因-964 A/G多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义 (P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,-964 G等位     

DNA修复基因XPD多态性与地方性砷中毒关系的研究

目的：研究核苷酸切除修复基因XPD单核苷酸多态性与地方性砷中毒患病风险的关系。方法：采用病例对照研究，包括正常对照99例，地方性砷中毒患者92例。以聚合酶链反应一限制性长度多态性方法分析XPD基因Lys751Gln多态性，比较不同基因型和地方性砷中毒患病风险的关系。结果：病例组中野生型XPD751Lys纯合子的频率明显低于对照组，和携带XPD751Lys／Lys基因型比较，携带至少一个XPD751Gln等位基因的个体即Lys／Gln和Gin／Gin基因型，地方性砷中毒发病风险显著增加，OR值分别为1．59和8．56。结论：XPD基因Lys751Gln多态性和地方性砷中毒易感性有关，XPD751Gln等位基因可能是地方性砷中毒的风险等位基因。     

轻度认知功能障碍与neprilysin基因单核苷酸多态性的相关性

目的   分析轻度认知功能障碍（MCI）患者脑啡肽酶基因（NEP）rs3736187位点单核苷酸多态性,为MCI的防治提供理论依据。方法   参照美国精神病学会的精神障碍诊断和统计手册第4版（DSM-IV）的MCI诊断标准,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测NEP基因多态性,采用病例-对照的关联分析方法,对NEP基因rs3736187位点进行基因型和等位基因频率分析。结果  NEP基因型频率和等位基因频率分布,MCI组与对照组间差异显著(P＜0.05),T等位基因携带者出现MCI的危险性高于C等位基因携带者(OR=2.212, P＜0.05),NEP基因基因型频率和等位基因频率分布,男性之间和女性之间差异不明显,女性MCI组与对照组间等位基因频率分布差异显著（P＜0.05）。结论   NEP基因的T等位基因可能是MCI的危险因素之一,在女性MCI的发病中可能起重要作用。     

载脂蛋白E基因变异与颈动脉粥样硬化及血脂的关系

目的探讨颈动脉粥样硬化(CAS)与载脂蛋白E(apoE)基因多态性的关系。方法采用聚合酶链反应一限制性长度多态技术(PCR-RFLP)检测103例CAS患者和108例健康对照者的apoE的基因型及等位基因分布频率,同时检测其血脂水平。结果CAS组apoE基因型E2/2、E2/3、E2/4、E3/3、E3/4和E4/4的频率分别为0%、11.7%、1.9%、47.6%、35.6%和2.9%,apoE等位基因ε2、ε3和ε4的频率依次为5.8%、66.0%和28.2%;而对照组相应基因频率分别为2.8%、16.7%、0.9%、65.7%、13.9%、0和9.3%、82.4%、8.3%;两组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,CAS组apoE基因E3/4和等位基因ε4的频率明显增高,而E3/3、ε3的频率则明显降低(P<0.05)。结论apoE等位基因ε4在CAS患者中出现的频率显著增高,很可能是引发CAS的潜在危险因子。     

Association of genetic variations of the prostasin gene with essential hypertension in the Xinjiang Kazakh population

Background  Transgenic overexpression of human prostasin in rats disturbs salt balance and causes hypertension. We investigated whether genetic variations in prostasin were implicated in hypertension or related phenotypes in the Xinjiang Kazakh population.

Methods  We sequenced all exons and the promoter regions of the prostasin gene in 94 hypertensive individuals, and the genotype identification was performed by the TaqMan polymerase chain reaction method. Case-control studies were conducted in 938 Kazakh subjects.

Results  E342K and 2827G>A, which are novel variants, were successfully genotyped in the general Xinjiang Kazakh population with a sample size of 938 individuals (406 men and 532 women). Only one hypertensive patient was identified with the E342K mutation. No significant association was observed between 2827G>A and hypertension. However, quantitative traits of hypertensive intermediate phenotypes were significantly associated with the A allele; P=0.041 and 0.034 for body mass index (BMI) in the additive and recessive models, P=0.042 and 0.018 for OGTT-2h glucose in the additive and recessive models, P=0.031 for IRT-3h insulin in the recessive model, and P=0.038 for serum potassium in the dominant model.

Conclusions  This study does not provide evidence of a major role of prostasin variation in blood pressure modulation. However, association of prostasin polymorphisms with hypertension and metabolic effects can be observed in our population. Further investigation is warranted to clarify the relevance of prostasin polymorphisms to blood pressure regulation.