梨果仙人掌果多酚分布及生物活性

目的 了解梨果仙人掌果多酚分布,并研究其抗氧化和抑制糖消化酶活性。方法 以乙醇为提取溶剂,分离出梨果仙人掌果果皮、果肉和种子中的游离多酚、酯化多酚和不可溶键合多酚,Folin-Ciocalteu法测定多酚含量,通过DPPH自由基、羟自由基、ABTS~+·清除实验测定其抗氧化能力,观察各部位各种类型多酚对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的体外抑制作用。结果 梨果仙人掌果中果皮多酚含量为(1427.15±34.48)mg GAE/100 g,果肉多酚含量为(525.88±51.66)mg GAE/100 g,种子多酚含量为(256.92±3.81)mg GAE/100 g;梨果仙人掌果不同部位的游离多酚、酯化多酚、不可溶键合多酚对DPPH自由基、羟自由基、ABTS~+·均有一定的清除能力,各部位间以种子的抗氧化能力最强;梨果仙人掌果果皮、果肉和种子的酯化多酚、不可溶键合多酚对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性均有抑制作用,以种子多酚抑制能力最强。结论 梨果仙人掌果果皮多酚含量最高,种子多酚体外抗氧化和抑制糖消化酶作用最强。     

大豆胚轴提取物的降糖作用及其机制研究

目的: 研究大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)和皂甙(soyasaponins,SS)的降糖作用机制。方法: 普通饲料中添加20 g/kg富含SI和SS的大豆胚轴提取物(soybean hypocotyl extracts,SHE),饲喂Wistar正常大鼠和GK/Jcl(Goto-Kakizaki)2型糖尿病大鼠20 w,观察其血糖和葡萄糖耐量变化及对-葡萄糖苷酶和-淀粉酶的抑制活性。 结果: 长期食用SHE能显著降低2型糖尿病大鼠血糖水平,明显改善其葡萄糖耐量,同时能改善正常大鼠葡萄糖耐量。在糖尿病相关酶的抑制试验中,B类、E类和DDMP(2,3-dihydro-2,5-dihydroxy-6-methyl-4H-pyran-4-one)皂甙显示很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其50%抑制浓度(IC50)值为10~40 mmol/L;异黄酮苷元也有很强的-葡萄糖苷酶抑制作用,其IC50值为20~150 mmol/L,异黄酮葡萄糖苷形式对α-葡萄糖苷酶的抑制活性则较弱。SI和SS还具有较弱的-淀粉酶抑制作用,浓度为1 g/L时,抑制率为10%~20%。结论: SHE具有降低糖尿病大鼠血糖水平和改善糖耐量的作用,其部分作用机制可能是通过SI和SS对 -葡萄糖苷酶和 -淀粉酶的抑制作用而实现的。     

海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性及抑制类型

[目的]了解海洋微生物代谢产物对α-葡萄糖苷酶抑制剂的能力及其抑制类型,以发现糖尿病等与糖代谢有关的疾病的新型治疗药物.[方法]42株海洋微生物经发酵和乙酸乙酯提取,获得粗提物,用比色法对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性和抑制剂动力学测定.[结果]从中发现6株菌株的代谢产物具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性;其中菌株Act09和Act18抑制活力较强,其IC50分别为2.51μl(含粗提物276.10μg)和1.48μl(含粗提物118.4μg).菌株Act09产生的是反竞争性抑制物,而菌株Act18产生的是非竞争性抑制物.[结论]海洋微生物代谢产物可能含有新类型的α-葡萄糖苷酶抑制剂.     

茶多糖降糖作用机制

目的 研究茶多糖的降糖作用机制.方法 用比色法测定茶多糖对α-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.20)和α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)的抑制活性,用快速过滤法观察茶多糖对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响.结果 茶多糖显示较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC₅₀)值为3.2 g/L;茶多糖对α-淀粉酶的抑制活性则较弱,浓度为为1 g/L时,其对α-淀粉酶的抑制率为10%;茶多糖同时明显降低兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力,其半抑制浓度(IC₅₀)值为15 g/L.结论 茶多糖可抑制α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶活力和小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力,从而可延缓小肠对糖的消化吸收.     

表没食子儿茶素没食子酸酯体外α-葡萄糖苷酶活性的影响

目的研究酵母和大鼠小肠黏膜来源的α-葡萄糖苷酶活性测定的体外体系,评价在该体系条件下表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的α-葡萄糖苷酶抑制活性(AGI)的活性,为建立AGI活性评价体系提供依据。方法分别应用酵母和大鼠小肠黏膜提取液作为α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物;用0.00、0.25、0.50、1.0和1.50mg/ml的酶与0.00、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1和0.12mol/l的底物反应,采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖生成量来确定反应条件;在该反应条件下比较两种酶源的活性差异,并以此分析EGCG的AGI作用和计算半数抑制浓度(IC50)。结果最佳反应条件为0.50mg/ml的酶与0.06mol/l的底物反应,研究发现在该体系下EGCG对酵母来源的AGI活性强于小肠黏膜来源的酶,其IC50值分别为:0.150和0.837mg/ml。结论建立体外AGI活性评价体系有利于准确筛选AGI活性物质,酵母来源的酶可用于AGI活性的初步筛选;离体组织测定法可用于进一步评价AGI活性物质;EGCG体外具有较强的AGI活性。     

L-阿拉伯糖对胰岛素抵抗大鼠降糖作用的研究

目的研究L-阿拉伯糖(L-arabinose,L-A)对胰岛素抵抗大鼠的降血糖作用及其机制。方法提取大鼠小肠α-葡萄糖苷酶,分别以蔗糖(sucrose,S)、麦芽糖(maltose,M)和α-糊精(α-dextrin,α-D)为底物,体外测定L-A的α-葡萄糖苷酶抑制活性;建立胰岛素抵抗大鼠模型,分别给与葡萄糖(glucose,G)/S(2 g/kg bw)+L-A(mg/kg bw)0、50、100、250;G/S(1.75 g/kg bw)+250 mg/kg bw L-A及单纯L-A(2g/kg bw)灌胃,测定0、30、60、120 min血糖水平变化,并计算各时间点血糖水平抑制率及血糖应答曲线下面积(AUC)抑制率。以阿卡波糖(acarbose,Acar)为阳性对照。结果 L-A体外可抑制小肠α-葡萄糖苷酶活性,尤其选择性较强地抑制蔗糖酶活性,当其添加量为0.5%S含量时,酶活抑制率>50%,最高抑制率为93%左右,有良好剂量反应关系,IC50为0.164 mg/ml;动物实验中,L-A对口服G后引起的血糖应答无影响(P>0.05),对于口服S后的血糖水平升高有良好抑制作用且有一定剂量反应关系,低、中、高剂量L-A对灌胃S后30min血糖抑制率分别为(20.9±14.1)%,(26.8±16.1)%,(27.5±24.9)%,AUC抑制率分别为(13.9±9.7)%,(15.4±12.1)%,(22.2±16.9)%,当只摄入L-A时,餐后血糖水平变化较小。以阿卡波糖(Acarbose,Acar)为阳性对照。结论 L-A可选择性抑制小肠蔗糖酶活性,对口服S后的血糖升高有良好抑制作用,推测选择性抑制小肠蔗糖酶活性以利于摄入S后血糖水平的控制为其降血糖机制之一,在肥胖、糖尿病等预防中具有积极意义。[营养学报,2012,34(6):563-566,571]     

红杉醇抑制葡萄糖苷酶及改善糖耐量实验研究

目的探讨红杉醇体外对葡萄糖苷酶的抑制作用以及对糖耐量的影响。方法采用96孔板法,分别测定红杉醇对α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、蔗糖酶和海藻糖酶的抑制作用,以及抑制类型。对小鼠灌胃给予红杉醇后,考察其糖耐量。结果红杉醇等化合物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,对β-半乳糖苷酶,α-淀粉酶,葡萄糖淀粉酶和海藻糖酶也有一定的抑制作用,且抑制类型多为竞争性抑制。结论红杉醇在一定程度上具有降血糖的作用,其作用机制部分通过抑制-葡萄糖苷酶实现。红杉醇对糖尿病的预防与治疗具有一定作用。     

青藏高原金露梅茶提取物的降糖作用研究

目的通过测定高原金露梅花茶提取物(FWE)、金露梅绿茶提取物(GWE)、金露梅红茶提取物(RWE)对α-葡萄糖苷酶(AG)的抑制活性作用及小鼠餐后血糖的影响,研究青藏高原金露梅茶的降糖作用。方法通过α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)体外筛选模型测定三种茶对AG活性的抑制作用,用糖耐量实验方法体内测定金露梅三种茶提取物对小鼠餐后血糖的影响。结果经测定,FWE、GWE、RWE对AG的IC50分别是0.055、0.089、0.164 mg/ml,灌胃FWE、GWE、RWE后,淀粉负荷后小鼠在30、60、90、120min时血糖值呈现下降趋势。结论金露梅三种茶的提取物AG有较高的抑制活性。同时,三种茶的提取物均能显著降低小鼠的餐后血糖。     

木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

目的：合成木犀草素-Cr（Ⅲ）,考察木犀草素及木犀草素-Cr（Ⅲ）对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,确定抑制类型。方法：在无水乙醇中,用木犀草素与醋酸铬搅拌合成木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物;用IR、UV、TG—DTA结合元素分析对结构进行表征,考察在不同的pH值和温度的条件下a一葡萄糖苷酶的酶活力,测定两者对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用双倒数作图法研究其动力学特性。结果：合成的木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物的分子组成为：C15H9O6Cr（COOCH3）2（H2O）2·2H2O;酶的最适作用pH值为5．0,温度为55℃;木犀草素及其配合物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的IC50值分别为1．496mmol／L、0．2320mmol／L,抑制类型为竞争型α-葡萄糖苷酶抑制剂。结论：木犀草素与Cr^3＋结合后,增强了对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为木犀草素-Cr（Ⅲ）的进一步研究打下了良好的基础。     

同时检测人尿中六种大豆异黄酮代谢产物的HPLC法

目的研究建立双波长同时检测人尿中大豆异黄酮代谢产物雌马酚等6种化学成分含量的高效液相色谱分析方法。方法尿样品用β-葡萄糖苷酶水解,乙酸乙酯萃取;采用乙酸乙酯-甲醇-0.05%磷酸盐缓冲液作为流动相,梯度洗脱;程序波长紫外检测器检测,检测波长为254nm、280nm。结果方法的线性范围为0.05～10μg/ml;检出限为0.03～0.05μg/ml,定量限为0.1～0.17μg/ml;6种成分的平均回收率为71.4%～102.1%;相对标准偏差为1.0%～7.9%。应用新建立的方法测定了10份人尿样品中6种活性化学成分的含量。结论该方法可靠,适用于人尿中大豆异黄酮代谢产物的分析检测。     

气相色谱法快速测定生活饮用水中4种氯酚类化合物残留

通过优化酚类物质检测中的萃取溶剂比例等实验参数,建立气相色谱快速测定生活饮用水中4种氯酚类化合物残留的方法。结果表明:提取溶剂为环己烷:乙酸乙酯=4∶1,4种消毒副产物灵敏度大幅提高,该法操作简单,适用于水样批量检测。通过方法学验证的结果显示,4种目标物在相应浓度范围内的线性关系良好(R~20.998),检出限为0.03μg/L(五氯酚)~1.0μg/L(2-氯酚),定量限为0.1μg/L(五氯酚)~2.5μg/L(2-氯酚);不同浓度水平的加标回收率在81.2%~95.6%范围内,相对标准偏差为0.93%~3.25%(n=5)。     

三七多糖抗氧化活性研究

目的:探讨三七多糖的体外抗氧化活性。方法:三七粗多糖经Sevage法纯化后用苯酚—硫酸法测定其含量,并采用还原/抗氧化能力、清除DPPH自由基、OH自由基和ABTS+自由基能力考察三七多糖的抗氧化能力。结果:三七多糖含量为80.49 mg/g;与对照品BHA和茶多酚相比较,还原/抗氧化能力和清除DPPH自由基能力(FRAP=11586.3μmol/g、IC50=0.055 mg/ml)都比茶多酚(FRAP=6507.5μmol/g、IC50=0.143mg/ml)强,但都比BHA(FRAP=1536.5μmol/g、IC50=0.030 mg/ml)弱;清除羟基自由基能力比BHA(IC50=0.028 mg/ml)及茶多酚(IC50=0.002 mg/m L)都强;清除ABTS+自由基能力(IC50=0.018 mg/ml)比BHA(IC50=0.175 mg/ml)强,但比茶多酚(IC50=0.002 mg/ml)弱。结论:三七多糖具有较强的抗氧化能力,为其生物活性的深入研究提供了参考依据。     

孝感地区人体有机氯农药蓄积水平

目的了解孝感地区人体脂肪、血液中有机氯农药的蓄积水平。方法于2001年在孝感市医院住院患者中选择孝感市粮食、蔬菜产区一般居民,采集其腹部大网膜或肠系膜脂肪50g和血液20ml,按GB/T5009.19-1996测定HCH(666)和DDT的含量。结果HCH、DDT在人体脂肪中检出率分别为93.33%、100%,血液中检出率分别为100%、86.7%。脂肪中HCH(187.67μg/kg)和DDT含量(298.47μg/kg)均高于血液中HCH(5.96μg/L)和DDT含量(3.61μg/L)。脂肪中HCH异构体含量为β-666>α-666>γ-666>δ-666,血液中为β-666>δ-666>α-666;脂肪中检出DDT的3种异构体,血液中检出DDT的2种异构体。结论孝感地区人体脂肪、血液中HCH和DDT的含量虽然已经明显低于中国允许残留量标准,但仍有一定蓄积。     

HPLC法同时测定工作场所空气中的苯酚、对硝基苯酚、2,4-二硝基苯酚、2,4,6-三硝基苯酚和间苯二酚

目的:建立高效液相色谱法同时测定工作场所中的苯酚、对硝基苯酚、2,4-二硝基苯酚、2,4,6-三硝基苯酚和间苯二酚5种酚类化合物的方法。方法:用多孔玻板吸收管采集空气样品,甲醇/水(65/35)作流动相,Atlantis C18柱作分离柱,用二极管阵列检测器在220 nm波长下测定各物质的峰面积。结果:各物质在0μg/ml～20.0μg/ml范围内有良好的线性,方法回收率97.0%～102.0%,RSD小于4%,检测限在0.03μg/ml～0.08μg/ml之间,最低检测浓度在0.02 mg/m3～0.05 mg/m3之间。结论:本法能同时测定工作场所中5种酚类化合物,操作简便、灵敏、重现性好,结果满意。     

TPCK胰酶和普通胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞分离培养中的影响

目的比较不同种类的胰酶对不同亚型流感病毒在MDCK细胞增殖能力的影响,寻找最佳胰酶类型和浓度。方法将血凝滴度为1∶16的甲型H1N1、H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒稀释100倍接种到MDCK细胞上,分别改变维持液中TPCK-胰酶和普通胰酶浓度,在24 h、48 h、72 h、96 h取培养物上清测血凝滴度,比较不同亚型流感病毒在MDCK细胞病变速度和病毒含量的差异。结果 TPCK胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞培养中的增值能力明显提高,TPCK胰酶在甲型H1N1、H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒的最优浓度分别为1μg/ml~3μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml~2μg/ml、1μg/ml。普通胰酶对甲型H1N1流感病毒的增值能力有提高作用,最佳胰酶浓度为5μg/ml,普通胰酶对H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒在MDCK细胞的增值无提高作用。结论 MDCK培养流感病毒时,需要添加TPCK胰酶。     

新疆红树莓果实不同有效部位提取及其抗氧化活性测定

目的测定树莓果实不同提取部位总酚含量并比较不同提取部位抗氧化活性。方法树莓果实95%乙醇提取物经石油醚脱脂后,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,对得到的各提取部位浸膏,①以没食子酸为标准品进行总酚含量测定,同时用相对标准偏差(RSD)表示稳定性;②采用1,1-二苯-2-苦肼基和羟自由基清除能力实验测定抗氧化活性。结果①Folin-Ciocalteu比色法具有精密度高、稳定性和重现性好等优点;②各提取部位物总酚含量从GAE10.56mg/g到96.76mg/g,其中以乙酸乙酯部位总酚含量最高(GAE96.76mg/g);③抗氧化实验中,树莓不同提取物均显示了较好的抗氧化活性,其中以乙酸乙酯部位抗氧化活性最高。结论树莓是良好的天然抗氧化剂。     

帮你了解阿卡波糖

<正>阿卡波糖(拜唐苹)属于α-糖苷酶抑制剂类口服降糖药。它是一种复杂的低聚糖,结构类似寡糖,可在小肠上部细胞刷状缘处和寡糖竞争并与α-葡萄糖苷酶可逆地结合,抑制各种α-葡萄糖苷酶的活性,使淀粉分解成如麦芽糖(双糖)、麦芽三糖及糊精(低聚糖)的寡糖进而分解成葡萄糖的速度减慢,使蔗糖分解成葡萄糖和果糖的速     

黄磷对大鼠肝微粒体和线粒体Ca^2＋泵的影响

在体外实验中,用不同浓度黄磷(0.026μg/ml,0.26μg/ml,2.60μg/ml)与大鼠肝微粒体和线粒体共同孵育,发现黄磷对肝微粒体和线粒体Ca~(2 )-ATP酶呈现抑制作用,且随剂量增大,抑制作用加重;在孵育的早期,对微粒体Ca~(2 )ATP酶的抑制更明显。在整体动物实验中,黄磷染毒后6小时,对肝微粒体和线粒体Ca~(2 )-ATP酶发生抑制。染毒后3小时,对肝微粒体~(45)Ca摄取发生抑制;染毒后6小时,对肝线粒体~(45)Ca摄取发生抑制。实验结果表明,黄磷对微粒体和线粒体Ca~(2 )泵机制的损害可能是引起中毒性肝损害的一个重要因素。     

阿萨希毛孢子菌胞外分泌酶和药物敏感性的微进化研究

目的研究宿主体内微进化对阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)胞外分泌酶和三唑类抗真菌药物敏感性的影响。方法酶检测培养基分析菌株胞外分泌酶种类和活性,采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)制定的M27-A3实验方案进行药物敏感实验。结果原代株(TO)胞外分泌酶谱组成及活性:蛋白酶(++++)、脂肪酶(++)、溶血素(++++)和磷脂酶(+++),微进化株(TEVO)胞外分泌酶谱组成及活性:蛋白酶(+)、脂肪酶(++)、溶血素(+++)。原代株的氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑MIC值分别为8μg/ml、0.5μg/ml和0.125μg/ml,微进化株的MIC值分别为32μg/ml、4μg/ml、0.25μg/ml。结论在宿主内环境和抗真菌药物双重压力下,阿萨希毛孢子菌改变其胞外分泌酶谱、降低部分毒力并增强耐药性以适应宿主内环境,从而与宿主形成长期共存状态。     

精浆生化分析在精索静脉曲张诊断中的临床意义

目的探索精浆锌、酸性磷酸酶、柠檬酸、果糖、α-葡萄糖苷酶在诊断精索静脉曲张中的临床意义。方法收集本院泌尿生殖科就诊的89份精索静脉曲张(VC)患者精浆锌、酸性磷酸酶、柠檬酸、果糖、α-葡萄糖苷酶的检测结果,同时以20份正常生育史的已婚男性作为对照组。结果VC组精浆生化分析结果中,果糖(28.43 mmol/L±5.05 mmol/L)、酸性磷酸酶(77.69 U/L±10.87 U/L)、柠檬酸(20.55 mmol/L±3.68 mmol/L)的浓度与对照组的果糖(28.43 mmol/L±6.23 mmol/L)、酸性磷酸酶(133.34 U/L±41.24 U/L)、柠檬酸(21.27 mmol/L±2.84 mmol/L)的浓度相比,差异无统计学意义(P0.05),而VC组精浆锌(1 519.2μmol/L±201.47μmol/L)、α-葡萄糖苷酶(51.49 U/ml±10.63 U/ml)的浓度明显低于对照组精浆锌(2 356.6μmol/L±259.34μmol/L)、α-葡萄糖苷酶(58.31 U/ml±4.40 U/ml)的浓度,差异有统计学意义(P0.05)。结论精索静脉曲张是影响精浆锌和α-葡萄糖苷酶浓度改变的一个重要原因,精浆生化检测为诊断VC提供了简单快速的方法。本研究为及时有效地治疗男性不育症提供了有力的临床实验基础。