胡桃楸茎枝中胡桃醌含量的动态变化

目的:考察不同时间采收的胡桃楸茎枝中胡桃醌含量的动态变化规律,为胡桃楸茎枝资源的合理开发利用提供理论基础。方法:采用高效液相色谱法测定胡桃楸茎枝中胡桃醌的含量。结果:12个月采收的胡桃楸茎枝样品中胡桃醌的平均含量为3.83 mg.g-1。3月底采收的胡桃楸茎枝样品中胡桃醌的含量最低,从3月至11月,随着植株的生长胡桃楸茎枝中胡桃醌的含量逐渐增加,而从11月到次年3月,随着植株进入休眠期胡桃醌的含量逐渐降低。结论:胡桃楸茎枝中胡桃醌含量的变化与植株的生长周期基本一致。     

不同干燥方法对胡桃楸茎枝中胡桃醌含量的影响

目的:研究不同干燥方法对胡桃楸茎枝中胡桃醌的影响。方法:采用冷冻干燥、自然晒干、自然阴干、20℃干燥、40℃干燥、60℃干燥等6种方法处理新鲜的胡桃楸茎枝样品;采用HPLC法测定不同方法干燥的样品中胡桃醌的量。结果:本文所建立的HPLC方法结果准确可靠,操作简单,可重现。不同方法干燥的胡桃楸茎枝样品中胡桃醌的量明显不同(P<0.05)。随着干燥温度的升高和光照强度的增加胡桃醌的量逐渐减少,60℃干燥样品中胡桃醌的量仅为冷冻干燥样品的1/4,自然晒干样品中胡桃醌的量较自然阴干样品中胡桃醌的量低0.15 mg.g-1。结论:不同干燥方法对胡桃楸茎枝中胡桃醌的量有明显影响,温度和光照强度为主要影响因素。要从胡桃楸茎枝样品中得到更多的胡桃醌,应采用40℃以下避光干燥的方法。     

胡桃楸茎枝水提物的急性毒性及体外抗肿瘤活性研究

目的研究胡桃楸水提物的急性毒性以及体外抗肿瘤活性和毒性,以期评价胡桃楸水提物的毒副作用及对肿瘤细胞的选择性毒性。方法采用热回流的方法制备胡桃楸水提物。体内急性毒性研究以小鼠为模型;体外抗肿瘤活性和毒性分别以胡桃楸水提物对人胃癌细胞(HGC-27)和高分化的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的增殖抑制作用作为评价指标,采用MTT比色法评价胡桃楸水提物对HGC-27和SH-SY5Y细胞形态和相对增殖率(RGR)的影响,进而评价胡桃楸水提物对肿瘤细胞的选择性抑制作用。结果胡桃楸水提物冻干粉的得率为12.5%。口服给药后,在最大给药剂量下(以生药计为227.27g·kg~(-1)),胡桃楸水提物对小鼠未表现出毒性。在体外抗肿瘤作用与毒性研究中,加入不同浓度胡桃楸水提物,当浓度≤0.1 mg·m L-1时,对两种细胞未显示细胞毒性。当浓度≥0.5 mg·m L~(-1)时,HGC-27细胞的RGR≤51.48%,有明显的细胞毒性;而对SH-SY5Y细胞无细胞毒性。结论胡桃楸水提物对小鼠无明显毒副作用。在低浓度下,胡桃楸水提物对HGC-27细胞和SH-SY5Y细胞均无明显毒性作用;在高浓度下,对HGC-27细胞显示一定的细胞毒性,而对SH-SY5Y细胞仍无明显毒性,说明胡桃楸水提物在高浓度下对胃癌细胞的增殖抑制作用具有一定的选择性。     

加入胡桃醌与敲除胡桃醌的胡桃楸水提物的抗肿瘤活性

目的明确胡桃醌对胡桃楸抗肿瘤作用的贡献。方法将胡桃醌及胡桃楸所有成分作为整体考虑,利用胡桃醌易挥发的性质,通过水煎煮敲除胡桃醌,比较加入和敲除胡桃醌的胡桃楸水提物在小鼠体内的抗肿瘤活性。采用荷H22肝癌小鼠模型,以瘤质量、抑瘤率、免疫器官指数和外周血常规参数评价不同样品的抗肿瘤活性及对荷瘤机体的影响。结果加入胡桃醌的胡桃楸水提物低、高剂量组能显著抑制小鼠H22肝癌细胞的生长,抑瘤率分别为31.96%和50.61%,呈量效关系。敲除胡桃醌的胡桃楸水提物低、高剂量组的抑瘤率分别为37.01%和12.35%,不呈量效关系。胡桃楸水提物中加入胡桃醌高剂量后,抑瘤率显著提高;加入胡桃醌低剂量后能改善荷瘤小鼠红细胞数量的异常;敲除胡桃醌高剂量组能改善荷瘤小鼠淋巴细胞百分比和中性粒细胞百分比的异常;其余各胡桃楸提取物对荷瘤小鼠免疫器官和外周血常规的异常无明显改善作用。结论胡桃楸水提物具有较好的抗肿瘤活性;胡桃醌高剂量组对胡桃楸水提物的抗肿瘤作用贡献较大。     

苦豆子生物碱衍生物施普睿达对小鼠肝癌H22的抑制作用

目的 观察苦豆子生物碱衍生物施普睿达体内对小鼠肝癌H22的抑制作用及量效关系. 方法 将75只昆明种小鼠移植肝癌H22细胞后,随机分为5组,每组15只. 空白对照组给予纯化水10 mL&#8226;kg^-1&#8226;d^-1,低、中、高剂量给药组分别给予施普睿达150,300,600 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1,阳性对照组每2 d给予顺铂（4 mg&#8226;kg^-1）,各组均连续给予相应药物10 d. 观察施普睿达对实体瘤的抑瘤率,通过体重变化,肝重,脾、胸腺指数等多项指标综合考察施普睿达对荷瘤动物免疫机能的影响. 结果 低、中和高剂量药物组对小鼠肝癌H22抑瘤率分别为33.44%,41.90%,48.25%,各组对小鼠的肝、脾指数和胸腺指数几乎无影响;而阳性对照组小鼠的肝、脾指数和胸腺指数明显下降. 结论 施普睿达对小鼠肝癌H22有较好的治疗作用,而且不影响荷瘤动物免疫功能,属于低毒的抗肿瘤新药.     

吡哆醇对小鼠肝癌细胞H22体外抑制作用的研究

目的：研究吡哆醇对体外培养小鼠肝细胞H22的细胞毒作用。方法：应用MTT法，测定吡哆醇在不同浓度及不同作用时间对小鼠肝癌细胞的抑 制作用。结果：同阴性对照组相比，吡哆醇浓度为3mmol/L时对肝癌细胞有轻度抑制作用（R＝36．8％），6mmol/L时为高度抑制（IR＝55．6％，P＜0．01）。回归分析显示，IR％与给药浓度与作用时间呈正相关，尤以48小时为显著，呈线性趋势（r＝0．9764，P＜0．01），其相应的IC50＝5mmol/L。结论：吡哆醇对体外培养的H22小鼠肝癌细胞系的生长具有抑制作用，且二者之间有剂量－效应关系和时间－效应趋势。     

乌骨藤提取物对小鼠移植性实体瘤H22和S180的抑制作用

目的探讨乌骨藤提取物对小鼠移植性实体瘤H22和S180的作用。方法乌骨藤提取物按25，50，100mg／kg灌胃给药，连续两次重复试验。结果低、中、高剂量的乌骨藤提取物对小鼠移植性实体瘤H22的抑制率分别为16．87％，23．41％和36．34％，对S180的抑制率分别为15．91％，26、36％和34．57％。结论乌骨藤提取物能抑制H22和S180瘤株的生长。     

胡桃楸不同部位水提取物的体内抗肿瘤作用

目的比较研究胡桃楸根、茎枝、叶和果等不同部位水提取物的体内抗肿瘤作用。方法采用H22肝癌荷瘤小鼠模型,以环磷酰胺为阳性对照,以瘤质量、免疫器官指数、外周血象和肝功能为指标,比较胡桃楸不同部位水提取物对H22肝癌实体瘤的抑制作用及对荷瘤机体正常免疫和生理功能的影响。结果胡桃楸果、叶和根低剂量组(1.77g·kg-1)小鼠肿瘤质量显著小于模型组,抑瘤率分别为30.58%,25.62%和23.14%。胡桃楸枝未显示明显的抗肿瘤作用。在提高荷瘤小鼠免疫力、改善荷瘤小鼠外周血常规和肝功能等方面,各胡桃楸水提取物未表现出积极的作用。但与环磷酰胺组比较,胡桃楸未显示出抑制免疫功能、杀伤白细胞和使小鼠体质量降低等不良反应。结论胡桃楸不同部位具有一定的抗肿瘤作用,抗肿瘤作用由强到弱的顺序为果>叶>根>枝。     

三棱提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

三棱是抗癌特效药莪棱蛇草系列中主要成分之一,三棱具有抑制肿瘤的功能,在抗癌中药的配方中起着非常重要的作用。药理学的作用主要表现为增强机体免疫力,改善血液循环,抑制癌细胞,使其不易在血液中停留、聚集,改善症状,缓解病情。但三棱对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及抑制机制未见报道,我们用三棱的水提物作用于H22荷瘤小鼠;     

水蛭素对荷肝癌H22小鼠的抑瘤作用

目的:观察水蛭素对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法:小鼠右前腋窝下皮下种瘤造成实体瘤模型,将40只小鼠随机抽样分为4组,水蛭素高剂量和水蛭素低剂量组、氟尿嘧啶组及模型对照组,每组10只。治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,用药14 d后取瘤称重,计算抑瘤率,并计算肝/体比、肾/体比、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标。结果:水蛭素高、低剂量组对小鼠H22肝癌细胞均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为37.63%、23.71%,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05),水蛭素高、低剂量组与氟尿嘧啶组比较,肝/体比、肾/体比、脾脏指数均有显著性差异,有统计学意义(P<0.05),经治疗后水蛭素各组小鼠与模型对照组及治疗前比较体重变化不明显(P>0.05)。结论:水蛭素对小鼠H22肝癌细胞有明显的抑制作用,同时对小鼠重要器官可能具有一定的保护作用。     

氯化两面针碱对小鼠腹水型H22肝癌的抑制作用及机制研究

氯化两面针碱(nitidine chloride, NC)是从广西特有药用植物两面针[Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC]的根中分离到的具有抗肿瘤活性的生物碱,据文献[1]报道,对LEWIS肺癌、人体鼻咽癌、肝癌、慢性粒细胞白血病等均有抑制作用.本课题组前期研究也证实[2],NC能抑制人肺癌SPC-A-1、舌癌Tca8113细胞的增殖,促进细胞凋亡.     

云树果实醋酸乙酯提取物对H22荷瘤小鼠抑瘤作用及机制研究

目的 研究云树果实醋酸乙酯提取物（EGCF）对H22实体移植瘤的抑制活性及作用机制。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺（20 mg/kg,阳性对照,ip给药）组和EGCF高、中、低剂量（400、200、100 mg/kg,ig给药）组,连续给药10 d,另设一对照组。检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏指数,ELISA法测定血清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量,HE染色法观察肿瘤组织病理学改变,免疫组化法检测肿瘤组织p-STAT3及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果 与模型组比较,EGCF高、中、低剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低（P<0.01、0.001）,脾脏指数均无显著性差异;高、低剂量组小鼠血清中IL-6水平显著降低（P<0.05）,各剂量组TNF-α含量显著增加（P<0.05、0.01）;各剂量组瘤组织均出现较多红染、碎片状的干酪样坏死区域,且伴有大量空泡形成;各剂量组均显著减少肿瘤组织VEGF表达,高剂量组显著抑制STAT3磷酸化（P<0.05、0.01）。结论 EGCF能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与阻断STAT3相关信号通路有关。     

北青龙衣对大鼠尿液中5种毒性标志物含量的影响

目的 考察北青龙衣鲜品对大鼠尿液中5种毒性代谢物[L-左旋多巴（laevodopa,L-Dopa）、L-酪氨酸（L-tyrosine,L-Tyr）、L-苯丙氨酸（L-phenylalanine,L-Phe）、吲哚乙酸（indoleacetic acid,Int）及尿黑酸（homogentisic acid,HGA）]含量的影响。方法 Wistar大鼠灌胃给予北青龙衣鲜品,周期为1个月,采用MRM方法,建立同时检测5种代谢物的最优方法,并应用Masslynx软件外标法,对各代谢物精准定量。结果 L-Dopa、L-Tyr、L-Phe、Int及HGA的线性范围分别为30~32 000,25~30 000,7.5~8 000,50~10 000,100~10 000 ng·mL^-1,线性良好;与空白组健康大鼠相比,北青龙衣鲜品组尿液中的5种代谢物含量均有所升高。结论 北青龙衣鲜品可影响大鼠体内5种代谢物的正常代谢。     

北青龙衣乙醇提取物中成分在大鼠脑组织中的分布研究

目的利用超高压色谱–四极杆–飞行时间串联质谱技术(UPLC-Q-TOF/MS)对大鼠ig北青龙衣乙醇提取物后在脑组织中成分分布进行分析。方法将北青龙衣醇提物按20 mL/kg ig大鼠后,采集脑组织,采用UPLC-Q-TOF/MS法分析;正负离子模式使用ESI源对数据进行采集,并通过数据分析软件进行处理,对入脑成分分子式的鉴别采用精确质量数、同位素峰度比比较进行,进一步将其二级质谱图与对照品或数据库的二级谱图进行比对、结合已知的文献报道和对化合物的裂解规律分析,确定入脑成分的结构式。结果从大鼠脑组织中鉴定了11种来源于北青龙衣的成分,包含7个原型成分、4个代谢产物,其中7个萘醌,2个二芳基庚烷,2个酚酸。结论北青龙衣乙醇提取物在大鼠脑组织中分布的成分以萘醌类为主,为北青龙衣脑毒性的深入研究提供物质基础,也为其体内成分、组织分布研究提供方法学借鉴。     

基于谱效关系的核桃楸皮治疗肝癌药效物质基础研究

目的 基于核桃楸皮不同极性部位HPLC指纹图谱与抗肝癌作用的谱效关系，筛选出核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示其治疗肝癌的药效物质基础。方法 采用HPLC法建立核桃楸皮不同极性部位的指纹图谱；采用CCK-8法开展核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌的体外药效学研究；采用灰色关联度分析法及偏最小二乘回归分析法，将指纹图谱共有峰峰面积与药效学数据相关联，建立核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌体外谱效关系，筛选出其治疗肝癌的药效物质，并进行体外药效验证。结果 不同极性部位指纹图谱中共24个共有峰，其中有8个峰与药效呈正相关且VIP值大于1，确认这8种成分为核桃楸皮治疗肝癌的药效物质。经对照品比对，指认出4号峰为丁香酸、9号峰为鞣花酸、10号峰为槲皮苷、16号峰为山柰酚。结论 本研究通过建立谱效关系筛选出了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质基础。     

臭牡丹提取物对H22荷瘤小鼠体内抑瘤作用及对相关蛋白表达的影响

目的 研究臭牡丹提取物对H22实体移植瘤的抑制作用及与B淋巴细胞瘤/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的相关性。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型。60只荷瘤鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）组和臭牡丹高、中、低剂量（2.18、1.09、0.55 g/kg）组,每组12只,各组分别给予生理盐水、5-Fu（25 mg/kg,1次/d）及不同浓度的臭牡丹提取物干预。连续给药14 d后处死,检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏和胸腺指数;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,臭牡丹高、中剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低（P<0.01）,胸腺和脾脏指数显著增加（P<0.05）;同时Bax蛋白的表达水平显著上调,Bcl-2蛋白的表达显著降低（P<0.01）。结论 臭牡丹提取物能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与上调Bax/Bcl-2比值和免疫调节有关。     

杠板归抑制小鼠H22肝癌的作用机制

目的 观察杠板归对小鼠H22肝癌的抑制作用，分析其可能的作用机制。方法 建立H22皮下移植小鼠模型评价杠板归对肿瘤生长的影响；二甲苯诱导的耳肿胀评价杠板归对荷瘤小鼠炎症的影响；网络药理学分析杠板归抗肿瘤和抗炎可能的作用机制。结果 杠板归对H22皮下肿瘤生长有明显抑制作用（P<0.05），显著降低二甲苯诱导的荷瘤小鼠耳肿胀（P<0.05）。通过上海有机所化学专业数据库以口服生物利用度（OB）≥30%和类药性（DL）≥0.18筛选杠板归4种有效成分，与生物芯片肝癌上下调基因蛋白分子对接得到106个预测靶点，预测靶点与TTD比对得到13个肝癌治疗靶点。蛋白相互作用网络（PPI）分析STAT3、IL-6、IL-1β、HBG2、TLR4、HBB、HBE1、HBD为8个核心靶点，其参与27个KEGG通路和27个生物过程。结论 杠板归对小鼠H22肝癌有抑制作用，能减轻荷瘤小鼠炎症，其作用与4个活性成分参与“泛素化介导蛋白水解”、“核因子（NF）-κB信号传导”、“Janus激酶-信号转导与转录激活子（JAK-STAT）信号传导”等通路有关。     

灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞VEGF表达的影响

目的观察灵芝孢子油对荷H22瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法小鼠右腋皮下接种H22瘤细胞(浓度1×107/ml),0.2 ml/只,给药12天后,处死动物,剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率,用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中VEGF的表达程度。结果与模型组比较,灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。造模后各组小鼠VEGF均为阳性表达,灵芝孢子油各组可降低小鼠H22瘤组织中VEGF的阳性表达(P<0.05,P<0.01)。结论灵芝孢子油对H22移植性癌细胞生长有抑制作用,可降低瘤细胞中血管生成调控基因VEGF的表达。     

苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的研究苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法 BALB/C裸鼠随机分为对照组和苦参碱25、50、75 mg/kg组,每组各10只。建立裸鼠肝癌细胞HepG2移植瘤模型。对照组ip生理盐水1 mL,1次/d;苦参碱25、50、75 mg/kg组分别ip 0.5、1.0、1.5 mg/mL苦参碱溶液1 mL,1次/d。连续给药35 d。计算瘤体体积和肿瘤体积抑制率。观察裸鼠瘤体HE染色病理改变和免疫组化染色,测定各组裸鼠瘤体Survivin蛋白表达量,并采用RT-PCR法检测裸鼠瘤体Survivin mRNA相对表达量。结果与对照组比较,苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠瘤体体积显著减小(P0.01);苦参碱组裸鼠瘤体生长速度较对照组减慢,肝癌细胞分布较对照组稀疏,且剂量越大越明显。苦参碱50、75 mg/kg组仅有少量Survivin表达于细胞质。与对照组比较,苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠Survivin蛋白表达量和Survivin mRNA相对表达量显著减小(P0.01)。结论苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠具有抑瘤作用,有效剂量为50 mg/kg,其机制可能与下调Survivin表达、诱导肝癌细胞凋亡有关。     

五味子提取物对小鼠银屑病样皮损的抑制作用及机制研究

目的 探讨五味子提取物对小鼠银屑病样皮损的抑制作用及机制。方法 使用咪喹莫特乳剂建立小鼠银屑病背部皮损模型,将小鼠分为对照组、模型组、他克莫司5 mg/kg组以及五味子提取物0.05、0.25 mg/kg组,并于造模后在小鼠背部皮肤涂抹相应药物。取小鼠背部皮肤组织,分析皮损症状,对其进行苏木精–伊红（HE）染色,并观察测定表皮厚度。免疫组织化学测定淋巴细胞表面分子（CD-8）、环氧化酶-2(COX-2)、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）的表达情况。建立3D皮肤模型,使用双氧水造模后,噻唑蓝（MTT）检测五味子提取物抗氧化修复活性、酶联免疫吸附法检测皮肤模型组织中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的酶活力和炎症因子白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果 五味子提取物可以缓解由咪喹莫特乳剂诱导的小鼠银屑病皮肤损伤、红斑、炎症,改善其皮损处组织细胞情况,降低银屑病模型小鼠表皮厚度（P<0.05）;五味子提取物可以下调银屑病模型小鼠皮肤组织中COX-2、ERK、pERK、CD-8的表达（P<0.05、0.01）;3D皮肤模型检测结果显...